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利用EST库资源克隆家蚕腺苷酸转移酶基因 被引量:15
1
作者 陈大福 牛宝龙 +2 位作者 翁宏飚 孟智启 《蚕业科学》 CAS CSCD 2004年第2期151-156,共6页
根据物种间同源基因相对保守的特点 ,利用生物信息学方法以果蝇 (Drosophilamelanogaster)腺苷酸转移酶基因 (adeninenucleotidetranslocase,ant)cDNA序列作为模板 ,对家蚕 (Bombyxmori)EST数据库进行同源检索筛选 ,克隆了家蚕腺苷酸转... 根据物种间同源基因相对保守的特点 ,利用生物信息学方法以果蝇 (Drosophilamelanogaster)腺苷酸转移酶基因 (adeninenucleotidetranslocase,ant)cDNA序列作为模板 ,对家蚕 (Bombyxmori)EST数据库进行同源检索筛选 ,克隆了家蚕腺苷酸转移酶基因的cDNA序列 (GenBank登录号为AY2 2 70 0 0 ) ,全长为 1936bp ,并经RT PCR克隆、序列分析验证 ,结果与电子克隆序列完全一致。该cDNA序列具有完整的开放阅读框架 (ORF ,2 0 7~ 110 9bp) ,推测编码蛋白为 30 0个氨基酸 ,通过与烟草天蛾 (Manducasexta)、蜜蜂 (Apismellifera)、绿蝇 (Luciliacuprina)、果蝇、蚊子(Anophelesgambiae)等昆虫的腺苷酸转移酶蛋白序列比较 ,发现该基因具有高度的保守性。表明根据物种间同源基因序列 ,对跨物种间EST数据库进行同源检索筛选、拼接 ,是基因克隆的一条有效途径。 展开更多
关键词 家蚕 EST数据库 RT-PCR 腺苷酸转移酶
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多孔丝素凝胶的理化性状和生物相容性 被引量:8
2
作者 闵思佳 胡智文 《蚕业科学》 CAS CSCD 2001年第1期43-48,共6页
以 10~ 10 0g/L不同浓度的丝素水溶液与二缩水甘油基乙醚反应得到平均孔径约 10 0~ 30 0 μm的多孔丝素凝胶 (CPFG)为材料 ,研究其理化性质和生物相容性。结果表明 ,CPFG的最大拉伸强度达 11g/mm2 ,伸度达 79% ,压缩回复率达 10 0 % ... 以 10~ 10 0g/L不同浓度的丝素水溶液与二缩水甘油基乙醚反应得到平均孔径约 10 0~ 30 0 μm的多孔丝素凝胶 (CPFG)为材料 ,研究其理化性质和生物相容性。结果表明 ,CPFG的最大拉伸强度达 11g/mm2 ,伸度达 79% ,压缩回复率达 10 0 % ,吸水率达 15 0 0 %。CPFG在中性溶液中较稳定 ,很少有丝素蛋白质溶出 ,而胰蛋白酶对CPFG有分解性。成纤细胞表面培养显示CPFG有较好的生物相容性。 展开更多
关键词 多孔丝素凝胶 理化性质 生物相容性 细胞培养
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氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶的活性 被引量:10
3
作者 闵思佳 丁春阳 《蚕业科学》 CAS CSCD 2002年第1期61-63,共3页
为了解家蚕氟中毒的机理 ,研究了氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH—Px)的活性。正常的家蚕 5龄幼虫血淋巴中GSH—Px活性在龄中期较强 ,龄初和龄末较弱。幼虫添食 10mmol/L的氟化钠溶液后 。
关键词 家蚕 幼虫 血淋巴 氟中毒 谷胱甘肽过氧化物酶 酶活性
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氟中毒对家蚕幼虫中肠组织糖原分解代谢调节的影响 被引量:12
4
作者 臧荣春 徐俊良 《蚕业科学》 CAS CSCD 1994年第2期110-114,共5页
用酶偶合系统测定了氟中毒对家蚕幼虫中肠组织糖原磷酸化酶活性的影响,其结果人氟中毒使中肠糖原磷酸化酶a型和b型的活性均明显下降,特别是b型的活性下降幅度较大。由此时以认为,氟中毒抑制了家蚕幼虫中肠组织内糖的分解代谢,使... 用酶偶合系统测定了氟中毒对家蚕幼虫中肠组织糖原磷酸化酶活性的影响,其结果人氟中毒使中肠糖原磷酸化酶a型和b型的活性均明显下降,特别是b型的活性下降幅度较大。由此时以认为,氟中毒抑制了家蚕幼虫中肠组织内糖的分解代谢,使细胞的能量供应减少。 展开更多
关键词 家蚕 氟中毒 糖原 磷酸化酶
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蜜蜂(Apis mellifera)腺苷酸转移载体基因cDNA的电子克隆 被引量:9
5
作者 陈大福 牛宝龙 +2 位作者 翁宏飚 孟智启 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期923-927,共5页
以果蝇腺苷酸转移载体基因cDNA序列为信息探针,对蜜蜂EST数据库进行同源检索筛选,克隆了蜜蜂腺苷酸转移载体基因(Am ant)的cDNA序列(GenBank登记号为AY332626),该基因全长1 251bp。经RT-PCR克隆、序列分析验证,结果表明与电子克隆序列... 以果蝇腺苷酸转移载体基因cDNA序列为信息探针,对蜜蜂EST数据库进行同源检索筛选,克隆了蜜蜂腺苷酸转移载体基因(Am ant)的cDNA序列(GenBank登记号为AY332626),该基因全长1 251bp。经RT-PCR克隆、序列分析验证,结果表明与电子克隆序列完全一致;该基因具有完整的开放阅读框架(ORF),编码蛋白为300个氨基酸,通过对人、果蝇、家蚕及烟草天蛾的腺苷酸转移载体蛋白序列比较,发现该基因具有高度的保守性;说明根据物种间同源基因序列,进行跨物种EST数据库的同源检索筛选、拼接,是基因克隆的一条有效途径。 展开更多
关键词 蜜蜂 腺苷酸转移载体 基因克隆 EST数据库 RT-PCR 电子克隆
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氟中毒蚕体内的膜脂过氧化作用 被引量:9
6
作者 丁春阳 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期111-112,共2页
关键词 家蚕氟中毒 膜脂过氧化作用 血液 MDA
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家蚕氟中毒血淋巴中GST和GSH合成酶系活性变化 被引量:9
7
作者 梁大刚 屠振力 《中国蚕业》 2005年第2期27-29,共3页
谷胱甘肽硫-转移酶(glutathione S-transferases,GST)是一组具有多种生理功能的蛋白质,主要存在于细胞质中.在哺乳类动物各组织中均含有不同种类的GST,其含量和活性亦各不相同,其中以肝脏中含量最高.GST能催化还原型谷胱甘肽上的巯基(-... 谷胱甘肽硫-转移酶(glutathione S-transferases,GST)是一组具有多种生理功能的蛋白质,主要存在于细胞质中.在哺乳类动物各组织中均含有不同种类的GST,其含量和活性亦各不相同,其中以肝脏中含量最高.GST能催化还原型谷胱甘肽上的巯基(-SH)结合到疏水化合物上,使疏水性的化合物变成亲水性的物质,从而使之容易从胆汁或尿液中排泄,通过这种方式将体内各种有潜在毒性的亲脂性化合物排出体外,因此GST是一种重要的解毒酶.由于结合解毒是动物体内主要的解毒方式,所以当组织内GST活性受到抑制时,将导致机体解毒作用的减弱. 展开更多
关键词 GST 家蚕氟中毒 活性变化 合成酶系 GSH 还原型谷胱甘肽 巴中 哺乳类动物 化合物 生理功能 动物体内 解毒作用 转移酶 蛋白质 细胞质 亲水性 疏水性 亲脂性 解毒酶 组织 含量 肝脏 排出
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氟化物对家蚕幼虫中肠(钙,镁)-三磷酸腺苷酶活性的影响 被引量:6
8
作者 臧荣春 +2 位作者 徐俊良 赵玉芳 凌备备 《蚕业科学》 CAS CSCD 1993年第3期156-161,共6页
添食NaF抑制家蚕幼虫中肠(钙,镁)-三磷酸腺苷酶[(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPase]的活性。该抑制作用随添食NaF的浓度提高,或添食日数延长而增加,有累积效应。添食适量的CaCl_2或CaCl_2和Na_2ATP能降低NaF对(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPase活性的抑... 添食NaF抑制家蚕幼虫中肠(钙,镁)-三磷酸腺苷酶[(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPase]的活性。该抑制作用随添食NaF的浓度提高,或添食日数延长而增加,有累积效应。添食适量的CaCl_2或CaCl_2和Na_2ATP能降低NaF对(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPase活性的抑制。试验结果说明,应用Lee的(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPase动力学模型可获得满意的解释。氟化物抑制家蚕幼虫体内组织细胞膜上(Ca^(2+),Mg^(2+))-ATPasc活性,致使Ca^(2+)在蚕体内平衡失调,是家蚕氟中毒的一种重要的毒理学上的分子机制。 展开更多
关键词 家蚕 氟化物 三磷酸腺苷 酶活性
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家蚕(Bombyx mori)不同发育阶段饲料适宜pH值的研究 被引量:8
9
作者 黄健辉 徐俊良 +1 位作者 缪云根 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 1997年第2期179-183,共5页
通过改变人工饲料的pH值,对蚁蚕、稚蚕和壮蚕进行饲育,以了解家蚕幼虫不同发育阶段对人工饲料pH值的要求,并研究用不同pH值的人工饲料饲育1~2龄家蚕对3龄改用桑叶育后生长发育的影响.结果表明:蚁蚕摄食和稚蚕饲育的最适... 通过改变人工饲料的pH值,对蚁蚕、稚蚕和壮蚕进行饲育,以了解家蚕幼虫不同发育阶段对人工饲料pH值的要求,并研究用不同pH值的人工饲料饲育1~2龄家蚕对3龄改用桑叶育后生长发育的影响.结果表明:蚁蚕摄食和稚蚕饲育的最适人工饲料pH值分别为4.3和4.6;壮蚕人工饲料的适宜pH值范围是4.4~4.7;但当3龄采用桑叶育时,1~2龄中所用人工饲料的pH值,以4.2~4. 展开更多
关键词 家蚕 发育阶段 人工饲料 PH
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RNA干涉与基因功能研究进展 被引量:5
10
作者 牛宝龙 翁宏飚 +1 位作者 孟智启 《浙江农业学报》 CSCD 2003年第4期263-267,共5页
RNA干涉是通过双链RNA的介导,在基因的转录后水平上,特异性抑制具有相应序列的基因表达,即通过双链RNA的介导特异性降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默。迄今,在真菌、植物、动物等真核生物中都发现存在这一基因沉默机制... RNA干涉是通过双链RNA的介导,在基因的转录后水平上,特异性抑制具有相应序列的基因表达,即通过双链RNA的介导特异性降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默。迄今,在真菌、植物、动物等真核生物中都发现存在这一基因沉默机制。RNA干涉对于抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、生物体的发育和基因表达调控都有重要作用;它也为基因功能的研究开辟了一条新途径。文章综述了RNA干涉的机制及其在基因功能研究方面的最新进展。 展开更多
关键词 RNA干涉 双链RNA 基因功能
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家蚕幼虫添食蔗糖的效果和机理研究 被引量:8
11
作者 徐俊良 臧荣春 《蚕业科学》 CAS CSCD 1989年第1期23-30,共8页
为了研究养蚕时添食蔗糖的效果和机理,采用高效液相色谱分析技术和二硝基水杨酸比色定糖法,测定了桑叶中核糖、木糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性还原糖和总糖的含量以及蚕体对它们的消化吸收率。并用桑园搭棚遮荫的方法人为造... 为了研究养蚕时添食蔗糖的效果和机理,采用高效液相色谱分析技术和二硝基水杨酸比色定糖法,测定了桑叶中核糖、木糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性还原糖和总糖的含量以及蚕体对它们的消化吸收率。并用桑园搭棚遮荫的方法人为造成日照不足叶,研究了养蚕时在光照叶和遮荫叶上添食蔗糖的效果。结果,在光照叶或遮荫叶上添食蔗糖,对蚕茧和蚕种的产质量都没有影响。 展开更多
关键词 家蚕幼虫 营养添食 蔗糖 效果
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氟化物和VD_3对家蚕幼虫中肠传输磷酸根离子的影响 被引量:4
12
作者 臧荣春 +1 位作者 姚菊明 徐俊良 《蚕业科学》 CAS CSCD 1996年第3期199-201,共3页
氟化物和VD_3对家蚕幼虫中肠传输磷酸根离子的影响臧荣春,吕顺霖,姚菊明,徐俊良(浙江农业大学)从对动物的大量研究知道,动物小肠吸收传输无机磷酸根离子(Pi)的过程,受动物自身的生理状况、外界环境和饮食的组成等因素影... 氟化物和VD_3对家蚕幼虫中肠传输磷酸根离子的影响臧荣春,吕顺霖,姚菊明,徐俊良(浙江农业大学)从对动物的大量研究知道,动物小肠吸收传输无机磷酸根离子(Pi)的过程,受动物自身的生理状况、外界环境和饮食的组成等因素影响[1]。研究影响昆虫中肠吸收传输... 展开更多
关键词 氟化物 VD3 家蚕 无机磷酸根离子 中毒
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桑蚕茧荧光色素的理化学研究 被引量:7
13
作者 申屠仁华 徐俊良 +1 位作者 陈荣新 《蚕桑通报》 1994年第1期15-17,共3页
白色桑蚕茧在紫外光(2600~3800(?))照射下会发出黄、白、紫、蓝色等可见荧光.茧荧光色与蚕品种,性别的研究(井上柳悟,1929;Lambardi.P.L,1930)发现存在着限性荧光现象.近代研究认为茧荧光色与茧丝的解舒等性能有密切关系(戴亚民,1957;... 白色桑蚕茧在紫外光(2600~3800(?))照射下会发出黄、白、紫、蓝色等可见荧光.茧荧光色与蚕品种,性别的研究(井上柳悟,1929;Lambardi.P.L,1930)发现存在着限性荧光现象.近代研究认为茧荧光色与茧丝的解舒等性能有密切关系(戴亚民,1957;刘冠峰,1983;葛惠英,1988),目前已应用于蚕茧的茧质检定. 展开更多
关键词 家蚕 蚕茧 荧光色素 分析 茧丝
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家蚕幼虫生长过程中的Logistic曲线 被引量:6
14
作者 徐俊良 《蚕业科学》 CAS CSCD 1989年第4期223-225,共3页
家蚕幼虫在某一龄期内逐时生长所增加的重量是不相同的,将这逐时测得的体重连成一条曲线时,大致呈“S”形,对于家蚕幼虫的生长曲线,曾有一些学者作过研究,1809年Robertson提出生物的生长可以用单分子反应式来表示,1926年八木首先将该式... 家蚕幼虫在某一龄期内逐时生长所增加的重量是不相同的,将这逐时测得的体重连成一条曲线时,大致呈“S”形,对于家蚕幼虫的生长曲线,曾有一些学者作过研究,1809年Robertson提出生物的生长可以用单分子反应式来表示,1926年八木首先将该式用于家蚕幼虫的生长,由于Robertson式应用在家蚕幼虫生长上误差较大,1934年大工原孝对该式加以修改,1956年我国学者吴载德抛弃了拘泥于以单分子反应为基础的Robertson式,从家蚕幼虫所形成的“S”形生长曲线的理论上加以研究,创造了新的家蚕生长式。 展开更多
关键词 幼虫 生长 Logistic曲线
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家蚕磷酸甘油醛异构酶Tpi基因的克隆 被引量:5
15
作者 牛宝龙 孟智启 +2 位作者 翁宏飙 沈卫锋 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期47-52,共6页
利用生物信息学方法成功地克隆了家蚕磷酸甘油醛异构酶 (triosephosphate isomerase Tpi) 基因 (GenBank登记号为AY734490).该基因全长为2 875 bp;含有5 个外显子、4个内含子,所有内含子/外显子边界都符合典型的GT/AG剪切模式;cDNA 序... 利用生物信息学方法成功地克隆了家蚕磷酸甘油醛异构酶 (triosephosphate isomerase Tpi) 基因 (GenBank登记号为AY734490).该基因全长为2 875 bp;含有5 个外显子、4个内含子,所有内含子/外显子边界都符合典型的GT/AG剪切模式;cDNA 序列全长1 051 bp,并经RT-PCR克隆和序列分析进行了验证;具有完整的开放阅读框架(ORF,95~839 bp),可编码248个氨基酸的蛋白.通过与NCBI蛋白数据库的比对表明,该基因编码的蛋白为磷酸甘油醛异构酶(EC 5.3.1.1),参与葡萄糖分解代谢,即将磷酸二羟丙酮转化为3-磷酸甘油醛,在果蝇、蚊子、黄粉虫、美洲淤夜蛾、棉铃虫等昆虫中具有高度的保守性. 展开更多
关键词 EST数据库 PCR 磷酸甘油醛异构酶 家蚕
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丝茧育养蚕时添食蔗糖的效果研究 被引量:5
16
作者 徐俊良 +3 位作者 肖志飞 丁煜艳 马秀康 楼黎静 《蚕桑通报》 1994年第2期18-20,共3页
丝茧育养蚕时添食蔗糖的效果研究浙江农业大学蚕学系吕顺霖,徐俊良,肖志飞,丁煜艳湖州市蚕桑技术推广总站马秀康,楼黎静目前养蚕生产中有的农户添食蔗糖,以期提高蚕茧的产质量,提高养蚕生产的经济效益。但对于养蚕中添食蔗糖的效... 丝茧育养蚕时添食蔗糖的效果研究浙江农业大学蚕学系吕顺霖,徐俊良,肖志飞,丁煜艳湖州市蚕桑技术推广总站马秀康,楼黎静目前养蚕生产中有的农户添食蔗糖,以期提高蚕茧的产质量,提高养蚕生产的经济效益。但对于养蚕中添食蔗糖的效果,人们有不同的看法。一种观点认为... 展开更多
关键词 家蚕 饲养 蔗糖 茧质
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氟中毒引起的桑蚕幼虫血淋巴pH和钙离子浓度的变化 被引量:3
17
作者 臧荣春 《蚕桑通报》 1995年第2期14-15,共2页
氟中毒引起的桑蚕幼虫血淋巴pH和钙离子浓度的变化浙江农业大学臧荣春,吕顺霖昆虫的血淋巴是昆虫生理活动所需的一切物质以及代谢产物的汇聚场所。正常情况昆虫血淋巴的组成成分,代表着经消化道吸入物质与被组织吸收及排泄物质间的... 氟中毒引起的桑蚕幼虫血淋巴pH和钙离子浓度的变化浙江农业大学臧荣春,吕顺霖昆虫的血淋巴是昆虫生理活动所需的一切物质以及代谢产物的汇聚场所。正常情况昆虫血淋巴的组成成分,代表着经消化道吸入物质与被组织吸收及排泄物质间的一个动态平衡。血淋巴的组成成分及p... 展开更多
关键词 家蚕 氟中毒 血淋巴 PH 钙离子浓度
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人工饲料桑叶粉含量及酸碱度的研究 被引量:5
18
作者 徐俊良 缪云根 +3 位作者 吴小锋 黄健辉 李美华 《蚕桑通报》 1995年第3期28-29,共2页
人工饲料桑叶粉含量及酸碱度的研究浙江农业大学徐俊良,缪云根,吕顺霖,吴小锋,黄健辉,李美华日本近十余年来推广的小蚕用人工饲料中,桑叶粉含量一般占干量的25%左右,国内多数配方达40%,个别的甚至超过50%,这就失去了... 人工饲料桑叶粉含量及酸碱度的研究浙江农业大学徐俊良,缪云根,吕顺霖,吴小锋,黄健辉,李美华日本近十余年来推广的小蚕用人工饲料中,桑叶粉含量一般占干量的25%左右,国内多数配方达40%,个别的甚至超过50%,这就失去了用人工饲料养蚕的意义。我们用20—... 展开更多
关键词 桑叶粉 人工饲料 酸碱度 家蚕
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萘胺类化合物对氟中毒家蚕幼虫血淋巴中GSH-Px活性的影响 被引量:3
19
作者 顾国达 丁春阳 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CSCD 北大核心 2000年第5期543-546,共4页
为了解萘胺类化合物 CRL缓解家蚕氟中毒的机理 ,研究了 CRL对氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)活性的影响 .正常的家蚕 5龄幼虫血淋巴 GSH- Px在龄的中期活性较强 ,龄初和龄末活性较弱 .幼虫添食 15mmol/L的 Na F溶... 为了解萘胺类化合物 CRL缓解家蚕氟中毒的机理 ,研究了 CRL对氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)活性的影响 .正常的家蚕 5龄幼虫血淋巴 GSH- Px在龄的中期活性较强 ,龄初和龄末活性较弱 .幼虫添食 15mmol/L的 Na F溶液后 ,GSH- Px活性显著增强 ,经 CRL添食处理后 ,GSH- Px的活性有所下降 .经 CRL和增效剂协同处理后 GSH- 展开更多
关键词 家蚕 氟中毒 GSH-Px 萘胺类化合物 解毒机理
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萘胺类化合物对氟中毒家蚕体内氧自由基水平的影响 被引量:3
20
作者 顾国达 丁春阳 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期565-568,共4页
为了解萘胺类化合物 CRL缓解家蚕氟中毒的机理 ,研究了 CRL对氟中毒蚕血淋巴中氧自由基 (O·2 )水平的影响 .家蚕幼虫添食 Na F溶液后 ,幼虫血淋巴中 O·2 的含量明显增高 ,说明家蚕的氟中毒与蚕体内的 O·2 水平有关 .氟... 为了解萘胺类化合物 CRL缓解家蚕氟中毒的机理 ,研究了 CRL对氟中毒蚕血淋巴中氧自由基 (O·2 )水平的影响 .家蚕幼虫添食 Na F溶液后 ,幼虫血淋巴中 O·2 的含量明显增高 ,说明家蚕的氟中毒与蚕体内的 O·2 水平有关 .氟中毒的家蚕幼虫经 CRL处理后 ,血淋巴中的 O·2 的含量有所下降 ,经 CRL和增效剂协同处理后 O·2 的含量大幅度下降 ,甚至接近正常蚕 (对照区 )的水平 ,由此说明 展开更多
关键词 家蚕 氟中毒 氧自由基 萘胺类化合物 增效剂 解毒机理
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