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溶血对LC-MS/MS检测血浆中儿茶酚胺的影响
1
作者 吕小波 何水兰 +3 位作者 谷叶 黄和飞 夏跃莲 包琳艺 《中国医药指南》 2023年第31期1-4,共4页
目的探讨溶血对液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测血浆中儿茶酚胺及其代谢物的影响,为医学检验实验室检测血浆中儿茶酚胺及代谢物提供指导和参考。方法分别采集30名健康志愿者静脉血,静脉血分别制作成不同程度的溶血标本,并建立溶血液样... 目的探讨溶血对液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测血浆中儿茶酚胺及其代谢物的影响,为医学检验实验室检测血浆中儿茶酚胺及代谢物提供指导和参考。方法分别采集30名健康志愿者静脉血,静脉血分别制作成不同程度的溶血标本,并建立溶血液样本模型。用实验室自建的高效LC-MS/MS法分别测定溶血前后血液样本中儿茶酚胺水平,对结果进行双侧配对t检验。结果溶血对肾上腺素、多巴胺的检测结果差异有统计学意义(P<0.05),其中样本溶血后肾上腺素的检测结果明显降低,多巴胺的检测结果明显升高,且多巴胺在中、重度溶血时升高尤其明显,与轻度溶血组间差异有统计学意义(P<0.01);除了3-甲氧基酪胺在溶血前后均无法测出外,溶血对去甲肾上腺素、去甲变肾上腺素、变肾上腺素的检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论溶血对于肾上腺素、多巴胺有较大的影响,临床采集血液样本时应严格遵守操作规程,防止溶血现象发生,从而确保检验结果的准确性。 展开更多
关键词 溶血 儿茶酚胺及代谢物 液相色谱串联质谱法
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液相色谱串联质谱法测定人体血清中的类固醇激素
2
作者 黄和飞 谷叶 +4 位作者 李佳兴 夏跃莲 何水兰 代秋琼 吕小波 《药学与临床研究》 2022年第4期300-304,共5页
目的:建立一种能同时测定血清中6种类固醇激素[包括孕酮(P)、17-羟基孕酮(17-OHP)、皮质醇(COL)、去氢表雄酮(DHEA)、双氢睾酮(DHT)、硫酸去氢表雄酮(DHEAS)]的快速、灵敏的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。方法:血清样本经甲基... 目的:建立一种能同时测定血清中6种类固醇激素[包括孕酮(P)、17-羟基孕酮(17-OHP)、皮质醇(COL)、去氢表雄酮(DHEA)、双氢睾酮(DHT)、硫酸去氢表雄酮(DHEAS)]的快速、灵敏的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。方法:血清样本经甲基叔丁基醚液液萃取,高速离心后上清液氮气吹干,加入复溶液后上机检测。采用安捷伦C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,水相A为纯水,有机相B为纯甲醇,质谱采用电喷雾电离(ESI)模式进行离子化,多反应监测模式(MRM)扫描,同位素稀释法进行定量分析。结果:血清中6个类固醇激素检测限(LOD,以信噪比(S/N)≥3为标准)为0.03~1.25 ng·mL^(-1);定量限(LOQ,以信噪比(S/N)≥10为标准)为0.05~2.50 ng·mL^(-1);在0.05~4000 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好,相关系数(r)≥0.9950;低浓度样本日内精密度为2.4%~6.2%;中浓度样本日内精密度为2.3%~5.7%;高浓度样本日内精密度为1.3%~5.4%。低浓度样本日间精密度为0.4%~2.6%;中浓度样本日间精密度为0.3%~3.9%;高浓度样本日间精密度为0.2%~4.7%。加标回收率为86%~106%。结论:建立一种能同时测定血清中6个类固醇激素的HPLC-MS/MS方法。该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强,可在6.5 min之内完成分离和检测,适用于人体血清中多种类固醇激素含量的定量分析。 展开更多
关键词 类固醇激素 血清 高效液相色谱串联质谱
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液相色谱串联质谱法测定人全血糖化血红蛋白
3
作者 夏跃莲 黄和飞 +3 位作者 谷叶 李佳兴 何水兰 吕小波 《检验医学与临床》 CAS 2022年第S01期47-50,共4页
目的建立一种液相色谱串联质谱测定人全血糖化血红蛋白(HbA1c)的方法。方法通过全血样本离心分离获得红细胞,将红细胞制备为溶血液,并通过蛋白内切酶水解作用,血红蛋白在β链N末端第六个氨基酸残基(Glu)处断开,得到糖基化HbA1c六肽和非... 目的建立一种液相色谱串联质谱测定人全血糖化血红蛋白(HbA1c)的方法。方法通过全血样本离心分离获得红细胞,将红细胞制备为溶血液,并通过蛋白内切酶水解作用,血红蛋白在β链N末端第六个氨基酸残基(Glu)处断开,得到糖基化HbA1c六肽和非糖基化HbA0六肽,以0.2%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,经色谱柱[ZORBAX SB-CN(2.1×150 mm,5μm)]洗脱分离,串联三重四级杆质谱在电喷雾电离正离子(ESI+),MRM模式下进行分离定量,以HbA1c六肽标准品作为校准品,HbA0六肽标准品作为内标,按相应比例进行配制,上机进行分离定量,得到标准曲线。通过标准曲线对未知样本进行定量。结果HbA1c在3.0%到20.0%范围内线性良好相关系数R^(2)>0.9950,低中高浓度样本日内精密度变异系数(CV)小于2.0%,日间精密度CV)小于1.2%,符合《中华人民共和国卫生行业标准》室内CV小于3%的要求。正确度以中国计量科学研究院生产的有证标准物质NIM-RM3626为参考物质,该参考物质标准值为5.1%(32.24 mmol/mol),本方法定值为5.2%,与其偏差为0.19%。符合《中华人民共和国卫生行业标准》偏差在±0.5%HbA1c范围内的要求。结论本方法适用于人全血样本中HbA1c水平测定,能准确反映出人全血样本中HbA1c水平,以辅助相关疾病的诊断。 展开更多
关键词 全血 糖化血红蛋白 液相色谱串联质谱
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溶血对液相色谱串联质谱检测血清中维生素A、E、D、K的影响 被引量：1
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作者 黄和飞 李佳兴 +4 位作者 谷叶 李泽东 李俊宇 夏跃莲 吕小波 《当代医学》 2021年第4期1-5,共5页
目的探讨溶血对液相色谱串联质谱(LC-MS\MS)检测血清中维生素A、E、D、K的影响。方法将全血样本采用多管涡旋振荡器进行不同程度的振荡或使用注射器针头涡旋搅拌,造成不同程度的溶血,并建立溶血样本模型,将上述样本采用蛋白质沉淀、液... 目的探讨溶血对液相色谱串联质谱(LC-MS\MS)检测血清中维生素A、E、D、K的影响。方法将全血样本采用多管涡旋振荡器进行不同程度的振荡或使用注射器针头涡旋搅拌,造成不同程度的溶血,并建立溶血样本模型,将上述样本采用蛋白质沉淀、液液萃取进行前处理,采用LC-MS/MS法分别测定溶血前、后血样的维生素水平,结果进行双侧配对t检验。结果溶血对VA的检测有明显影响,样本溶血后VA的检测含量明显降低;溶血对VE、VD、VK的检测无明显影响。结论溶血对于维生素A有较大的影响,临床采集血液样本时应严格遵守操作规程,防止溶血现象发生,确保检验结果的准确性。 展开更多
关键词 溶血 维生素 液相色谱串联质谱法
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