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回毒银花散中各药及药物不同配比对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用研究
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作者 李雨芬 姜爽 +6 位作者 宋伍 姜涛 刘畅 唐亚婷 魏琳 苏鑫 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期63-71,共9页
目的研究《外科正宗》中回毒银花散对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin⁃resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抑菌能力以及毒力因子α-溶血素(α⁃hemolysin,Hla)活性和生物被膜形成的抑制作用,同时探究回毒银花散最佳配比为古... 目的研究《外科正宗》中回毒银花散对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin⁃resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抑菌能力以及毒力因子α-溶血素(α⁃hemolysin,Hla)活性和生物被膜形成的抑制作用,同时探究回毒银花散最佳配比为古方新用提供实验支撑。方法通过最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)、纸片扩散法(K⁃B法)分析回毒银花散及组方中各味药对MRSA菌株USA300的抑制效果,溶血实验、Hla中和实验、Hla寡聚实验、免疫印记(Western blot)实验验证药物以何种形式抑制毒力因子Hla的活性,生物被膜形成实验评价回毒银花散对生物被膜的抑制效果,最后正交实验探究回毒银花散的最佳配比。结果回毒银花散抑制MRSA菌株,MIC_(90)为64 mg/mL,MBC为256 mg/mL,抑菌圈直径为(7.50±0.50)mm。回毒银花散还通过抑制Hla的释放抑制Hla的活性,最小有效浓度(minimum effective concentration,MEC)为16 mg/mL,抑制生物被膜形成的MEC为8 mg/mL。回毒银花散中金银花、黄芪只影响MRSA溶血活性以及生物被膜形成但不抑制细菌的生长,两药溶血活性MEC以及生物被膜形成MEC均为32 mg/mL;甘草抑菌能力较强,MIC_(90)为8 mg/mL,生物被膜MEC为1 mg/mL,在亚抑菌浓度下未表现出抑制溶血活性。最后正交实验显示,当回毒银花散中金银花、黄芪、甘草比例为1∶2∶4时,MIC_(90)为16 mg/mL,溶血活性MEC为8 mg/mL,生物膜形成MEC为4 mg/mL,均为9组中最低。结论回毒银花散在亚抑菌浓度下可影响MRSA的溶血活性以及生物被膜形成,其中金银花、黄芪、甘草的最佳比例为1∶2∶4。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 回毒银花散 α-溶血素 生物被膜
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黄芩射干汤对金黄色葡萄球菌泛毒力的实验研究
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作者 刘畅 宋伍 +3 位作者 姜涛 李雨芬 苏鑫 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2566-2571,共6页
目的研究最低抑菌浓度(MIC)以下浓度的黄芩射干汤对金黄色葡萄球菌(金葡菌)的体外毒力作用的影响。方法首先采用微量稀释法和时间-生长曲线测定黄芩射干汤对金葡菌的MIC和对细菌生长的影响;用溶血实验和蛋白质印迹实验来探究MIC浓度以... 目的研究最低抑菌浓度(MIC)以下浓度的黄芩射干汤对金黄色葡萄球菌(金葡菌)的体外毒力作用的影响。方法首先采用微量稀释法和时间-生长曲线测定黄芩射干汤对金葡菌的MIC和对细菌生长的影响;用溶血实验和蛋白质印迹实验来探究MIC浓度以下黄芩射干汤对金葡菌的溶血作用和α-溶血素(Hla)分泌的影响;用脲酶活性实验来研究黄芩射干汤对金葡菌毒力表达的影响;用纤维蛋白原黏附实验和生物膜形成实验研究MIC浓度以下黄芩射干汤对金葡菌生物膜形成和黏附能力的影响;用流式细胞仪来研究MIC浓度以下黄芩射干汤对金葡菌表面蛋白A(SpA)锚定的影响。结果黄芩射干汤对金葡菌USA300的MIC为16 mg/mL,对Newman的MIC为16 mg/mL,对SA37的MIC为32 mg/mL。在不明显抑菌的情况下,MIC以下浓度的黄芩射干汤表现出对金葡菌USA300溶血能力、生物膜形成和黏附能力的抑制作用,并可以减少Hla的分泌;可以通过抑制SrtA的活性来减少细胞壁中SpA锚定的含量。此外,推测黄芩射干汤可能是通过抑制ClpP的活性而抑制金葡菌毒力表型。结论MIC浓度下的黄芩射干汤在体外减弱了金葡菌毒力相关的表型,给金葡菌的治疗提供中医药选择。 展开更多
关键词 黄芩射干汤 金黄色葡萄球菌 溶血 生物膜 毒力
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