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鼠疫耶尔森菌基因组进化与生态位适应研究 被引量：77
1
作者 周冬生 韩延平 +18 位作者 宋亚军 童宗中 裴德翠 戴二黑 张玲 包静月 李敏 崔百忠 张秀清 王津 郭兆彪 祁芝珍 金丽霞 翟俊辉 杜宗敏 王效义 汪建 黄培堂 杨瑞馥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期204-210,共7页
目的　探索鼠疫耶尔森菌基因组进化的基本规律及其与该菌在自然界适应性演化之间的内在联系。方法　对 36株鼠疫耶尔森菌和 7株假结核耶尔森菌进行芯片比较基因组分析 ,鉴定差异区段 (DFR) ,并对 2 6 0株鼠疫耶尔森菌进行PCR验证 ,分析... 目的　探索鼠疫耶尔森菌基因组进化的基本规律及其与该菌在自然界适应性演化之间的内在联系。方法　对 36株鼠疫耶尔森菌和 7株假结核耶尔森菌进行芯片比较基因组分析 ,鉴定差异区段 (DFR) ,并对 2 6 0株鼠疫耶尔森菌进行PCR验证 ,分析各DFR在这些鼠疫耶尔森菌中的分布 ,同时进行基因组岛分析。结果　在鼠疫耶尔森菌基因组中鉴定出 2 2个DFR ,基于DFR图谱 ,将鼠疫耶尔森菌中国分离株分成 14个基因组型。鼠疫耶尔森菌共有 2 1个基因组岛 ,其中 18个已存在于假结核杆菌中 ,余下 3个为鼠疫耶尔森菌独有。结论　探明了各基因组岛在鼠疫耶尔森菌和假结核耶尔森菌间的差异分布 ,探究了鼠疫耶尔森菌的起源进化 ;建立了鼠疫耶尔森菌基因组分型系统 ;建立了各基因组型别间的系统发育关系 ,初步揭示了鼠疫耶尔森菌基因组的进化规律及其与鼠疫耶尔森菌生态位适应和鼠疫疫源地扩展之间的关系 。 展开更多
关键词 耶尔森氏菌 鼠疫 DNA芯片 基因组进化 生态位适应
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鼠疫耶尔森菌菌株91001全基因组序列测定及初步分析 被引量：40
2
作者 宋亚军 童宗中 +26 位作者 王津 郭兆彪 汪莉 韩延平 张建国 裴德翠 周冬生 秦海鸥 庞昕 韩玉军 翟俊辉 李敏 祁芝珍 金丽霞 戴瑞霞 崔百忠 陈峰 李胜霆 叶辰 杜宗敏 王效义 王俊 于军 杨焕明 汪建 黄培堂 杨瑞馥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期192-199,共8页
目的　测定对人不致病的鼠疫耶尔森菌布氏田鼠疫源地菌株 910 0 1的全基因组序列 ,并通过比较基因组学研究 ,探索鼠疫耶尔森菌致病性的遗传学机制和进化路线。方法　采用全基因组鸟枪法测定 910 0 1菌株的全基因组序列 ,利用比较基因组... 目的　测定对人不致病的鼠疫耶尔森菌布氏田鼠疫源地菌株 910 0 1的全基因组序列 ,并通过比较基因组学研究 ,探索鼠疫耶尔森菌致病性的遗传学机制和进化路线。方法　采用全基因组鸟枪法测定 910 0 1菌株的全基因组序列 ,利用比较基因组方法对 910 0 1与另外 2株鼠疫耶尔森菌(CO92和KIM)的全基因组进行比较研究。结果　910 0 1菌株的基因组包括 1条染色体和 4个质粒 (pPCP1、pCD1、pMT1和pCRY)。pPCP1质粒长度为 96 0 9bp,与参考菌株基本一致 ;pCD1质粒是编码Ⅲ型分泌系统的质粒 ,长度为70 15 9bp,编码情况与参考菌株基本相同 ,但重排导致了质粒的结构与参考菌株存在差异 ;pMT1质粒长度为10 6 6 4 2bp,保留了较多的原始质粒片段 ,毒力相关基因与参考菌株没有差异 ;pCRY质粒是本研究中新发现的质粒 ,在国内外研究中未曾报道 ,这一质粒长度为2 174 2bp ,具有独立复制能力 ,有一群编码Ⅳ型分泌系统的基因。 910 0 1菌株的染色体长度为4 5 95 0 6 5bp,有 4 0 37个编码序列 (CDS) ,其中 14 1个是假基因 ;染色体中存在着非常丰富的插入序列 ,由于存在IS序列介导的基因组重排 ,910 0 1菌株染色体的结构与参考菌株存在较大差异。通过比较基因组学分析 ,初步确定了910 0 1菌株甘油降解阳性、硝酸盐还原阴性、阿拉? 展开更多
关键词 耶尔森氏菌 鼠疫 基因组 进化 序列分析 DNA
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空载变压器油箱表面振动信号的初步研究 被引量：26
3
作者 汲胜昌 周冬生 +2 位作者 陈锦 李彦明 孙强 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第8期30-32,共3页
利用变压器振动测量系统测取了空载变压器油箱表面的振动信号 ,根据对铁心振动信号特征、不同位置处振动信号的差异的研究提出了运用振动信号分析法在线监测变压器铁心时 ,同时分析三相振动信号及与各自的历史振动数据相比较的方法。
关键词 变压器 油箱表面 空载 铁心 振动
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鼠疫耶尔森菌生物型变异遗传基础的研究和新生物型——田鼠型的提出 被引量：24
4
作者 周冬生 童宗中 +16 位作者 宋亚军 张玲 裴德翠 庞昕 韩延平 李敏 崔百忠 王津 郭兆彪 祁芝珍 金丽霞 翟俊辉 杜宗敏 王效义 汪建 黄培堂 杨瑞馥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期211-215,共5页
目的　探究鼠疫耶尔森菌生物型变异的遗传基础。方法　通过全基因组序列的比较分析 ,鉴定可能与生物型变异相关的基因突变 ,采用DNA测序和位点特异性PCR的方法 ,分析基因突变在鼠疫耶尔森菌自然分离株中的分布。结果　田鼠鼠疫自然疫源... 目的　探究鼠疫耶尔森菌生物型变异的遗传基础。方法　通过全基因组序列的比较分析 ,鉴定可能与生物型变异相关的基因突变 ,采用DNA测序和位点特异性PCR的方法 ,分析基因突变在鼠疫耶尔森菌自然分离株中的分布。结果　田鼠鼠疫自然疫源地菌株在毒力、生化表型和分子特征上与其他型别鼠疫耶尔森菌相差很大。所有脱氮阴性菌株的napA基因发生了突变 ,所有甘油利用阴性菌株的 glpD基因发生了突变 ,所有阿拉伯糖利用阴性菌株的araC基因发生了突变。结论　提出了一个新的生物型———田鼠型 ;相应糖醇代谢相关基因发生突变是 4个生物型变异的遗传基础。 展开更多
关键词 耶尔森氏菌 鼠疫 生物型 突变
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鼠疫耶尔森菌全基因组DNA芯片的研制及用于比较基因组学分析 被引量：21
5
作者 周冬生 韩延平 +17 位作者 戴二黑 宋亚军 包静月 裴德翠 李敏 崔百忠 张秀清 童宗中 王津 郭兆彪 祁芝珍 金丽霞 翟俊辉 杜宗敏 王效义 汪建 黄培堂 杨瑞馥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期200-203,共4页
目的　研制鼠疫耶尔森菌全基因组DNA芯片 ,并将其用于比较基因组分析。方法　挑选出 4 0 0 5条鼠疫耶尔森菌基因 ,PCR扩增各基因 ,以纯化的PCR产物点样制备芯片 ,采用双色荧光杂交策略 ,进行芯片比较基因组杂交。结果　设计了若干质控... 目的　研制鼠疫耶尔森菌全基因组DNA芯片 ,并将其用于比较基因组分析。方法　挑选出 4 0 0 5条鼠疫耶尔森菌基因 ,PCR扩增各基因 ,以纯化的PCR产物点样制备芯片 ,采用双色荧光杂交策略 ,进行芯片比较基因组杂交。结果　设计了若干质控杂交组合 ,芯片杂交结果与全基因组测序结果完全一致。 展开更多
关键词 耶尔森氏菌 鼠疫 DNA芯片 比较基因组学
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鼠疫菌H-NS蛋白的表达与纯化及其DNA结合活性分析 被引量：19
6
作者 张义全 高鹤 +5 位作者 王丽 罗张 谭亚芳 郭兆彪 杨瑞馥 周冬生 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期615-621,共7页
【目的】利用大肠杆菌BL21λDE3的表达系统,表达出有活性的鼠疫耶尔森氏菌(以下简称鼠疫菌)调控子蛋白H-NS,为进一步研究H-NS的转录调控奠定基础。【方法】PCR扩增鼠疫菌201株hns基因的编码区,将其直接克隆入pET28a质粒中,再将pET28a-hn... 【目的】利用大肠杆菌BL21λDE3的表达系统,表达出有活性的鼠疫耶尔森氏菌(以下简称鼠疫菌)调控子蛋白H-NS,为进一步研究H-NS的转录调控奠定基础。【方法】PCR扩增鼠疫菌201株hns基因的编码区,将其直接克隆入pET28a质粒中,再将pET28a-hns重组质粒转入大肠杆菌BL21λDE3菌株中,所得菌株经IPTG诱导后能表达出鼠疫菌His-H-NS蛋白;通过体外的凝胶迁移实验(EMSA)和DNaseⅠ足迹实验对His-H-NS蛋白与DNA的结合活性进行分析。【结果】成功表达出有活性的鼠疫菌His-H-NS蛋白,该蛋白对鼠疫菌pH6抗原基因(psaA、psaE)及rovA基因均有结合活性。【结论】鼠疫菌His-H-NS具有DNA结合活性,说明H-NS能调控鼠疫菌基因的转录。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森氏菌 H-NS DNA结合活性
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鼠疫研究进展与展望 被引量：17
7
作者 周冬生 杨瑞馥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1176-1182,共7页
鼠疫是一种极其烈性的人畜共患传染病,其自然疫源地广泛分布于世界各地。近20年来鼠疫的动物与人间疫情有所加重,世界卫生组织已将其列为重新抬头的传染病。鼠疫菌是传统的生物战剂,也是潜在的生物恐怖剂。鼠疫研究中主要有四个关键的... 鼠疫是一种极其烈性的人畜共患传染病,其自然疫源地广泛分布于世界各地。近20年来鼠疫的动物与人间疫情有所加重,世界卫生组织已将其列为重新抬头的传染病。鼠疫菌是传统的生物战剂,也是潜在的生物恐怖剂。鼠疫研究中主要有四个关键的科学问题:鼠疫菌的遗传多态性与微进化;鼠疫菌的致病与传播机制;鼠疫疫苗;鼠疫自然保存机制。本文就这些关键科学问题的研究进展与展望进行了论述。 展开更多
关键词 鼠疫 耶尔森菌 鼠疫 鼠疫菌苗
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施肥量和环境温度对转Bt基因棉抗虫性的影响 被引量：16
8
作者 周冬生 吴振廷 +3 位作者 王学林 倪春耕 郑厚今 夏静 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2000年第4期352-357,共6页
以从美国引进的转 Bt基因棉“保铃棉 32 B”为参考 ,比较鉴定我国自行研制的第一个转 Bt基因棉品种“国抗棉 1号”对棉铃虫的抗性 ,研究温度和肥料等因素对抗虫性的影响。结果表明 :“国抗棉 1号”抗虫性低于“保铃棉 32 B”,抗性等级... 以从美国引进的转 Bt基因棉“保铃棉 32 B”为参考 ,比较鉴定我国自行研制的第一个转 Bt基因棉品种“国抗棉 1号”对棉铃虫的抗性 ,研究温度和肥料等因素对抗虫性的影响。结果表明 :“国抗棉 1号”抗虫性低于“保铃棉 32 B”,抗性等级分别评价为“抗”和“高抗”;随着施肥量的增加 ,转 Bt基因棉对低龄棉铃虫幼虫的抗虫活性和抑制生长作用增强 ,低肥时抗虫性降低严重 ;随温度升高 ,转 Bt基因棉对低龄棉铃虫幼虫的抗虫活性增强 ,低温 ( 1 6℃ )下抗虫活性明显降低 ,但随处理时间的推进 ,高温 ( 36℃ )下迅速生长至高龄的棉铃虫幼虫 ,强迫取食转 B t基因棉 。 展开更多
关键词 转BT基因棉 棉铃虫 温度 肥料 抗虫性
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土壤胁迫与温度对转Bt基因棉抗虫性的影响 被引量：13
9
作者 周冬生 吴振廷 +2 位作者 王学林 郑厚今 夏静 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2001年第5期290-292,共3页
土壤水分过多和过少均不利于转 Bt基因棉杀虫蛋白的表达 ,土壤涝渍可造成转 Bt基因棉抗虫性的显著下降 ,而土壤干旱的影响则相对较小。低温 ( 1 8℃ )不仅可明显降低转 Bt基因棉抗虫基因的表达活性 ,亦可明显降低已表达于棉株中的杀虫... 土壤水分过多和过少均不利于转 Bt基因棉杀虫蛋白的表达 ,土壤涝渍可造成转 Bt基因棉抗虫性的显著下降 ,而土壤干旱的影响则相对较小。低温 ( 1 8℃ )不仅可明显降低转 Bt基因棉抗虫基因的表达活性 ,亦可明显降低已表达于棉株中的杀虫蛋白的抗虫活性。高温 ( 3 8℃ )亦可降低转 Bt基因棉抗虫基因的表达活性 ,但较低温的影响则相对较小 ;高温下已表达于棉株中的杀虫蛋白对低龄棉铃虫幼虫的抗虫活性明显增强。因此 ,应加强转 Bt基因棉田的水肥管理 ,保证转 Bt基因棉抗虫性的高效表达 ,重视各种异常天气后转 Bt基因棉田间的虫量监测 。 展开更多
关键词 土壤 温度 转BT基因棉 棉铃虫 棉花 抗虫性
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细菌基因组进化的分子策略 被引量：13
10
作者 周冬生 杨瑞馥 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期34-41,共8页
论述了细菌基因组进化的 4个分子策略 :点突变 ,基因组内重排 ,基因水平转移 ,基因缺失。从经典的达尔文进化论角度探讨了细菌基因组进化与表型进化的关系。
关键词 细菌 基因组进化 表型进化 点突变 基因组内重排 基因水平转移 基因缺失
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鼠疫耶尔森菌DNA标识序列的鉴定及其应用研究 被引量：16
11
作者 韩延平 周冬生 +16 位作者 宋亚军 裴德翠 李敏 崔百忠 包静月 张秀清 童宗中 王津 郭兆彪 祁芝珍 金丽霞 翟俊辉 杜宗敏 王效义 汪建 黄培堂 杨瑞馥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期307-309,共3页
目的　确定鼠疫耶尔森菌DNA标识序列 ,以用于鼠疫耶尔森菌的快速检测和鉴定。方法　通过芯片比较基因组杂交和PCR验证 ,鉴定鼠疫耶尔森菌DNA标识序列 ,针对标识序列设计特定的PCR引物。结果　鼠疫耶尔森菌基因组中存在 3个区段 ,共 2 8... 目的　确定鼠疫耶尔森菌DNA标识序列 ,以用于鼠疫耶尔森菌的快速检测和鉴定。方法　通过芯片比较基因组杂交和PCR验证 ,鉴定鼠疫耶尔森菌DNA标识序列 ,针对标识序列设计特定的PCR引物。结果　鼠疫耶尔森菌基因组中存在 3个区段 ,共 2 8条基因 ,均是鼠疫耶尔森菌DNA标识序列。针对其中 3条基因设计PCR引物 ,能特异性扩增出鼠疫耶尔森菌 ,与来自其他非鼠疫耶尔森菌的DNA无交叉反应。结论　鼠疫耶尔森菌存在DNA标识序列 ,并能用于鼠疫耶尔森菌的快速检测与鉴定。 展开更多
关键词 耶尔森氏菌 鼠疫 DNA芯片 标识序列
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副溶血性弧菌基因敲除方法的建立及应用 被引量：16
12
作者 刘霞 高鹤 +6 位作者 杨琳 张义全 谭亚芳 郭兆彪 黄新祥 杨瑞馥 周冬生 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第3期188-192,276,共6页
目的摸索出一套副溶血性弧菌基因敲除的可靠方案,副溶血性弧菌致病相关基因的敲除对深入研究其致病机制有重要意义。方法通过融合PCR技术将目的基因上下游同源臂融合并克隆到自杀载体pDS132上,将重组质粒转化大肠杆菌S17λpir中,再接合... 目的摸索出一套副溶血性弧菌基因敲除的可靠方案,副溶血性弧菌致病相关基因的敲除对深入研究其致病机制有重要意义。方法通过融合PCR技术将目的基因上下游同源臂融合并克隆到自杀载体pDS132上,将重组质粒转化大肠杆菌S17λpir中,再接合转移到副溶血性弧菌菌株内,经pDS132质粒上sacB基因的反向筛选得到突变株。结果成功构建了副溶血性弧菌RIMD2210633菌株ΔopaR,ΔtoxR和ΔaphA三个基因突变株。结论通过自杀载体同源重组成功获得精确敲除的无痕突变株更有利于基因功能的研究,使后续副溶血性弧菌突变株与野生株的对比研究成为可能。 展开更多
关键词 自杀载体 同源重组 无痕突变
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生长前期转Bt基因棉对棉铃虫(Helicoverpa armigera Hübner)的抗性研究 被引量：13
13
作者 周冬生 吴振廷 +2 位作者 王学林 郑厚今 夏静 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期174-176,共3页
生长前期转 Bt基因棉对低龄棉铃虫幼虫具较强的抗性 ,子叶期抗性最强 ,真叶后下降 ,随后逐渐上升 ,至 1 0叶期达顶点 ,之后又开始下降 ;沿江棉区一代棉铃虫幼虫发生期 ,正处于 Bt基因棉的生长前期 ,转 Bt基因棉对 1龄和 2龄幼虫在较短... 生长前期转 Bt基因棉对低龄棉铃虫幼虫具较强的抗性 ,子叶期抗性最强 ,真叶后下降 ,随后逐渐上升 ,至 1 0叶期达顶点 ,之后又开始下降 ;沿江棉区一代棉铃虫幼虫发生期 ,正处于 Bt基因棉的生长前期 ,转 Bt基因棉对 1龄和 2龄幼虫在较短的时间内即表现出较强的抗虫效果 ,对 3龄和4龄幼虫抗虫效果明显下降 ,但连续取食后全部不能存活 ,对 5龄幼虫抗虫效果较差 ,连续取食后可部分化蛹但化蛹率明显低于对照。同时测定了降雨对生长前期转 展开更多
关键词 转BT基因棉 生长前期 棉铃虫 抗虫性 降雨
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荧光定量PCR快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究 被引量：13
14
作者 张玲 翟俊辉 +3 位作者 周冬生 郭兆彪 王津 杨瑞馥 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期976-980,共5页
目的利用LightCycler建立一种简便、特异的实时荧光定量PCR检测方法,用于炭疽芽孢杆菌的快速检测。方法采用SYBR GreenⅠ随机掺入法,利用本实验室建立的实时荧光定量PCR反应体系,根据炭疽芽孢杆菌荚膜和水肿因子设计引物,同时检测两个... 目的利用LightCycler建立一种简便、特异的实时荧光定量PCR检测方法,用于炭疽芽孢杆菌的快速检测。方法采用SYBR GreenⅠ随机掺入法,利用本实验室建立的实时荧光定量PCR反应体系,根据炭疽芽孢杆菌荚膜和水肿因子设计引物,同时检测两个毒力相关质粒的存在,检测其灵敏度和特异性,并以盲测试验进行验证;在此基础上鉴定14株炭疽芽孢杆菌,并测试该法检测土壤模拟污染标本的灵敏度,实验中设置内对照以排除假阴性结果的存在。结果炭疽杆菌基因组DNA的检测灵敏度可达每反应体系0.53pg,两个克隆株提取质粒的检测限分别为每反应体系12拷贝、140拷贝;检测14株炭疽芽孢杆菌及29株非炭疽芽孢杆菌的PCR扩增结果表明,炭疽芽孢菌DNA均出现特异的扩增结果,29株对照菌的DNA均为阴性;土壤模拟污染标本检测灵敏度可达每反应体系36个芽孢;20次重复实验结果表明其平均值与标准差为14.602±0.640。结论该方法检测炭疽芽孢杆菌具有简便、快捷、灵敏度高和特异性好的特点,为临床诊断、环境监测、卫生防疫等方面,快速检出炭疽芽孢杆菌提供了有利的手段。 展开更多
关键词 炭疽芽孢杆菌 荧光定量PCR 荚膜因子 水肿因子 LIGHTCYCLER
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基因芯片技术及其在植物病害研究中的应用 被引量：11
15
作者 李淼 檀根甲 +4 位作者 周冬生 丁克坚 张成林 高智谋 吴芳芳 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期5-9,共5页
基因芯片即DNA系列 (DNAmicroarray) ,主要包括cDNA微列阵与寡聚核苷酸微列阵两种类型。基因芯片技术即DNA微列阵技术是近年来在生命科学技术领域中 ,迅速发展起来的一项探索基因组功能的高新技术。本文简要综述了基因芯片、表达谱芯片... 基因芯片即DNA系列 (DNAmicroarray) ,主要包括cDNA微列阵与寡聚核苷酸微列阵两种类型。基因芯片技术即DNA微列阵技术是近年来在生命科学技术领域中 ,迅速发展起来的一项探索基因组功能的高新技术。本文简要综述了基因芯片、表达谱芯片技术的概念、原理、分类和制作方法 。 展开更多
关键词 基因芯片 植物 病害 应用 基因工程 生物芯片 表达谱芯片
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中国鼠疫自然疫源地的演化动态及环境生态位的生物学特征 被引量：15
16
作者 许磊 方喜业 +3 位作者 周冬生 崔玉军 叶财德 刘起勇 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2015年第3期228-232,共5页
目的研究中国鼠疫自然疫源地的形成、起源、演化动态与环境生态位生物学基本规律,揭示中国鼠疫自然疫源地的形成环境,确定中国鼠疫自然疫源地的起源、演化动态标准。方法采用之前研究中提出的中国鼠疫自然疫源地分型方法,综合研究中国... 目的研究中国鼠疫自然疫源地的形成、起源、演化动态与环境生态位生物学基本规律,揭示中国鼠疫自然疫源地的形成环境,确定中国鼠疫自然疫源地的起源、演化动态标准。方法采用之前研究中提出的中国鼠疫自然疫源地分型方法,综合研究中国鼠疫生态地理景观型分型法、中国鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)基因组型分型法、鼠疫菌生物型分型法和中国鼠疫主要宿主、主要媒介的物种分类和地理空间分布。结果综合上述鼠疫自然疫源地中的多因子,提出中国鼠疫自然疫源地演化动态的理论结果,中国鼠疫自然疫源地最早起源于天山森林草原灰旱獭、长尾黄鼠鼠疫自然疫源地型。中国鼠疫自然疫源地型均起源于该疫源地型。结论中国鼠疫自然疫源地最早起源于天山灰旱獭、长尾黄鼠森林草原鼠疫自然疫源地。 展开更多
关键词 鼠疫自然疫源地的形成 演化动态 环境生态位
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应用抑制削减杂交技术进行鼠疫耶尔森菌的比较基因组研究 被引量：14
17
作者 戴二黑 童宗中 +9 位作者 王效义 周冬生 张建国 李蓓 杨俊兴 陈泽良 宋亚军 郭兆彪 王津 杨瑞馥 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期179-182,共4页
目的　确定古典型鼠疫耶尔森菌的特有序列 ,为建立和完善该菌基因组分型系统提供可靠数据。方法　通过抑制削减杂交技术发现差异片段并应用PCR验证。结果　发现了 5个在不同生物型鼠疫菌间存在差异的DNA片段 ,其中一个 383bp的片段在来... 目的　确定古典型鼠疫耶尔森菌的特有序列 ,为建立和完善该菌基因组分型系统提供可靠数据。方法　通过抑制削减杂交技术发现差异片段并应用PCR验证。结果　发现了 5个在不同生物型鼠疫菌间存在差异的DNA片段 ,其中一个 383bp的片段在来自天山山地灰旱獭、长尾黄鼠鼠疫自然疫源地的 30株鼠疫菌全部阳性 ,而来自其它鼠疫自然疫源地的菌株全部阴性 ,5株假结核耶尔森菌中有 2株 (生物Ⅰ型和Ⅱ型 )阳性。结论　该 383bp片段为天山山地灰旱獭、长尾黄鼠鼠疫自然疫源地的鼠疫菌所特有 ,此疫源地的菌株可能是我国较古老的鼠疫菌。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 杂交技术 基因组研究 抑制 鼠疫自然疫源地 假结核耶尔森菌 长尾黄鼠 DNA片段 鼠疫菌 灰旱獭 PCR 生物型 山地 阳性 菌株
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转Bt基因棉的抗棉铃虫性及其生理作用研究进展 被引量：10
18
作者 周冬生 吴振延 +1 位作者 王学林 郑厚今 《安徽农业科学》 CAS 2000年第1期65-69,共5页
综述了转Bt基因棉对棉铃虫存活、生长、繁殖及为害行为的影响 ,及其抗虫性的时空动态特征 ;探讨了转Bt基因棉抗棉铃虫的毒理及其中毒生理 ,以及转Bt基因棉的抗性表达及其影响因素 。
关键词 转BT基因棉 棉玲虫 抗虫性 抗性表达 中毒生理
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荧光定量PCR快速检测鼠疫耶尔森氏菌的实验研究 被引量：13
19
作者 张玲 翟俊辉 +4 位作者 周冬生 郭兆彪 毕玉晶 王津 杨瑞馥 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期206-209,共4页
目的　利用LightCycler建立一种简便、特异的荧光定量PCR检测方法 ,用于鼠疫耶尔森氏菌的快速检测。 方法　采用SYBRGreenI随机掺入法 ,以Roche试剂盒为标准 ,比较两公司的DNA聚合酶 ,用鼠疫菌 310 0 4建立荧光PCR反应体系 ;针对鼠疫耶... 目的　利用LightCycler建立一种简便、特异的荧光定量PCR检测方法 ,用于鼠疫耶尔森氏菌的快速检测。 方法　采用SYBRGreenI随机掺入法 ,以Roche试剂盒为标准 ,比较两公司的DNA聚合酶 ,用鼠疫菌 310 0 4建立荧光PCR反应体系 ;针对鼠疫耶尔森氏菌特异的染色体标识序列和质粒上F1抗原基因设计引物 ,检测其灵敏度和特异性 ,以盲测试验进行验证 ;在此基础上鉴定 2 75株鼠疫耶尔森氏菌 ,并测试该法检测脏器污染模拟标本的灵敏度。结果　建立以一个公司试剂为主较低成本的PCR反应体系 ;EV76的检测灵敏度可达每反应体系 1.6个菌 ;检测我国 18个生态型共计 2 75株鼠疫耶尔森氏菌及 2 8株非鼠疫菌株的PCR扩增结果表明 ,鼠疫菌株均出现特异的扩增结果 ,2 8株对照菌株均为阴性 ;肝、脾、肺模拟标本检测灵敏度可达每反应体系 4 0 0 0个菌。结论　该方法对于检测鼠疫耶尔森氏菌具有简便、快捷、高敏感性和特异性的特点 。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森氏菌 荧光定量PCR 标识序列 LightCycler
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中国鼠疫自然疫源地分型研究Ⅶ．中国鼠疫自然疫源地分型生物学特征 被引量：13
20
作者 方喜业 杨瑞馥 +13 位作者 许磊 刘起勇 董兴齐 张荣祖 于心 秦长育 龚正达 周冬生 崔玉军 李艳君 叶瑞玉 鲁亮 张金桐 李贵昌 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1144-1150,共7页
目的研究中国鼠疫自然疫源地分型。方法根据中国鼠疫自然疫源地鼠疫生态地理景观学、鼠疫耶尔森菌基因组学、鼠疫宿主动物学、鼠疫媒介昆虫学特征，提出“鼠疫生物地理群落指征、两级分型法和三项指征命名法”；区划中国鼠疫自然疫源地... 目的研究中国鼠疫自然疫源地分型。方法根据中国鼠疫自然疫源地鼠疫生态地理景观学、鼠疫耶尔森菌基因组学、鼠疫宿主动物学、鼠疫媒介昆虫学特征，提出“鼠疫生物地理群落指征、两级分型法和三项指征命名法”；区划中国鼠疫自然疫源地型及其亚型。结果中国鼠疫自然疫源地分为12型19亚型。阐明中国鼠疫自然疫源地生物学特征。结论中国鼠疫自然疫源地型及其亚型的划分，为掌握其生物学基本规律奠定基础。 展开更多
关键词 鼠疫自然疫源地 鼠疫生态地理景观学 鼠疫耶尔森菌基因组学 鼠疫宿主动物学 鼠疫媒介昆虫学
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