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整合过表达嘌呤代谢途径关键酶基因提高酿酒酵母菌株环磷酸腺苷产量 被引量:5
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作者 王凯 +2 位作者 徐欢欢 仇申珅 邹少兰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期25-30,共6页
调控嘌呤代谢途径关键酶基因表达水平,会影响经AMP→ADP→ATP而生成的c AMP(cyclic adenosine mnophosphate,c AMP)产量。将酿酒酵母编码磷酸核糖焦磷酸合成酶基因PRS1和PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因ADE4、腺苷酸激酶基因ADK1,... 调控嘌呤代谢途径关键酶基因表达水平,会影响经AMP→ADP→ATP而生成的c AMP(cyclic adenosine mnophosphate,c AMP)产量。将酿酒酵母编码磷酸核糖焦磷酸合成酶基因PRS1和PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因ADE4、腺苷酸激酶基因ADK1,分别置于磷酸甘油酸激酶基因PGK1的启动子PGK1p和终止子PGK1t控制下,利用整合载体YIplac211,在菌株GA125中进行整合表达,通过摇瓶实验考察所得菌株的环磷酸腺苷产量。结果表明,在加腺嘌呤条件下,120 h时的c AMP产量分别为(5 380.5±1.91)、(5 189.4±1.72)、(5 131.8±2.05)和(5 199.9±1.62)μmol/L,较菌株GA125分别提高9.8%、5.9%、4.8%和6.2%;此外,ADK1过表达导致一定的生长抑制,所有菌株的腺嘌呤消耗量在(0.399±0.01)^(0.447±0.02)g/L,葡萄糖利用和乙醇产生上彼此没有呈现明显差异。 展开更多
关键词 酿酒酵母 嘌呤代谢途径 整合 环磷酸腺苷 腺嘌呤
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过表达嘌呤合成途径关键酶基因对重组酿酒酵母菌株生产cAMP的影响 被引量:3
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作者 王凯 陈洵 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期853-859,共7页
研究了环磷酸腺苷(cAMP)合成途径中的3个关键酶基因(磷酸核糖焦磷酸合成酶基因PRS1和PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因ADE4、腺苷酸激酶基因ADK1)过量表达对重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)发酵向胞外分泌cAMP的影响,利用酿... 研究了环磷酸腺苷(cAMP)合成途径中的3个关键酶基因(磷酸核糖焦磷酸合成酶基因PRS1和PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因ADE4、腺苷酸激酶基因ADK1)过量表达对重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)发酵向胞外分泌cAMP的影响,利用酿酒酵母游离型质粒YEplac195和磷酸甘油酸激酶PGK的强启动子PGK1p及终止子PGK1t构建含PRS1,PRS3,ADE4和ADK1的单基因表达载体,分别转入cAMP生产菌GA125,通过摇瓶发酵实验考察重组菌株与对照菌株的生长、cAMP生产及胞外腺嘌呤消耗情况.结果表明,在外加腺嘌呤条件下,与对照菌株相比,PRS1,PRS3和ADE4基因过表达菌株的cAMP产量分别提高4.17%,9.03%和6.06%,而ADK1过表达菌株的cAMP产量降低3.85%. 展开更多
关键词 酿酒酵母 环磷酸腺苷 腺嘌呤 磷酸核糖焦磷酸
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