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米糠中不同存在形态酚类物质的抗氧化活性研究 被引量:31
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作者 陈彩薇 吴晖 +4 位作者 赖富饶 闵甜 杜小燕 李晓凤 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第2期42-46,13,共6页
本文测定了米糠中的游离酚、可溶酯型酚、可溶苷型酚和不溶酯型酚和不溶苷型酚的含量。并测定了其体外抗氧化能力,其中包括Fe3+还原力的测定、DPPH、超氧阴离子以及ABTS自由基清除率的测定实验等。实验结果表明,米糠中游离酚、可溶酯型... 本文测定了米糠中的游离酚、可溶酯型酚、可溶苷型酚和不溶酯型酚和不溶苷型酚的含量。并测定了其体外抗氧化能力,其中包括Fe3+还原力的测定、DPPH、超氧阴离子以及ABTS自由基清除率的测定实验等。实验结果表明,米糠中游离酚、可溶酯型酚、可溶苷型酚、不溶酯型酚和不溶苷型酚含量分别为44.70、80.81、63.84、128.63、95.46 mg GAE/100g。不同存在形态的酚对不同体系有不同的抗氧化效果:其中Fe3+还原能力可溶酯型酚最好,IC50值为37.62μg/m L;DPPH自由基清除能力不溶苷型酚最好,当浓度为16.33μg/m L时,清除率可以达到93.56%;超氧阴离子自由基清除能力可溶酯型酚最好,当浓度为9.66μg/m L时,清除率可达91.12%;ABTS自由基清除能力不溶酯型酚较好,当不溶酯型酚浓度为64.05μg/m L时,清除率可达91.19%。结果表明,米糠富含多酚,具有较好的抗氧化能力。 展开更多
关键词 米糠 粗多酚 抗氧化活性
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麦麸发酵前后不同存在形态酚类物质中酚酸含量的变化及其抗氧化活性分析 被引量:17
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作者 杜小燕 吴晖 +5 位作者 雷灼贵 陈彦君 陈彩薇 赖富饶 闵甜 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期17-23,共7页
以小麦麦麸为培养基,采用三株泡盛曲霉进行固态发酵,分别提取并采用高效液相色谱法测定麦麸发酵前后不同存在形态(游离型、酯苷结合型、糖苷结合型、碱解束缚型和酸解束缚型)的酚类物质中酚酸的含量,并通过DPPH自由基清除试验、还原力... 以小麦麦麸为培养基,采用三株泡盛曲霉进行固态发酵,分别提取并采用高效液相色谱法测定麦麸发酵前后不同存在形态(游离型、酯苷结合型、糖苷结合型、碱解束缚型和酸解束缚型)的酚类物质中酚酸的含量,并通过DPPH自由基清除试验、还原力试验以及抗脂质过氧化试验,研究这些酚类物质的抗氧化活性。结果表明:未经过发酵的麦麸,束缚型酚酸在总酚酸含量中约占总量的80%,其酚酸类成分主要包括对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、咖啡酸、绿原酸、没食子酸、香草酸和肉桂酸等。发酵后的麦麸,游离型酚类物质的含量显著提高。抗氧化试验的结果显示,麦麸中碱解束缚型的酚类物质和发酵后麦麸的游离型酚类物质的抗氧化性较强。试验结果说明泡盛曲霉能促使被束缚的阿魏酸游离出来,使游离型酚类物质的含量及抗氧化性显著提高;而且抗氧化活性与酚酸的种类及含量有关,咖啡酸、丁香酸和阿魏酸含量高的酚类物质,其抗氧化性也较强。 展开更多
关键词 小麦麦麸 泡盛曲霉 酚类物质 抗氧化性
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生物降解呕吐毒素的肠杆菌筛选与鉴定 被引量:14
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作者 李晓凤 刘思利 +3 位作者 谭景耀 李靖 朋贤 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2017年第6期125-132,共8页
呕吐毒素,又名脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),主要污染小麦和大麦等作物。为了筛选得到具有呕吐毒素降解能力的菌株,实验搜集了50份土壤,通过菌株的富集、筛选和纯化得到一株白色菌株,命名为W-D,该菌株能在无机盐培养基中以DO... 呕吐毒素,又名脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),主要污染小麦和大麦等作物。为了筛选得到具有呕吐毒素降解能力的菌株,实验搜集了50份土壤,通过菌株的富集、筛选和纯化得到一株白色菌株,命名为W-D,该菌株能在无机盐培养基中以DON(20μg/m L)作为唯一碳源进行生长。对分离得到的菌株进行DON毒素降解能力检测发现,在37℃、180 r/min下作用于60μg/m L的DON,经过7 d反应降解率可达40.40%。对该菌株进行相关鉴定,发现该菌株为革兰氏阴性菌,显微镜下呈短杆状,扫描电镜观察菌株为形状不一的杆状结构,大小约为0.5×(1.0~3.0)μm。生理生化鉴定结果表明W-D基本符合肠杆菌的特征。对W-D的DNA进行PCR扩增16S r DNA得到一段长度约为1500 bp的片段,测序后进行同源性分析表明该菌株属肠杆菌Enterobacter,与阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae的亲缘关系最近。 展开更多
关键词 呕吐毒素 生物降解 菌株筛选 鉴定
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇的生物转化及其隐蔽型毒素的形成研究进展 被引量:13
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作者 潘药银 +1 位作者 刘晨迪 杨继国 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第19期281-289,共9页
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是目前粮食作物中由于霉变产生的分布最为广泛、影响较大的单端孢霉烯族化合物之一。DON在植物、微生物作用下会转化形成各种隐蔽型毒素,且这些生物转化往往并不彻底,使中毒症状更加复杂,从而增... 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是目前粮食作物中由于霉变产生的分布最为广泛、影响较大的单端孢霉烯族化合物之一。DON在植物、微生物作用下会转化形成各种隐蔽型毒素,且这些生物转化往往并不彻底,使中毒症状更加复杂,从而增加了粮食及其副产品的风险。本文主要综述各类生物对DON的转化模式及其对所形成的隐蔽型毒素类型、分布及毒性作用的影响,以期为今后DON及其隐蔽型毒素的降解研究提供参考。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 植物转化 微生物降解 体内代谢 隐蔽型真菌毒素
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酶解丝素蛋白制备ACE抑制肽的研究 被引量:11
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作者 吴晖 罗美琪 +3 位作者 肖性龙 袁坤 李晓凤 《现代食品科技》 EI CAS 2011年第12期1461-1465,共5页
本研究首次探讨利用Alcalase酶解丝素蛋白制备高活性ACE抑制肽。以水解度为主要评价指标,研究了温度、浓度、pH、加酶量以及反应时间对酶解反应的影响。分析了不同水解度下的酶解产物与ACE体外抑制活性、肽得率和蛋白回收率的关系。确... 本研究首次探讨利用Alcalase酶解丝素蛋白制备高活性ACE抑制肽。以水解度为主要评价指标,研究了温度、浓度、pH、加酶量以及反应时间对酶解反应的影响。分析了不同水解度下的酶解产物与ACE体外抑制活性、肽得率和蛋白回收率的关系。确定了制备ACE抑制肽的最佳酶解反应DH值为17.12%,此时所得丝素蛋白肽的肽得率为50.31%,蛋白回收率为77.37%,ACE抑制率可达74.07%。基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF)分析表明,所制备的丝素蛋白肽的分子量小于2.4 kDa。 展开更多
关键词 丝素蛋白 ACE抑制活性 活性肽
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一种能同时富集沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的培养基 被引量:11
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作者 刘园园 肖性龙 +4 位作者 余以刚 陈谷 李晓凤 吴晖 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1389-1396,共8页
【目的】设计制备一种能够同时富集沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌的复合增菌肉汤。【方法】挑选合适的添加剂进行单因素实验,确定增菌肉汤的成分及配比,采用平板计数法及三重荧光PCR技术验证肉汤的增菌效果。【结果】结果得... 【目的】设计制备一种能够同时富集沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌的复合增菌肉汤。【方法】挑选合适的添加剂进行单因素实验,确定增菌肉汤的成分及配比,采用平板计数法及三重荧光PCR技术验证肉汤的增菌效果。【结果】结果得到一种能同时富集沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌的选择性增菌肉汤(SSL),经验证SSL可使得3种目标菌以相对一致的速度进行富集,经过37℃150 r/min振荡培养24 h后,菌体浓度到达107~108CFU/mL,非目标菌生长受到抑制。应用荧光PCR扩增样品,可同时得到3种目标菌的扩增曲线。在710份实际样品检测中,无假阳性及假阴性报告。【结论】研究结果表明,SSL肉汤可用于沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌的共增菌,可用于多重PCR检测的前增菌。 展开更多
关键词 SSL肉汤 复合增菌培养液 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌
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玉米赤霉烯酮生物脱毒及关键酶作用机理的研究进展 被引量:10
7
作者 钟凤 +3 位作者 陈艺 史成超 李丹 吴晖 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第7期1742-1746,共5页
玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN,ZEA)是由镰刀菌属产生的一类具有类雌激素生物活性的霉菌毒素,广泛存在于玉米、小麦等谷物及其制品中。本文综述了各类微生物降解ZEN的研究现状,重点比较其脱毒效率及产物毒性,尤以不动杆菌(Acinetobacter... 玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN,ZEA)是由镰刀菌属产生的一类具有类雌激素生物活性的霉菌毒素,广泛存在于玉米、小麦等谷物及其制品中。本文综述了各类微生物降解ZEN的研究现状,重点比较其脱毒效率及产物毒性,尤以不动杆菌(Acinetobacter sp.SM04)、粉红粘帚菌(Gliocladium roseum IFO 7063)、毛孢子菌(Trichosporon mycotoxinivorans)和假单胞菌(Pseudomonas sp.ZE-1)研究较为全面,进一步总结了ZEN降解的关键酶及其作用机制,为微生物降解玉米赤霉烯酮的研究提供依据,也为大环内酯化合物和芳香族化合物的降解开拓更广泛的途径。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 生物降解 作用机制
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植物乳杆菌DMDL 9010中亚硝酸盐还原酶的基因克隆、表达和纯化 被引量:10
8
作者 王盼 费永涛 +5 位作者 刘冬梅 黄娟 吴晖 余以刚 肖性龙 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第6期150-155 271,共7页
研究了植物乳杆菌DMDL 9010亚硝酸盐还原酶基因克隆、表达及表达产物的纯化。首先以植物乳杆菌DMDL 9010的DNA为模板,利用PCR扩增亚硝酸盐还原酶基因,扩增后nir编码序列大小为1638 bp,再将其编码序列克隆到原核表达载体p ET-32a(+)上,... 研究了植物乳杆菌DMDL 9010亚硝酸盐还原酶基因克隆、表达及表达产物的纯化。首先以植物乳杆菌DMDL 9010的DNA为模板,利用PCR扩增亚硝酸盐还原酶基因,扩增后nir编码序列大小为1638 bp,再将其编码序列克隆到原核表达载体p ET-32a(+)上,转化到感受态细胞DH5α,成功构建重组质粒p ET-32a(+)-nir。将重组质粒转化到大肠杆菌表达菌株E.coli BL21中,在IPTG浓度为1 mmol/L和诱导温度为25℃的条件下诱导4 h后诱导表达NIR蛋白,经诱导后的工程菌能将50μg/m L的亚硝酸盐降解90%以上,利用亲和层析柱Ni sepharose 6 Fast flow进行纯化得到重组蛋白,该重组蛋白经SDS-PAGE电泳后的分子量约为60 KDa。总之,经由植物乳杆菌DMDL 9010克隆出亚硝酸还原酶基因,并成功构建了重组质粒p ET-32a(+)-nir,利用基因工程方法得到的工程菌能有效降解亚硝酸盐,并能利用亲和层析得到高纯度的NIR。 展开更多
关键词 亚硝酸盐还原酶 植物乳杆菌 基因克隆 蛋白表达 工程菌
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泡盛曲霉发酵麦麸过程中酚类物质含量的变化与三种酶活性的相关性 被引量:9
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作者 杜小燕 吴晖 +4 位作者 赵超敏 闵甜 李晓凤 赖富饶 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第4期69-76 209,共9页
本研究以小麦麦麸为原料,分别采用3株泡盛曲霉(分别为GIM3.266,GIM3.4,GIM3.5)进行连续8天的固态发酵,每天分别提取发酵过程中小麦麦麸中不同存在形态酚类物质并测定其含量,同时,每天测定3株泡盛曲霉在发酵过程中木聚糖酶、纤维素酶以... 本研究以小麦麦麸为原料,分别采用3株泡盛曲霉(分别为GIM3.266,GIM3.4,GIM3.5)进行连续8天的固态发酵,每天分别提取发酵过程中小麦麦麸中不同存在形态酚类物质并测定其含量,同时,每天测定3株泡盛曲霉在发酵过程中木聚糖酶、纤维素酶以及阿魏酸酯酶的活性变化。结果表明,与未经发酵的麦麸相比,经泡盛曲霉发酵后的麦麸游离型酚类物质的含量显著增加,总酚含量可高达11561.30μg/g麸皮,比发酵前的麸皮总酚提高了169%;另外,酶活力的结果表明:纤维素酶活力在发酵前三天显著增大,其活力最高可达156.70 U,木聚糖酶活力随总酚释放量的增加而增加,最高可达34123.00 U,阿魏酸酯酶活力在发酵中后期达到顶峰,最高可达2642.60 U。总体而言,麦麸发酵过程中酚类物质的释放量与木聚糖酶和阿魏酸酯酶的酶活力呈正相关,说明发酵后麦麸中酚类物质提取量的显著增加与这两种酶密切相关,这两种酶活力高的泡盛曲霉菌株,更有利于释放麦麸中的酚类物质。 展开更多
关键词 泡盛曲霉 小麦麦麸 酚类物质 木聚糖酶 纤维素酶 阿魏酸酯酶
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臭氧和紫外降解面粉中的DON及对面粉品质的影响 被引量:8
10
作者 余以刚 马涵若 +2 位作者 侯芮 肖性龙 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2016年第9期196-202,共7页
为降低面粉DON含量,用臭氧及紫外线处理受污染的面粉,研究处理条件对降解效果的影响,对比处理前后面粉的蛋白含量、湿面筋含量和白度值并通过MTT法评价降解产物安全性。研究表明,在臭氧浓度45.00 mg/L,水分含量为16.00%的条件下处理DON... 为降低面粉DON含量,用臭氧及紫外线处理受污染的面粉,研究处理条件对降解效果的影响,对比处理前后面粉的蛋白含量、湿面筋含量和白度值并通过MTT法评价降解产物安全性。研究表明,在臭氧浓度45.00 mg/L,水分含量为16.00%的条件下处理DON污染面粉60 min,初始DON含量为2.35、2.84、4.09和4.95 mg/kg的面粉DON降解率分别为46.59%、40.71%、38.96%和35.40%;在紫外照射强度1200μW/cm2,水分含量12.00%的条件下处理DON污染面粉60 min,相同初始含量的DON降解率为39.89%、40.32%、36.68%和30.32%。两种处理后面粉蛋白质含量、湿面筋含量和白度等理化指标均无显著变化(p>0.05)。MTT实验表明:DON对LO2有很强的细胞毒性,给药48h后细胞活性降低62.02%,相同DON浓度的紫外降解产物使细胞活性降低17.50%,臭氧降解产物则使细胞活性仅下降2%(p>0.05)。本研究使用的方法可在短时间内有效降低面粉中DON含量,对面粉品质无显著影响,两种方法的降解产物对LO2细胞毒性均显著下降(p<0.01)。 展开更多
关键词 面粉 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 臭氧降解 紫外降解 细胞毒性
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枯草芽孢杆菌YQ-1降解玉米赤霉烯酮膜蛋白酶的提取及性质分析
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作者 周于群 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2024年第2期100-108,共9页
玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是一类常见于发霉谷物、饲料中的真菌毒素,具有生殖、遗传和致癌性等危害,在世界各地的谷物中常超标检出。本课题组前期筛选得到一株高效降解ZEN的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis YQ-1,全细胞催化12 h后ZE... 玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是一类常见于发霉谷物、饲料中的真菌毒素,具有生殖、遗传和致癌性等危害,在世界各地的谷物中常超标检出。本课题组前期筛选得到一株高效降解ZEN的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis YQ-1,全细胞催化12 h后ZEN(20μg/mL)的降解率达98.36%。根据降解酶的细胞定位,推测ZEN降解酶定位于细胞膜表面。本实验以ZEN降解率为指标,提取YQ-1细胞膜表面ZEN降解酶蛋白,结合氨基酸序列分析,推测可能的降解酶。结果显示,以辛基-β-葡萄糖苷(OG)、十二烷基-β-D-麦芽糖苷(DDM)、Triton X-100和Triton X-114作为膜蛋白提取剂比NaCl和尿素提取的蛋白量显著增加,但提取的膜蛋白酶ZEN降解活性较差,以丁醇为提取剂提取得到的水相蛋白粗酶液在12h内对20μg/mLZEN的降解率为64.09%,粗酶液蛋白含量为9.86μg/mL,酶活为0.43 U。该降解酶的提取为后续的ZEN降解酶挖掘奠定了实验基础,枯草芽孢杆菌及其ZEN降解酶的研究为霉菌毒素的体外脱毒提供支撑。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 生物降解 膜蛋白 丁醇
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荔枝果渣可溶性膳食纤维去结合酚前后结构和功能性质的比较 被引量:1
12
作者 许涵婷 +3 位作者 胡腾根 余元善 杨继国 陈晓维 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第8期206-212,共7页
该研究以荔枝果渣中的可溶性膳食纤维(Soluble Dietary Fiber,SDF)为原料,探讨碱水解法去除其中的结合酚后SDF结构和功能性质的变化。结果表明荔枝果渣可溶性膳食纤维中结合酚含量为4.53 mg GAE/g。扫描电镜结果表明去除结合酚后的SDF... 该研究以荔枝果渣中的可溶性膳食纤维(Soluble Dietary Fiber,SDF)为原料,探讨碱水解法去除其中的结合酚后SDF结构和功能性质的变化。结果表明荔枝果渣可溶性膳食纤维中结合酚含量为4.53 mg GAE/g。扫描电镜结果表明去除结合酚后的SDF结构变得较为松散;傅里叶红外光谱的结果表明SDF的主要成分为果胶和半纤维素,去除结合酚后的SDF未发生官能团上的转化。单糖组成和流变特性分析结果表明SDF和去除结合酚后的SDF单糖组成相同,且都为假塑性非牛顿流体;但相同剪切速率下,去除结合酚后的SDF表观黏度大为降低,这与其更加松散的结构有关。相同浓度下,去除结合酚后SDF的DPPH自由基清除能力降低了15.06%~29.02%,ABTS阳离子自由基清除能力降低了42.06%~78.98%。此外,去除结合酚后SDF对3种益生菌的体外增殖作用也显著降低。上述结果证实,结合酚与荔枝果渣可溶性膳食纤维的生物活性息息相关,为荔枝果渣的开发利用提供理论基础。 展开更多
关键词 荔枝果渣可溶性膳食纤维 结合酚 结构 功能性质
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酿酒酵母S.cerevisiae YQ-7的高密度发酵 被引量:5
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作者 汪芳 吴晖 +4 位作者 余以刚 李勤昌 朱佳喜 董珊珊 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第10期113-117,共5页
研究了酿酒酵母s.cerevisiae YQ-7发酵的最佳培养基组成;通过单因素试验优化碳源和氮源的添加量,响应面法优化培养基中的碳氮比,得出最佳发酵培养基配方:蔗糖76.31g/L,酵母浸膏33.75g/L,酸水解酪蛋白16.00gm,硫酸铵0.5班... 研究了酿酒酵母s.cerevisiae YQ-7发酵的最佳培养基组成;通过单因素试验优化碳源和氮源的添加量,响应面法优化培养基中的碳氮比,得出最佳发酵培养基配方:蔗糖76.31g/L,酵母浸膏33.75g/L,酸水解酪蛋白16.00gm,硫酸铵0.5班,硫酸镁1.OgrL,磷酸二氢钾2.6g/L,甘氨酸2g/L。同时,对补糖策略进行了研究,确定补糖工艺为自发酵16h开始补糖,补糖量70%~80%,每隔12h补糖一次,50h终止发酵,生物量为49.47ga,。 展开更多
关键词 酿酒酵母 培养基优化 响应面法
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高粱糠中不同存在形态酚类物质的组成及抗氧化活性 被引量:5
14
作者 陈华敏 吴晖 +2 位作者 赖富饶 陈彩薇 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2016年第8期77-82,76,共7页
本文提取了高粱糠中的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚,用高效液相色谱法测定其中15种酚类化合物的含量,并对抗氧化能力进行研究,其中包括DPPH自由基、ABTS自由基、O2-自由基清除率的测定,以及Fe3+还... 本文提取了高粱糠中的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚,用高效液相色谱法测定其中15种酚类化合物的含量,并对抗氧化能力进行研究,其中包括DPPH自由基、ABTS自由基、O2-自由基清除率的测定,以及Fe3+还原力的测定实验等。实验结果表明:本实验研究的高粱糠的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚的含量分别为645.27、138.57、48.67、118.92、176.06 mg GAE/100 g DW;阿魏酸和水杨酸的含量较高,分别为39.04%和28.04%,3,4-二羟基苯甲酸的含量最低(0.09%);阿魏酸主要以束缚型的形式存在,可溶性酚中的异绿原酸的含量较高,而游离酚中水杨酸的含量最高;不同存在形态的酚类物质的抗氧化能力在不同的抗氧化体系中略有差异,总的来说,束缚型酯型酚、束缚型苷型酚、可溶性酯型酚的抗氧化能力较强,虽然游离酚含量最高,但其抗氧化能力较弱。 展开更多
关键词 高粱糠 酚类物质 抗氧化活性
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Alcalase 2.4L催化牛骨胶原蛋白水解反应及其动力学研究 被引量:5
15
作者 吴晖 王晨 +3 位作者 李晓凤 李丽丽 余以刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期68-71,共4页
对碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解牛骨胶原蛋白的工艺以及动力学特征进行了研究。探讨底物浓度、酶量、温度、pH、时间等因素对胶原蛋白水解度的影响,研究确定了碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解牛骨胶原蛋白的最佳水解条件为:在pH8.5,60℃,... 对碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解牛骨胶原蛋白的工艺以及动力学特征进行了研究。探讨底物浓度、酶量、温度、pH、时间等因素对胶原蛋白水解度的影响,研究确定了碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解牛骨胶原蛋白的最佳水解条件为:在pH8.5,60℃,底物浓度为80g/L,加酶量为40μL/g条件下水解3h,水解度可达13.5%,优于其他蛋白酶。根据所建立的pH-stat酶解体系确定了Km为1.6362mol/L,Vmax为0.3444mol/L·h,为更有效地利用胶原蛋白资源奠定了理论基础。 展开更多
关键词 牛骨胶原蛋白 ALCALASE 2.4L 酶解 动力学
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酿酒酵母对数生长后期代谢重构的全基因组表达谱芯片分析 被引量:4
16
作者 叶燕锐 +3 位作者 陈宏运 郑穗平 潘力 林影 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期962-967,共6页
为了探讨酵母进入对数生长后期以后酒精生产速度降低的原因,我们利用酵母表达谱芯片技术对酿酒酵母细胞从对数生长中期进入对数生长后期时的全基因组表达谱进行了分析,发现酵母在对数生长中期的表达谱非常稳定,而一旦进入对数生长后期,... 为了探讨酵母进入对数生长后期以后酒精生产速度降低的原因,我们利用酵母表达谱芯片技术对酿酒酵母细胞从对数生长中期进入对数生长后期时的全基因组表达谱进行了分析,发现酵母在对数生长中期的表达谱非常稳定,而一旦进入对数生长后期,则出现明显的代谢重构现象。许多氨基酸合成和代谢相关的基因、离子转移以及与能量的生成和储存等功能相关的基因出现了不同程度的上调;而许多涉及酵母转座和DNA重组的基因则表达下调;一些中心代谢途径也发生了代谢重构,包括:琥珀酸和α-酮戊二酸生成途径基因的一致上调,都与氨基酸合成和代谢相关基因表达的结果相吻合。结果表明:由于氨基酸合成的需求量增加,进入对数生长后期酵母的代谢转向TCA循环和乙醛酸循环,导致酒精的生产速率降低。 展开更多
关键词 酿酒酵母 对数生长后期 表达谱 代谢重构
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人源蛋白酶体α亚基6(Proteasome subunit alpha 6)在酿酒酵母表面展示 被引量:4
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作者 叶茂 +4 位作者 林影 韩双艳 郑泓 王小宁 梁世中 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第9期984-990,共7页
为构建人源蛋白酶体α亚基6(α6)的酵母展示体系,研制其单克隆抗体用于抗体表位分析和研究泛素-蛋白酶体途径,建立绕过重组抗原表达及纯化制备、将展示重组抗原直接应用于抗体检测的方法.在酵母展示表达载体pICAS中引入His.tag标签,将... 为构建人源蛋白酶体α亚基6(α6)的酵母展示体系,研制其单克隆抗体用于抗体表位分析和研究泛素-蛋白酶体途径,建立绕过重组抗原表达及纯化制备、将展示重组抗原直接应用于抗体检测的方法.在酵母展示表达载体pICAS中引入His.tag标签,将编码α6的基因PSA6_HUMAN克隆到酵母表面展示载体pICAS-H上,用流式细胞仪检测其抗原表位活性,以表面展示α6的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫检测技术,建立酵母(yeast)-ELISA检测技术,应用于检测小鼠单克隆抗体及单抗效价.酵母细胞培养48h后获得抗原α6的高效表面展示,展示的α6具有良好的抗原活性和特异性,将α6的展示酵母用于yeast-ELISA的初步实验结果显示可有效检测和筛选到抗α6抗体. 展开更多
关键词 泛素-蛋白酶体途径 人源蛋白酶体α亚基6 酵母表面展示体系 抗体检测
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通过L-乳酸脱氢酶1的上下游DNA序列鉴定Lactobacillus sp.DMDL 9010 被引量:4
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作者 刘冬梅 费永涛 +4 位作者 王盼 陈谷 肖性龙 吴晖 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期137-144,共8页
从发酵蔬菜中分离到乳杆菌DMDL 9010,将此菌与LCR 719、LB 1.83、ST 1.204和LP 8140等4株乳酸菌用于MRS培养基体系中亚硝酸盐的降解,作用24h后发现,DMDL 9010的降解效果最好并具有显著性(P≤0.001).利用16S rDNA将鉴别的范围缩小到植物... 从发酵蔬菜中分离到乳杆菌DMDL 9010,将此菌与LCR 719、LB 1.83、ST 1.204和LP 8140等4株乳酸菌用于MRS培养基体系中亚硝酸盐的降解,作用24h后发现,DMDL 9010的降解效果最好并具有显著性(P≤0.001).利用16S rDNA将鉴别的范围缩小到植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)或戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus),生理生化实验将DMDL 9010鉴定为戊糖乳杆菌.但在后续的PCR中无法得到戊糖乳杆菌的特异性条带.通过分析两种菌的基因组序列,发现它们都具有编码L-乳酸脱氢酶1的同源DNA序列(ldhL1),序列相似度达到90%.同时这段同源序列上下游片段序列相似度较低,其序列的差异可以作为鉴别依据.对DMDL 9010的L-乳酸脱氢酶1基因上下游900bp左右的DNA片段进行PCR扩增并测序,利用生物信息学分析方法进行序列比对分析,DMDL9010被鉴定为植物乳杆菌. 展开更多
关键词 细菌 鉴定 DNA序列 发酵
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玉米干磨酒精生产期间原料内呕吐毒素和赤霉烯酮的去向 被引量:4
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作者 余元善 邱礼平 +1 位作者 吴晖 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期208-211,共4页
测试了几株工业上常用的酒精酵母在酒精发酵过程中转化赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的能力。结果表明:所测试的五株酒精酵母都具有转化ZEN成赤霉烯醇(ZOL)的能力,转化产物中两种构型的ZOL都有,两种构型的比例因不同的菌株而有明显的差... 测试了几株工业上常用的酒精酵母在酒精发酵过程中转化赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的能力。结果表明:所测试的五株酒精酵母都具有转化ZEN成赤霉烯醇(ZOL)的能力,转化产物中两种构型的ZOL都有,两种构型的比例因不同的菌株而有明显的差异,但所有的五株酵母都不具有转化DON的能力。同时,使用人为添加有1μg/mLZEN和1μg/mLDON的优质玉米为原料,以安琪牌超级酒精酵母为发酵菌种,模拟玉米干磨酒精生产工艺,在发酵结束后,发酵醪被分成三部分,即酒精、酒糟离心液和湿酒糟。HPLC分析结果表明:酒精中基本检测不到两种真菌毒素及其代谢物,ZEN及其代谢物主要分布在湿酒糟,而DON主要分布在酒糟离心液中。另外,从两种真菌毒素及其代谢物总的含量看,在整个工艺生产过程中,两种真菌毒素及其代谢物基本上没有发生降解。 展开更多
关键词 玉米酒精生产 呕吐毒素 赤霉烯酮 转化
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可降解玉米赤霉烯酮的重组过氧化物酶A4-Prx的纯化与活性研究 被引量:3
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作者 钟凤 吴晖 +1 位作者 刘思利 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第8期65-70,共6页
以来源于不动杆菌Acinetobacter sp.SM04的过氧化物酶A4-Prx的毕赤酵母工程表达菌株GS115/p PIC9K-A4-Prx为研究对象,从培养液中纯化重组过氧化物酶A4-Prx,分析其ZEA降解活力,并研究过氧化物酶A4-Prx的酶学特性。本论文首先研究了蛋白... 以来源于不动杆菌Acinetobacter sp.SM04的过氧化物酶A4-Prx的毕赤酵母工程表达菌株GS115/p PIC9K-A4-Prx为研究对象,从培养液中纯化重组过氧化物酶A4-Prx,分析其ZEA降解活力,并研究过氧化物酶A4-Prx的酶学特性。本论文首先研究了蛋白的纯化方法,通过一系列分离纯化手段得到纯的过氧化物酶A4-Prx,最终纯化倍数约为12,HPLC实验结果表明纯化后的过氧化物酶A4-Prx具有ZEA降解能力,且ZEA降解率达到63%。对过氧化物酶A4-Prx进行酶学特性研究,结果表明,p H和温度均对A4-Prx的过氧化物酶酶活有显著影响,p H 9.0和反应温度60℃时酶活最高,A4-Prx的最大酶活是204.1 U,此时过氧化氢浓度为9.7 m M。A4-Prx过氧化物酶反应受EDTA的抑制作用明显。本研究为过氧化物酶的酶学研究奠定了基础,为后续的A4-Prx降解机理研究提供先决条件,推动生物降解ZEA研究的进展。 展开更多
关键词 过氧化物酶 玉米赤霉烯酮 毕赤酵母 酶学特性
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