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过表达miRNA-424-5p靶向AKT3对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡的影响
1
作者 姚伟佳 罗春海 +4 位作者 刘佳金 王薇 李丹阳 刘炳琦 付世新 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3635-3642,共8页
[目的]本试验通过过表达miRNA-424-5p,明确miRNA-424-5p与其靶基因丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT serine/threonine kinase 3,AKT3)对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡影响的机制,为阐明miRNA-424-5p在奶牛胎盘分离过程中的作用机制提供试验基础和理... [目的]本试验通过过表达miRNA-424-5p,明确miRNA-424-5p与其靶基因丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT serine/threonine kinase 3,AKT3)对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡影响的机制,为阐明miRNA-424-5p在奶牛胎盘分离过程中的作用机制提供试验基础和理论依据。[方法]试验分为3组:空白对照组(Control)、阴性对照组(miRNA-424-5p mimics NC)和过表达组(miRNA-424-5p mimics)。采用茎环法实时荧光定量PCR检测转染miRNA-424-5p mimics后奶牛子宫内膜上皮细胞miRNA-424-5p的表达变化;采用Western blotting及实时荧光定量PCR检测过表达后AKT3和凋亡相关因子的表达变化,采用Annexin V-FITC/PI法检测奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡情况。[结果]与空白对照及阴性对照组相比,转染miRNA-424-5p mimics后子宫内膜上皮细胞miRNA-424-5p mRNA的表达量极显著升高(P<0.01),B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase3)和Caspase9的mRNA表达量极显著升高(P<0.01),AKT3和Bcl-2的mRNA表达量极显著降低(P<0.01);Bax和Caspase3蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Caspase9蛋白表达量显著升高(P<0.05),AKT3和Bcl-2蛋白表达量极显著降低(P<0.01);细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。[结论]过表达miRNA-424-5p可通过靶向调控AKT3使奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子Bax、Caspase3和Caspase9的表达量增加,使Bcl-2的表达量降低,进而促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 奶牛 miRNA-424-5p AKT3 子宫内膜上皮细胞 凋亡
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miRNA-424-5p靶向VEGFA对胎衣不下奶牛胎盘胶原蛋白降解的影响
2
作者 刘炳琦 罗春海 +4 位作者 姚伟佳 王薇 刘佳金 李丹阳 付世新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期3083-3092,共10页
【目的】通过探究miRNA-424-5p对奶牛母体胎盘组织胶原蛋白降解的影响,进而明确miRNA-424-5p对奶牛胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)发生的调控作用及机制。【方法】检测胎衣正常排出与胎衣不下奶牛母体胎盘组织miRNA-424-5p表... 【目的】通过探究miRNA-424-5p对奶牛母体胎盘组织胶原蛋白降解的影响,进而明确miRNA-424-5p对奶牛胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)发生的调控作用及机制。【方法】检测胎衣正常排出与胎衣不下奶牛母体胎盘组织miRNA-424-5p表达水平,采用qRT-PCR和Western blot方法进行胎衣正常排出与胎衣不下奶牛的母体胎盘组织VEGFA、MMP-2、MMP-9、COL-IV的表达水平检测。应用生物信息学分析对miRNA-424-5p进行靶基因预测,并通过双荧光素酶试验验证miRNA-424-5p与VEGFA的靶向关系。在奶牛子宫内膜上皮细胞中转染miRNA-424-5p mimics和miRNA-424-5p inhibitor进行过表达和沉默miRNA-424-5p。采用免疫荧光技术观察VEGFA在奶牛子宫内膜上皮细胞的表达变化,qRT-PCR和Western blot检测VEGFA、MMP-2、MMP-9、COL-IV的mRNA与蛋白表达水平的变化。【结果】与健康组相比,RFM组母体胎盘组织中的miRNA-424-5p mRNA表达水平显著升高(P<0.01),VEGFA、MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。miRNA-424-5p的潜在靶基因共有152个,并经双荧光素酶试验结果证实VEGFA是miRNA-424-5p的靶基因。过表达和沉默miRNA-424-5p后,免疫荧光结果显示,与对照组相比miRNA-424-5p mimics组VEGFA的表达较低,而miRNA-424-5p inhibitor组VEGFA表达较高;qRT-PCR和Western blot结果显示,过表达miRNA-424-5p,靶基因VEGFA mRNA与蛋白表达水平极显著降低,基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),胶原蛋白COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),而沉默miRNA-424-5p时VEGFA、MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达显著升高(P<0.01),COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著降低。【结论】miRNA-424-5p可靶向VEGFA调控MMPs表达、胶原蛋白的分解从而引起细胞外胶原降解障碍,是引起胎衣不下发生的重要因素。 展开更多
关键词 奶牛 胎衣不下 miRNA-424-5p 血管内皮生长因子A 胶原蛋白降解
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胎衣不下奶牛miRNA-185靶向调控血管内皮生长因子A表达的研究
3
作者 罗春海 郑程远 +5 位作者 张梦龙 姚伟佳 刘佳金 刘炳琦 王薇 付世新 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期916-925,共10页
【目的】通过体内和体外试验检测miRNA-185及血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)在胎衣正常排出和胎衣不下(RFM)奶牛胎盘组织中的差异表达情况及VEGFA在奶牛母体胎盘组织中表达分布,验证及明确miRNA-185和V... 【目的】通过体内和体外试验检测miRNA-185及血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)在胎衣正常排出和胎衣不下(RFM)奶牛胎盘组织中的差异表达情况及VEGFA在奶牛母体胎盘组织中表达分布,验证及明确miRNA-185和VEGFA与奶牛胎衣不下发生密切相关并存在靶向调节关系,为深入研究miRNA-185在奶牛胎衣不下发生过程中的作用提供理论依据和试验基础。【方法】采用实时荧光定量PCR法检测胎衣正常排出及胎衣不下奶牛母体胎盘组织中miRNA-185及VEGFA基因表达情况,采用荧光原位杂交技术(FISH)检测VEGFA在母体胎盘组织的表达分布及mRNA的差异表达情况;采用双荧光素酶明确miRNA-185与VEGFA的靶向调节关系,采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测体外转染miRNA185 mimics、miRNA-185 inhibitor及miRNA-185 NC后VEGFA mRNA及蛋白的差异表达情况。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,与胎衣正常排出奶牛相比,胎衣不下奶牛体内miRNA-185及VEGFA的表达水平均极显著下调(P<0.01);荧光原位杂交结果显示,VEGFA mRNA主要在奶牛子宫内膜上皮细胞中表达。VEGFA是miRNA-185的靶向调节蛋白。与阴性对照组相比,转染miRNA-185 mimics后VEGFA的mRNA及蛋白表达水平均极显著下调(P<0.01),转染miRNA-185 inhibitor后VEGFA的mRNA及蛋白表达水平均极显著上调(P<0.01)。【结论】胎衣不下奶牛母体胎盘组织内miRNA-185及VEGFA表达显著降低,VRGFA主要在子宫内膜上皮细胞中表达,miRNA-185可通过靶向调控VEGFA的表达参与奶牛胎衣不下的发生发展。 展开更多
关键词 奶牛 胎衣不下 miRNA-185 血管内皮生长因子A 母体胎盘
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基于拓扑优化技术的压力机机身结构优化设计
4
作者 张号 高媛 +2 位作者 钱峰 李相源 姚伟佳 《机械设计与制造工程》 2024年第8期5-9,共5页
构造传动机构动态静力学模型,获取机身拓扑优化设计复杂载荷边界条件,结合带权重的折衷规划法定义机身多工况刚度优化模型。设定优化前后优化区域的体积比为约束条件,基于层次分析法决策矩阵确定权重因子,以静态刚度最大为优化目标进行... 构造传动机构动态静力学模型,获取机身拓扑优化设计复杂载荷边界条件,结合带权重的折衷规划法定义机身多工况刚度优化模型。设定优化前后优化区域的体积比为约束条件,基于层次分析法决策矩阵确定权重因子,以静态刚度最大为优化目标进行机身多工况刚度拓扑优化。以优化结果材料密度云图为依据确定最优材料分布,结合结构工艺性设计压力机机身结构方案,实现机身结构性能轻量化设计,可为突破传统经验设计方法、探索现代结构设计技术提供理论依据。 展开更多
关键词 压力机 动态静力学 层次分析法 多工况 拓扑优化
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含间隙多连杆机构动力学仿真分析 被引量：3
5
作者 张建超 钱峰 +2 位作者 李相源 姚伟佳 高媛 《机电工程技术》 2022年第1期42-45,共4页
转动副间隙普遍存在于压力机主运动机构中,为探究杆间转动副间隙对运动机构动态特性的影响,以广泛采用的下死点位置精度作为评价指标,以重载压力机曲柄肘杆机构为研究对象,基于ADAMS虚拟样机仿真技术,借助L-N非线性弹簧阻尼模型与库伦... 转动副间隙普遍存在于压力机主运动机构中,为探究杆间转动副间隙对运动机构动态特性的影响,以广泛采用的下死点位置精度作为评价指标,以重载压力机曲柄肘杆机构为研究对象,基于ADAMS虚拟样机仿真技术,借助L-N非线性弹簧阻尼模型与库伦摩擦力模型理论,施加转动副间碰撞接触力与摩擦力,建立含转动副间隙多刚体动力学模型,对具有关节间隙的多体机械系统进行研究。结果表明,建立的动力学模型可以有效地预测多连杆机构的运动特性。此外,研究了间隙尺寸、冲击载荷及曲轴转速对机构下死点精度的影响规律,得到不同仿真条件下压力机下死点位移变化趋势。 展开更多
关键词 压力机 间隙 多刚体动力学 ADAMS仿真 下死点精度
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中高温塔式容器裙座优化设计
6
作者 姚伟佳 《石油石化物资采购》 2022年第17期229-231,共3页
中高温塔式容器在裙座与封头连接部位存在着热应力,而在常规设计中往往忽略了此处热应力,运用有限元分析方法对具体的模型进行了温度场模拟和结构分析计算,通过大量计算结果的比较与分析优化了裙座结构,并给出在常规设计基础上的改进措... 中高温塔式容器在裙座与封头连接部位存在着热应力,而在常规设计中往往忽略了此处热应力,运用有限元分析方法对具体的模型进行了温度场模拟和结构分析计算,通过大量计算结果的比较与分析优化了裙座结构,并给出在常规设计基础上的改进措施,以降低热应力的影响,提高此类塔器的安全性。 展开更多
关键词 塔式容器 热应力 温度场 优化
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新课改视野下的高中物理实验教学 被引量：3
7
作者 姚伟佳 《学苑教育》 2014年第11期65-65,共1页
在经济不断发展的前提下，我国对教育的重视程度越来越高，并且伴随着无数次改革和深化，进一步提升了我国的教育水平。但是，从高中物理实验教学的现状来看，并不理想。基于新课改视野下，针对高中物理实验教学所存在的不足，提出一些... 在经济不断发展的前提下，我国对教育的重视程度越来越高，并且伴随着无数次改革和深化，进一步提升了我国的教育水平。但是，从高中物理实验教学的现状来看，并不理想。基于新课改视野下，针对高中物理实验教学所存在的不足，提出一些可行性建议。 展开更多
关键词 高中物理 实验教学 新课改
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院前急救护理措施的实施
8
作者 姚伟佳 韩俊惠 等 《泰山卫生》 2001年第5期63-63,共1页
关键词 院前急救 护理措施 监护
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物理实验教学的尝试
9
作者 姚伟佳 《中学生数理化（教与学）》 2014年第10期80-80,共1页
物理教学和实验教学是互相羁绊、互相依存的两个个体,二者不可分割,不可抽离.在初中物理教学中实验教学可谓是最为主要的一项教学,尽管它非常重要,但是实际教学效果却不是很理想.本文就针对实验教学的现状、弊端提出相对应的建议,仅供参... 物理教学和实验教学是互相羁绊、互相依存的两个个体,二者不可分割,不可抽离.在初中物理教学中实验教学可谓是最为主要的一项教学,尽管它非常重要,但是实际教学效果却不是很理想.本文就针对实验教学的现状、弊端提出相对应的建议,仅供参考.一、物理实验的重要性物理实验教学不仅具有一定的价值,而且它的重要性更是有目共睹的.第一,在物理实验教学中强调了学生的动手实践能力,在一定程度上锻炼了学生的创新意识以及创新能力. 展开更多
关键词 物理实验教学 探究能力 物理教学实验 初中物理
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