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猴痘病毒mRNA疫苗的构建及免疫评价
1
作者
唐家
凤
庄忻雨
+7 位作者
姜人月
狄亚心
杨松惠
张桐
许智强
于潼
田明尧
金宁一
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2024年第3期257-262,共6页
目的设计猴痘病毒(MPXV)抗原,选择多种方案设计抗猴痘病毒mRNA候选疫苗,并完成其表达鉴定及小鼠体内的免疫效果评价。方法选取猴痘病毒M1R、A35R、A29L、H3L基因设计三组候选抗原基因(命名为:M1RA35R、A29L-H3L-A35R、A35R-Fc),并设置...
目的设计猴痘病毒(MPXV)抗原,选择多种方案设计抗猴痘病毒mRNA候选疫苗,并完成其表达鉴定及小鼠体内的免疫效果评价。方法选取猴痘病毒M1R、A35R、A29L、H3L基因设计三组候选抗原基因(命名为:M1RA35R、A29L-H3L-A35R、A35R-Fc),并设置一组痘苗病毒(VACV)基因(L1R-A33R)作为对照,分别连接至mRNA制备专用载体pGEM-3Zf-n3,通过线性化、体外转录、纯化和加帽获得功能性mRNA,利用Western blot、IFA对目的抗原进行鉴定。通过微流控芯片制备LNP-mRNAs疫苗,制定免疫程序并完成小鼠的免疫及特异性抗体水平监测。结果成功构建3组抗猴痘病毒的mRNA疫苗和1组抗痘苗病毒的mRNA疫苗,四组疫苗均能表达抗原蛋白,并且制备的4组LNP-mRNAs疫苗在免疫后84 d仍维持较高的特异性抗体水平。结论成功完成猴痘病毒mRNA疫苗的构建、表达及鉴定,并通过对不同猴痘病毒抗原设计的验证,为以后猴痘疫苗的研发提供数据支撑。
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关键词
猴痘病毒
痘苗病毒
mRNA疫苗
EEV
IMV
LNP-mRNAs
原文传递
新型冠状病毒重组蛋白疫苗的构建、表达及鉴定
被引量:
1
2
作者
张桐
杨松惠
+9 位作者
姜人月
唐家
凤
许智强
狄亚心
于潼
方效良
田明尧
金宁一
庄忻雨
朱光泽
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2023年第11期1241-1244,1251,共5页
目的 利用毕赤酵母系统表达重组新型冠状病毒受体结构域蛋白RBD,以期作为新冠病毒重组蛋白候选疫苗。方法 选择新型冠状病毒的RBD(受体结合域)蛋白为靶点,通过基因工程技术将RBD基因序列克隆到毕赤氏酵母表达载体pPIC9K中。通过载体将...
目的 利用毕赤酵母系统表达重组新型冠状病毒受体结构域蛋白RBD,以期作为新冠病毒重组蛋白候选疫苗。方法 选择新型冠状病毒的RBD(受体结合域)蛋白为靶点,通过基因工程技术将RBD基因序列克隆到毕赤氏酵母表达载体pPIC9K中。通过载体将外源基因整合到毕赤酵母染色体上,获得遗传性稳定重组子。毕赤氏酵母表达载体含有醇氧化酶基因的调控序列,加入甲醇进行诱导,通过前导信号肽引导外源蛋白的分泌表达。结果 成功将RBD基因序列克隆到表达载体中并整合到酵母染色体上,获得遗传性稳定重组子。能通过前导信号肽引导目的蛋白的分泌表达,表达产物免疫动物刺激产生高水平的血清IgG抗体,IgG抗体效价为1∶2.73×106。结论 重组新型冠状病毒受体结构域蛋白RBD的设计具有可行性,为重组蛋白候选疫苗在预防新型冠状病毒感染中具有潜在的应用价值。
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关键词
新型冠状病毒
受体结构域蛋白RBD
毕赤酵母系统
重组蛋白候选疫苗
原文传递
索象于图:谈部编本历史七上教科书中的图片运用
被引量:
1
3
作者
曹勇
唐家
凤
《中学历史教学》
2018年第7期6-7,60,共3页
南宋学者郑樵在其著作《通志·图谱略》中说:"置图于左,置书于右,索象于图,索理于书。"图片以其形象性和直观性起到了文字所难以达到的效果。历史学科的内容往往繁琐、枯燥且与现实生活相去甚远,具有过去性和不可再现性,学生感...
南宋学者郑樵在其著作《通志·图谱略》中说:"置图于左,置书于右,索象于图,索理于书。"图片以其形象性和直观性起到了文字所难以达到的效果。历史学科的内容往往繁琐、枯燥且与现实生活相去甚远,具有过去性和不可再现性,学生感觉甚是枯燥乏味。而历史图片所具有的特性,则可以很好地激发学生学习历史的兴趣。
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关键词
历史学科
图片运用
教科书
现实生活
历史图片
直观性
形象性
再现性
原文传递
音乐教育中德育渗透的实践
4
作者
韩秀丽
唐家
凤
《新课程教学(电子版)》
2022年第22期128-130,共3页
德育在学生成长中发挥着重要作用。学校音乐教育可以对学生形成艺术塑化和思想感染,是渗透德育的首选。音乐教师要关注学生身心发展特点,充分挖掘音乐课中的德育元素,结合课堂教学,为学生提供良好的德育环境。本文研究分析了德育的原则...
德育在学生成长中发挥着重要作用。学校音乐教育可以对学生形成艺术塑化和思想感染,是渗透德育的首选。音乐教师要关注学生身心发展特点,充分挖掘音乐课中的德育元素,结合课堂教学,为学生提供良好的德育环境。本文研究分析了德育的原则,并提出了以核心素养为基础的音乐教育中渗透德育的途径。
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关键词
核心素养
音乐教育
德育渗透
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职称材料
多媒体技术融入农村音乐课堂的实践探索
5
作者
唐家
凤
韩秀丽
《新课程教学(电子版)》
2022年第19期140-142,共3页
随着信息化多媒体技术的日益普及,多媒体技术交互课堂越来越多地走进音乐课堂。信息化音乐课堂的建设要从丰富音乐教学资源、增强课堂教学交互性、提高师生应用信息化的能力等方面入手。在中小学音乐课堂中,探索依托现代化手段,能提高...
随着信息化多媒体技术的日益普及,多媒体技术交互课堂越来越多地走进音乐课堂。信息化音乐课堂的建设要从丰富音乐教学资源、增强课堂教学交互性、提高师生应用信息化的能力等方面入手。在中小学音乐课堂中,探索依托现代化手段,能提高学生音乐鉴赏能力、音乐审美能力和音乐表达能力。在课堂实践中,要求音乐教师要合理利用多媒体技术,用生动的视频、具体的创编实践培养学生的音乐思维和能力。从应用学习到创新发展,让现代多媒体技术更好地提升中小学音乐课堂教学效益。
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关键词
智慧课堂
音乐课堂
交互课堂
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职称材料
新加坡等国家和地区档案管理工作情况考察
被引量:
1
6
作者
杨阿芬
唐家
凤
《山东档案》
1994年第4期35-37,共3页
我们赴新加坡、泰国、香港就档案管理工作进行考察,开阔了眼界,受到了启发,初步了解了国外档案管理体制、业务范围、新技术应用以及档案对经济和社会发展所起的促进作用.国外档案管理和运行机制是适应现代社会发展要求的,在许多方面对...
我们赴新加坡、泰国、香港就档案管理工作进行考察,开阔了眼界,受到了启发,初步了解了国外档案管理体制、业务范围、新技术应用以及档案对经济和社会发展所起的促进作用.国外档案管理和运行机制是适应现代社会发展要求的,在许多方面对我们都有重要的借鉴作用.
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关键词
档案管理体制
档案保护技术
国家档案馆
管理工作情况
档案工作
档案资料
促进作用
进馆
计算机检索系统
档案征集
原文传递
呼吸道合胞病毒mRNA候选疫苗的表达、鉴定及免疫效果验证
7
作者
姜人月
庄忻雨
+8 位作者
田明尧
唐家
凤
狄亚心
杨松惠
许智强
于潼
张桐
金鑫
金宁一
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2024年第5期497-501,共5页
目的制备呼吸道合胞病毒F蛋白的融合前构象(pre-F)mRNA疫苗,进行可行性验证。方法对抗原基因进行密码子优化设计,分别连接至pGEM-3Zf-N3载体上,通过质粒线性化、体外转录、纯化和Cap1加帽处理,得到功能性mRNAs。在转染至293T细胞后,利用...
目的制备呼吸道合胞病毒F蛋白的融合前构象(pre-F)mRNA疫苗,进行可行性验证。方法对抗原基因进行密码子优化设计,分别连接至pGEM-3Zf-N3载体上,通过质粒线性化、体外转录、纯化和Cap1加帽处理,得到功能性mRNAs。在转染至293T细胞后,利用Western blot和间接免疫荧光试(IFA)来确定目标蛋白的表达情况。通过微流控装置制备LNP/mRNAs疫苗免疫C57BL/6小鼠,检测小鼠血清中抗原特异性IgG抗体效价,评估免疫效果。结果成功构建重组质粒Pre-F-GCN4t和mDS-Cav1,通过双酶切验证条带符合预期大小。表达目的抗原大小为57.57 ku和64.35 ku。成功检测小鼠血清中抗原特异性IgG抗体,Pre-F-GCN4t免疫组的效果优于mDS-Cav1组,3次免疫较2次免疫提升了2倍,抗体效价最高可达1∶4×10^(4)。结论两种抗原设计模式均具有可行性,Pre-F-GCN4t的设计方式对于激活机体的体液免疫应答更有优势,mRNA疫苗无需体内转录,为呼吸道合胞病毒mRNA疫苗的优化设计提供理论基础。
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关键词
呼吸道合胞病毒
mRNA疫苗
密码子优化
体液免疫
原文传递
关于初中历史教学的一点思考
8
作者
唐家
凤
《好家长》
2019年第58期138-138,共1页
本文将结合笔者多年的初中历史教学实践经验,从初中历史课堂教学的现状出发,对其存在的问题进行分析研究,并提出相应的应对措施,以促进初中历史课堂教学质量的提高。
关键词
历史教学
现状
对策
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职称材料
题名
猴痘病毒mRNA疫苗的构建及免疫评价
1
作者
唐家
凤
庄忻雨
姜人月
狄亚心
杨松惠
张桐
许智强
于潼
田明尧
金宁一
机构
广西大学动物科学技术学院
中国农业科学院长春兽医研究所
延边大学农学院
东北农业大学动物医学学院
吉林大学动物医学学院
吉林农业大学动物医学学院
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2024年第3期257-262,共6页
基金
国家重点研发计划项目(No.2023YFD1800404)。
文摘
目的设计猴痘病毒(MPXV)抗原,选择多种方案设计抗猴痘病毒mRNA候选疫苗,并完成其表达鉴定及小鼠体内的免疫效果评价。方法选取猴痘病毒M1R、A35R、A29L、H3L基因设计三组候选抗原基因(命名为:M1RA35R、A29L-H3L-A35R、A35R-Fc),并设置一组痘苗病毒(VACV)基因(L1R-A33R)作为对照,分别连接至mRNA制备专用载体pGEM-3Zf-n3,通过线性化、体外转录、纯化和加帽获得功能性mRNA,利用Western blot、IFA对目的抗原进行鉴定。通过微流控芯片制备LNP-mRNAs疫苗,制定免疫程序并完成小鼠的免疫及特异性抗体水平监测。结果成功构建3组抗猴痘病毒的mRNA疫苗和1组抗痘苗病毒的mRNA疫苗,四组疫苗均能表达抗原蛋白,并且制备的4组LNP-mRNAs疫苗在免疫后84 d仍维持较高的特异性抗体水平。结论成功完成猴痘病毒mRNA疫苗的构建、表达及鉴定,并通过对不同猴痘病毒抗原设计的验证,为以后猴痘疫苗的研发提供数据支撑。
关键词
猴痘病毒
痘苗病毒
mRNA疫苗
EEV
IMV
LNP-mRNAs
Keywords
monkeypox virus
vaccinia virus
mRNA vaccine
EEV
IMV
LNP-mRNAs
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
新型冠状病毒重组蛋白疫苗的构建、表达及鉴定
被引量:
1
2
作者
张桐
杨松惠
姜人月
唐家
凤
许智强
狄亚心
于潼
方效良
田明尧
金宁一
庄忻雨
朱光泽
机构
吉林大学动物医学院
中国农业科学院长春兽医研究所
浙江东方生物基因制品有限公司
长春中医药大学附属医院
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2023年第11期1241-1244,1251,共5页
基金
新型冠状病毒肺炎变异株重组蛋白疫苗研发项目(No.21ZGY30)。
文摘
目的 利用毕赤酵母系统表达重组新型冠状病毒受体结构域蛋白RBD,以期作为新冠病毒重组蛋白候选疫苗。方法 选择新型冠状病毒的RBD(受体结合域)蛋白为靶点,通过基因工程技术将RBD基因序列克隆到毕赤氏酵母表达载体pPIC9K中。通过载体将外源基因整合到毕赤酵母染色体上,获得遗传性稳定重组子。毕赤氏酵母表达载体含有醇氧化酶基因的调控序列,加入甲醇进行诱导,通过前导信号肽引导外源蛋白的分泌表达。结果 成功将RBD基因序列克隆到表达载体中并整合到酵母染色体上,获得遗传性稳定重组子。能通过前导信号肽引导目的蛋白的分泌表达,表达产物免疫动物刺激产生高水平的血清IgG抗体,IgG抗体效价为1∶2.73×106。结论 重组新型冠状病毒受体结构域蛋白RBD的设计具有可行性,为重组蛋白候选疫苗在预防新型冠状病毒感染中具有潜在的应用价值。
关键词
新型冠状病毒
受体结构域蛋白RBD
毕赤酵母系统
重组蛋白候选疫苗
Keywords
Novel coronavirus
receptor domain protein RBD
Pichia pastoris system
recombinant protein candidate vaccine
分类号
R373.1 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
索象于图:谈部编本历史七上教科书中的图片运用
被引量:
1
3
作者
曹勇
唐家
凤
机构
仪征市教学研究室
仪征市实验中学
出处
《中学历史教学》
2018年第7期6-7,60,共3页
文摘
南宋学者郑樵在其著作《通志·图谱略》中说:"置图于左,置书于右,索象于图,索理于书。"图片以其形象性和直观性起到了文字所难以达到的效果。历史学科的内容往往繁琐、枯燥且与现实生活相去甚远,具有过去性和不可再现性,学生感觉甚是枯燥乏味。而历史图片所具有的特性,则可以很好地激发学生学习历史的兴趣。
关键词
历史学科
图片运用
教科书
现实生活
历史图片
直观性
形象性
再现性
分类号
G633.51 [文化科学—教育学]
原文传递
题名
音乐教育中德育渗透的实践
4
作者
韩秀丽
唐家
凤
机构
山东省淄博市沂源县南麻街道办事处中心小学
山东省淄博市沂源县土门中学
出处
《新课程教学(电子版)》
2022年第22期128-130,共3页
文摘
德育在学生成长中发挥着重要作用。学校音乐教育可以对学生形成艺术塑化和思想感染,是渗透德育的首选。音乐教师要关注学生身心发展特点,充分挖掘音乐课中的德育元素,结合课堂教学,为学生提供良好的德育环境。本文研究分析了德育的原则,并提出了以核心素养为基础的音乐教育中渗透德育的途径。
关键词
核心素养
音乐教育
德育渗透
分类号
G63 [文化科学—教育学]
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职称材料
题名
多媒体技术融入农村音乐课堂的实践探索
5
作者
唐家
凤
韩秀丽
机构
山东省淄博市沂源县土门中学
山东省淄博市沂源县南麻街道办事处中心小学
出处
《新课程教学(电子版)》
2022年第19期140-142,共3页
文摘
随着信息化多媒体技术的日益普及,多媒体技术交互课堂越来越多地走进音乐课堂。信息化音乐课堂的建设要从丰富音乐教学资源、增强课堂教学交互性、提高师生应用信息化的能力等方面入手。在中小学音乐课堂中,探索依托现代化手段,能提高学生音乐鉴赏能力、音乐审美能力和音乐表达能力。在课堂实践中,要求音乐教师要合理利用多媒体技术,用生动的视频、具体的创编实践培养学生的音乐思维和能力。从应用学习到创新发展,让现代多媒体技术更好地提升中小学音乐课堂教学效益。
关键词
智慧课堂
音乐课堂
交互课堂
分类号
G63 [文化科学—教育学]
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职称材料
题名
新加坡等国家和地区档案管理工作情况考察
被引量:
1
6
作者
杨阿芬
唐家
凤
出处
《山东档案》
1994年第4期35-37,共3页
文摘
我们赴新加坡、泰国、香港就档案管理工作进行考察,开阔了眼界,受到了启发,初步了解了国外档案管理体制、业务范围、新技术应用以及档案对经济和社会发展所起的促进作用.国外档案管理和运行机制是适应现代社会发展要求的,在许多方面对我们都有重要的借鉴作用.
关键词
档案管理体制
档案保护技术
国家档案馆
管理工作情况
档案工作
档案资料
促进作用
进馆
计算机检索系统
档案征集
分类号
G279.3 [文化科学—档案学]
原文传递
题名
呼吸道合胞病毒mRNA候选疫苗的表达、鉴定及免疫效果验证
7
作者
姜人月
庄忻雨
田明尧
唐家
凤
狄亚心
杨松惠
许智强
于潼
张桐
金鑫
金宁一
机构
延边大学农学院
中国农业科学院长春兽医研究所
广西大学动物科学技术学院
东北农业大学动物医学学院
吉林农业大学动物医学学院
吉林大学动物医学学院
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2024年第5期497-501,共5页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(No.32202820)
国家重点研发计划项目(No.21ZGY30)。
文摘
目的制备呼吸道合胞病毒F蛋白的融合前构象(pre-F)mRNA疫苗,进行可行性验证。方法对抗原基因进行密码子优化设计,分别连接至pGEM-3Zf-N3载体上,通过质粒线性化、体外转录、纯化和Cap1加帽处理,得到功能性mRNAs。在转染至293T细胞后,利用Western blot和间接免疫荧光试(IFA)来确定目标蛋白的表达情况。通过微流控装置制备LNP/mRNAs疫苗免疫C57BL/6小鼠,检测小鼠血清中抗原特异性IgG抗体效价,评估免疫效果。结果成功构建重组质粒Pre-F-GCN4t和mDS-Cav1,通过双酶切验证条带符合预期大小。表达目的抗原大小为57.57 ku和64.35 ku。成功检测小鼠血清中抗原特异性IgG抗体,Pre-F-GCN4t免疫组的效果优于mDS-Cav1组,3次免疫较2次免疫提升了2倍,抗体效价最高可达1∶4×10^(4)。结论两种抗原设计模式均具有可行性,Pre-F-GCN4t的设计方式对于激活机体的体液免疫应答更有优势,mRNA疫苗无需体内转录,为呼吸道合胞病毒mRNA疫苗的优化设计提供理论基础。
关键词
呼吸道合胞病毒
mRNA疫苗
密码子优化
体液免疫
Keywords
respiratory syncytial virus
mRNA vaccine
codon optimization
humoral immunity
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
关于初中历史教学的一点思考
8
作者
唐家
凤
机构
江苏省仪征市实验中学
出处
《好家长》
2019年第58期138-138,共1页
文摘
本文将结合笔者多年的初中历史教学实践经验,从初中历史课堂教学的现状出发,对其存在的问题进行分析研究,并提出相应的应对措施,以促进初中历史课堂教学质量的提高。
关键词
历史教学
现状
对策
分类号
G633.51 [文化科学—教育学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猴痘病毒mRNA疫苗的构建及免疫评价
唐家
凤
庄忻雨
姜人月
狄亚心
杨松惠
张桐
许智强
于潼
田明尧
金宁一
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2024
0
原文传递
2
新型冠状病毒重组蛋白疫苗的构建、表达及鉴定
张桐
杨松惠
姜人月
唐家
凤
许智强
狄亚心
于潼
方效良
田明尧
金宁一
庄忻雨
朱光泽
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2023
1
原文传递
3
索象于图:谈部编本历史七上教科书中的图片运用
曹勇
唐家
凤
《中学历史教学》
2018
1
原文传递
4
音乐教育中德育渗透的实践
韩秀丽
唐家
凤
《新课程教学(电子版)》
2022
0
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职称材料
5
多媒体技术融入农村音乐课堂的实践探索
唐家
凤
韩秀丽
《新课程教学(电子版)》
2022
0
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职称材料
6
新加坡等国家和地区档案管理工作情况考察
杨阿芬
唐家
凤
《山东档案》
1994
1
原文传递
7
呼吸道合胞病毒mRNA候选疫苗的表达、鉴定及免疫效果验证
姜人月
庄忻雨
田明尧
唐家
凤
狄亚心
杨松惠
许智强
于潼
张桐
金鑫
金宁一
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2024
0
原文传递
8
关于初中历史教学的一点思考
唐家
凤
《好家长》
2019
0
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职称材料
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