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G蛋白偶联受体激酶4突变A142V基因对大鼠血管平滑肌细胞AT_1受体的影响
1
作者 邓昆 刘莉 +5 位作者 陈彩宇 陈垦 王微 周永巧 何多芬 曾春雨 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第33期3977-3979,共3页
目的研究人G蛋白偶联受体激酶4(GRK4)变异体A142V对大鼠血管平滑肌细胞(VMSCs)血管紧张素Ⅱ1型(AT1)受体及其介导的VMSCs增殖的影响,以期了解GRK4引起原发性高血压的原因。方法构建与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的慢病毒载体,包... 目的研究人G蛋白偶联受体激酶4(GRK4)变异体A142V对大鼠血管平滑肌细胞(VMSCs)血管紧张素Ⅱ1型(AT1)受体及其介导的VMSCs增殖的影响,以期了解GRK4引起原发性高血压的原因。方法构建与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的慢病毒载体,包装慢病毒,感染A10细胞并进行鉴定;免疫印迹方法检测AT1受体蛋白变化;采用分光光度法检测GRK4活性,免疫共沉淀检测GRK4和AT1受体的共连接;[3 H]胸腺嘧啶掺入的方法检测增殖变化。结果转染hGRK4γA142V细胞的GRK4酶活性显著升高,AT1受体表达显著升高,GRK4和AT1受体共连接作用降低,AngⅡ刺激细胞增殖效应显著增强。结论转染hGRK4变异体A142V增加GRK4活性,引起AT1受体的功能增强和VMSCs的增殖作用增加。 展开更多
关键词 高血压 G蛋白偶联受体激酶4 受体 血管紧张素 1型 血管平滑肌细胞
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多巴胺D_1类受体对神经肽Y受体介导的促血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：3
2
作者 周永巧 王震 +7 位作者 刘莉 王微 韩愈 陈彩宇 任红梅 何多芬 杨剑 曾春雨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期581-584,共4页
目的探讨多巴胺D1类受体对神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)受体介导的Sprague-Dawley(SD)大鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法以NPY(10-8～10-11mol/L)刺激SD大鼠胸主动脉培养的VSMCs,观察在D1类... 目的探讨多巴胺D1类受体对神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)受体介导的Sprague-Dawley(SD)大鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法以NPY(10-8～10-11mol/L)刺激SD大鼠胸主动脉培养的VSMCs,观察在D1类多巴胺受体激动剂Fenoldopam(10-8mol/L)存在的情况下,神经肽Y促VSMCs增殖作用的变化。细胞增殖的检测采用[3H]胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)掺入率的变化表示及MTT方法。结果 NPY呈浓度依赖性促进SD大鼠VSMCs的异常增殖,最高增殖幅度达(77±9)%(P<0.05),该增殖作用由NPY Y1受体亚型介导。多巴胺D1类受体激动剂Fenoldopam对VSMCs无增殖影响,但Fenoldopam可抑制NPY Y1亚型受体介导VSMCs的增殖作用,该作用通过PKA途径发挥作用。结论多巴胺D1类受体激活抑制NPY受体介导的促VSMCs增殖作用,可能参与心血管疾病的发生、发展过程。 展开更多
关键词 多巴胺受体 神经肽YY1受体 细胞增殖 血管平滑肌细胞
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脯氨酸羟化酶2对脂肪间充质干细胞旁分泌介导的心肌保护的影响 被引量：2
3
作者 王微 王伟 +6 位作者 彭玉兰 刘莉 周永巧 陈彩宇 于长青 何多芬 曾春雨 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期265-271,共7页
目的观察RNA干扰脂肪间充质干细胞脯氨酸羟化酶2(PHD2)对其旁分泌介导的心肌保护作用的影响及其机制。方法慢病毒包装PHD2干扰载体转染第三代人脂肪间充质干细胞(ADSC)。H2O2(100μmol/L)刺激新生大鼠心肌细胞(NRVM)6h,建立体外氧化损... 目的观察RNA干扰脂肪间充质干细胞脯氨酸羟化酶2(PHD2)对其旁分泌介导的心肌保护作用的影响及其机制。方法慢病毒包装PHD2干扰载体转染第三代人脂肪间充质干细胞(ADSC)。H2O2(100μmol/L)刺激新生大鼠心肌细胞(NRVM)6h,建立体外氧化损伤模型。ADSC条件培养液(CM)预处理NRVM,TUNEL染色和免疫印迹法检测caspase-3蛋白表达,观察H2O2诱导的心肌细胞凋亡。ELISA方法检测ADSC-CM的促存活细胞因子:血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和肝细胞生长因子(HGF)。结果 PHD2干扰-ADSC-CM较空载体-ADSC-CM预处理明显减少NRVM的凋亡,TUNEL阳性率降低30.3%,caspase-3蛋白表达降低24.8%。PHD2干扰后ADSC-CM中IGF-1明显增加。IGF-1中和抗体干预后PHD2干扰-ADSC-CM的抗心肌细胞凋亡作用明显受抑制。结论 PHD2干扰增强了ADSC旁分泌介导的心肌保护作用,其机制可能为增加ADSC促存活细胞因子IGF-1的分泌。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 脯氨酸羟化酶Ⅱ 心肌细胞 过氧化氢 细胞凋亡 胰岛素样生长因子1
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G蛋白偶联受体激酶4对大鼠血管平滑肌细胞AT_1受体的调节作用 被引量：2
4
作者 刘莉 杨剑 +6 位作者 陈彩宇 王微 周永巧 韩愈 何多芬 周林 曾春雨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期593-596,共4页
目的应用siRNA干扰抑制大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled recep-tor kinase 4,GRK4)的表达,探讨GRK4对血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinⅡtype 1,AT1)受体的调节作用。方法免疫组化检测大鼠回结肠动脉血管... 目的应用siRNA干扰抑制大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled recep-tor kinase 4,GRK4)的表达,探讨GRK4对血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinⅡtype 1,AT1)受体的调节作用。方法免疫组化检测大鼠回结肠动脉血管平滑肌组织GRK4蛋白表达;以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞株)为研究对象,免疫印迹检测GRK4、AT1受体蛋白表达变化,免疫共沉淀检测GRK4和AT1受体的相互作用和AT1受体磷酸化改变。结果大鼠动脉平滑肌组织GRK4表达良好;siRNA干扰后,GRK4蛋白表达明显下降(P<0.05);AT1蛋白表达降低(P<0.05),AT1受体磷酸化明显增强(P<0.05);GRK4和AT1受体存在共连接,抑制GRK4表达后增加GRK4与AT1受体之间的共连接。结论 GRK4能够调控大鼠胸主动脉平滑肌细胞AT1受体蛋白表达及其磷酸化状态,该调节作用可能与两者的共连接有关。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体4 血管紧张素Ⅱ1型受体 血管平滑肌细胞 原发性高血压
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神经肽Y及其亚型受体在动脉粥样硬化中的作用
5
作者 周永巧(综述) 杨剑 曾春雨(审校) 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期636-638,共3页
动脉粥样硬化等心血管疾病的治疗仍然是临床难点之一。近年研究发现，神经肽Y（Neuropeptide Y，NPY）作为支配外周血管的交感神经递质，在促动脉粥样硬化发生中也发挥着重要的作用，它不仅促进动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth mus... 动脉粥样硬化等心血管疾病的治疗仍然是临床难点之一。近年研究发现，神经肽Y（Neuropeptide Y，NPY）作为支配外周血管的交感神经递质，在促动脉粥样硬化发生中也发挥着重要的作用，它不仅促进动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMC）异常增殖，还介导了巨噬细胞及血小板在粥样硬化病变过程的病理变化。本综述主要探讨NPY在动脉粥样硬化病变发生发展过程中的作用。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化病变 神经肽Y 亚型受体 动脉血管平滑肌细胞 交感神经递质 心血管疾病 CELLS 外周血管
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初中物理教学中科学探究新认识
6
作者 周永巧 《教师》 2013年第21期98-98,共1页
初中物理教学中，学生的学习思想都是与教师的教学思想同步发展，在经过一段时间的学习之后，学生会收获到一些学习成果。但学生跟着教师的思想来学习，这并不是一种有效的教学方式，在教学方式下，无法达到培养学生自主探究能力的目的... 初中物理教学中，学生的学习思想都是与教师的教学思想同步发展，在经过一段时间的学习之后，学生会收获到一些学习成果。但学生跟着教师的思想来学习，这并不是一种有效的教学方式，在教学方式下，无法达到培养学生自主探究能力的目的。因此，教师要采用合适的教学方式来激发、引导和督促学生学习。 展开更多
关键词 初中 物理教学 科学探究
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