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冬虫夏草菌实时荧光定量PCR内参基因的筛选 被引量:7
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作者 苏强军 +3 位作者 谢放 Uwitugabiye VESTINE 陈照禾 周刚 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1712-1722,共11页
以冬虫夏草单子囊孢子分离得到的菌株TZ8-1的3种菌丝形态为实验材料,提取RNA,经反转录获取c DNA,选择了11个持家基因为候选内参基因(18S r RNA、APRTase、β-TUB、RPL2、EF1-α、PGI、PGM、H^(+)-ATPase、ACT1、UBQ和GAPDH),根据该菌基... 以冬虫夏草单子囊孢子分离得到的菌株TZ8-1的3种菌丝形态为实验材料,提取RNA,经反转录获取c DNA,选择了11个持家基因为候选内参基因(18S r RNA、APRTase、β-TUB、RPL2、EF1-α、PGI、PGM、H^(+)-ATPase、ACT1、UBQ和GAPDH),根据该菌基因组注释结果来设计引物,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术进行定量扩增,利用ge Norm、Norm Finder和Best Keeper算法程序进行表达稳定性评估,并用Ref Finder对评估结果进行综合排比,最终筛选得到了最适内参基因。结果表明,所选取的11个候选内参基因均可作为冬虫夏草菌菌丝体时期的内参基因,稳定性最好的3个内参基因分别是UBQ、PGE和ACT1,稳定性较差的3个内参基因分别是GAPDH、RPL2和β-TUB。 展开更多
关键词 内参基因 冬虫夏草菌 QRT-PCR 菌丝形态
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光照处理对冬虫夏草单孢菌株生长代谢的影响 被引量:3
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作者 谢放 苏强军 +3 位作者 李佳莹 陈照禾 周刚 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1060-1070,共11页
为了探究光照处理对中国被毛孢生长代谢的影响,通过分离单子囊孢子获得单孢菌株,并对该菌株进行光照处理。观察记录光照处理30 d后菌落和菌丝形态的变化,测量菌落鲜质量、干质量以及分生孢子量,通过比色法检测甘露醇、多糖、尿素和多酚... 为了探究光照处理对中国被毛孢生长代谢的影响,通过分离单子囊孢子获得单孢菌株,并对该菌株进行光照处理。观察记录光照处理30 d后菌落和菌丝形态的变化,测量菌落鲜质量、干质量以及分生孢子量,通过比色法检测甘露醇、多糖、尿素和多酚4种代谢物含量的变化,并通过UPLC检测腺苷含量的变化。结果表明,光照处理后中国被毛孢菌落形态发生显著变化;菌落鲜质量显著低于黑暗处理组,干质量无明显差异;菌丝的延伸被抑制并出现扭结现象;分生孢子数量显著高于黑暗处理组;多糖和尿素含量均显著低于黑暗处理组;甘露醇和多酚含量无显著变化;腺苷含量显著高于黑暗处理组。 展开更多
关键词 冬虫夏草 单孢菌株 中国被毛孢 光照处理 生长 代谢 UPLC
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中国被毛孢三种菌丝形态的超显微特征观察 被引量:2
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作者 谢放 +3 位作者 苏强军 UWITUGABIYE Vestine 陈照禾 周刚 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第5期855-860,共6页
为探究人工培养中国被毛孢Ophiocordyceps sinensis过程中出现的3种形态菌丝(基内菌丝、菌丝团与气生菌丝)的差别及产生机理,以分离自单子囊孢子的菌株为材料,分别用光学显微镜和扫描电子显微镜观察3种形态菌丝的显微与超显微形态。结... 为探究人工培养中国被毛孢Ophiocordyceps sinensis过程中出现的3种形态菌丝(基内菌丝、菌丝团与气生菌丝)的差别及产生机理,以分离自单子囊孢子的菌株为材料,分别用光学显微镜和扫描电子显微镜观察3种形态菌丝的显微与超显微形态。结果发现:菌丝直径和形态不同,表现为菌丝团>基内菌丝>气生菌丝;气生菌丝排列疏松,菌丝表面附着有大量分生孢子;菌丝团的菌丝褶皱明显、扭结且相互交联缠绕;基内菌丝排列密集,菌丝融合、分支现象明显。说明出现三种形态的菌丝是中国被毛孢的特性,与菌种和菌株纯度无关,且分生孢子在气生菌丝顶端或中部直接以出芽的方式形成。 展开更多
关键词 中国被毛孢 菌丝形态 显微结构 扫描电子显微镜
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冬虫夏草子座萌发阶段五种化合物的变化
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作者 谢放 周刚 +3 位作者 张蓉蓉 陈照禾 苏强军 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期883-892,共10页
【目的】本研究以不同子座原基启动阶段的冬虫夏草为研究材料,探究冬虫夏草菌Ophiocordyceps sinensis子座萌发过程中代表性化合物及菌丝形态的变化。【方法】选取子座萌发前(僵虫,简称S1)、萌发初期(菌丝突破虫体头部,简称S2)和已经萌... 【目的】本研究以不同子座原基启动阶段的冬虫夏草为研究材料,探究冬虫夏草菌Ophiocordyceps sinensis子座萌发过程中代表性化合物及菌丝形态的变化。【方法】选取子座萌发前(僵虫,简称S1)、萌发初期(菌丝突破虫体头部,简称S2)和已经萌发(形成子座,子座?1 cm,简称S3)三个阶段的冬虫夏草,采用比色法检测多酚、多糖、甘露醇和尿素4种物质含量,通过超高效液相色谱检测腺苷含量,并采用扫描电子显微镜观察三个阶段菌丝的形态差异。【结果】冬虫夏草子座萌发前后3个阶段菌丝形态差异显著,表现为子座的萌发前菌丝开始融合,突破虫体头部后菌丝疏松细长,萌发后菌丝粗细均匀且表面微疣。在S1阶段,多酚(56.633±2.312)mg/g和尿素(13.580±1.112)mg/g含量最高,且显著高于S2和S3阶段(P<0.05),多糖含量为(22.045±1.341)mg/g,且显著低于S2和S3(P<0.05)阶段;在S2和S3阶段,多酚含量分别为(39.608±2.145)mg/g和(37.365±1.972)mg/g,且无显著差异(P>0.05);尿素含量分别为(1.892±0.345)mg/g和(2.322±0.423)mg/g,无显著差异(P<0.05);S2阶段甘露醇含量为(42.099±2.986)mg/g,且显著高于S1和S3阶段(P<0.05),与S3阶段相比,S1阶段多糖和甘露醇含量均较低,但二者之间差异不显著(P<0.05);腺苷含量则随着冬虫夏草子座萌发而增加。【结论】冬虫夏草子座萌发前后菌丝形态差异显著,且不同阶段多酚、尿素、多糖、甘露醇及腺苷的含量变化差异显著。 展开更多
关键词 冬虫夏草 冬虫夏草菌 化学物 菌丝形态
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转录组测序技术在食药用菌研究中的应用 被引量:1
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作者 谢放 +3 位作者 苏强军 李佳莹 陈照禾 周刚 《现代食品》 2020年第24期31-33,共3页
转录组测序技术不断发展并逐渐应用于食药用菌研究中,其在揭示食药用菌生长发育过程中的分子机制方面表现出独特的优势。本文回顾了近年来食药用菌的转录组学研究成果,综述了转录组测序技术在食药用菌子实体发育相关基因挖掘、SSR分子... 转录组测序技术不断发展并逐渐应用于食药用菌研究中,其在揭示食药用菌生长发育过程中的分子机制方面表现出独特的优势。本文回顾了近年来食药用菌的转录组学研究成果,综述了转录组测序技术在食药用菌子实体发育相关基因挖掘、SSR分子标记开发和探索次级代谢产物的生物合成3个方面的应用,并对转录组测序技术结合其他分子生物学技术在食药用菌中的进一步研究进行展望,为今后开展食药用菌的研究提供参考。 展开更多
关键词 食药用菌 转录组测序 子实体发育 SSR分子标记 次级代谢产物
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不同生长年限宽叶羌活品质的研究 被引量:1
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作者 谢放 Uwitugabiye Vestine +2 位作者 张亚军 常黎明 《甘肃农业科技》 2021年第5期30-34,共5页
为了评价不同生长年限对人工栽培条件下宽叶羌活生物量和化学成分的影响,对甘肃主产区栽培的宽叶羌活进行调查采样,采挖2年生、3年生宽叶羌活鲜样,分别测定其根鲜重、根干重、主根长、主根粗等4个生物量指标,以及羌活醇、异欧前胡素、... 为了评价不同生长年限对人工栽培条件下宽叶羌活生物量和化学成分的影响,对甘肃主产区栽培的宽叶羌活进行调查采样,采挖2年生、3年生宽叶羌活鲜样,分别测定其根鲜重、根干重、主根长、主根粗等4个生物量指标,以及羌活醇、异欧前胡素、挥发油、浸出物、多糖、总灰分及酸不溶性灰分含量等。结果表明,3年生的根鲜重、根干重、主根长及主根粗较2年生均有所增长,且羌活总产量为2年生的2~3倍;3年生宽叶羌活单株有效成分总量大幅增加,主要有效成分相对含量多有下降,品质略差。 展开更多
关键词 宽叶羌活 生长年限 生物量 化学成分
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