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山鸡椒的愈伤组织诱导及植株再生 被引量:6
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作者 林丽媛 韩小娇 +2 位作者 陈益存 汪阳东 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1047-1052,共6页
以山鸡椒无菌苗叶片、茎段为外植体诱导愈伤组织,通过愈伤组织分化诱导不定芽途径,建立山鸡椒植株再生体系。结果表明,山鸡椒茎段是诱导愈伤组织最佳外植体,愈伤组织诱导和不定芽分化的最适培养基为MS+2.0 mg·L-1BA+0.1 mg·L-... 以山鸡椒无菌苗叶片、茎段为外植体诱导愈伤组织,通过愈伤组织分化诱导不定芽途径,建立山鸡椒植株再生体系。结果表明,山鸡椒茎段是诱导愈伤组织最佳外植体,愈伤组织诱导和不定芽分化的最适培养基为MS+2.0 mg·L-1BA+0.1 mg·L-1IBA,分化培养基中添加适当浓度的维生素C可减轻愈伤组织褐化程度;诱导不定芽生根较理想的培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1IBA+0.4 mg·L-1NAA。同时,通过组织学观察了愈伤组织的结构和不定芽的发生。 展开更多
关键词 山鸡椒 组织培养 愈伤组织 植株再生
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油桐油质蛋白Oleosin编码基因5个VfOLE转录本的克隆与表达分析 被引量:5
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作者 杨素素 +2 位作者 汪阳东 高暝 陈益存 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2014年第2期233-239,共7页
植物种子中,油脂主要贮藏在一种分散的、相对稳定的亚细胞微滴"油体"中,油质蛋白Oleosin是油体结构组成和功能调节的最主要蛋白质,在种子成熟、休眠和萌发过程中发挥重要作用。通过油桐种仁EST文库构建与测序,获得了油桐Oleos... 植物种子中,油脂主要贮藏在一种分散的、相对稳定的亚细胞微滴"油体"中,油质蛋白Oleosin是油体结构组成和功能调节的最主要蛋白质,在种子成熟、休眠和萌发过程中发挥重要作用。通过油桐种仁EST文库构建与测序,获得了油桐Oleosin(OLE)蛋白编码基因的5个转录本VfOLE1、VfOLE2、VfOLE3、VfOLE4、VfOLE5,完整阅读框长度分别为474、465、414、414、429 bp。通过实时荧光定量PCR技术分析了5个VfOLE转录本在油桐不同组织以及种仁成熟过程中的表达变化。结果表明,5个VfOLE转录本在成熟的种子中特异高效表达,其它组织中微弱表达;5个VfOLE表达趋势与桐酸、桐油积累趋势一致,其中在桐酸快速合成、桐油快速积累时期,VfOLE1、VfOLE2表达迅速上升并且表达量显著高于VfOLE3、VfOLE4、VfOLE5。试验结果为进一步研究VfOLE基因在桐油合成中的生物学功能提供了参考。 展开更多
关键词 OLEOSIN 油桐 基因表达
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山鸡椒1-脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶DXR基因的克隆和SNP分析 被引量:5
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作者 刘英冠 +4 位作者 何关顺 汪阳东 杨素素 陈益存 高暝 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2015年第1期93-100,共8页
在转录组测序结果分析基础上,以山鸡椒c DNA为模板,克隆得到山鸡椒1-脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶DXR基因c DNA全长,以山鸡椒基因组DNA为模板,设计引物、扩增拼接后获得山鸡椒DXR基因全长,命名为Lc DXR。序列分析表明,Lc DXR c DNA全长... 在转录组测序结果分析基础上,以山鸡椒c DNA为模板,克隆得到山鸡椒1-脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶DXR基因c DNA全长,以山鸡椒基因组DNA为模板,设计引物、扩增拼接后获得山鸡椒DXR基因全长,命名为Lc DXR。序列分析表明,Lc DXR c DNA全长为1 501 bp,5’非编码区长34 bp,3’非编码区长53 bp,开放阅读框长1 413 bp,预测编码含有470个氨基酸残基的蛋白质,等电点为6.62,分子量为51.12 k D。Lc DXR基因全长为12 601bp,其中外显子12个,内含子11个。对来自10个种源的Lc DXR基因编码区单核苷酸变异位点进行分析表明:在c DNA区间内共发现10个SNP(single nucleotide polymorphism)位点,其中有4个单核苷酸变异导致了所编码的氨基酸的改变,为了分析氨基酸突变导致的蛋白质精细结构的变化,利用Swiss-PDB Viewer模拟4个突变位点氨基酸残基的替换。其中江西安远(AY)的突变Lys119Thr引起了氢键的变化,推测可能对酶的活性产生影响。研究结果为深入研究山鸡椒脱氧木酮糖5-磷酸还原异构酶的活性和功能奠定了基础,同时为山鸡椒遗传育种提供理论依据。 展开更多
关键词 山鸡椒 DXR 基因克隆 SNPS
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