黄芪甲苷促进缺氧损伤后人主动脉内皮细胞血管新生的研究 被引量：19

1

作者 卢飞艳 丁燕子 +3 位作者 陈相健 卞智萍 吴恒芳 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1124-1129,共6页

目的:研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧损伤后人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)的保护作用及对血管生成的影响及可能机制。方法:体外培养HAECs,8%O2制备缺氧模型,实验分为对照组、缺氧组、AS-Ⅳ治疗组... 目的:研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧损伤后人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)的保护作用及对血管生成的影响及可能机制。方法:体外培养HAECs,8%O2制备缺氧模型,实验分为对照组、缺氧组、AS-Ⅳ治疗组,50μg/mL)。观察AS-IV对缺氧损伤后HAECs的保护作用及对细胞迁移能力、增殖活性和体外成环的影响以及自噬在血管生成过程中的作用。结果:缺氧损伤后与对照组比较,HAECs细胞上清释放的损伤标志物乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)浓度增加[(25.33±1.70)U/L vs.(5.33±1.25)U/L],细胞活力降低[(81.12±0.72)%vs.(100±3.07)%],细胞迁移能力降低,增殖能力降低,体外成环数下降[(30.91±3.78)个vs.(62.10±7.56)个],自噬相关蛋白Beclin及LC3-Ⅱ表达下调(P<0.05)。加入AS-Ⅳ治疗后,与缺氧组比较,细胞上清LDH释放量减少[(18.33±1.25)U/L],细胞活力提高[(85.71±2.48)%],细胞迁移能力增强、增殖活性增加,基质胶体外成环数增加[(48.64±4.80)个],自噬相关蛋白Beclin及LC3-Ⅱ表达上调(P<0.05)。结论:AS-Ⅳ可减轻缺氧对HAECs的损伤,可能通过激活自噬通路促进HAECs血管新生。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 人主动脉内皮细胞 缺氧 血管新生

下载PDF 职称材料

心肌肌钙蛋白Ⅰ与心力衰竭 被引量：13

2

作者 吴恒芳 张寄南 马文珠 《心血管病学进展》 CAS 2004年第3期181-184,共4页

心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌兴奋收缩耦联的主要调节蛋白 ,是肌肉舒缩的分子开关。因其具有高度的组织特异性及检测的敏感性 ,自二十世纪九十年代以来 ,已被作为诊断心肌损伤首选的血清标志物 ,并且在疾病的预后评估中具有重要价值。研... 心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌兴奋收缩耦联的主要调节蛋白 ,是肌肉舒缩的分子开关。因其具有高度的组织特异性及检测的敏感性 ,自二十世纪九十年代以来 ,已被作为诊断心肌损伤首选的血清标志物 ,并且在疾病的预后评估中具有重要价值。研究显示收缩蛋白的降解及磷酸化修饰可能在心肌细胞的损伤及功能下降中起重要作用 ,而到目前为止 ,对无症状性心功能不全 ,临床上还没有敏感的诊断方法 ,即使对于明显的心力衰竭患者 ,也缺乏一个判断其心肌损伤程度的指标 ,血清心肌肌钙蛋白I可能会成为一个比较理想的评价心力衰竭患者的指标。同时对肌纤维蛋白结构和功能的研究也为心脏疾病的诊治提供了新的信息 ,其中针对肌纤维设计新药就是一个值得开拓和有应用前景的领域。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白I 心力衰竭 调节蛋白 心肌细胞

下载PDF 职称材料

黄芪甲苷改善过氧化氢诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激损伤的研究 被引量：11

3

作者 陈宇琼 孙东岳 +3 位作者 吴恒芳 卞智萍 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第8期949-954,共6页

目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_... 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_2O_2损伤组细胞经H_2O_2(400μmol/L)持续损伤36 h,AS-Ⅳ治疗组细胞经H_2O_2损伤12 h后加入含50μg/m L AS-Ⅳ的培养基继续干预处理24 h。观察AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤及线粒体功能损伤的修复作用。结果:H_2O_2损伤后HAECs丙二醛(MDA)含量、NADPH氧化酶活性及线粒体活性氧(ROS)水平显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及线粒体膜电位显著降低;H_2O_2损伤的HAECs经AS-IV治疗后,HAECs的MDA含量、NADPH氧化酶活性及线粒体ROS含量明显降低,SOD和Mn-SOD活性及线粒体膜电位显著增高。结论:AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤具有保护作用,提高线粒体的抗氧化功能是其可能的机制之一。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 人主动脉内皮细胞 线粒体 过氧化氢

下载PDF 职称材料

黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体损伤的保护作用 被引量：10

4

作者 张少君 吴恒芳 +2 位作者 陈相健 杨笛 朱铁兵 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期889-893,共5页

目的:研究黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体损伤的保护作用。方法:采用两肾一夹制备肾血管性高血压大鼠,术后2周将大鼠随机分为手术组和黄芪甲苷治疗组[5.0 mg/(kg·d)],以假手术组为正常对照,治疗2周后,观察大鼠... 目的:研究黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体损伤的保护作用。方法:采用两肾一夹制备肾血管性高血压大鼠,术后2周将大鼠随机分为手术组和黄芪甲苷治疗组[5.0 mg/(kg·d)],以假手术组为正常对照,治疗2周后,观察大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体超微结构的变化,应用免疫组化染色法观察大鼠胸主动脉内皮细胞锰超氧化物歧化酶(SOD2)的表达。结果:术后2周大鼠收缩压明显高于正常对照大鼠。手术组大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体内嵴断裂、消失,基质电子密度降低,肿胀、空泡化明显;黄芪甲苷治疗后大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体损伤程度明显减轻。手术组大鼠胸主动脉内皮细胞SOD2表达水平较正常对照大鼠明显降低,黄芪甲苷治疗后恢复至正常大鼠水平。结论:黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体的损伤有保护作用,上调主动脉内皮细胞SOD2表达是其可能途径之一。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 肾血管性高血压大鼠 主动脉内皮细胞 线粒体 锰超氧化物歧化酶

下载PDF 职称材料

中国肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白I基因突变类型的研究 被引量：7

5

作者 万文辉 吴恒芳 +4 位作者 杨笛 卞智萍 徐晋丹 马文珠 张寄南 《中国临床康复》 CSCD 2003年第12期1806-1807,共2页

目的研究中国肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因突变类型。方法肥厚型心肌病患者58例,男36例,女22例,年龄10～77岁,平均(46±18)岁。正常对照100例,男60例,女40例,年龄10～68岁,平均(33±12)岁。聚合酶链反应(PCR)扩增... 目的研究中国肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因突变类型。方法肥厚型心肌病患者58例,男36例,女22例,年龄10～77岁,平均(46±18)岁。正常对照100例,男60例,女40例,年龄10～68岁,平均(33±12)岁。聚合酶链反应(PCR)扩增肥厚型心肌病患者及正常对照组cTnI基因5、7及8号外显子,结合单链构型多态性及直接测序法分析结果。结果未见国外已报道的cTnI基因突变类型(Pro82Ser,Arg145Gly,Arg145Gln,Arg162Trp,ΔAAG183,Asp196Asn,Gly203Ser,Ser199Asn,Lys206Gln,8号外显子缺失33bp),但在7号外显子发现一新的Arg145Trp突变。此外,在7号外显子尚见179位密码子GAG→GAA多态性。结论所研究的肥厚型心肌患者群未发现国外报道的cTnI基因突变类型。与国外比较,中国肥厚型心肌病cTnI基因突变类型可能具有不同的特点。 展开更多

关键词 中国 肥厚型心肌病 心肌肌钙蛋白Ⅰ 基因突变类型 聚合酶链反应

下载PDF 职称材料

一种新发现的肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白Ⅰ基因突变 被引量：7

6

作者 万文辉 吴恒芳 +2 位作者 杨笛 张寄南 马文珠 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1093-1094,共2页

关键词 肥厚型心肌病 心肌肌钙蛋白Ⅰ 基因突变 病理机制

原文传递

大鼠心肌肌钙蛋白I基因Lys184缺失突变重组腺病毒载体的构建 被引量：5

7

作者 万文辉 吴恒芳 +1 位作者 杨笛 张寄南 《医学研究生学报》 CAS 2008年第4期367-371,共5页

目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)赖氨酸(Lys)184缺失突变重组腺病毒载体。方法:利用PCR定点突变方法给大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突变,将扩增片段克隆至pMD18-T载体,在C末端用PCR法加6×组氨酸(His)标签序列后,再亚克隆至Aden... 目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)赖氨酸(Lys)184缺失突变重组腺病毒载体。方法:利用PCR定点突变方法给大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突变,将扩增片段克隆至pMD18-T载体,在C末端用PCR法加6×组氨酸(His)标签序列后,再亚克隆至Adeno-X腺病毒DNA,转染HEK 293细胞,包装形成重组腺病毒(Ad-cTnILys184del)。结果:PCR及测序结果表明,重组腺病毒序列正确,Western blot证明有融合突变蛋白表达。结论:本研究成功地构建了大鼠cTnI Lys184缺失突变重组腺病毒载体,为后续的功能研究提供了有价值的研究材料。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 定点突变 重组腺病毒

下载PDF 职称材料

黄芪甲苷联合依那普利治疗改善小鼠急性心肌梗死后心功能 被引量：5

8

作者 孙东岳 卢飞艳 +4 位作者 丁燕子 吴恒芳 卞智萍 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期945-949,1000,共6页

目的:探讨黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)联合依那普利治疗急性心肌梗死小鼠对心功能改善及其促血管新生的作用机制。方法:24只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术(Sham)组、对照(CTL)组、依那普利(Enalapril)组、黄芪甲苷+依... 目的:探讨黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)联合依那普利治疗急性心肌梗死小鼠对心功能改善及其促血管新生的作用机制。方法:24只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术(Sham)组、对照(CTL)组、依那普利(Enalapril)组、黄芪甲苷+依那普利(AS-Ⅳ+Enalapril)组,除Sham组外,对CTL组、Enalapril组、AS-Ⅳ+Enalapril组3组小鼠均行冠状动脉左前降支结扎术构建心梗模型。对Enalapril组(Enalapril 7.5 mg/kg)、AS-Ⅳ+Enalapril组(AS+Ⅳ 10 mg/kg+Enalapril 7.5 mg/kg)小鼠分别以对应药物进行治疗。2周后行超声检查测定心功能。以HE染色观察心脏病理改变。以CD31/VEGFR3免疫荧光染色观察各组血管密度及血管新生情况。结果:与CTL组相比,Enalapril组和AS-Ⅳ+Enalapril组小鼠心功能得到明显改善,且AS-Ⅳ+Enalapril组优于Enalapril组;CD31/VEGFR3双荧光染色显示,与CTL组相比,Enalapril组和AS-Ⅳ+Enalapril组小鼠梗死边缘区血管密度增高,新生血管比率增高,且AS-Ⅳ+Enalapril组优于Enalapril组。结论:黄芪甲苷联合依那普利可有效改善急性心肌梗死后小鼠的心功能,并可促进心肌梗死边缘区血管新生。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 依那普利 小鼠 急性心肌梗死

下载PDF 职称材料

黄芪甲苷逆转血管紧张素Ⅱ引起的主动脉平滑肌细胞线粒体功能障碍 被引量：5

9

作者 路遥 徐晋妉 +4 位作者 卞智萍 吴恒芳 顾春荣 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期975-980,共6页

目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)引起的线粒体功能障碍的逆转作用。方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),低血清培养液饥饿处理后分为24 h对照组、... 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)引起的线粒体功能障碍的逆转作用。方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),低血清培养液饥饿处理后分为24 h对照组、AngⅡ24 h处理组、48 h对照组、AngⅡ48 h处理组、As-Ⅳ治疗组。24 h对照组和AngⅡ24 h处理组使用线粒体呼吸功能检测仪进行线粒体呼吸功能检测,线粒体ATP含量检测;48 h对照组、AngⅡ48 h处理组和As-Ⅳ治疗组进行线粒体呼吸功能检测、线粒体ATP含量检测、电镜观察线粒体结构变化,共聚焦显微镜检测线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和Mn-SOD活性检测。结果:AngⅡ24 h处理组与24 h对照组相比,线粒体耗氧率(oxygen consumption rates,OCRs)出现下降,线粒体ATP含量减少(P≤0.05);AngⅡ48 h处理组与48 h对照组相比,线粒体OCRs显著下降,线粒体ATP含量明显减少(P<0.05),线粒体出现嵴模糊、肿胀、空泡,线粒体内ROS水平升高(P<0.05),Mn-SOD活性下降(P≤0.05);As-Ⅳ治疗组较AngⅡ48 h处理组线粒体OCRs和线粒体ATP含量明显回升(P<0.05),线粒体形态结构损伤减轻,线粒体内ROS水平降低(P<0.05),Mn-SOD活性升高(P≤0.05)。结论 :As-Ⅳ可以通过增强线粒体Mn-SOD活性,降低线粒体内ROS水平,进一步减轻线粒体结构损伤并提高线粒体OCRs和ATP含量,从而逆转AngⅡ引起的线粒体功能障碍。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 黄芪甲苷 线粒体功能障碍 活性氧 平滑肌细胞

下载PDF 职称材料

黄芪皂苷Ⅳ通过PKA途径减轻缺氧/复氧心肌损伤的机制研究 被引量：6

10

作者 张大伟 徐晋妉 +5 位作者 卞智萍 刘静 吴恒芳 顾春荣 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期30-34,共5页

目的:研究黄芪皂苷IV(astragaloside IV,As-IV)减轻缺氧/复氧所致心肌细胞损伤的机制。方法:胰酶多次消化法培养新生SD大鼠原代心肌细胞,建立缺氧/复氧模型,测定培养心肌细胞上清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(creatine kinase,CK-MB)含... 目的:研究黄芪皂苷IV(astragaloside IV,As-IV)减轻缺氧/复氧所致心肌细胞损伤的机制。方法:胰酶多次消化法培养新生SD大鼠原代心肌细胞,建立缺氧/复氧模型,测定培养心肌细胞上清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(creatine kinase,CK-MB)含量,检测心肌细胞肌浆网钙ATP酶(sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase,SERCA2a)活性、Real-Time PCR法测定PKA催化亚单位α(PKA C subunitα,PKA-Cα)基因的表达水平以及Western blot检测第16位丝氨酸磷酸化受磷蛋白(Ser16 phos-phorylated phospholamban,Ser16-PLN)的表达水平,同时以As-IV(30μmol/L)干预,观察其作用。结果:与正常组相比,缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)引起心肌细胞CK-MB释放增加,SERCA2a活性降低约35%、PKA-Cα基因表达下调28%以及Ser16-PLN表达下调51%,P值均﹤0.05,As-IV干预则可逆转上述变化,基本恢复至正常水平。结论:黄芪皂苷Ⅳ抑制缺氧/复氧所致心肌细胞损伤的机制可能是通过上调PKA-Cα基因表达,提高受磷蛋白(phosphorylated phospholamban,PLN)16位丝氨酸的磷酸化水平,解除PLN对SERCA2a的抑制,从而增强SERCA2a的功能。 展开更多

关键词 黄芪皂苷Ⅳ 心肌保护 肌浆网钙ATP酶 PKA 受磷蛋白

下载PDF 职称材料

心电图新指标在肥厚型心肌病诊断中的应用 被引量：2

11

作者 郝晶 周芳 +4 位作者 吴恒芳 张海峰 王晖 李新立 徐东杰 《临床心电学杂志》 2012年第6期411-414,共4页

目的分析肥厚型心肌病患者的心电学特征和常规肥厚指标,并拟选取新指标观察其敏感性和特异性,与常规指标的关联性及优越性。方法肥厚型心肌病(HCM)组105例与正常对照组65例,予以常规12导联心电图及超声心动图检查。结果 HCM组的心电常... 目的分析肥厚型心肌病患者的心电学特征和常规肥厚指标,并拟选取新指标观察其敏感性和特异性,与常规指标的关联性及优越性。方法肥厚型心肌病(HCM)组105例与正常对照组65例,予以常规12导联心电图及超声心动图检查。结果 HCM组的心电常规参数,临床异常特征比例及肥厚指标均比正常对照组高(p<0.01);方差分析:复极化异常中亚组之间均有明显差异;新指标RV3+SV1无梗阻性与梗阻性,心尖肥厚型均有统计学差异(p=0.017;p=0.038);ROC分析:当RV2+SV1取值2.0mV,敏感度56.2%,特异度90.8%,阳性预测值89.5%,阴性预测值56.3%;RV3+SV1取值2.48mV,敏感度57.1%,特异度92.3%,阳性预测值92.18%,阴性预测值56.19%。结论肥厚型心肌病较常人更易发生复极化异常和除极化异常,RV3/RV2+SV1优于所有传统肥厚指标,可作为一项较为特异性的诊断指标。 展开更多

关键词 肥厚型心肌病 心电图特征 左室肥厚

原文传递

肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白I R145W突变对大鼠心肌细胞钙调控的影响 被引量：2

12

作者 吴恒芳 陈相健 +3 位作者 杨笛 卞智萍 徐晋妉 张寄南 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1000-1004,共5页

目的探讨国人新的致肥厚型心肌病(HCM)心肌肌钙蛋白 I 基因突变(eTnI R145W)引起 HCM 发病的可能机制。方法采用定点突变技术在大鼠 cTnI cDNA 引入 R146W(相当于人R145W)突变,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)做报告基因,构建含野生型和突变... 目的探讨国人新的致肥厚型心肌病(HCM)心肌肌钙蛋白 I 基因突变(eTnI R145W)引起 HCM 发病的可能机制。方法采用定点突变技术在大鼠 cTnI cDNA 引入 R146W(相当于人R145W)突变,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)做报告基因,构建含野生型和突变型大鼠 cTnI cDNA 的重组腺病毒载体。Langendoff 逆流灌注系统分离成年大鼠心肌细胞,无血清法培养后重组腺病毒转染。Western blot 检测重组蛋白的表达,全膜片钳技术记录心肌细胞膜 L 型钙电流,Fura-2/AM 孵育后测定细胞内游离钙离子浓度和咖啡因诱导的肌浆网钙释放。结果 DNA 测序证实 R146W 突变成功引入大鼠 cTnI cDNA。新鲜分离的成年大鼠心肌细胞存活率达70%～80%,无血清培养7天后绝大部分能保持长杆状形态。重组腺病毒转染48h 后荧光显微镜下可观察到绿色荧光,cTnI 和绿色荧光蛋白单抗均能检测到重组蛋白。与野生型 cTnI 和正常对照组比较,突变型 cTnI 组心肌细胞膜 L 型钙电流峰值明显降低。Fura-2/AM 法测定细胞内游离钙离子浓度和咖啡因诱导的肌浆网钙释放,三组之间差异无统计学意义。结论含 R146W 突变的 cTnI 蛋白可能引起心肌细胞的电生理学重构,进一步研究可探讨肌丝对钙的敏感性及钙调节蛋白表达的改变。 展开更多

关键词 心肌病 肥厚性 肌钙蛋白Ⅰ 突变 腺病毒科 L型钙通道

原文传递

PAPP-A基因多态性与子痫前期的相关性研究 被引量：3

13

作者 李坤 孙丽洲 +2 位作者 吴恒芳 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期544-547,共4页

目的:探讨妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)基因多态性与子痫前期的相关性。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)对129例子痫前期患者(轻度子痫前期64例,重度子痫前期65例)和137例同期入院产检并在南京医科大学第一附属医院分娩... 目的:探讨妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)基因多态性与子痫前期的相关性。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)对129例子痫前期患者(轻度子痫前期64例,重度子痫前期65例)和137例同期入院产检并在南京医科大学第一附属医院分娩的正常孕妇,进行PAPP-A基因位点S1224Y(A/C)(dbSNP:rs7020782)多态性的分析,比较各基因型及等位基因的频率在子痫前期组和正常组间、重度子痫前期组和轻度子痫前期组间的差别。结果:AC基因型频率在子痫前期组(44.2%)高于对照组(31.4%,P﹤0.05);AC基因型频率在重度子痫前期组(75.4%)明显高于轻度子痫前期组(12.5%,P﹤0.001);C等位基因频率在重度子痫前期组(40.8%)明显高于轻度子痫前期组(18.7%,P<0.001)。结论:PAPP-A基因位点S1224Y(A/C)的AC基因型,C等位基因可能是子痫前期的重要遗传危险因素,并与病情的严重程度相关。 展开更多

关键词 妊娠相关血浆蛋白A 子痫前期 基因多态性

下载PDF 职称材料

中国人群肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白基因突变研究 被引量：2

14

作者 吴恒芳 万文辉 +4 位作者 杨笛 卞智萍 徐晋丹 马文珠 张寄南 《中国临床康复》 CSCD 2003年第21期2897-2898,F003,共3页

目的:初步探讨中国人群肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白T基因突变情况,为该病的早期防治和康复介入奠定理论基础。方法:提取58例肥厚型心肌病(hypertrophiccardiomyopathy,HCM)患者外周血白细胞基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增心肌肌钙蛋... 目的:初步探讨中国人群肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白T基因突变情况,为该病的早期防治和康复介入奠定理论基础。方法:提取58例肥厚型心肌病(hypertrophiccardiomyopathy,HCM)患者外周血白细胞基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增心肌肌钙蛋白T(cTnT)基因8、9、11号外显子,产物做单链构象多态性(SSCP)分析,出现异常条带者直接测序验证。结果:58例临床确诊的HCM患者cTnT基因8,9,11号外显子,除160位密码子存在ATC和ATT多态性外,未发现基因位点的异常。结论:与国外报道的肥厚型心肌病约20%是由肌钙蛋白T基因突变引起相比较,中国人群肥厚型心肌病患者基因突变可能存在不同的特点。 展开更多

关键词 中国人群 肥厚型心肌病 心肌肌钙蛋白T 基因突变 聚合酶链反应 单链构象 基因多态性

下载PDF 职称材料

105例肥厚型心肌病心电图肥厚指标与超声心动图检查结果相关性分析 被引量：4

15

作者 郝晶 周芳 +4 位作者 吴恒芳 张海峰 王晖 李新立 徐东杰 《江苏医药》 CAS 北大核心 2013年第10期1150-1153,共4页

目的分析肥厚型心肌病(HCM)患者心电图肥厚新指标与左心室、左房内径(LAD)及舒张功能的相关性。方法 HCM组患者105例中,单纯肥厚型75例(A组),肥厚梗阻型17例(B组),心尖肥厚型13例(C组);选择正常健康人群65例作为对照组。予以常规12导联... 目的分析肥厚型心肌病(HCM)患者心电图肥厚新指标与左心室、左房内径(LAD)及舒张功能的相关性。方法 HCM组患者105例中,单纯肥厚型75例(A组),肥厚梗阻型17例(B组),心尖肥厚型13例(C组);选择正常健康人群65例作为对照组。予以常规12导联心电图及超声心电图检查,比较除极化复极化指标、肥厚指标和心电常规参数。并将肥厚指标在HCM不同亚型之间比较,分析新指标与室间隔厚度(IVS)、LAD与左室舒张功能的相关性。结果 HCM组除极化复极化异常及肥厚指标高于对照组(P<0.05)。不同HCM亚型中,C组传统指标SV1+RV5高于A组(P<0.05);B、C组新指标RV3+SV1高于A组(P<0.05)。传统指标∑QRS与LAD、IVS呈正相关(P<0.01);新指标RV2+SV1,RV3+SV1与IVS呈正相关(P<0.01)。随着左室舒张期末内径(LVDd)和LAD的增加,RV2+SV1,RV3+SV1增加(P<0.01)。结论 HCM患者较常人易发生除极和复极化异常,肥厚新指标RV2+SV1,RV3+SV1不仅与IVS有着一定关联度,更能在一定程度上较好评估患者LAD和左室舒张功能,为临床诊疗提供帮助。 展开更多

关键词 肥厚型心肌病 心电学肥厚指标 左室舒张功能

原文传递

C反应蛋白对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙的影响 被引量：2

16

作者 刘强 张丹丹 +5 位作者 徐晋妉 卞智萍 吴恒芳 顾春荣 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期679-683,共5页

目的:研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙[Ca2+]i的作用。方法:原代培养小鼠主动脉内皮细胞,取生长状态良好的内皮细胞分为对照组(未加CRP)和不同浓度CRP处理组,25 min后观察各组内皮细胞[Ca2+]i。... 目的:研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙[Ca2+]i的作用。方法:原代培养小鼠主动脉内皮细胞,取生长状态良好的内皮细胞分为对照组(未加CRP)和不同浓度CRP处理组,25 min后观察各组内皮细胞[Ca2+]i。将内皮细胞用1μmol/L阿托伐他汀预处理30 min后,加入100 mg/L CRP,观察阿托伐他汀对CRP作用的影响。结果:与对照组相比,CRP可显著升高内皮细胞胞内[Ca2+]i并呈剂量依赖关系;阿托伐他汀可明显降低CRP引起的[Ca2+]i升高。结论:CRP可导致和加重小鼠主动脉内皮细胞的炎症反应,阿托伐他汀可部分拮抗CRP的致炎作用。 展开更多

关键词 C反应蛋白 钙 内皮细胞 动脉粥样硬化

下载PDF 职称材料

低剪切力下调PPAR信号通路参与BALB/c小鼠局部血管早期病变的实验研究 被引量：2

17

作者 张友明 杨笛 +5 位作者 吴恒芳 卞智萍 徐晋妉 顾春荣 陈相健 王连生 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期607-614,共8页

目的 :研究局部血流低剪切力对BALB/c小鼠局部血管内皮细胞损伤及平滑肌细胞增殖的影响及其分子机制。方法:以左侧颈总动脉套管植入术造成局部血流剪切力变化。30只雄性BALB/c小鼠随机分为假手术组(n=10,普通饮食)、模型1组(n=10,套管... 目的 :研究局部血流低剪切力对BALB/c小鼠局部血管内皮细胞损伤及平滑肌细胞增殖的影响及其分子机制。方法:以左侧颈总动脉套管植入术造成局部血流剪切力变化。30只雄性BALB/c小鼠随机分为假手术组(n=10,普通饮食)、模型1组(n=10,套管植入术+普通饮食)、模型2组(n=10,套管植入术+高脂饮食)。术后喂养8周,监测小鼠体重,颈总动脉超声测量术后3 d和术后8周左、右颈总动脉血流峰值、血管舒张末内径及剪切力变化,检测血脂水平,HE染色观察颈总动脉病理形态学变化,测量血管中膜厚度,透射电镜观测颈总动脉内皮细胞、内皮下超微结构。芯片比较小鼠低剪切力区与自身正常剪切力区血管段基因表达谱变化,GO及KEGG信号通路分析与细胞迁移及增殖相关基因和信号通路的变化并行实时定量PCR(quantificational real time-polymerase chain reaction,QRT-PCR)验证。结果 :与假手术组相比,模型1组小鼠术后8周体重及血脂均无明显差异(P>0.05),模型2组小鼠术后8周体重增加明显,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均升高(P<0.05)。模型1、2组左侧颈总动脉套管近心端呈低剪切力变化,HE染色可见内皮细胞不同程度损伤,血管中膜增厚,无脂纹和斑块形成;电镜下可见有不同程度的内皮细胞空泡化形成,内皮下未见脂质空泡和脂滴堆积。合并高脂喂养加强了低剪切力导致的血管病变。芯片检测提示与自身正常剪切力血管段相比,低剪切力血管段标本呈现mi R-27a上调(>2倍),PPAR信号通路下调,MAPK、TGF-β、PI3K/Akt及NF-κB信号通路上调,包括TGFB2、END1、CTGF等促细胞迁移及(或)增殖的基因上调>2.0倍。QRT-PCR验证结果显示:相比于自身正常血管段,在低剪切力血管段中PPARG下调0.14倍,TGFB2和EDN1分别上调2.51倍和1.83倍,差异有统计学意义(P<0.05,n=4),与基因芯片结果 展开更多

关键词 低剪切力 动脉粥样硬化 PPAR信号通路 中膜增厚 内皮细胞损伤

下载PDF 职称材料

经皮室间隔心肌化学消融酒精用量对围手术期心肌损伤和心律失常的影响 被引量：1

18

作者 杨吉猛 王晖 +7 位作者 徐东杰 吴恒芳 朱铁兵 王连生 戴振华 杨迪 杨志健 曹克将 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期197-200,共4页

目的:探讨经皮室间隔心肌化学消融(PTSMA)酒精用量与围术期心肌损伤和心律失常发生的关系。方法:连续选择接受低剂量酒精(≤2ml)消融的肥厚型梗阻性心肌病(HOCM)患者10例(低剂量组),从资料库中筛选常规较大剂量酒精(>2ml)治疗的患者2... 目的:探讨经皮室间隔心肌化学消融(PTSMA)酒精用量与围术期心肌损伤和心律失常发生的关系。方法:连续选择接受低剂量酒精(≤2ml)消融的肥厚型梗阻性心肌病(HOCM)患者10例(低剂量组),从资料库中筛选常规较大剂量酒精(>2ml)治疗的患者20例作为对照组,分别记录两组患者围术期血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)峰值及心律失常的发生情况,同时评估两种剂量酒精对术后血流动力学和心脏结构的影响。结果:低剂量组和对照组PTSMA围术期CK-MB峰值分别为(126.9±55.3)U/L和(232.8±58.7)U/L(P<0.01);相关分析显示,CK-MB峰值与酒精剂量呈显著正相关(r=0.646,P<0.01);两组发生急性房室传导异常(含束支、室内传导和Ⅰ～Ⅲ度房室传导阻滞)分别为6例(60%)和13例(65%),发生Ⅲ度房室传导阻滞分别为2例(20%)和5例(25%);两组术后左心室流出道压力阶差(LVOTPG)和室间隔厚度较基线水平均显著下降(均P<0.01),但两组间术后LVOTPG水平及下降幅度均差异无统计学意义。结论:低剂量酒精能减少PTSMA围术期心肌坏死,并显著改善术后血流动力学和心脏结构,但不能减轻传导系统的损伤。 展开更多

关键词 心律失常 经皮室间隔心肌化学消融 酒精用量 心肌损伤

原文传递

肥厚型心肌病基因突变与预后的相关性 被引量：2

19

作者 吴恒芳 张寄南 《中国全科医学》 CAS CSCD 2006年第22期1837-1839,共3页

关键词 心肌病 肥厚型 基因突变 预后

下载PDF 职称材料

OX40/OX40L逆向信号对小鼠主动脉内皮细胞MMP-9表达及机制的研究 被引量：3

20

作者 张丹丹 夏文龙 +5 位作者 刘强 张大伟 徐晋妉 吴恒芳 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期20-25,共6页

目的:探讨OX40配体(OX40 ligand,OX40L)逆向通路激活对培养的小鼠主动脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)表达及活性的作用。方法:分离与培养8～10周龄C57BL/6J小鼠主动脉内皮细胞,传代至第2代,用可溶性OX40(... 目的:探讨OX40配体(OX40 ligand,OX40L)逆向通路激活对培养的小鼠主动脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)表达及活性的作用。方法:分离与培养8～10周龄C57BL/6J小鼠主动脉内皮细胞,传代至第2代,用可溶性OX40(sOX40)、OX40L单克隆抗体(anti-OX40L)和钙离子螯合剂bapta-AM刺激内皮细胞,RT-PCR和Western blot方法检测内皮细胞MMP-9的mRNA和蛋白表达水平,明胶酶谱法检测内皮细胞培养上清MMP-9活性,应用钙离子成像方法观察内皮细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的改变。结果:与对照组相比,可溶性OX40(0.1 mg/L)刺激后内皮细胞MMP-9的mRNA及蛋白表达水平均显著增高,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显增高,内皮细胞胞浆[Ca2+]i也明显增高。分别应用可溶性OX40L单克隆抗体(0.1 mg/L)和Bapta-AM(20μmol/L)预处理培养内皮细胞后,由可溶性OX40引起的内皮细胞基因和蛋白表达水平明显降低,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显下降。结论:内皮细胞OX40L逆向信号的激活可以通过调节胞内的游离钙离子水平参与内皮细胞中MMP-9表达的调控,这可能是OX40/OX40L逆向信号通路参与动脉粥样硬化的发生、发展的机制之一。 展开更多

关键词 OX40配体 钙离子 基质金属蛋白酶-9 内皮细胞

下载PDF 职称材料