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大学生创新实验——医学院校创新型人才培养模式的研究与探索 被引量：7
1
作者 齐素华 孙福谋 +1 位作者 高思禹 严鹏 《中国校外教育》 2011年第10期43-43,73,共2页
大学生创新性实验项目是高等学校本科教学质量与教学改革工程的重要组成部分,是大学生科研素质和创新能力培养教育的核心之一。创新性实验项目的开展为大学生科研素质和创新能力的培养提供了很好的契机。本文在总结指导医学本科生参加... 大学生创新性实验项目是高等学校本科教学质量与教学改革工程的重要组成部分,是大学生科研素质和创新能力培养教育的核心之一。创新性实验项目的开展为大学生科研素质和创新能力的培养提供了很好的契机。本文在总结指导医学本科生参加创新性实验项目过程中经验的基础上,提出以启发和激励的方式培养大学生的科研素质和创新能力的观点。 展开更多
关键词 大学生创新实验 科研素质 创新能力
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噬菌体展示全人源抗GPC3的单链抗体的筛选及鉴定 被引量：2
2
作者 蒋家豪 孙福谋 +4 位作者 韩月 王阳 蔡佳玲 王旻 张娟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1877-1883,共7页
使用全人源噬菌体单链抗体文库进行筛选,获得特异性靶向磷脂酰肌醇聚糖-3(GPC3)的单链抗体,并对单链抗体的生物学活性和抗原表位进行鉴定。经过4轮"结合-淘洗-洗脱-扩增"后,利用噬菌体ELISA和IMGT数据库分析抗体序列的靶向性... 使用全人源噬菌体单链抗体文库进行筛选,获得特异性靶向磷脂酰肌醇聚糖-3(GPC3)的单链抗体,并对单链抗体的生物学活性和抗原表位进行鉴定。经过4轮"结合-淘洗-洗脱-扩增"后,利用噬菌体ELISA和IMGT数据库分析抗体序列的靶向性和完整性。单链抗体的基因序列与表达载体p ET-22b进行双酶切并连接,重组载体转化大肠杆菌E.coli Rosetta(DE3),抗体表达后经Ni^(2+)柱亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blot对单链抗体分子质量进行鉴定。抗体对抗原的亲和力常数通过ELISA和SPR实验获得,流式细胞术分析其与细胞膜受体的结合能力。经筛选获得4个单链抗体(1F7、1D7、1D4和1B10)具有良好的靶向性和亲和力,其中1F7单链抗体的亲和力和结合能力最高。本课题抗GPC3单链抗体为双特性抗体和免疫毒素等新一类免疫治疗药物的开发奠定基础。 展开更多
关键词 噬菌体展示 单链抗体 磷脂酰肌醇聚糖-3 肿瘤靶向
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双特异性抗体mAb04-MICA对人白血病细胞K562的体内外抗肿瘤活性 被引量：1
3
作者 杜晓典 孙福谋 +5 位作者 袁敏讷 王斐 刘雅利 尚鹏钊 王旻 张娟 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期117-124,共8页
探讨双特异性抗体m Ab04-MICA对人白血病细胞K562的体内外抗肿瘤活性。前期研究显示,m Ab04-MICA具有抗血管生成和重塑肿瘤微环境中的免疫监视作用,体外对K562细胞具有良好的抗肿瘤作用。通过ELISA鉴定m Ab04-MICA对抗原VEFGR2和受体NK... 探讨双特异性抗体m Ab04-MICA对人白血病细胞K562的体内外抗肿瘤活性。前期研究显示,m Ab04-MICA具有抗血管生成和重塑肿瘤微环境中的免疫监视作用,体外对K562细胞具有良好的抗肿瘤作用。通过ELISA鉴定m Ab04-MICA对抗原VEFGR2和受体NKG2D的亲和力;CCK8法分析m Ab04-MICA对K562的体外增殖抑制作用;采用流式细胞术分析m Ab04-MICA对鼠源VEGFR2的交叉反应能力;建立K562皮下荷瘤BALB/c裸鼠模型,通过测定瘤体积、称量瘤重、观测荷瘤鼠生存期等方法检测目的抗体的体内抗肿瘤活性;免疫组化方法测定其对肿瘤组织本身及组织内新生血管生成的影响。结果显示:m Ab04-MICA对VEGFR2和NKG2D都具有良好的亲和力,并且在体外能够特异性地抑制VEGF诱导的K562细胞的增殖;m Ab04-MICA与鼠源VEGFR2具有较高的结合能力;相同给药剂量下,双特异性抗体抑瘤作用显著优于母体单抗,且能延长荷瘤裸鼠生存期,其中Ki-67、p-VEGFR2、VEGF及CD34的表达量显著降低,提示m Ab04-MICA可通过特异性地阻碍瘤组织VEGFR2的磷酸化而控制瘤体新生血管的生成,在治疗白血病方面具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 双特异性抗体 血管内皮生长因子受体2 MHC-I相关抗原分子A 免疫监视 白血病
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基于酶催化抗体药物偶联物中抗体的定点突变及鉴定
4
作者 马招兄 徐瑶 +4 位作者 赵虹 孙福谋 张鑫荣 王旻 张娟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期403-408,共6页
谷氨酰胺转移酶催化谷氨酰胺与赖氨酸及其衍生物形成异肽键,可用于抗体与小分子药物的定点偶联。本文在构建的抗人CD24嵌合抗体c G7的基础上,定点突变c G7获得具有4个可催化的谷氨酰胺位点的嵌合抗体c G7Q。本研究采用overlap PCR技术... 谷氨酰胺转移酶催化谷氨酰胺与赖氨酸及其衍生物形成异肽键,可用于抗体与小分子药物的定点偶联。本文在构建的抗人CD24嵌合抗体c G7的基础上,定点突变c G7获得具有4个可催化的谷氨酰胺位点的嵌合抗体c G7Q。本研究采用overlap PCR技术将抗体重链CH段第297位天冬酰胺突变成谷氨酰胺,构建含突变重链的真核表达载体。将含突变重链与轻链的载体共转染CHO-s细胞,筛选稳定高产单克隆细胞株,表达及鉴定目的蛋白c G7Q,表面等离子共振法与流式细胞术分析c G7Q与人CD24分子的结合能力,乳酸脱氢酶释放实验鉴定定点突变对抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)的影响,结果显示,经改造的c G7Q保持母体单抗的结构和特异性结合能力及部分ADCC效应,为后续制备靶向CD24定点偶联药物奠定基础。 展开更多
关键词 抗体 定点突变 谷氨酰胺转移酶 抗体药物偶联物
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