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低氧下牦牛、黑白花牛肾间质成纤维细胞PDK1、Smad2、Caspase3等因子表达差异研究 被引量：1
1
作者 姚一凡 张伊阳 +5 位作者 董仕慧 李睿 张兰 周熳琳 乔自林 杨琨 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1335-1343,共9页
为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧... 为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)法检测细胞内PDK1等因子表达差异。波形蛋白(Vimentin)免疫组化染色鉴定结果显示,两种牛的原代RIFs纯度较高,可用于后续试验。低氧处理后,两种牛的RIFs内PDK1、Smad2及Caspase3的mRNA和蛋白表达均存在不同程度上调,且种属间存在显著差异(P<0.05),牦牛HIF-1α、PDK1、Smad2及Caspase3等基因表达量于24 h达到峰值,之后下调,而黑白花牛基因则随时间呈递增趋势,且牦牛RIFs低氧下增殖能力低于黑白花牛。综上所述,低氧诱导的相关转录因子表达存在差异,两种牛RIFs的增殖能力存在差异,这可能是导致低氧下黑白花牛肾纤维化程度的加深,从而产生肾源性高原疾病的原因之一。本研究为比较不同海拔牛种肾脏的低氧适应性研究提供了基础数据,为探索牦牛肾脏高原低氧适应机制提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 牦牛 黑白花牛 肾间质成纤维细胞 低氧 增殖
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血管内皮生长因子在藏羊脾脏中的表达分布研究 被引量：1
2
作者 周熳琳 董玲 +2 位作者 韩禹婷 陆弈橙 杨琨 《甘肃畜牧兽医》 2020年第12期47-50,共4页
目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在1岁藏羊脾脏组织中的表达分布。方法:选取1岁藏羊脾脏组织作为研究样本,制成石蜡切片,利用HE染色法观察藏羊脾脏组织的形态结构,采用免疫组织化学方法检测VEGF在... 目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在1岁藏羊脾脏组织中的表达分布。方法:选取1岁藏羊脾脏组织作为研究样本,制成石蜡切片,利用HE染色法观察藏羊脾脏组织的形态结构,采用免疫组织化学方法检测VEGF在藏羊脾脏组织中的表达分布。结果:经过免疫组织化学方法检测可发现VEGF在藏羊脾脏的中央动脉内膜血管内皮细胞和外膜纤维细胞以及脾血窦内皮细胞呈强阳性表达,在小梁和被膜呈弱阳性表达,而在中央动脉中膜层平滑肌中基本无表达。结论:VEGF广泛分布于藏羊脾脏组织中,对其形态结构和功能的维持具有重要作用。 展开更多
关键词 藏羊 VEGF 脾脏 免疫组化
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VEGF及其相关低氧因子在不同发育阶段牦牛肾脏中的表达分布研究 被引量：1
3
作者 周熳琳 董仕慧 +5 位作者 张伊阳 李睿 杨映雪 柴雅静 乔自林 杨琨 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1542-1550,共9页
为探究血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR-2)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管细胞粘附因子-1(VCAM-1)在牦牛肾脏发育过程中适应高原低氧环境的调控作用,本研究选取不同发育阶段(新生、9月龄、成年)的高原健康牦牛... 为探究血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR-2)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管细胞粘附因子-1(VCAM-1)在牦牛肾脏发育过程中适应高原低氧环境的调控作用,本研究选取不同发育阶段(新生、9月龄、成年)的高原健康牦牛,采用H&E染色、免疫组织化学染色(IHC)以及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对不同发育阶段牦牛肾脏组织中VEGF、VEGFR-2、HIF-1α和VCAM-1的表达分布进行分析。H&E结果显示,随着年龄的增长,肾小球和肾小管直径、肾小球和肾小管上皮细胞以及肾间质细胞面积逐渐增加。IHC结果显示,VEGF、VEGFR-2、HIF-1α和VCAM-1主要分布在肾小管上皮细胞和肾小球细胞胞质,且表达量与年龄呈正相关。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,VEGF和HIF-1α在新生组的表达水平显著高于9月龄和成年组(P<0.05);VEGFR-2在新生组和成年组的相对表达差异不显著;VCAM-1在新生和9月龄表达较高,二者间差异不显著。VEGF、VEGFR-2、HIF-1α和VCAM-1表达量与年龄的相关性较强。综上,推测在低氧下VEGF等因子上调促进血管生成、红细胞生成和糖酵解过程,与牦牛肾脏发育及适应高原低氧环境密切相关。本研究结果为进一步探究牦牛肾脏对高原低氧环境的适应性提供了基础资料。 展开更多
关键词 牦牛 肾脏发育 血管内皮生长因子(VEGF) 血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2) 低氧诱导因子-1α(HIF-1α)
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低氧对牦牛肺动脉平滑肌细胞增殖及氧化应激损伤作用的影响
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作者 李睿 张伊阳 +4 位作者 罗雪慧 周熳琳 吴绍米 杨琨 乔自林 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2245-2254,共10页
【目的】通过研究低氧环境对牦牛(Bos grunniens)肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖及氧化应激损伤的影响,初步探究牦牛肺动脉平滑肌对低氧的适应性特点。【方法】分离纯化并利用α-平滑肌肌动蛋白(... 【目的】通过研究低氧环境对牦牛(Bos grunniens)肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖及氧化应激损伤的影响,初步探究牦牛肺动脉平滑肌对低氧的适应性特点。【方法】分离纯化并利用α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)鉴定牦牛PASMCs。试验分为常氧组和低氧组,采用CCK-8法检测牦牛PASMCs在低氧和常氧状态下0、2、4、6、12、24、48、72、96、120 h的增殖效率;采用ELISA法检测常氧组和低氧组培养24、48、72、96 h细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的蛋白浓度。【结果】细胞鉴定结果表明,95%以上的细胞均能表达α-SMA,即分离纯化所得细胞为牦牛PASMCs。CCK-8结果表明,低氧组在72、96、120 h细胞增殖倍数极显著低于常氧组(P<0.01);低氧组和常氧组在72 h的细胞增殖倍数均极显著高于48 h(P<0.01),表明牦牛PASMCs在72 h出现增殖高峰,且长时间的低氧环境能够降低牦牛PASMCs增殖效率。ELISA检测结果表明,与常氧组相比,低氧组牦牛PASMCs培养上清液中LDH蛋白浓度在72 h极显著上调(P<0.01);SOD蛋白浓度在72、96 h均极显著或显著上调(P<0.01;P<0.05);CK蛋白浓度在48、72 h均显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01);MDA蛋白浓度在72 h显著上调、96 h显著下调(P<0.05)。在低氧条件下,各时间点上清液中LDH、SOD蛋白浓度差异不显著(P>0.05),CK、MDA蛋白浓度在24、48和72 h均显著高于96 h(P<0.05)。在常氧条件下,上清液中LDH蛋白浓度在48 h显著高于24、72 h(P<0.05);SOD蛋白浓度在24、48 h均显著高于72、96 h(P<0.05);CK蛋白浓度在24 h显著高于72、96 h(P<0.05);MDA蛋白浓度在48 h显著高于72 h(P<0.05)。【结论】长时间低氧能够增强牦牛PASMCs氧化应激反应和细胞损伤,抗氧化作用减弱,细胞增殖效率显著降低,LDH、SOD� 展开更多
关键词 牦牛 肺动脉平滑肌细胞(PASMCs) 低氧 氧化应激
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