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间歇性缺氧通过NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路促进香烟烟雾提取物诱导的人支气管上皮细胞炎症因子分泌
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作者 周钰皓 周灵 +6 位作者 张火军 罗苗 刘露 郑鹏豆 刘辉国 《国际呼吸杂志》 2022年第11期838-845,共8页
目的探究间歇性缺氧(IH)是否通过NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路促进香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞炎症因子分泌。方法本研究为实验研究。采用CSE刺激BEAS-2B细胞24 h, 并将细胞暴露于IH环境6、12、24 h后, ELISA检测细胞上... 目的探究间歇性缺氧(IH)是否通过NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路促进香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞炎症因子分泌。方法本研究为实验研究。采用CSE刺激BEAS-2B细胞24 h, 并将细胞暴露于IH环境6、12、24 h后, ELISA检测细胞上清IL-6、IL-8的表达水平, CCK8检测细胞活性, western blot检测p-P65、P65、NLRP3、cleaved-caspase 1、cleaved-IL-1β的表达;向BEAS-2B细胞转染NLRP3 siRNA 24 h后, 使细胞接受CSE和IH联合刺激24 h, western blot检测NLRP3、cleaved-caspase 1、cleaved-IL-1β的表达, ELISA检测IL-6、IL-8的分泌水平;CSE和IH联合刺激BEAS-2B细胞24 h, 使用NF-κB信号通路抑制剂BAY 11-7082预处理后, western blot检测p-P65、P65、NLRP3、cleaved-caspase 1的表达, ELISA检测IL-6、IL-8的分泌水平。结果 CSE+IH(24 h)组的IL-6[(287.13±31.74)ng/L比(179.53±21.71)ng/L]、IL-8[(786.77±66.46)ng/L比(450.80±24.89)ng/L]的分泌水平均高于CSE组(F值分别为36.30、57.95, P值均<0.001), 且细胞活性低于CSE组(F=42.16, P<0.001)。CSE+IH组的NLRP3的mRNA表达以及p-P65/P65、NLRP3、cleaved-caspase 1、cleaved-IL-1β的蛋白表达均高于CSE组(F值分别为129.60、36.30、55.83、26.97、72.83, P值均<0.01)。CSE+IH+si-NLRP3组的NLRP3、cleaved-caspase 1、cleaved-IL-1β的蛋白表达均低于CSE+IH+si-NC组(F值分别为20.58、43.76、48.66, P值均<0.01)。CSE+IH+si-NLRP3组的IL-6、IL-8的分泌水平均低于CSE+IH+si-NC组(F值分别为38.23、24.73, P值均<0.01)。CSE+IH+BAY组的p-P65/P65、NLRP3、cleaved-caspase 1的蛋白表达均低于CSE+IH组(F值分别为42.17、54.70、40.18, P值均<0.001)。CSE+IH+BAY组的IL-6、IL-8的分泌水平均低于CSE+IH组(F值分别为48.63、60.38, P值均<0.001)。结论 IH通过NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路促进CSE诱导的人支气管上皮细胞炎症因子分泌。 展开更多
关键词 炎症 间歇性缺氧 香烟烟雾提取物 NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路
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