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一种带有组氨酸标签的新型表达载体的构建及应用
被引量:
4
1
作者
齐向辉
孙
储
鹏
+5 位作者
何晨曦
沈琦
刘学
郭齐
陈华友
徐虹
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期52-54,共3页
目的:利用基因重组技术,对已有载体pSE380进行改造,获得具有组氨酸标签的新型表达载体。方法:以pSE380载体为出发材料,通过一步反向PCR技术在多克隆位点处添加一个六聚组氨酸纯化标签,并用该载体对xdh外源基因进行克隆表达及纯化验证。...
目的:利用基因重组技术,对已有载体pSE380进行改造,获得具有组氨酸标签的新型表达载体。方法:以pSE380载体为出发材料,通过一步反向PCR技术在多克隆位点处添加一个六聚组氨酸纯化标签,并用该载体对xdh外源基因进行克隆表达及纯化验证。结果:测序结果显示该标签已成功插入,xdh基因克隆表达及纯化表明,镍柱亲和层析完全可以将重组的表达蛋白纯化,并达到电泳纯级别,融合标签并没有影响的该重组酶的功能。结论:通过一步反向PCR技术成功地获得了改造pSE380载体,该技术为载体的相关改造提供了一种方便可行的方法。
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关键词
pSE380
表达载体
His标签
一步反向PCR
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职称材料
题名
一种带有组氨酸标签的新型表达载体的构建及应用
被引量:
4
1
作者
齐向辉
孙
储
鹏
何晨曦
沈琦
刘学
郭齐
陈华友
徐虹
机构
江苏大学食品与生物工程学院
材料化学工程国家重点实验室南京工业大学
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期52-54,共3页
基金
国家自然科学基金项目("宏基因组甘油脱水酶分子催化机制及分子改造
"21006041)
+4 种基金
江苏省博士后基金项目("新型甘油脱水酶基因的克隆表达及三维结构研究
"0901012B)
江苏大学基金项目("新型甘油脱水酶基因的克隆与高效表达
"08JDG009"一种带有组氨酸标签的新型表达载体的构建
"07A063)资助
文摘
目的:利用基因重组技术,对已有载体pSE380进行改造,获得具有组氨酸标签的新型表达载体。方法:以pSE380载体为出发材料,通过一步反向PCR技术在多克隆位点处添加一个六聚组氨酸纯化标签,并用该载体对xdh外源基因进行克隆表达及纯化验证。结果:测序结果显示该标签已成功插入,xdh基因克隆表达及纯化表明,镍柱亲和层析完全可以将重组的表达蛋白纯化,并达到电泳纯级别,融合标签并没有影响的该重组酶的功能。结论:通过一步反向PCR技术成功地获得了改造pSE380载体,该技术为载体的相关改造提供了一种方便可行的方法。
关键词
pSE380
表达载体
His标签
一步反向PCR
Keywords
pSE380
expression vector
His Tag
one-step-reverse PCR
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种带有组氨酸标签的新型表达载体的构建及应用
齐向辉
孙
储
鹏
何晨曦
沈琦
刘学
郭齐
陈华友
徐虹
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2010
4
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