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射频治疗肺癌患者免疫淋巴细胞检测 被引量:13
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作者 吴昱 +3 位作者 程庆书 李小飞 王小平 刘锟 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第7期671-672,共2页
目的 :探讨射频消融治疗对肺癌患者免疫功能的影响 .方法 :采用流式细胞术对 89例肺癌患者射频消融术前、后免疫活性细胞进行监测 .结果 :射频治疗前T细胞CD3+ ,CD4 + ,CD8+ 及NK细胞CD1 6 + 处于一个较低水平 ,分别为[(6 3.32± 3.... 目的 :探讨射频消融治疗对肺癌患者免疫功能的影响 .方法 :采用流式细胞术对 89例肺癌患者射频消融术前、后免疫活性细胞进行监测 .结果 :射频治疗前T细胞CD3+ ,CD4 + ,CD8+ 及NK细胞CD1 6 + 处于一个较低水平 ,分别为[(6 3.32± 3.0 6 ) ,(36 .83± 1 .32 ) ,(2 3.7± 1 5 .0 1 ) ,(1 6 .80±1 0 .90 ) ],B细胞CD1 9+ 亦处在较低水平 [(1 6 .30± 9.81 ) ];射频治疗后T细胞CD3+ ,CD4 + ,CD8+ 显著增高分别为 ,[(71 .33± 1 9.77) ,(4 6 .2 0± 1 1 .30 ) ,(30 .6 0± 1 0 .98) ]与正常组比较无统计学意义 ,NK细胞和B细胞明显增高 [(2 0 .30± 8.1 2 ) ,(1 9.90± 1 1 .4 0 ) ].T细胞CD4 + /CD8+ 比值治疗前与正常对照组对比无统计学差异 ,治疗后比值与正常组对比显著增高 [(1 .6 3± 0 .5 3)vs(4 .35± 1 .89)P <0 .0 5 ]并超出正常范围 .结论 :肺癌患者特别是晚期肺癌患者细胞免疫功能处于抑制状态 ,体液免疫功能亢进 ;射频消融治疗后激发了机体细胞免疫功能 . 展开更多
关键词 射频消融 肺肿瘤 T淋巴细胞群 B淋巴细胞 自然杀伤细胞 流式细胞术
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多指标联合检测在诊断结核性脑膜炎中的临床价值 被引量:6
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作者 许茜 董轲 +2 位作者 李鸾 张惠中 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第21期2637-2640,共4页
目的观察脑脊液结核杆菌DNA(TB-DNA)、脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)和结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)联合检测在结核性脑膜炎(TBM)诊断中的价值。方法选取该院神经内科收治的84例TBM患者纳入试验组,86例非TBM患者作为对照组,对2组进行脑脊... 目的观察脑脊液结核杆菌DNA(TB-DNA)、脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)和结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)联合检测在结核性脑膜炎(TBM)诊断中的价值。方法选取该院神经内科收治的84例TBM患者纳入试验组,86例非TBM患者作为对照组,对2组进行脑脊液TB-DNA、脑脊液ADA和T-SPOT.TB检测,比较三项单独与联合检测的临床诊断价值。结果84例TBM患者,TB-DNA、ADA和T-SPOT.TB阳性率分别为33.33%(28/84)、65.48%(55/84)和75.00%(63/84),三项联合检测阳性率为95.24%(80/84)。结论三联检测对TBM的诊断有较高的敏感性,对临床诊治具有重要意义。 展开更多
关键词 脑脊液 腺苷脱氨酶 结核感染T细胞斑点试验 结核性脑膜炎
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抗前列腺癌多肽融合蛋白在大肠杆菌中的原核表达 被引量:4
3
作者 李斌 郝晓柯 +2 位作者 李立文 苏明权 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第9期796-798,共3页
目的:探讨抗前列腺癌多肽融合蛋白在大肠杆菌中的原核表达,为抗前列腺癌新药的研究奠定基础.方法:通过BH3,K237,DG2结构域和能被PSA特异性水解的短肽序列设计多肽药物的氨基酸序列,并依据大肠杆菌的偏爱密码子反翻译成基因序列.分段合... 目的:探讨抗前列腺癌多肽融合蛋白在大肠杆菌中的原核表达,为抗前列腺癌新药的研究奠定基础.方法:通过BH3,K237,DG2结构域和能被PSA特异性水解的短肽序列设计多肽药物的氨基酸序列,并依据大肠杆菌的偏爱密码子反翻译成基因序列.分段合成寡聚脱氧核糖核酸,经磷酸化、退火后,先后克隆至表达载体pGEX4T2的BamHI和EcoRI之间.将经双酶切鉴定获得的阳性重组子进行DNA测序.用IPTG诱导重组菌株表达并进行SDS PAGE分析.结果:pGEX4T2APP216酶切鉴定可见约216bp电泳条带,与设计长度相符.测序结果证实pGEX4T2APP216的基因序列与设计完全一致.SDS PAGE分析表明该基因在原核细胞中获得高效融合表达,所得到蛋白分子质量与预测相符.融合蛋白表达量约占菌体总蛋白的30%.结论:通过抗前列腺癌多肽序列在大肠杆菌中的高效表达,为前列腺癌的治疗提供新的思路和方法. 展开更多
关键词 多肽药物 前列腺癌 设计 基因表达
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肿瘤特异性Survivin、Livin共沉默RNAi载体的构建及其在前列腺癌细胞中的RNA干涉作用 被引量:4
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作者 沈建军 李斌 +4 位作者 龙敏 林芳 何婷 张惠中 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第9期1941-1945,共5页
目的:构建含Survivin基因启动子的、肿瘤特异性Survivin、Livin共沉默RNAi载体,研究该载体在前列腺癌细胞中的RNA沉默作用。方法:运用分子克隆技术,选取Survivin、Livin基因RNAi特异性序列,构建以Survivin、Livin基因为靶点的、含Survi... 目的:构建含Survivin基因启动子的、肿瘤特异性Survivin、Livin共沉默RNAi载体,研究该载体在前列腺癌细胞中的RNA沉默作用。方法:运用分子克隆技术,选取Survivin、Livin基因RNAi特异性序列,构建以Survivin、Livin基因为靶点的、含Survivin启动子的CGM30 miR-30 shRNA载体。经测序验证,用脂质体法转染PC-3细胞,RT-PCR、免疫印迹实验检测Survivin、Livin的表达变化,并用流式细胞术检测转染后PC-3细胞的凋亡变化。结果:构建的共沉默RNAi重组载体转染PC-3细胞后,Survivin、Livin基因在mRNA和蛋白水平上的表达均明显下调(P<0.01),且转染后的细胞凋亡增加了约15%,而正常前列腺上皮BPH-1细胞中则无此作用。结论:成功构建了含Survivin启动子、特异性沉默Survivin、Livin基因表达的RNAi共沉默载体CGM30-SP-svv-liv,转染该重组质粒后可促进肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 RNA干扰 存活素 生存素 凋亡 前列腺癌
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胎膜早破与细菌学感染的关系探讨 被引量:3
5
作者 汪定成 王金声 +3 位作者 刘茂贤 马侠 罗洋 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期324-325,共2页
胎膜早破与细菌学感染的关系探讨汪定成,王金声,刘茂贤,姜南艳,马侠,罗洋本文受检51例羊水中共检出需氧菌和(或)厌氧菌22例,占43.1%,其中股股早破组24例,检出细菌19例,占79.2%。胎膜未破组27例,检出3... 胎膜早破与细菌学感染的关系探讨汪定成,王金声,刘茂贤,姜南艳,马侠,罗洋本文受检51例羊水中共检出需氧菌和(或)厌氧菌22例,占43.1%,其中股股早破组24例,检出细菌19例,占79.2%。胎膜未破组27例,检出3例,占11.1%.结果显示,胎膜早... 展开更多
关键词 胎膜早破 细菌学 感染
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西藏三个不同海拔地区男性体检者血尿酸的观察 被引量:2
6
作者 侯毅 +5 位作者 江承建 杨光 黄淮霖 陈薇薇 央娜 张惠中 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第2期105-106,共2页
目的 探讨西藏三个不同海拔高度地区驻军男性体检者血尿酸的变化.方法 选择来自海拔4 500 m(A组)、3 700 m(B组)、2 800 m(C组)三个不同海拔高度的驻军男性健康体检人员71人、63人、66人,采用尿酸酶法在日立7180全自动生化分析仪... 目的 探讨西藏三个不同海拔高度地区驻军男性体检者血尿酸的变化.方法 选择来自海拔4 500 m(A组)、3 700 m(B组)、2 800 m(C组)三个不同海拔高度的驻军男性健康体检人员71人、63人、66人,采用尿酸酶法在日立7180全自动生化分析仪上测定血尿酸水平.结果 A组、B组、C组三个不同海拔高度的驻军男性血尿酸分别为401.38±68.85 μmol/L,377.19±57.48 μmol/L,367.05±57.12 μmol/L,经方差齐性检验,方差齐,(F=2.632,P=0.074).A组血尿酸水平明显升高,经t检验,与B组、C组之间有显著性差异(tAB=2.192,P<0.05;tAC=3.164,P<0.05).但是B组、C组之间无显著性差异(tBC=1.005,P>0.05).A组、B组、C组血尿酸升高率分别为46.5%,27.0%,16.7%,A组和B组、C组之间血尿酸升高率有显著性差异(χAB^2=5.62,P<0.05;χAC^2=12.81,P<0.05).但是B组、C组之间血尿酸升高率无显著性差异(χBC^2=1.48,P>0.05).结论 研究结果表明,在海拔4 000 m以上的高原地区,海拔因素所导致的血尿酸升高率及血尿酸水平均显著升高.这点在高原疾病的预防及治疗中应当引起重视. 展开更多
关键词 西藏 不同海拔 尿酸
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高迁移率族蛋白-1的结构与细胞外功能 被引量:2
7
作者 于文彬 苏明权 《医学研究生学报》 CAS 2004年第11期1012-1014,1018,共4页
高迁移率族蛋白 1(HMGB 1)是一种核蛋白 ,属于HMG蛋白超家族 ,由 2 15个氨基酸组成 ,相对分子质量为 2 5 0 0 0 ,在哺乳动物细胞核内普遍存在。新近发现HMGB 1可由单核 /巨噬细胞等通过非经典的、囊介导的分泌通路而分泌至细胞外。细... 高迁移率族蛋白 1(HMGB 1)是一种核蛋白 ,属于HMG蛋白超家族 ,由 2 15个氨基酸组成 ,相对分子质量为 2 5 0 0 0 ,在哺乳动物细胞核内普遍存在。新近发现HMGB 1可由单核 /巨噬细胞等通过非经典的、囊介导的分泌通路而分泌至细胞外。细胞外的HMGB 1是一个重要炎症因子 ,参与多种疾病尤其是类风湿性关节炎、脓毒症、急性肺损伤等的发病机制 ,甚至可导致动物死亡。对HMGB 1细胞外机制与功能的进一步研究 。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白-1 结构-功能研究 细胞外
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Survivin、Livin共沉默对前列腺癌细胞的联合促凋亡作用 被引量:2
8
作者 沈建军 李斌 +4 位作者 龙敏 林芳 何婷 张惠中 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第6期1282-1287,共6页
目的:研究Survivin、Livin基因共沉默对前列腺癌细胞PC-3在细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡、对化疗药物敏感性、克隆形成及裸鼠体内成瘤等方面的影响以及Survivin shRNA、Livin shRNA联合促前列腺癌细胞凋亡作用。方法:运用分子克隆技术... 目的:研究Survivin、Livin基因共沉默对前列腺癌细胞PC-3在细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡、对化疗药物敏感性、克隆形成及裸鼠体内成瘤等方面的影响以及Survivin shRNA、Livin shRNA联合促前列腺癌细胞凋亡作用。方法:运用分子克隆技术,构建以Survivin、Livin基因为靶点的、含Survivin启动子的CGM30 miR-30 shRNA载体,慢病毒包装后感染PC-3细胞。免疫印迹实验检测Survivin、Livin的表达变化,MTT、流式细胞术等检测PC-3细胞在细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖、对顺铂的敏感性、克隆形成及裸鼠体内成瘤等方面的变化。结果:构建重组慢病毒感染PC-3细胞后,实现了Survivin、Livin基因的共沉默。与单独沉默Survivin或Livin相比,S期PC-3细胞增加了5%-10%。PC-3细胞增殖抑制率和对顺铂的敏感性及凋亡率增加了约20%,克隆形成率明显下降。与阴性对照组比较,裸鼠体内成瘤瘤体重量减小约50%。结论:构建重组慢病毒,成功的在PC-3细胞中实现了Survivin、Livin的共沉默,达到了Survivin shRNA和Livin shRNA二者联合促细胞凋亡的目的。 展开更多
关键词 RNA干扰 SURVIVIN LIVIN 凋亡 前列腺癌
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HMGB1B盒编码序列的克隆和大肠杆菌表达 被引量:2
9
作者 于文彬 +3 位作者 苏明权 李斌 郝晓柯 李立文 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第3期199-201,共3页
目的:克隆小鼠高迁移率族蛋白1(highmobility groupbox1,HMGB1)B盒编码序列并在大肠杆菌中表达GST B盒融合蛋白.方法:从新生小鼠肺组织提取总RNA,经RT PCR获得HMGB1B盒编码序列.将酶切后PCR产物克隆到 pGEX 4T 2载体的BamHI和EcoRI位... 目的:克隆小鼠高迁移率族蛋白1(highmobility groupbox1,HMGB1)B盒编码序列并在大肠杆菌中表达GST B盒融合蛋白.方法:从新生小鼠肺组织提取总RNA,经RT PCR获得HMGB1B盒编码序列.将酶切后PCR产物克隆到 pGEX 4T 2载体的BamHI和EcoRI位点之间,经双酶切鉴定 后测序证实.用pGEX 4T 2 B转化BL21(DE3)感受态细胞,在30℃经IPTG诱导表达5h后进行SDS PAGE分析.结果: 测序结果证实成功获得了小鼠HMGB1B盒编码序列,其序列 与GenBank中报道序列完全一致.SDS PAGE分析表明,在大 肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了GST B盒蛋白,表达量约占 菌体总蛋白的30%,结论:成功克隆小鼠HMGB1B盒编码序 列并在大肠杆菌中获得了高效表达. 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白1 试剂盒 诊断 基因表达
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鼠高迁移率族蛋白1A盒基因的克隆和原核表达 被引量:1
10
作者 于文彬 +4 位作者 张惠中 郝晓柯 苏明权 李斌 李立文 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2007年第3期272-273,299,共3页
目的:克隆小鼠高迁移率族蛋白1A盒(HMGB1 A box)cDNA,并在大肠杆菌中表达GST-A盒融合蛋白。方法:从鼠肺提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1 A盒基因。将该基因插入pGEX-4T-2载体的BamHI和EcoRI位点之间并测序鉴定,转化BL21(DE3)后30℃IPTG诱... 目的:克隆小鼠高迁移率族蛋白1A盒(HMGB1 A box)cDNA,并在大肠杆菌中表达GST-A盒融合蛋白。方法:从鼠肺提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1 A盒基因。将该基因插入pGEX-4T-2载体的BamHI和EcoRI位点之间并测序鉴定,转化BL21(DE3)后30℃IPTG诱导表达5h,进行SDS-PAGE分析。结果:DNA测序证明,获得了HMGB1 A盒基因,其序列与GenBank中报道序列基本一致。SDS-PAGE分析表明,HMGB1 A盒与GST融合蛋白获得成功表达,分子质量约36KD,表达量约占菌体总蛋白的15%,结论:通过RT-PCR成功克隆和表达了鼠HMGB1 A盒基因。 展开更多
关键词 HMGB1A盒/免疫学 大肠杆菌/免疫学 聚合酶链反应 序列分析 克隆 分子 基因表达 小鼠
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高迁移率族蛋白1在大肠埃希菌中的高效表达以及纯化 被引量:1
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作者 张伟 +3 位作者 任君萍 顾炳权 沈建军 张惠中 《现代检验医学杂志》 CAS 2007年第3期26-28,共3页
目的克隆、表达高迁移率族蛋白1(HMGB1)。方法从人外周血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1基因;将该基因克隆到PMD18-T载体中,测序鉴定;将HMGB1基因插入pET32-A表达载体中,30℃诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析;目的蛋白在变性条件下... 目的克隆、表达高迁移率族蛋白1(HMGB1)。方法从人外周血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1基因;将该基因克隆到PMD18-T载体中,测序鉴定;将HMGB1基因插入pET32-A表达载体中,30℃诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析;目的蛋白在变性条件下经Ni2+-NTA亲和层析纯化后用Western-Blot证实。结果DNA测序证明,获得了HMGB1基因,其序列与Gen Bank中报道序列完全一致;SDS-PAGE分析表明,HMGB1蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的32%;诱导表达产物主要以包涵体形式存在,6 His-NTA纯化后获得目的蛋白,Western-Blot结果显示纯化蛋白具有良好的抗原性。结论成功表达和纯化了HMGB1基因。 展开更多
关键词 HMGB1 逆转录 聚合酶链反应 基因表达
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1例恶性组织细胞病临床分析
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作者 薛姣 +1 位作者 张惠中 《国际检验医学杂志》 CAS 2015年第10期1476-1477,共2页
恶性组织细胞病(以下简称恶组)由组织细胞及其前身细胞异常增生所致,呈现系统性、全身性浸润的特征,是血液系统高度恶性的肿瘤性疾病,病因尚未完全明确。恶组主要特点是肝、脾、淋巴结、骨髓等器官或组织中出现广泛的恶性组织细胞... 恶性组织细胞病(以下简称恶组)由组织细胞及其前身细胞异常增生所致,呈现系统性、全身性浸润的特征,是血液系统高度恶性的肿瘤性疾病,病因尚未完全明确。恶组主要特点是肝、脾、淋巴结、骨髓等器官或组织中出现广泛的恶性组织细胞灶性增生,常伴有血细胞被吞噬的现象。临床表现多样,以持续高热,以及肝、脾淋巴结肿大和全血细胞减少、进行性系统功能衰竭为主。本病按病程可分为急性型和慢性型,国内以急性型为多见,起病急骤,病程大都较短,多数在半年以内。 展开更多
关键词 恶性组织细胞病 临床分析 全血细胞减少 淋巴结肿大 血液系统 异常增生 肿瘤性疾病 临床表现
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SLE患者新型DNA自身抗原及其抗体
13
作者 齐为民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期S013-S014,共2页
关键词 系统性红斑狼疮 DNA 自身抗体 自身抗原
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HMGB1 A盒与LBPK95A融合基因的构建和原核表达
14
作者 于文彬 +4 位作者 苏明权 沈建军 李立文 郝晓柯 张惠中 《现代检验医学杂志》 CAS 2008年第6期9-11,共3页
目的克隆、表达高迁移率族蛋白1A盒(HMGB1A box)与LBPK95A的融合基因。方法经加端-PCR获得HMGB1A盒与LBPK95A的融合基因。该基因克隆到pGEX-4T-2载体中转化TOP10感受态细胞,测序鉴定。将A-LBP质粒转化E.coliBL21,30℃诱导表达4h,超声裂... 目的克隆、表达高迁移率族蛋白1A盒(HMGB1A box)与LBPK95A的融合基因。方法经加端-PCR获得HMGB1A盒与LBPK95A的融合基因。该基因克隆到pGEX-4T-2载体中转化TOP10感受态细胞,测序鉴定。将A-LBP质粒转化E.coliBL21,30℃诱导表达4h,超声裂解后经GSTrapFF蛋白纯化柱纯化,进行SDS-PAGE分析。结果DNA测序证明,获得了HMGB1A盒与LBPK95A的融合基因。SDS-PAGE分析表明,A-LBP融合蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的28,GSTrapFF纯化后获得目的蛋白。结论成功表达和纯化了HMGB1A盒与LBPK95A的融合蛋白。 展开更多
关键词 HMGB1 A盒 LBPK95A 加端-PCR 基因表达 纯化
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肝硬化患者血浆胆碱酯酶活性对麻醉剂米库氯铵代谢的影响 被引量:1
15
作者 薛姣 肖海峰 +1 位作者 董珂 《现代检验医学杂志》 CAS 2019年第5期124-126,共3页
目的探讨肝硬化患者血浆胆碱酯酶(plasma cholinesterase,PchE)活性对麻醉剂米库氯铵代谢的影响,为临床麻醉提供指导。方法选取2016年10月~2018年10月接受全麻手术的患者70例,分为肝硬化组(n=35)和非肝硬化组(n=35),麻醉开始前采集静脉... 目的探讨肝硬化患者血浆胆碱酯酶(plasma cholinesterase,PchE)活性对麻醉剂米库氯铵代谢的影响,为临床麻醉提供指导。方法选取2016年10月~2018年10月接受全麻手术的患者70例,分为肝硬化组(n=35)和非肝硬化组(n=35),麻醉开始前采集静脉血检测PchE活性,使用同样的麻醉药物及麻醉方法,肌松监测采用四个成串刺激(train of four stimulation,TOF)。首次给予米库氯铵后记录作用时间(首剂作用时间),术中维持阶段采用持续泵注,手术结束前停止泵注的时间肝硬化组早于非肝硬化组10 min,然后分别记录四个成串刺激比值(train of four stimulation ratio,TOFr)恢复到25%,50%和75%的时间。术中记录的一般观察指标为手术时长、出血量和输液量。最后分析两组间PchE的活性和恢复时间之间的关系。结果肝硬化组的PchE活性(4 174±799U/L)明显低于非肝硬化组(6274±1151U/L),差异有统计学意义(t=8.865,P=0.000)。肝硬化组的首剂作用时间(20.3±3.7 min)长于非肝硬化组(16.3±3.3min),差异有统计学意义(t=4.767,P=0.000)。肝硬化组的TOFr恢复到25%,50%和75%的时间(26.2±8.0,31.8±8.3,33.8±10.6 min)明显长于非肝硬化组(16.0±4.0,20.4±3.9,24.1±4.6 min),差异均有统计学意义(t=6.683,P=0.000;t=7.355,P=0.000;t=4.960,P=0.000)。两组患者的手术时长、出血量、输液量比较,差异均无统计学意义(t=1.227,P=0.224;t=0.643,P=0.000;t=1.624,P=0.109)。结论肝硬化患者的PchE活性明显下降,对米库氯铵的代谢时间延长,掌握其代谢特点对临床麻醉有重要意义。 展开更多
关键词 肝硬化 血浆胆碱酯酶 米库氯铵
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血清三项肿瘤标志物在大肠癌转移、复发中的应用 被引量:2
16
作者 齐为民 +1 位作者 刘树林 郭力 《第四军医大学学报》 2000年第12期F003-F003,共1页
关键词 大肠癌 肿瘤转移 肿瘤复发 肿瘤标志物 CEA 诊断
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肿瘤标志物CA-242在消化道恶性肿瘤中的诊断作用 被引量:2
17
作者 张周良 +1 位作者 刘树林 齐为民 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第3期203-203,共1页
关键词 肿瘤标志物 CA-242 消化道恶性肿瘤 诊断 消化道肿瘤
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