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GmDREB8在大豆干旱胁迫下的功能分析 被引量：2
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作者 许建玉 陆阳 +7 位作者 孙睿东 王修帅 丁文涛 邓肃霜 王鹏崴 赵晋铭 郭娜 邢邯 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期226-236,共11页
[目的]本研究旨在解析大豆DREB(dehydration responsive element-binding protein)转录因子基因GmDREB8与干旱胁迫的关系,为DREB转录因子参与大豆干旱胁迫的分子机制研究奠定基础,也为大豆耐旱转基因育种提供新的基因资源。[方法]以大... [目的]本研究旨在解析大豆DREB(dehydration responsive element-binding protein)转录因子基因GmDREB8与干旱胁迫的关系,为DREB转录因子参与大豆干旱胁迫的分子机制研究奠定基础,也为大豆耐旱转基因育种提供新的基因资源。[方法]以大豆品种‘天隆1号’为试材,通过荧光定量PCR(RT-qPCR)分析10个DREB基因在干旱胁迫诱导下的表达模式及GmDREB8在大豆不同组织和植物激素处理下的表达。采用生物信息学方法分析GmDREB8保守基序和亚细胞定位。通过农杆菌介导的烟草瞬时表达体系进行GmDREB8蛋白的亚细胞定位。分别在拟南芥中异源表达GmDREB8和利用VIGS(virus-induced gene silencing)技术在大豆中沉默GmDREB8,分析该基因在拟南芥和大豆干旱胁迫中的功能。[结果]10个DREB基因在干旱胁迫下都被诱导表达,但这10个基因间表达谱存在差异。筛选并克隆得到GmDREB8,其位于大豆17号染色体上,含有1个AP2结构域,蛋白相对分子质量为19.79×10^(3),pI为9.76。GmDREB8基因受到植物激素赤霉素(ABA)和水杨酸(SA)的诱导表达。GmDREB8蛋白位于细胞核内。异源表达GmDREB8转基因拟南芥在不同浓度的甘露醇处理下表现出比野生型更短的根,对干旱胁迫更敏感。与空载对照相比,大豆GmDREB8沉默株系叶片在干旱处理后相对电导率、相对失水率、丙二醛(MDA)含量更低,游离脯氨酸(Pro)含量更高,表现出更强的耐旱性。[结论]GmDREB8可负向调控植物的耐旱能力。 展开更多
关键词 大豆 GmDREB8 干旱胁迫 VIGS 转基因拟南芥
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小麦GTP结合蛋白TaRac3基因的克隆、功能域注释与表达载体构建 被引量：3
2
作者 程乔林 李明 +5 位作者 丁博 牛浩 孙睿东 尹倩倩 魏琳 谢晓东 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期10-20,共11页
GTP结合蛋白是真核生物中一类信号开关分子,通过与GTP结合的活化状态和与GDP结合的非活化状态,参与调控多种信号传导通路和物质代谢。近年来,许多研究发现小G蛋白家族成员在植物细胞极性生长的生物学过程中具有非常重要的作用。为了研究... GTP结合蛋白是真核生物中一类信号开关分子,通过与GTP结合的活化状态和与GDP结合的非活化状态,参与调控多种信号传导通路和物质代谢。近年来,许多研究发现小G蛋白家族成员在植物细胞极性生长的生物学过程中具有非常重要的作用。为了研究GTP结合蛋白在小麦叶片表皮细胞极性分化中的作用,我们从小麦幼叶基部居间分生组织中克隆了一个尚未报道的小麦GTP结合蛋白基因,命名为Ta Rac3。为进一步验证该基因在表皮细胞发育过程中的生物学功能,我们利用生物信息学方法对该基因编码蛋白的保守结构域中的活性位点和羧基端多元基团区域的亚细胞定位信号进行了注释和分析,并进行了聚类分析。我们还构建了Ta Rac3基因的植物表达载体,并转入农杆菌细胞,为后期转化拟南芥进行生物学功能验证奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 GTP结合蛋白 Rac蛋白 保守结构域 载体构建
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