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携带blaIMP-4或blaKPC-2的产新德里金属β-内酰胺酶-1的肠杆菌科菌的基因型检测及其质粒转移传播机制的研究 被引量：7
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作者 曾云祥 陈杨芳 +9 位作者 沈丽珍 金晓立 许建平 梁世周 罗坚 奚经巧 余方友 林洁 叶瑾 周林双 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期542-549,共8页
目的：分析携带blaIMP‐4或blaKPC‐2的产新德里金属β‐内酰胺酶‐1（NDM‐1）的肠杆菌科菌的基因型及其质粒转移传播机制。方法收集2012年4月至2014年10月间浙江省温州市和杭州市5家医院细菌培养非重复菌株中碳青霉烯类耐药（如亚胺... 目的：分析携带blaIMP‐4或blaKPC‐2的产新德里金属β‐内酰胺酶‐1（NDM‐1）的肠杆菌科菌的基因型及其质粒转移传播机制。方法收集2012年4月至2014年10月间浙江省温州市和杭州市5家医院细菌培养非重复菌株中碳青霉烯类耐药（如亚胺培南、美罗培南、厄他培南等耐药）肠杆菌科菌33株，应用全自动微生物分析仪对该类菌株进行鉴定和药物敏感试验。并用改良 Hogde试验、EDTA协同初筛金属酶试验、超广谱β‐内酰胺酶（ESBL）检测（采用美国临床和实验室标准协会推荐的双纸片方法）、高产头孢菌素（AmpC）酶检测（采用头孢西丁三维试验），对试验菌基因包括blaNDM‐1在内及ISAba125‐NDM连锁基因进行 PCR检测，并将扩增产物纯化、克隆后测序，对部分菌株及2株携带blaIMP‐4或blaKPC‐2的产blaNDM‐1基因的肺炎克雷伯菌进行质粒转移、接合与消除试验。结果33株碳青霉烯类耐药的肠杆菌科菌分别为肺炎克雷伯菌28株，产酸克雷伯菌1株，大肠埃希菌2株，植生乌拉尔菌1株，阴沟肠杆菌1株；分别来自浙江大学医学院附属邵逸夫医院13株、温州市中医院13株、温州市人民医院1株、温州医科大学附属第一医院3株、温州市中西医结合医院3株。有31株确定为产碳青霉烯酶，包括 blaKPC‐224株、blaNDM‐13株、blaNDM‐51株、blaIMP‐43株，其中blaNDM‐1阳性菌株中同时携带blaIMP‐4或 blaKPC‐2的各1株，将携带部分阳性基因的菌株与大肠埃希菌 EC600或肺炎克雷伯菌ATCC13833进行质粒转移结合试验，获得结合子进行相应基因检测，均获得相应 blaNDM‐1、ISAba125‐NDM等基因。结论碳青霉烯类耐药肠杆菌科菌中最常见的是 blaKPC‐2型；blaNDM‐1、blaNDM‐5基因与ISAba125‐NDM连锁基因可能有相关；2株 blaNDM‐1型阳性菌株中有1株同时携带 blaKPC‐2型基因、另1株同时携带金属酶blaIMP‐4型基 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 肠杆菌科 产新德里金属β-内酰胺酶-1 基因型
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204株碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌耐药性分析
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作者 朱丰村 曾云祥 +4 位作者 金晓立 曾添 黄天鹏 林枝 周林双 《检验医学》 CAS 2023年第1期60-65,共6页
目的分析温州地区碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)临床分离株耐药性及其基因型。方法收集2018—2020年温州市4家综合性三级甲等医院临床分离的非重复CRE共204株,采用全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和体外药物敏感性试验。采用改良Hodg... 目的分析温州地区碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)临床分离株耐药性及其基因型。方法收集2018—2020年温州市4家综合性三级甲等医院临床分离的非重复CRE共204株,采用全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和体外药物敏感性试验。采用改良Hodge试验和乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验初筛金属酶,用双纸片法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBL),用头孢西丁三维试验检测Amp C酶。采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验对所有经改良Hodge试验和EDTA协同试验初筛得到的阳性表型结果行进一步检测,采用聚合酶链反应(PCR)检测菌株的blaKPC、blaNDM、blaCTX-M、blaTEM、blaSHV基因,并测序。结果204株CRE对常用抗菌药物的耐药率从高到低依次为氨苄西林-舒巴坦(99.4%)、头孢吡肟(95.6%)、厄他培南(94.8%)、头孢替坦(93.8%)、哌拉西林-他唑巴坦(90.6%)、亚胺培南(89.4%)、环丙沙星(83.6%)、左氧氟沙星(80.8%)、呋喃妥因(68.8%)、复方磺胺甲噁唑(53.5%)、庆大霉素(51.4%)、妥布霉素(47.5%)、阿米卡星(37.8%)。有158株(77.45%)CRE产碳青霉烯酶,其中KPC型144株、NDM型25株。25株blaNDM阳性CRE中,有11株同时携带blaKPC-2,有14株同时携带blaTEM,有10株同时携带blaSHV,有3株同时携带5种耐药基因。blaNDM阳性菌株中存在blaNDM-1、blaNDM-4、blaNDM-5共3种亚型。结论CRE耐药基因型复杂,临床微生物实验室应持续跟踪监测CRE耐药表型和基因型,根据实际情况制定用药方案。 展开更多
关键词 碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌 新德里金属β-内酰胺酶 超广谱Β-内酰胺酶 基因型 耐药性
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111例早期胚胎停育患者绒毛染色体测序分析 被引量：3
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作者 白小青 白微 +1 位作者 周林双 蔡文品 《重庆医学》 CAS 2020年第21期3634-3637,共4页
目的探讨胚胎停育患者绒毛组织染色体拷贝数变异分布情况及其可能的影响因素。方法选择该院2018年4月至2019年10月111例确诊为胚胎停育患者的流产绒毛组织,进行高通量测序,统计总异常率、染色体数目异常率、拷贝数变异异常率,同时比较... 目的探讨胚胎停育患者绒毛组织染色体拷贝数变异分布情况及其可能的影响因素。方法选择该院2018年4月至2019年10月111例确诊为胚胎停育患者的流产绒毛组织,进行高通量测序,统计总异常率、染色体数目异常率、拷贝数变异异常率,同时比较分析不同年龄(≥35、<35岁)组间染色体异常检测率的差异。结果111例胚胎停育患者中绒毛染色体正常33例(29.73%),染色体异常78例(70.27%)。78例染色体异常患者中数目异常64例(82.05%),其中染色体三体型有39例(60.94%),嵌合体有9例(14.06%),三倍体8例(12.50%),四倍体1例(1.56%),X染色体缺失6例(9.38%),三倍体且三体1例(1.56%);14例(17.95%)染色体结构异常患者中染色体缺失8例(57.14%),染色体重复1例(7.14%),染色体缺失且重复5例(35.71%)。<35岁组79例患者中染色体异常51例(64.56%),≥35岁组33例患者中染色体异常27例(81.82%),两组患者染色体异常率比较差异有统计学意义(χ^2=4.282,P<0.05)。结论孕妇染色体数目异常是早期胚胎停育的主要原因,高龄是胚胎染色体异常的高危因素。 展开更多
关键词 高通量测序 胚胎停止发育 绒毛 染色体畸变 拷贝数变异
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尿中邻苯二甲酸盐浓度与精液质量参数的相关性 被引量：1
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作者 周林双 单婷婷 蔡文品 《中国医师杂志》 CAS 2020年第3期412-415,共4页
目的探讨尿中邻苯二甲酸盐浓度与精液质量参数的相关性。方法选择本院就诊的112例不育症男性为不育症组,另择本院同期已生育的体检健康男性65例为对照组,采集所有受试者尿液及精液样本,采用全自动彩色精子质量检测系统检测精液质量参数... 目的探讨尿中邻苯二甲酸盐浓度与精液质量参数的相关性。方法选择本院就诊的112例不育症男性为不育症组,另择本院同期已生育的体检健康男性65例为对照组,采集所有受试者尿液及精液样本,采用全自动彩色精子质量检测系统检测精液质量参数,应用高效液相色谱法测定尿液中邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二异辛脂(DEHP)浓度,并采用spearman相关系数分析4种邻苯二甲酸盐浓度与精液质量参数的相关性。结果不育症组尿中DMP、DEP、DBP、DEHP及总邻苯二甲酸盐浓度均明显高于对照组(P<0.05);不育症组精子密度、精子存活率及a+b级精子、前向运动比率均明显低于对照组(P<0.05),而畸形精子比率明显高于对照组(P<0.05);尿中DMP、DEP、DBP、DEHP浓度与精子密度、精子存活率及a+b级精子、前向运动比率均呈负相关(P<0.05),与畸形精子比率呈正相关(P<0.05)。结论不育症男性尿液中邻苯二甲酸盐浓度偏高,其浓度与精液质量呈负相关,邻苯二甲酸盐蓄积可能是男性不育的重要原因之一。 展开更多
关键词 尿分析 领苯二甲酸盐 精液分析 不育 男性
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慢病毒介导shRNA特异性干扰MRPL18基因对胰岛素瘤细胞线粒体能量代谢的影响
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作者 施孟如 陈琳 +3 位作者 周林双 杨宇 吕建新 李伟 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1389-1396,共8页
为了观察线粒体核糖体蛋白大亚基18(mitochondrial ribosomal proteins L18,MRPL18)基因低表达对小鼠胰岛素瘤细胞(MIN6)线粒体能量代谢的影响,该研究利用慢病毒介导的MRPL18 shRNA特异性干扰MRPL18基因,构建MRPL18基因低表达的MIN6细... 为了观察线粒体核糖体蛋白大亚基18(mitochondrial ribosomal proteins L18,MRPL18)基因低表达对小鼠胰岛素瘤细胞(MIN6)线粒体能量代谢的影响,该研究利用慢病毒介导的MRPL18 shRNA特异性干扰MRPL18基因,构建MRPL18基因低表达的MIN6细胞模型。Real-time PCR和Western blot检测干扰前后MRPL18 mRNA和蛋白质的表达情况。流式细胞仪检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平变化。海马生物能量代谢仪检测细胞线粒体功能。高效液相色谱检测细胞ATP、ADP和AMP含量。结果显示:转染MRPL18-shRNA后,MRPL18 mRNA和蛋白质表达均显著降低(P<0.05、P<0.01),细胞ROS明显升高(P<0.05);细胞氧耗率、基础呼吸、最大呼吸和储备呼吸能力显著降低,同时ATP产量和质子漏也减少(P<0.05、P<0.01)。细胞ATP含量和能荷较对照组减少,ADP和AMP含量显著增加(P<0.05、P<0.01)。证实了MRPL18基因表达下调后细胞内发生了代谢障碍。推测MRPL18是影响线粒体功能的关键蛋白质,该蛋白在细胞代谢过程中发挥着重要作用。MRPL18表达下降所建立的线粒体功能障碍的MIN6细胞模型,可用于线粒体糖尿病发病分子机制的研究。 展开更多
关键词 线粒体核糖体蛋白大亚基18 慢病毒 RNA干扰 线粒体能量代谢 糖尿病
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