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荞麦源降血糖糖肽结构表征及酶抑制动力学 被引量：1
1
作者 周柳莎 郦萍 +3 位作者 顾双 俞瑜媛 胡香莲 施永清 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期86-98,共13页
为实现荞麦蛋白资源高值化利用,从6个菌株中筛选出植物乳杆菌和嗜热链球菌作为发酵菌株,制备α-葡萄糖苷酶抑制糖肽(α-GIG)。采用单因素实验确定优化中心点,然后做响应面试验优化发酵工艺。通过Sephadex G-25和反向高效液相色谱法(RP-H... 为实现荞麦蛋白资源高值化利用,从6个菌株中筛选出植物乳杆菌和嗜热链球菌作为发酵菌株,制备α-葡萄糖苷酶抑制糖肽(α-GIG)。采用单因素实验确定优化中心点,然后做响应面试验优化发酵工艺。通过Sephadex G-25和反向高效液相色谱法(RP-HPLC)对发酵液进行分离纯化,制备α-GIG。采用β-消除反应方法确定α-GIG中糖肽键类型,红外光谱扫描法测定二级结构。采用Lineweaver-Burk作图法探究酶抑制动力学,确定α-GIG对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型。结果表明:在料液比1∶14.8、pH 7.5、接种量2%、发酵2.8 d条件下,发酵产物对α-葡萄糖苷酶抑制率达70.83%。发酵液经Sephadex G-25分离得到I1,I2,I33个组分,其中I2对α-葡萄糖苷酶抑制作用较强,IC50达1.72 mg/mL。经RP-HPLC进一步分离纯化I2,得到α-GIG,其纯度为94.17%。红外光谱扫描确定α-GIG的二级结构为:β-折叠占70.51%,α-螺旋占18.95%,β-转角占10.54%。α-GIG中糖肽键类型为O-糖肽键。酶抑制动力学研究表明,α-GIG对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型为混合型非竞争性抑制。α-GIG具有开发为天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的潜力。 展开更多
关键词 荞麦 Α-葡萄糖苷酶 响应面 结构表征 抑制动力学
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荞麦糖肽脂质体的制备及其稳定性和缓释研究 被引量：1
2
作者 周柳莎 胡香莲 +2 位作者 俞瑜媛 徐海星 施永清 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期119-130,共12页
制备一种荞麦糖肽(buckwheat glycopeptide,BG)缓释脂质体,提高荞麦糖肽的生物利用度。本研究首先对制备所得的BG进行稳定性分析,随后利用反向蒸发法制备荞麦糖肽脂质体(buckwheat glycopeptide liposomes,BGL),经响应面实验对包埋工艺... 制备一种荞麦糖肽(buckwheat glycopeptide,BG)缓释脂质体,提高荞麦糖肽的生物利用度。本研究首先对制备所得的BG进行稳定性分析,随后利用反向蒸发法制备荞麦糖肽脂质体(buckwheat glycopeptide liposomes,BGL),经响应面实验对包埋工艺进行优化,并探究其稳定性、体外缓释特性、α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,AGase)抑制活性和抗氧化活性。结果表明:温度(20~80℃)对BG的活性影响较小,碱性条件下BG易失活。从5种磷脂中筛选出蛋黄卵磷脂制备BGL,响应面优化工艺条件为磷脂与胆固醇质量比为4.2∶1.0,脂药比为7.5∶1.0,水相体积为1 mL,此条件下,BGL包埋率为72.64%。BGL对高温(100℃)环境不耐受,在短时间(1 h)内具有广谱pH(2~10)稳定性,反复冻融5次对其渗漏率无显著影响(P>0.05)。BGL在体外模拟胃、肠体系中表现出良好的缓释特性,24 h累计释放速率分别为(84.50±2.30)%和(60.17±1.42)%。 展开更多
关键词 荞麦糖肽 脂质体 稳定性 体外缓释 生物活性
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荞麦多肽对RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用
3
作者 周柳莎 周青青 +3 位作者 胡香莲 俞瑜媛 徐海星 施永清 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期80-92,共13页
为提高荞麦蛋白生物利用度,利用Sephadex G-25凝胶层析和反向高效液相色谱(RP-HPLC)分离制备荞麦抗氧化多肽(BAPs),对其结构进行表征。通过H_(2)O_(2)诱导RAW 264.7巨噬细胞建立氧化应激模型,评价BAPs对细胞氧化损伤的保护作用。结果表... 为提高荞麦蛋白生物利用度,利用Sephadex G-25凝胶层析和反向高效液相色谱(RP-HPLC)分离制备荞麦抗氧化多肽(BAPs),对其结构进行表征。通过H_(2)O_(2)诱导RAW 264.7巨噬细胞建立氧化应激模型,评价BAPs对细胞氧化损伤的保护作用。结果表明:经分离纯化得到的BAPs纯度达96.25%,其分子质量为5.8 ku。BAPs对DPPH·、ABTS+·、·OH清除能力及BAPs的还原力以VC当量抗氧化能力(VCEAC)分别表示为(12.12±0.27),(153.82±5.04),(901.95±39.30),(109.23±1.18)μg/mg。在细胞试验中,BAPs质量浓度达200μg/mL时,相较于模型组,对所有测定抗氧化指标均产生显著性(P<0.05)影响,细胞存活率显著提高13.80%,细胞内活性氧(ROS)水平下降40.63%,丙二醛(MDA)含量下降11.92 nmol/mg prog,超氧化物歧化酶(SOD)活力和过氧化氢酶(CAT)活力分别提高23.48 U/mg prot 15.71 U/mg prot。BAPs能有效抵抗RAW 264.7细胞产生的氧化应激反应,为开发荞麦多肽为天然抗氧化剂提供理论依据。 展开更多
关键词 荞麦多肽 分离纯化 结构表征 RAW 264.7巨噬细胞 抗氧化
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藜麦多肽与食品多酚复合物的制备、表征及功能性研究
4
作者 俞瑜媛 周青青 +2 位作者 周柳莎 胡香莲 施永清 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期83-96,共14页
研究常用食品多酚(茶多酚(TPs)、竹叶抗氧化物(AOB))对藜麦多肽(QPs)结构、抗氧化性和抑菌性的影响。采用荧光分光光度计、傅里叶红外光谱仪探究QPs和多酚复合过程的结构变化,运用ANS探针分析QPs表面疏水性,并通过粒径、电位等指标对复... 研究常用食品多酚(茶多酚(TPs)、竹叶抗氧化物(AOB))对藜麦多肽(QPs)结构、抗氧化性和抑菌性的影响。采用荧光分光光度计、傅里叶红外光谱仪探究QPs和多酚复合过程的结构变化,运用ANS探针分析QPs表面疏水性,并通过粒径、电位等指标对复合胶粒进行表征。荧光光谱结果表明,QPs与多酚复合后,QPs的固有荧光发生猝灭,且随多酚添加量的增加而降低,固有荧光光谱的最大发射波长发生红移。QPs与TPs复合后,表面疏水性显著降低(P<0.05),QPs∶TPs添加比例为1∶2时,ANS荧光强度由(74.13±1.67)AU,降低至(62.14±1.36)AU;而QPs与AOB复合后,表面疏水性无显著变化(P>0.05)。二级结构分析表明,所有复合样品中QPs的β-折叠、α-螺旋、无规则卷曲的百分含量下降,β-转角的百分含量增加。QPs∶TPs为1∶2时,β-折叠、α-螺旋、无规则卷曲和β-转角的百分含量分别为43.58%,17.20%,12.92%和26.30%;QPs∶AOB为1∶2时,β-折叠、α-螺旋、无规则卷曲和β-转角的百分含量分别为49.60%,14.99%,9.79%和25.62%。此外,QPs与TPs、AOB复合后能够显著提高QPs的抗氧化活性和对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制活性(P<0.05)。这些发现表明TPs和AOB在改善QPs功能特性方面可行,以及QPs-多酚复合物在食品配料及功能性食品体系中具有潜在用途。 展开更多
关键词 藜麦多肽-多酚复合物 二级结构 抗氧化活性 抑菌活性
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薏米多肽-钙、锌螯合物制备及结构表征
5
作者 胡香莲 郦萍 +3 位作者 周柳莎 俞瑜媛 徐海星 施永清 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期229-240,共12页
目的:制备1种薏米多肽-钙、锌螯合物并研究其结构。方法:利用枯草芽孢杆菌和嗜热链球菌混合发酵薏米,采用葡聚糖凝胶Sephadex G-15、反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化薏米发酵液得到薏米多肽(CSP),Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺... 目的:制备1种薏米多肽-钙、锌螯合物并研究其结构。方法:利用枯草芽孢杆菌和嗜热链球菌混合发酵薏米,采用葡聚糖凝胶Sephadex G-15、反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化薏米发酵液得到薏米多肽(CSP),Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(Tricine-SDS-PAGE)电泳检测其分子质量。以锌螯合率和钙螯合率为指标,在单因素实验的基础上,采用响应面试验优化薏米多肽-钙、锌螯合物(CSP-Ca-Zn)的制备工艺,采用紫外光谱、红外光谱和荧光光谱表征其结构。结果:薏米发酵液经Sephadex G-15分离得到4个峰,其中A3的钙、锌螯合率最高。RP-HPLC分离A3得到的CSP纯度达93.91%,其分子质量约7.8 ku。CSP与Ca-Zn螯合的最佳制备工艺为:CSP与钙、锌质量比4.4∶1,钙、锌质量比1∶1,pH 3.7,在此条件下,锌螯合率、钙螯合率分别达到52.63%和63.79%。CSP与钙、锌螯合的主要位点是氨基氮、羧酸基,其空间结构也发生改变。结论:所确定的螯合工艺条件使CSP同时螯合钙、锌两种金属,为薏米多肽新产品的开发提供了技术参考,为制作食源性有机钙、锌补充剂提供了新思路。 展开更多
关键词 薏米 发酵 纯化 肽-钙、锌螯合物 结构
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青稞源ACE抑制糖肽结构及其稳定性研究 被引量：1
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作者 胡香莲 郦萍 +3 位作者 周柳莎 俞瑜媛 徐海星 施永清 《中国粮油学报》 CSCD 北大核心 2023年第9期125-133,共9页
为制备一种血管紧张素转换酶(ACE)抑制糖肽并研究其结构及稳定性,选用嗜热链球菌和米根霉混合发酵青稞,单因素和响应面法优化发酵条件,凝胶色谱、反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化ACE抑制糖肽,红外光谱和β-消除法分析其结构,考察ACE... 为制备一种血管紧张素转换酶(ACE)抑制糖肽并研究其结构及稳定性,选用嗜热链球菌和米根霉混合发酵青稞,单因素和响应面法优化发酵条件,凝胶色谱、反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化ACE抑制糖肽,红外光谱和β-消除法分析其结构,考察ACE抑制糖肽物理化学和体外胃肠模拟消化稳定性。料液比1.0∶15.5 g/mL,接菌量2.4%,嗜热链球菌∶米根霉1∶1,发酵6.4 d,ACE抑制率达65.79%;Sephadex G-15分离获得的A_(2)组分ACE抑制活性最高(IC_(50)=2.0 mg/mL);RP-HPLC分离得到的组分F5纯度达95.17%;ACE抑制糖肽具有糖和多肽的典型结构,糖苷键为O-糖肽键;高温、强碱、高NaCl含量及体外胃肠模拟消化显著影响ACE抑制糖肽活性。 展开更多
关键词 青稞 混菌 血管紧张素转换酶抑制糖肽 纯化 结构 稳定性
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藜麦源ACE抑制糖肽制备、结构表征及体外稳定性研究 被引量：1
7
作者 俞瑜媛 周青青 +3 位作者 周柳莎 胡香莲 徐海星 施永清 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第12期18-28,共11页
利用毛霉和米根霉混合发酵藜麦制备藜麦源血管紧张素转化酶(angiotensin-I converting enzyme,ACE)抑制糖肽。通过单因素实验和响应面试验优化发酵工艺条件,发酵液经真空浓缩、醇沉、葡聚糖凝胶G-15和反相高效液相色谱分离纯化,利用傅... 利用毛霉和米根霉混合发酵藜麦制备藜麦源血管紧张素转化酶(angiotensin-I converting enzyme,ACE)抑制糖肽。通过单因素实验和响应面试验优化发酵工艺条件,发酵液经真空浓缩、醇沉、葡聚糖凝胶G-15和反相高效液相色谱分离纯化,利用傅里叶红外光谱法判断官能团构成,β-消除法判断糖肽键链接方式,并分析温度、p H、金属离子以及体外模拟消化对活性的影响。结果表明:在料液比1:18 g/m L、毛霉与米根霉接种量比1:1、总接种量2.8%(φ)、发酵时间8.7 d时,得到ACE抑制率为64.22%±4.57%的藜麦发酵液,分离纯化后获得单一组分F_(3)b。利用傅里叶红外光谱检测,发现F_(3)b具有多肽和多糖的特征吸收,β-消除法确定其存在O-糖肽键。体外稳定性研究结果表明,温度(25~55°C)对F3b活性影响较小,100℃处理后ACE抑制率为25℃时的86.23%±3.47%;不同p H条件(pH2~12)对其活性无显著影响(P>0.05);在Zn2+和Fe3+浓度为4 mmol/L时,ACE抑制率分别为对照的109.91%±8.12%和117.43%±6.78%,增强其活性;相同浓度的K+和Ca2+减弱其活性,ACE抑制率分别为对照的78.94%±2.18%和85.31%±4.99%;模拟胃肠消化过程中,F3b活性略有降低,ACE抑制率为对照的70.00%±3.30%。该研究丰富了ACE抑制肽的种类,为藜麦资源高值化利用提供理论和数据技术参考。 展开更多
关键词 藜麦 糖肽 ACE抑制活性 结构 稳定性
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