长、短效重组人粒细胞刺激因子对恶性肿瘤患者多周期化疗后白细胞减少症的有效性研究 被引量：21

1

作者 马晶晶 曹梦璐 +3 位作者 姚雨君 邹凤 李亚军 喻皇飞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第20期2815-2819,共5页

目的对比长、短效粒细胞刺激因子对恶性肿瘤患者多周期化疗所致骨髓抑制的治疗效果。方法回顾性分析遵义市第一人民医院肿瘤科2019年7月至2020年2月期间使用长、短效两种粒细胞刺激因子治疗经多周期化疗造成骨髓抑制的晚期恶性肿瘤患者... 目的对比长、短效粒细胞刺激因子对恶性肿瘤患者多周期化疗所致骨髓抑制的治疗效果。方法回顾性分析遵义市第一人民医院肿瘤科2019年7月至2020年2月期间使用长、短效两种粒细胞刺激因子治疗经多周期化疗造成骨髓抑制的晚期恶性肿瘤患者117例,其中使用重组人粒细胞刺激因子注射液(短效,rhG-CSF组)54例,使用聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子注射液(长效,PEG-rhG-CSF组)63例,比较两组患者的临床疗效、骨髓抑制情况、不良反应发生情况。结果两组患者在化疗后均出现不同程度的骨髓抑制,经治疗后PEG-rhG-CSF组患者WBC/ANC恢复至正常值范围所需的时间为(3.53±1.38)d,短于rhG-CSF组(4.52±1.78)d(P<0.01)。WBC/ANC升至正常范围后的维持时间在PEG-rhG-CSF组是(11.07±2.98)d,而rhG-CSF组是(6.04±2.43)d,两组差异有统计学意义(P<0.01)。经G-CSF治疗3 d后rhG-CSF组患者WBC/ANC恢复至正常范围的比例为59.20%,而PEG-rhG-CSF组患者为69.80%。结论rhG-CSF和PEG-rhG-CSF对恶性肿瘤患者多周期化疗所致骨髓抑制均有良好的治疗作用,对WBC/ANC的恢复PEG-rhG-CSF组优于rhG-CSF组。 展开更多

关键词 重组人粒细胞刺激因子注射液 聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子注射液 恶性肿瘤 多周期化疗 骨髓抑制

下载PDF 职称材料

人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响 被引量：5

2

作者 喻皇飞 方宁 +5 位作者 陈代雄 余丽梅 章涛 刘祖林 万卫红 赵春华 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2012年第4期411-415,共5页

目的观察人羊膜间充质干细胞（hAD—MSCs）移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法建立大鼠脊髓全横断损伤模型，脊髓横断后立即以明胶海绵吸附10μlhAD—MSCs（约2×10^5个）或等量PBS液植入脊髓两断端之间。术后每周应用BBB... 目的观察人羊膜间充质干细胞（hAD—MSCs）移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法建立大鼠脊髓全横断损伤模型，脊髓横断后立即以明胶海绵吸附10μlhAD—MSCs（约2×10^5个）或等量PBS液植入脊髓两断端之间。术后每周应用BBB评分评价大鼠后肢运动功能；采用免疫荧光染色观察hAD—MSCs在脊髓内的存活、分化情况；免疫组织化学染色观察受损脊髓远端组织NF-200表达。结果hAD—MSCs移植组神经功能明显恢复，BBB评分逐周增加，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。hAD—MSCs植入后2周在宿主脊髓中存在MAB1281染色阳性细胞，但不表达MAP-2和GFAP。hAD—MSCs移植后大鼠受损脊髓远端神经组织NF-200表达明显强于对照组。结论hAD—MSCs移植可促进大鼠脊髓损伤后的神经功能恢复，其机制可能与hAD—MSCs促进受损脊髓远端组织表达NF-200有关。 展开更多

关键词 大鼠 脊髓损伤 移植 人羊膜间充质干细胞

原文传递

自动勾画技术在全乳内侧瘤床同步推量中的应用

3

作者 陈车 罗德红 +4 位作者 喻皇飞 张琴 胡小池 余盛华 李亚军 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第17期2406-2411,共6页

目的 通过比较自动勾画(auto-segmentation, AS)与人工勾画(manually segmented, MS)结构的几何、剂量和工作时间差异,以评估自动勾画在全乳放疗内侧瘤床同步推量中应用的可行性与有效性。方法 选取遵义市第一人民医院收治的左侧乳腺癌... 目的 通过比较自动勾画(auto-segmentation, AS)与人工勾画(manually segmented, MS)结构的几何、剂量和工作时间差异,以评估自动勾画在全乳放疗内侧瘤床同步推量中应用的可行性与有效性。方法 选取遵义市第一人民医院收治的左侧乳腺癌保乳术后行单纯全乳大分割放疗内侧瘤床同期推量患者30例,采用戴斯系数(DSC)、95%豪斯多夫距离(95HD)评估软件AccuContour自动勾画的全乳计划靶区(PTV)和心肺结构几何差异;然后比较两组对应放疗计划PlanA和PlanM靶区和心肺剂量学差异;最后比较两组花费时间。结果 自动勾画实现了肿瘤计划靶区(PGTV)、PTV、肺和心脏DSC分别为0.94(0.91,0.96)、0.88(0.86,0.91)、0.98(0.97,0.98)和0.94(0.93,0.95),95HD(cm)分别为0.25(0.20,0.33)、0.99(0.56,1.20)、0.29(0.25,0.35)和0.50(0.50,0.59);剂量学结果显示AS组PGTV和PTV的V95、D95和Dmean明显低于人工勾画组(P <0.05),而左肺的V20和MLD明显增大(P <0.05),心脏剂量参数差异无统计学意义;两组PGTV和心肺的剂量参数平均绝对差异小于1 Gy/1%;工作效率上,自动勾画组中能在2 d内完成对超过70%的患者勾画和计划,时间大幅缩短。结论 与人工勾画相比,在全乳放疗内侧瘤床推量中自动勾画靶区和心肺的几何和剂量参数差异较小。如果在计划优化前对PTV人工略微修改,或可使工作效率显著提高。 展开更多

关键词 乳腺癌 自动勾画 剂量学 内侧瘤床

下载PDF 职称材料

5-羟色胺与消化道恶性肿瘤发生发展关系的研究进展 被引量：5

4

作者 万林 李亚军 喻皇飞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第20期3243-3247,共5页

5 羟色胺(5 hydroxytryptamine,5 HT)是普遍存在于人体组织的单胺类神经递质,具有广泛的生物学活性,调节胃肠道功能、血管紧张性及血压调节、止凝血过程及机体免疫等多种病理生理过程。同时,5 HT与恶性肿瘤的之间的关系十分密切,参与调... 5 羟色胺(5 hydroxytryptamine,5 HT)是普遍存在于人体组织的单胺类神经递质,具有广泛的生物学活性,调节胃肠道功能、血管紧张性及血压调节、止凝血过程及机体免疫等多种病理生理过程。同时,5 HT与恶性肿瘤的之间的关系十分密切,参与调控多种组织类型肿瘤的发生进展。本文就5 HT在消化道恶性肿瘤发生进展中的作用和所涉及的异常信号转导途径作一综述,为深入了解5 HT在消化道恶性肿瘤演变过程中所扮演的角色提供一定的认识。 展开更多

关键词 5 羟色胺 消化道 肿瘤

下载PDF 职称材料

人羊膜细胞神经生物学性状研究进展 被引量：3

5

作者 喻皇飞 陈代雄 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第32期3315-3317,共3页

人羊膜组织是位于胎儿绒毛膜表面的一层光滑、无神经、无血管及淋巴管的半透明薄膜,厚约0.02～0.50mm,由胚胎发育期细胞滋养层演化而来,主要含有两种类型细胞,羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells,hAECs）和羊膜间充质细胞（... 人羊膜组织是位于胎儿绒毛膜表面的一层光滑、无神经、无血管及淋巴管的半透明薄膜,厚约0.02～0.50mm,由胚胎发育期细胞滋养层演化而来,主要含有两种类型细胞,羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells,hAECs）和羊膜间充质细胞（human mesenchymal cells,hAMCs）,所谓人羊膜细胞是hAECs和hAMCs的总称。 展开更多

关键词 羊膜 神经生长因子类 人羊膜细胞 移植

下载PDF 职称材料

抑制血清素转运蛋白表达联合Erastin诱导肠癌细胞铁死亡的实验研究

6

作者 杨金兰 屈天银 +3 位作者 戴庆 马晶晶 喻皇飞 李亚军 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期1206-1211,共6页

目的观察肠癌SW480细胞经铁死亡诱导剂Erastin处理后血清素转运蛋白(serotonin transporter,SERT)表达的变化,探索调控SERT表达联合Erastin对肠癌细胞铁死亡的影响。方法Erastin处理肠癌SW480细胞,CCK8检测细胞的存活能力,Western blot... 目的观察肠癌SW480细胞经铁死亡诱导剂Erastin处理后血清素转运蛋白(serotonin transporter,SERT)表达的变化,探索调控SERT表达联合Erastin对肠癌细胞铁死亡的影响。方法Erastin处理肠癌SW480细胞,CCK8检测细胞的存活能力,Western blot评估细胞内血清素转运蛋白SERT及铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4和ACSL4的影响,流式细胞术分析癌细胞内ROS含量的变化。同时利用siRNA干扰下调细胞内SERT表达,观察调节SERT表达联合Erastin对癌细胞铁死亡的影响。结果10μmol/L Erastin处理肠癌SW480细胞可诱导癌细胞发生铁死亡,并显著上调细胞中SERT表达。siSERT后Erastin所致的癌细胞中铁死亡抵抗蛋白SLC7A11和GPX4下降更为显著,而铁死亡执行蛋白ACSL4则明显升高。5⁃HT刺激不仅逆转Erastin对SW480细胞所致的SLC7A11和GPX4减少及铁死亡作用,同时还使得Erastin联合siSERT对铁死亡的协同作用得到一定程度的抑制。结论Erastin刺激在诱导肠癌SW480细胞发生铁死亡的同时,代偿性上调了SERT的表达;抑制SERT表达可增加肠癌细胞对Erastin的铁死亡敏感性。 展开更多

关键词 结直肠癌 血清素转运蛋白 5⁃羟色胺 铁死亡

下载PDF 职称材料

体外诱导人羊膜间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞 被引量：2

7

作者 赵玉洁 方宁 +4 位作者 陈代雄 余丽梅 喻皇飞 万卫红 赵春华 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1013-1016,共4页

目的 探讨体外诱导人羊膜间充质干细胞（hAD-MSCs）向胰岛素分泌细胞分化潜能.方法 采用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离提取hAD-MSCs,流式细胞术分析和免疫细胞化学染色行表型鉴定.取第3代按2.5× 106个/ml或5×105个/ml细胞密度接... 目的 探讨体外诱导人羊膜间充质干细胞（hAD-MSCs）向胰岛素分泌细胞分化潜能.方法 采用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离提取hAD-MSCs,流式细胞术分析和免疫细胞化学染色行表型鉴定.取第3代按2.5× 106个/ml或5×105个/ml细胞密度接种6孔培养板或预置盖玻片的24孔培养板,在含10mmol/L尼克酰胺和N2补充物的无血清HG-DMEM培养基培养,未诱导组为含10％胎牛血清的LG-DMEM基础培养基.分别于体外诱导第7、14、21天采用免疫细胞化学法检测胰岛素和β2微球蛋白的表达,采用放射免疫法检测上清液中胰岛素含量,采用RT-PCR检测胰岛素mRNA和胰十二指肠同源异型盒因子1（PDX-1）mRNA的表达.结果 （1）hAD-MSCs高表达间充质干细胞表面标志CD29、CD44、CD73、CD166及波形蛋白；（2） hAD-MSCs诱导第7、14、21天胰岛素阳性细胞百分率分别为74.67％±1.53％、75.00％±1.00％、74.33％±1.53％,培养物上清液中胰岛素含量分别为（331.62±1.76）、（330.50±1.22）和（331.65±0.48） μIU/ml,各时点间比较无显著性差异（均P＞0.05）,而未诱导组仍未见胰岛素阳性细胞；培养上清也未检测到胰岛素；（3） hAD-MSCs诱导前后均有PDX-1 mRNA和蛋白表达,胰岛素基因mRNA表达仅见于诱导组；（4） hAD-MSCs诱导组和未诱导组各时点均有β2微球蛋白表达,其阳性细胞百分率组间差异无显著性（均P＞0.05）.结论 hAD-MSCs具有向胰岛素分泌细胞分化的能力,可能成为1型糖尿病细胞移植治疗的新的细胞供源. 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 胰岛素分泌细胞 诱导分化

原文传递

人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后NGF、BDNF和Nogo-A mRNA表达的影响 被引量：2

8

作者 喻皇飞 马晶晶 +4 位作者 方宁 余丽梅 章涛 刘祖林 陈代雄 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期924-929,共6页

目的:观察人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及轴突生长抑制因子(Nogo-A)mRNA表达的影响。方法:成年雌性SD大鼠24只,随机分成hAMSCs移植组(12只)、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(1... 目的:观察人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及轴突生长抑制因子(Nogo-A)mRNA表达的影响。方法:成年雌性SD大鼠24只,随机分成hAMSCs移植组(12只)、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(12只)。体外分离培养、鉴定hAMSCs,并以终浓度为10μg/ml 4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染料标记hAMSCs。在建立大鼠T11脊髓全横断损伤模型后,立即以微量注射器吸取约3×106个hAMSCs悬液于横断损伤处头尾两端原位移植,对照组注射相同体积的PBS液。分别于术后3d、7d利用荧光显微镜观察hAMSCs存活情况,并采用RT-PCR分析损伤脊髓段NGF mRNA、BDNF mRNA及Nogo-A mRNA的表达。结果:术后3d和7d hAMSCs移植组均可观察到植入的hAMSCs在宿主脊髓组织内存活。术后3d、7d,hAMSCs移植组NGF mRNA的表达均高于对照组(P<0.05,P<0.01),Nogo-A mRNA的表达均低于对照组(P<0.05);术后3d时hAMSCs移植组BDNF mRNA的表达与对照组比较无显著性差异(P>0.05),但术后7d其表达高于对照组(P<0.05)。结论:hAMSCs移植可上调大鼠受损脊髓组织内NGF mRNA和BDNF mRNA的表达、下调Nogo-A mRNA的表达,有利于促进脊髓损伤后的功能修复。 展开更多

关键词 脊髓损伤 移植 人羊膜间充质干细胞 神经营养因子 大鼠

下载PDF 职称材料

人羊膜间充质干细胞移植对大鼠随意皮瓣成活的影响 被引量：2

9

作者 金文虎 常树森 +6 位作者 吴中桓 李海 喻皇飞 张子阳 魏在荣 张文夺 王达利 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期843-848,共6页

目的探索人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）移植促进超长宽比例随意皮瓣血管化，进而促进皮瓣成活的可能性。方法体外分离、培养、免疫组化及流式细胞术鉴定hAMSCs。hAMSCs植入皮瓣前用CellTracker“CM—Dil进行标记。选用20只健康成年SD大... 目的探索人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）移植促进超长宽比例随意皮瓣血管化，进而促进皮瓣成活的可能性。方法体外分离、培养、免疫组化及流式细胞术鉴定hAMSCs。hAMSCs植入皮瓣前用CellTracker“CM—Dil进行标记。选用20只健康成年SD大鼠，于大鼠背侧左右分别构建8cm×2cm超长缺血随意皮瓣模型，皮瓣蒂部位于髂棘水平。皮瓣掀起后每只大鼠皮瓣分为左侧组[注射0．5ml低糖杜氏改良培养基（LG—DMEM）]和右侧组（注射0．5m1浓度为1×10^6／ml的hAMSCs）。术后7d观察各组皮瓣的成活率。激光多普勒血流监测仪于术后即刻、24h、48h、4d、7d监测皮瓣蒂部和中部的相对血流值。通过组织学观察各组成活皮瓣毛细血管密度，荧光显微镜观察标记CellTracker^TM-CM—Dil的hAMSCs在皮瓣内的分布及成活情况。结果皮瓣成活率左侧组为（50．6±2．2）％，右侧组为（70．9±2．1）％（P〈0．05）。左侧组术后4d及7d皮瓣蒂部的相对血流值高于右侧组（P〈0．05）；皮瓣中部术后24h、48h、4d、7d的相对血流值均低于右侧组（P〈0．05）。术后7d皮瓣内微血管断面密度左侧组为（8．8±1．2）个／mm^2，右侧组为（23．5±1．6）个／mm^2，（P〈0．05）。右侧组成活皮瓣组织在荧光显微镜下可观察到标记有CellTracker^TM CM-Dil红色荧光染料的hAMSCs，可以证实hAMSCs在皮瓣内分布及存活。结论在超长随意皮瓣中、远部位应用hAMSCs可明显改善皮瓣的成活率，增加皮瓣下微血管重建的密度。 展开更多

关键词 间质干细胞移植 羊膜 外科皮瓣

原文传递

人羊膜间充质干细胞不同移植方式治疗大鼠脊髓损伤疗效比较 被引量：3

10

作者 马晶晶 廖旭勇 +1 位作者 赵玉洁 喻皇飞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期562-566,571,共6页

目的比较原位移植和尾静脉注射途径移植人羊膜间充质干细胞(h AMSCs)对脊髓损伤大鼠组织学修复及神经功能的影响。方法建立大鼠脊髓损伤模型,1周后通过脊髓原位或尾静脉移植DAPI标记的h AMSCs细胞,BBB评分评估大鼠后肢运动功能,组织学... 目的比较原位移植和尾静脉注射途径移植人羊膜间充质干细胞(h AMSCs)对脊髓损伤大鼠组织学修复及神经功能的影响。方法建立大鼠脊髓损伤模型,1周后通过脊髓原位或尾静脉移植DAPI标记的h AMSCs细胞,BBB评分评估大鼠后肢运动功能,组织学观察受损脊髓组织Neu N、GFAP、CD68的表达和髓鞘的形态改变。结果 h AMSCs移植后,原位注射和尾静脉移植组大鼠后肢功能BBB评分逐周增加,至第6周时分别是6.71±0.70和6.93±1.28,均高于PBS对照组(均P<0.01),但两组间比较无统计学意义。组织学结果显示,PBS对照组损伤脊髓组织中空洞、囊腔形成明显;Neu N在h AMSCs移植后大鼠脊髓中的表达高于对照组;GFAP、CD68阳性表达细胞则在相应对照组脊髓残端聚集分布,较h AM-SCs移植组明显增多。PBS对照组大鼠病损脊髓髓鞘板层松懈,空泡化严重,而无论h AMSCs原位移植或尾静脉移植组大鼠脊髓组织中髓鞘的毁损改变均明显轻于对照组。结论 h AMSCs静脉移植能够促进脊髓损伤大鼠的神经功能重建和组织学修复,具有与原位移植相似的治疗效果。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 脊髓损伤 移植 BBB评分

下载PDF 职称材料

长链非编码RNA FTX通过PPARγ影响肠癌细胞的增殖、迁移和糖酵解 被引量：2

11

作者 马晶晶 杨金兰 +1 位作者 屈天银 喻皇飞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第13期1618-1623,共6页

目的探讨长链非编码RNA FTX(LncFTX)对肠癌细胞增殖迁移行为和糖酵解的影响。方法RT-qPCR检测不同肠癌细胞株中LncFTX本底表达。利用siRNA干扰下调HT-29细胞中LncFTX表达,CCK8和Transwell实验验证细胞的增殖和迁移能力,Western blot评... 目的探讨长链非编码RNA FTX(LncFTX)对肠癌细胞增殖迁移行为和糖酵解的影响。方法RT-qPCR检测不同肠癌细胞株中LncFTX本底表达。利用siRNA干扰下调HT-29细胞中LncFTX表达,CCK8和Transwell实验验证细胞的增殖和迁移能力,Western blot评估细胞内PPARγ及下游Leptin、TNFα和糖酵解相关蛋白表达,ELISA分析HT-29细胞参与糖代谢有关酶的变化。结果LncFTX在不同肠癌细胞中高表达;下调肠癌HT-29细胞中LncFTX表达显著抑制细胞的增殖和迁移,细胞内PPARγ和Glut4的表达亦明显下降,而PDHA1及Leptin、TNFα则显著升高;下调LncFTX后胞内PFK、LDH的含量分别为(0.14±0.02)U/mg和(72.03±14.64)U/L,低于对照组(均P<0.05)。而CS含量则升高至(8.07±0.50)U/mg(P<0.05)。在LncFTX降低的HT-29细胞中激活PPARγ后,相应的蛋白表达和PFK、LDH及CS的含量变化均得到一定程度的逆转。结论LncFTX可通过调控PPARγ表达影响肠癌HT-29细胞的增殖迁移能力和有氧糖酵解过程。 展开更多

关键词 长链非编码RNA FTX 过氧化物增殖激活受体 糖酵解 增殖

下载PDF 职称材料

体外诱导人羊膜上皮细胞分化为胰岛素分泌细胞的研究 被引量：1

12

作者 赵玉洁 方宁 +3 位作者 陈代雄 余丽梅 喻皇飞 赵春华 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期139-143,I0002,共6页

目的:通过体外诱导分化实验,探讨人羊膜上皮细胞(hAECs)向胰岛素分泌细胞(ISCs)分化的能力。方法:采用胰蛋白酶消化法从人羊膜组织分离提取hAECs,用流式细胞仪和免疫细胞化学法进行鉴定。取第3代hAECs在含尼克酰胺和N2补充物的无血清培... 目的:通过体外诱导分化实验,探讨人羊膜上皮细胞(hAECs)向胰岛素分泌细胞(ISCs)分化的能力。方法:采用胰蛋白酶消化法从人羊膜组织分离提取hAECs,用流式细胞仪和免疫细胞化学法进行鉴定。取第3代hAECs在含尼克酰胺和N2补充物的无血清培养基中诱导培养,分别于诱导不同时间采用免疫细胞化学法检测胰岛素和β2微球蛋白的表达,采用放射免疫法检测上清液中胰岛素含量,采用RT-PCR检测胰岛素mRNA和胰十二指肠同源异型盒因子-1(PDX-1)mRNA的表达。结果:①hAECs高表达CD29、CD73、CD166和CK19;②hAECs诱导组第7、142、1天胰岛素阳性细胞百分率分别为74.00%±1.73%、75.33%±1.15%和75.67%±0.58%,而对照组未见胰岛素阳性细胞;③hAECs诱导组第7、14、21天培养物上清液中胰岛素含量分别达(328.47±3.22)μIU/ml、(332.26±1.22)μIU/ml和(329.68±2.57)μIU/ml,均显著高于对照组(P均<0.01);④hAECs诱导前后均有PDX-1 mRNA和β2微球蛋白表达,胰岛素mRNA表达仅见于诱导组。结论:hAECs能分化为ISCs,在Ⅰ型糖尿病细胞移植治疗方面具有潜在应用前景。 展开更多

关键词 人羊膜上皮细胞 胰岛素分泌细胞 诱导分化

下载PDF 职称材料

人脐血清对人脐带血间充质干细胞生物学特征与衰老的影响 被引量：1

13

作者 王爽 范振海 +5 位作者 刘祖林 王钰莹 方宁 喻皇飞 刘金伟 余丽梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期582-586,共5页

目的:探讨人脐血清(human umbilical cord blood serum,CBS)对体外培养人脐血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)基本生物学特征的影响。方法:密度梯度离心分离脐带血单个核细胞,以含3%CBS加7... 目的:探讨人脐血清(human umbilical cord blood serum,CBS)对体外培养人脐血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)基本生物学特征的影响。方法:密度梯度离心分离脐带血单个核细胞,以含3%CBS加7%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)(CBS组)或10%FBS(FBS组)的完全培养基培养hUCB-MSCs,流式细胞术检测细胞表面分子与细胞周期,显微镜下测定细胞表面积和表达β-半乳糖苷酶细胞百分率,MTT法检测光密度值、绘制生长曲线。结果:CBS组和FBS组均表达CD44、CD105、CD90、CD73,不表达CD45、CD34、CD11b、CD19和人白细胞DR抗原(human leukocyte antigen DR,HLA-DR),但与FBS组比较,CBS组表达CD90细胞百分率更低,G0/G1期细胞比例较少,细胞增殖指数较高(P<0.05)且细胞表面积也明显更小(P<0.05)。CBS组生长曲线较FBS组左移,峰值更高,细胞倍增时间48.37 h,FBS组则为54.43 h。FBS组β-gal染色阳性细胞百分率明显高于CBS组(P<0.05)。结论:部分CBS合用FBS培养hUCB-MSCs能更好地促进细胞增殖,并更好地保持hUCB-MSCs的基本生物学特征和延缓细胞的衰老。 展开更多

关键词 人脐血清 脐带血间充质干细胞 生物学特征 衰老

下载PDF 职称材料

人脐带血清合用胎牛血清培养人脐血间充质干细胞

14

作者 王爽 范振海 +4 位作者 王钰莹 喻皇飞 刘祖林 胡锡阶 余丽梅 《遵义医学院学报》 2013年第3期203-206,共4页

目的探讨人脐带血清与胎牛血清合用培养人脐血间充质干细胞(hUCB-MSCs)的形态学、表面标志和胞内标志蛋白的变化。方法密度梯度离心分离脐带血单个核细胞后,应用含10%胎牛血清完全培养基原代培养,分别以3%人脐血清加7%胎牛血清(CBS组)和... 目的探讨人脐带血清与胎牛血清合用培养人脐血间充质干细胞(hUCB-MSCs)的形态学、表面标志和胞内标志蛋白的变化。方法密度梯度离心分离脐带血单个核细胞后,应用含10%胎牛血清完全培养基原代培养,分别以3%人脐血清加7%胎牛血清(CBS组)和10%胎牛血清(FBS组)完全培养基传代培养。P5内细胞,进行细胞形态学观察,流式细胞术检测细胞表面分子,免疫细胞化学染色检测细胞内标志蛋白。结果 P5内细胞,两组hUCB-MSCs均为梭型细胞,细胞大小无明显改变,均表达CD44、CD105、CD90、CD73和波形蛋白,不表达CD45、CD34、CD11b、CD19和HLA-DR;其中表达CD44、CD73阳性细胞百分率高达99%。结论 3%人脐血清加7%胎牛血清可成功地培养出形态与表型特征良好的hUCB-MSCs。 展开更多

关键词 人脐血清 胎牛血清 脐血间充质干细胞

下载PDF 职称材料

PDE5抑制剂伐地那非预处理对人羊膜间充质干细胞生物学特性的影响

15

作者 喻皇飞 冯吉梅 +2 位作者 方宁 赵玉洁 余丽梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第9期1376-1380,共5页

目的:观察特异性5型磷酸二酯酶抑制剂(PDE5)伐地那非对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)生物学特性的影响。方法:分离培养hAMSCs,以终浓度为10μmol/L伐地那非预处理hAMSCs,观察伐地那非处理hAMSCs组(Vard-hAMSCs)生长形态,采用流式细胞术分... 目的:观察特异性5型磷酸二酯酶抑制剂(PDE5)伐地那非对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)生物学特性的影响。方法:分离培养hAMSCs,以终浓度为10μmol/L伐地那非预处理hAMSCs,观察伐地那非处理hAMSCs组(Vard-hAMSCs)生长形态,采用流式细胞术分析比较hAMSCs细胞免疫表型、增殖能力及抗氧化损伤能力;免疫双荧光染色计数阳性表达细胞数,计算hAMSCs向神经细胞诱导分化百分率。结果:(1)流式细胞术结果显示,hAMSCs、Vard-hAMSCs均阳性表达CD90、CD105、CD73,不表达CD45、CD34、CD19、CD11b及HLA-DR;Vard-hAMSCs组细胞S期细胞比率及增殖指数为(0.57±0.40)%和(2.20±1.60)%,与hAMSCs组[分别是(0.62±1.33)%,(1.90±1.40)%]比较,无统计学差异(P>0.05);(2)Annexin V/PI双染色结果显示,经250μmol/L H2O2作用4 h后,Vard-hAMSCs组细胞凋亡率为(7.67±0.82)%,明显低于hAMSCs组(18.72±2.92)%和特异性Vardenafil阻断剂组(15.90±1.69)%(均P<0.05);(3)免疫双荧光染色结果显示,在相同诱导条件下,Vard-hAMSCs组细胞MAP-2及GFAP阳性细胞百分率分别是(49.8±6.42)%和(55.2±6.10)%,均高于hAMSCs组[分别为(29±3.94)%,(32.2±3.03)%,P<0.05]。结论 :伐地那非处理一定时间可明显提高hAMSCs抗氧化损伤效应和hAMSCs向神经细胞分化的能力,但短时间内不明显影响hAMSCs生长形态、增殖能力和免疫表型。提示伐地那非处理可能作为hAMSCs移植治疗神经系统疾病的优选预处理方案。 展开更多

关键词 间充质干细胞 环磷酸鸟苷 5型磷酸二酯酶抑制剂 预处理

下载PDF 职称材料

HL-60细胞胞质体的制备

16

作者 王丽丽 喻皇飞 +1 位作者 方宁 陈代雄 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期577-583,共7页

建立悬浮培养细胞胞质体制备及鉴定方法,为细胞重构奠定基础。采用密度梯度离心法和低速离心法纯化人白血病HL-60细胞,在单独细胞松弛素B(CB)和联合秋水酰碱介导下,分别于34℃和25℃,50%Percoll等密度梯度离心对HL-60细胞进行脱核,然后... 建立悬浮培养细胞胞质体制备及鉴定方法,为细胞重构奠定基础。采用密度梯度离心法和低速离心法纯化人白血病HL-60细胞,在单独细胞松弛素B(CB)和联合秋水酰碱介导下,分别于34℃和25℃,50%Percoll等密度梯度离心对HL-60细胞进行脱核,然后分别用38%和40%Percoll密度梯度离心纯化胞质体;采用Wright-Giem-sa染色和4,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)/羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)荧光染料双染色观察胞质体形态学变化;采用流式细胞术(FCM)检测胞质体表型和线粒体膜电位(MMP)以评价其活性。结果显示,CB联合秋水酰碱介导HL-60细胞脱核率为91.98%±4.29%,明显高于单独CB组(74.95%±3.02%)(P<0.01);34℃组的脱核率和直径≥5μm胞质体比例均明显高于25℃组(P<0.01,P<0.05);38%Percoll密度梯度离心纯化胞质体纯度高于40%Percoll组;纯化的HL-60胞质体表型无明显变化,12h内其活性达80%以上。结果表明,CB联合秋水酰碱介导下50%Percoll密度梯度离心脱核、38%Percoll密度梯度离心纯化、DAPI/CFSE双染鉴定、MMP检测是制备和鉴定悬浮培养细胞胞质体的适宜方案。 展开更多

关键词 胞质体 脱核 HL60细胞 细胞松弛素B 秋水酰碱

原文传递

恶性肿瘤患者自体CIK细胞的诱导培养及表型鉴定

17

作者 喻皇飞 方宁 +6 位作者 章涛 陈代雄 范振海 杨卫兵 宫黎明 刘金伟 余丽梅 《遵义医学院学报》 2011年第4期354-356,360,共4页

目的观察恶性肿瘤患者外周血来源的细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞体外培养形态及免疫表型变化。方法采用费森尤斯CEM.TEC血细胞分离机采集恶性肿瘤患者自体外周血单个核细胞,经rhIFN-、rhIL-2及CD3McAb联合诱导培养后,显微镜下观察诱导细... 目的观察恶性肿瘤患者外周血来源的细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞体外培养形态及免疫表型变化。方法采用费森尤斯CEM.TEC血细胞分离机采集恶性肿瘤患者自体外周血单个核细胞,经rhIFN-、rhIL-2及CD3McAb联合诱导培养后,显微镜下观察诱导细胞形态,流式细胞术分析其免疫表型。结果连续诱导培养10 d后CIK细胞呈团样生长;至13 d时,CD3+、CD3+CD8+和CD3+CD56+细胞比例分别从诱导前的(44.8±11.3)%、(21.1±8.5)%和(3.4±10.7)%增加至(72.1±13.8)%、(51.1±17.9)%及(10.7±4.4)%(<0.05);而CD3+CD4+细胞比例为(19.2±8.0)%,明显低于诱导前(28.7±6.4)%(<0.05)。结论来自恶性肿瘤患者的自体外周血单个核细胞可成功诱导为富含CIK细胞的肿瘤杀伤细胞。 展开更多

关键词 肿瘤 细胞因子诱导杀伤细胞 免疫表型

下载PDF 职称材料