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二仙汤对过氧化氢诱导的成骨细胞蛋白组学及PI3K信号通路的影响 被引量:9
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作者 吴雨蒙 王莹 +5 位作者 吴琪 施旻 张丽 任明诗 刘波 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期3934-3942,共9页
采用过氧化氢(H_(2)O_(2))复制细胞氧化应激模型,探讨二仙汤对过氧化氢(H_(2)O_(2))刺激的成骨细胞蛋白组学的影响及其保护机制。取新出生(24 h以内)乳鼠的头盖骨培养原代成骨细胞,实验分为正常组、模型组、福善美组、二仙汤组4组,空白... 采用过氧化氢(H_(2)O_(2))复制细胞氧化应激模型,探讨二仙汤对过氧化氢(H_(2)O_(2))刺激的成骨细胞蛋白组学的影响及其保护机制。取新出生(24 h以内)乳鼠的头盖骨培养原代成骨细胞,实验分为正常组、模型组、福善美组、二仙汤组4组,空白组和模型组加入空白血清,福善美组和二仙汤组则分别加入福善美含药血清和二仙汤含药血清干预45 h后,除正常组外,各组均加入H_(2)O_(2)刺激3 h后,提取细胞蛋白,采用Nano-LC-LTQ-Orbitrap系统检测,Protein Discovery软件进行蛋白鉴定,SIEVE软件进行相对定量定性分析;另外用LY294002(10μmol·L^(-1))阻断PI3K信号通路,实验分为空白对照组、模型组、LY294002组、二仙汤组、二仙汤+LY294002组,观察LY294002干预下二仙汤含药血清对H_(2)O_(2)刺激成骨细胞后细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性及BMP-2、OPG、p-Akt、p-FoxO1蛋白表达的影响。结果显示,二仙汤组与模型组比较共发现78个差异蛋白,这些蛋白参与PI3K/Akt、胰高血糖素、雌激素、胰岛素等信号通路的调节;使用LY294002后,二仙汤对成骨细胞增殖的促进作用被削弱,OPG、p-FoxO1表达显著下调,BMP-2、p-Akt表达有下调趋势但无显著性,然而LY294002和二仙汤均提高了成骨细胞ALP活力,这可能与细胞状态、细胞分化进程有关。以上结果表明,二仙汤含药血清对H_(2)O_(2)刺激的成骨细胞有保护作用,PI3K/Akt信号通路是内在机制之一。 展开更多
关键词 二仙汤 成骨细胞 氧化应激 蛋白组学 PI3K信号通路
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骨相关细胞来源外泌体miRNA调节骨形成的研究进展 被引量:5
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作者 刘波 吴雨蒙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期613-616,共4页
外泌体是一种由细胞分泌的具有脂质双分子层结构的杯状细胞外囊泡,直径约30-150 nm。近年来,研究表明骨组织中的各类骨细胞产生的外泌体不仅可介导生理情况下骨髓微环境内的细胞间通讯,维持骨髓微环境的稳态,还参与骨骼疾病的发病过程... 外泌体是一种由细胞分泌的具有脂质双分子层结构的杯状细胞外囊泡,直径约30-150 nm。近年来,研究表明骨组织中的各类骨细胞产生的外泌体不仅可介导生理情况下骨髓微环境内的细胞间通讯,维持骨髓微环境的稳态,还参与骨骼疾病的发病过程。该文将着重探讨骨相关细胞来源的外泌体miRNA对骨形成的调节作用。 展开更多
关键词 外泌体 骨形成 MIRNA 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 骨质疏松症
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基于“双药”理念的社区卫生服务中心特色药学服务实践及效果初探
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作者 吴文燕 沈福来 +2 位作者 许雅俊 陈方剑 《中华全科医师杂志》 2024年第12期1346-1351,共6页
社区药学服务项目的内容和形式日益丰富,发展适合社区属性特点的药学服务,需要以患者和居民的实际需求为导向,结合社区患者群体特点进行科学开发。文章分析国内外药学服务实施现状,患者对药学服务的需求、目前药学服务开展的情况和存在... 社区药学服务项目的内容和形式日益丰富,发展适合社区属性特点的药学服务,需要以患者和居民的实际需求为导向,结合社区患者群体特点进行科学开发。文章分析国内外药学服务实施现状,患者对药学服务的需求、目前药学服务开展的情况和存在问题,基于药品的病理治疗作用和药师的语言关怀作用的“双药”理念,制定了双药特色药学服务的开展流程、实施方法,进行初步探索实践,取得了一定效果,为同行开展新模式的药学服务提供参考。 展开更多
关键词 社区卫生中心 药学服务 卫生服务需求 实践
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HPLC-MS/MS同时测定感冒安颗粒中5种黄酮成分的含量
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作者 陈方剑 骆锦前 +3 位作者 王志君 胡叶帅 宋洪杰 《药学实践与服务》 CAS 2024年第9期402-406,共5页
目的建立HPLC-MS/MS方法测定感冒安颗粒中5种黄酮成分含量。方法色谱条件:色谱柱为Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×150 mm×4.6 mm,5μm,100Å),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱(0~20 min,35%A;20~40 min,45%A),流速为1.0... 目的建立HPLC-MS/MS方法测定感冒安颗粒中5种黄酮成分含量。方法色谱条件:色谱柱为Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×150 mm×4.6 mm,5μm,100Å),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱(0~20 min,35%A;20~40 min,45%A),流速为1.0 ml/min,柱温为25℃;质谱条件:电喷雾电离源(ESI源)负离子扫描,多反应监测(MRM)模式检测。5种黄酮检测的离子对:芦丁m/z 609.1→300.1、金丝桃苷和异槲皮苷m/z 463.0→300.1、槲皮素m/z 301.0→151.0、木犀草素m/z 285.0→132.9。结果5个成分在一定浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系,相关系数r均>0.9991;平均加样回收率在100.63%~102.81%之间,RSD范围在0.67%~2.07%。10批感冒安颗粒中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素和木犀草素的含量测定结果分别为32.23~479.83、0.291~1.825、11.44~20.54、6.32~18.41、3.46~6.51μg/g。结论建立的HPLCMS/MS法灵敏度高、专属性强,适合同时测定感冒安颗粒中5种黄酮类成分的含量。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱法 感冒安颗粒 芦丁 金丝桃苷 异槲皮苷 槲皮素 木犀草素
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发酵虫草菌粉(Cs-4)对慢性阻塞性肺疾病大鼠及肺组织蛋白质组学的作用 被引量:3
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作者 杨硕 +3 位作者 刘波 钟承赞 李进进 杨明 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2833-2838,共6页
目的探讨发酵虫草菌粉(Cs-4)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺功能保护作用及初步机制。方法采用香烟烟雾熏染联合气管内滴注脂多糖复制COPD大鼠模型。SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组(地塞米松混悬液0.09 mg·kg^(-1)),发酵... 目的探讨发酵虫草菌粉(Cs-4)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺功能保护作用及初步机制。方法采用香烟烟雾熏染联合气管内滴注脂多糖复制COPD大鼠模型。SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组(地塞米松混悬液0.09 mg·kg^(-1)),发酵虫草菌粉(Cs-4)低剂量组(0.3 g·kg^(-1))、中剂量组(0.6 g·kg^(-1))、高剂量组(1.2 g·kg^(-1)),除第1天和第14天气管内滴注脂多糖不给药外,实验第2~13天,第15~28天每天烟熏前30min灌胃给药。收集大鼠血清、肺泡灌洗液、肺,以试剂盒法检测大鼠血清白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α);肺组织匀浆白细胞介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)含量;血清、肺泡灌洗液丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)含量。以HE染色、AB-PAS染色观察肺组织病理形态学变化。以蛋白质组学技术鉴定筛选差异蛋白。通过Uniprot、String、KEGG、DAVID数据库对差异蛋白进行注释、GO分析、信号通路分析及蛋白质相互作用分析。结果与模型组相比,发酵虫草菌粉(Cs-4)各剂量组均不同程度降低血清IL-8、IL-6、TNF-α、肺组织匀浆IL-4、血清MDA含量;升高肺组织匀浆IFN-γ、血清、肺泡灌洗液SOD、CAT含量。结论发酵虫草菌粉(Cs-4)对COPD有一定保护作用,其机制可能是通过降低体内炎症因子水平、改善机体氧化损伤程度来完成的。 展开更多
关键词 发酵虫草菌粉(Cs-4) 慢性阻塞性肺疾病 氧化应激 蛋白质组学
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论舒伯特声乐套曲《冬之旅》视角下的悲剧人生 被引量:2
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作者 《中国民族博览》 2021年第10期184-186,共3页
艺术歌曲是始于13世纪前,在浪漫主义时期的德国得到进一步发展的一个声乐体裁,诗与乐的相互交融成为那个时代风靡大众的音乐类型。其中涌现出舒伯特、舒曼、勃拉姆斯、马勒等一批优秀作曲家的旷世之作。本文将透过舒伯特声乐套曲《冬之... 艺术歌曲是始于13世纪前,在浪漫主义时期的德国得到进一步发展的一个声乐体裁,诗与乐的相互交融成为那个时代风靡大众的音乐类型。其中涌现出舒伯特、舒曼、勃拉姆斯、马勒等一批优秀作曲家的旷世之作。本文将透过舒伯特声乐套曲《冬之旅》来讨论那个时代背景下的悲剧人生。全文共三个章节。第一章节通过诗人威廉·缪勒笔下,主人公在特定的场景中的一系列的人物形态和人物心态,来构想其人生中的悲惨经历。第二章结合套曲作家舒伯特的成长环境,所生活的时代环境,以及他一生所经历的种种历程,来谈论造就他悲剧人生的原因。第三章将从音乐旋律、曲式和声节奏、伴奏调性织体等诸方面对套曲进行研究,深度剖析出"艺术歌曲之王"的精湛创作技巧。 展开更多
关键词 《冬之旅》 舒伯特 悲剧人生
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二仙汤含药血清外泌体经FN1促进成骨细胞骨形成 被引量:1
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作者 李子涵 +5 位作者 任明诗 罗兰兰 张宇静 夏循礼 罗晶 刘波 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2023年第10期23-29,共7页
目的:探讨二仙汤含药血清外泌体蛋白的变化及其对成骨细胞骨形成的作用。方法:对二仙汤含药血清外泌体进行提取、鉴定。体外培养MC3T3-E1成骨细胞,分为正常对照组、空白血清外泌体2.5、5μg/mL组、二仙汤含药血清外泌体2.5、5、10μg/m... 目的:探讨二仙汤含药血清外泌体蛋白的变化及其对成骨细胞骨形成的作用。方法:对二仙汤含药血清外泌体进行提取、鉴定。体外培养MC3T3-E1成骨细胞,分为正常对照组、空白血清外泌体2.5、5μg/mL组、二仙汤含药血清外泌体2.5、5、10μg/mL组。CCK8法检测成骨细胞增殖情况;碱性磷酸酶(ALP)染色法观察成骨细胞ALP;茜素红染色观察成骨细胞矿化结节;Western blot法检测细胞中骨形态发生蛋白2(BMP-2)蛋白表达。运用蛋白质组学技术对血清外泌体进行差异性蛋白分析。采用纤连蛋白(FN1)联合空白血清外泌体(3 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL、12 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL)处理成骨细胞,通过试剂盒检测成骨细胞ALP活力;Western blot法检测FN1对成骨细胞中BMP-2蛋白表达的影响。结果:与空白血清外泌体2.5μg/mL组相比,二仙汤含药血清外泌体组成骨细胞的增殖、ALP染色程度和茜素红染色程度明显升高(P<0.05或P<0.01),BMP-2的蛋白表达明显上调(P<0.05)。从血清外泌体中共鉴定到256个蛋白,其中96个蛋白属于ExoCarta外泌体蛋白质数据库。差异统计分析显示有29个蛋白表达有明显变化(P<0.05)。针对显著差异蛋白进行生物信息学分析,与差异蛋白质相关的分子功能、生物过程和信号通路主要涉及氧化还原、细胞外泌体、PI3K/AKT信号通路、补体和凝血级联反应等过程。显著差异性蛋白主要包括FN1、白蛋白(ALB)、血清对氧磷酶/芳基酯酶1(PON1)和簇蛋白(CLU)等。与空白血清外泌体5μg/mL组相比,纤连蛋白联合空白血清外泌体组(3 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL、12 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL)成骨细胞ALP活力显著升高(P<0.01),BMP-2的蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:二仙汤含药血清外泌体促进成骨细胞骨形成与血清外泌体中的蛋白变化有关,FN1在其中发挥重要作用。 展开更多
关键词 二仙汤 外泌体 蛋白质组学 成骨细胞 骨形成 纤连蛋白
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葛根对结扎冠状动脉左前降支致心肌缺血大鼠的影响
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作者 张丽 黄思敏 +6 位作者 李海龙 黄丽萍 李文宏 刘荣华 朱卫丰 刘波 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期574-579,共6页
目的探讨葛根对结扎冠状动脉左前降支致心肌缺血大鼠的作用及初步机制。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、维拉帕米(4 mg·kg^(-1))组及葛根低、中、高剂量组(0.79、1.58、3.15 g·kg^(-1)),每组12只。灌胃给药,每日1... 目的探讨葛根对结扎冠状动脉左前降支致心肌缺血大鼠的作用及初步机制。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、维拉帕米(4 mg·kg^(-1))组及葛根低、中、高剂量组(0.79、1.58、3.15 g·kg^(-1)),每组12只。灌胃给药,每日1次,连续30 d。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支复制心肌缺血模型。检测心肌缺血大鼠Ⅱ导联心电图参数;采用伊文思蓝染色法测定大鼠心肌组织缺血面积;检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)的含量;采用HE染色法观察大鼠心肌组织病理变化;采用Western Blot法检测心肌组织中Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠心电图ST段抬高幅度显著上升(P<0.01),心肌缺血区面积显著增大(P<0.01),血清AST、LDH、CK含量明显升高(P<0.05,P<0.01),组织病理学检测显示心肌损伤明显加重,心肌组织Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.01)。与模型组比较,葛根组大鼠心电图ST段抬高幅度均明显降低(P<0.01),心肌缺血区面积显著减少(P<0.01),血清AST、LDH、CK含量均明显下降(P<0.05,P<0.01),组织病理学检测显示心肌损伤明显减轻,心肌组织Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.01)。结论葛根对结扎冠状动脉左前降支致心肌缺血大鼠有一定的保护作用,其作用机制可能与调节Bcl-2/Bax凋亡信号分子有关。 展开更多
关键词 葛根 心肌缺血 冠状动脉结扎法 凋亡 BAX蛋白 BCL-2蛋白 大鼠
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