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全自动免疫组化染色仪比较不同抗原修复液对p53的染色结果
1
作者 吴兴旗 党啟华 +1 位作者 徐晶晶 张顺民 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期663-664,共2页
p53是一种与人类肿瘤相关性极高的抑癌基因,其参与细胞周期的调控。准确检测p53的表达对肿瘤诊断、治疗及预后具有重要意义[1]。基因测序是检测其突变的金标准,但在实际工作中,免疫组化法检测p53表达最为简便实惠。抗原修复技术是影响... p53是一种与人类肿瘤相关性极高的抑癌基因,其参与细胞周期的调控。准确检测p53的表达对肿瘤诊断、治疗及预后具有重要意义[1]。基因测序是检测其突变的金标准,但在实际工作中,免疫组化法检测p53表达最为简便实惠。抗原修复技术是影响免疫组化染色结果的重要因素,其中以抗原修复液的pH值和加热条件最为关键[2]。随着全自动免疫组化染色仪的广泛应用,免疫组化流程更加规范化,操作更加标准化,但抗原修复仍是一个亟待解决的问题。 展开更多
关键词 抗原修复 修复液 全自动免疫组化染色仪 P53
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网状纤维染色在肿瘤诊断与鉴别诊断中的应用
2
作者 吴兴旗 何妙侠 张顺民 《诊断病理学杂志》 2023年第5期495-498,共4页
网状纤维广泛分布于机体组织中,与网状细胞共同构成机体的网状结构,可被网状纤维染色识别。网状纤维染色是一种常见的病理特殊染色,在疾病的诊断、鉴别诊断及判断预后方面具有重要意义。在此综述网状纤维染色的原理、方法及其在肿瘤诊... 网状纤维广泛分布于机体组织中,与网状细胞共同构成机体的网状结构,可被网状纤维染色识别。网状纤维染色是一种常见的病理特殊染色,在疾病的诊断、鉴别诊断及判断预后方面具有重要意义。在此综述网状纤维染色的原理、方法及其在肿瘤诊断与鉴别诊断中的应用。 展开更多
关键词 网状纤维 特殊染色 肿瘤诊断 鉴别诊断
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鼠伤寒沙门菌spvBC基因编辑株的构建
3
作者 左玲莉 周丽婷 +2 位作者 吴兴旗 吴超逸 吴淑燕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期253-260,共8页
利用λRed重组系统和pBAD原核表达载体构建鼠伤寒沙门菌spvBC质粒毒力基因修饰菌株,为深入探究沙门菌毒力基因spv的功能和致病机制及宿主抗感染免疫提供工具菌。以pKD4为模板,PCR扩增含spvBC同源臂的卡那霉素抗性基因以构建同源打靶片段... 利用λRed重组系统和pBAD原核表达载体构建鼠伤寒沙门菌spvBC质粒毒力基因修饰菌株,为深入探究沙门菌毒力基因spv的功能和致病机制及宿主抗感染免疫提供工具菌。以pKD4为模板,PCR扩增含spvBC同源臂的卡那霉素抗性基因以构建同源打靶片段,再将其电转入含有质粒pKD46的鼠伤寒沙门菌中进行同源重组,随后将质粒pCP20电转导入阳性转化子,消除卡那霉素抗性基因,PCR鉴定敲除株的构建。PCR扩增含酶切位点的spvBC基因片段,扩增产物与原核表达载体pBAD/gⅢ分别双酶切后连接构建pBAD-spvBC重组质粒,PCR筛选阳性菌落并测序鉴定。将构建成功的pBAD-spvBC重组质粒电转导入spvBC敲除株中,Western blot测定不同浓度L-阿拉伯糖诱导SpvB和SpvC蛋白表达情况。PCR结果表明鼠伤寒沙门菌spvBC基因敲除成功;PCR及测序结果表明pBAD-spvBC重组质粒构建成功,Western blot结果表明13 mmol/L L-阿拉伯糖可诱导SpvB和SpvC蛋白正常表达。λRed重组系统可用于沙门菌质粒上大片段基因的敲除,pBAD原核表达载体可用于沙门菌质粒上大片段基因的回补,丰富了细菌质粒的基因修饰和编辑策略。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 spvBC基因 λRed重组系统 基因编辑
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