雌激素对大鼠心肌细胞钙的调控作用研究 被引量：6

1

作者 高瞻 朱妙章 +5 位作者 周士胜 谢安 郭海涛 吕顺燕 裴建明 马新亮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期272-274,共3页

目的　观察雌激素对大鼠心肌细胞钙转运的调控作用。方法　应用膜片钳全细胞记录方法观察L型钙通道电流 (ICa .L) ,共聚焦显微镜系统分析细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)的变化。结果　应用 10 μmol·L-1和 30 μmol·L-1的 17β Est... 目的　观察雌激素对大鼠心肌细胞钙转运的调控作用。方法　应用膜片钳全细胞记录方法观察L型钙通道电流 (ICa .L) ,共聚焦显微镜系统分析细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)的变化。结果　应用 10 μmol·L-1和 30 μmol·L-1的 17β Estradiol,分别使ICa .L 抑制到正常的 48 1%± 4 5 %and2 9 3%± 5 2 % (n =5 ,P <0 0 1)。 10 μmol·L-1的 17β Estradiol可升高静息的培养心肌细胞 [Ca2 + ]i,荧光强度 (FI)值由 5 4 2± 13 6增加到 86 5± 15 3(n =6 ,P <0 0 5 ) ;而对具有自发收缩的心肌细胞钙瞬变幅度有明显的抑制作用 ,由给药前的 18 5± 4 3减小到 11 4± 3 9(n =6 ,P <0 0 5 )。17β Estradiol可剂量依赖性地抑制ICa.L。结论　L型钙通道等多种机制参与雌激素对大鼠心肌细胞钙转运的调控作用。 展开更多

关键词 雌激素 心肌细胞钙 离子通道 共聚焦显微镜 细胞培养 钙转运

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牛结节性皮肤病病毒检测及蠓、蚊携带病毒调查 被引量：4

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作者 李楠 孟锦昕 +4 位作者 王建聂 何于雯 杨绍昌 吕顺燕 王静林 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4179-4187,共9页

【目的】了解牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)在自然感染状况下病牛的带毒状况及其潜在的传播媒介种类,为牛结节性皮肤病防控提供参考依据。【方法】于2021年7月在云南省文山市采集疑似发病牛不同组织类型标本,2020... 【目的】了解牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)在自然感染状况下病牛的带毒状况及其潜在的传播媒介种类,为牛结节性皮肤病防控提供参考依据。【方法】于2021年7月在云南省文山市采集疑似发病牛不同组织类型标本,2020年8月和2021年7月~2021年8月分别在云南省昆明市、文山市和双江县采集疑似LSDV感染的牛圈舍蠓、蚊标本,并进行形态学鉴定。采用实时荧光定量PCR方法检测发病牛不同组织及库蠓、库蚊标本中LSDV核酸;采用LSDV127基因特异引物对皮肤结节标本进行PCR扩增及测序;利用DNAStar和Mega 6.0等软件进行核苷酸序列相似性比对和系统进化分析。【结果】3头发病牛全血、血清、鼻拭子和皮肤结节标本中均检测到LSDV核酸,且皮肤结节标本中LSDV核酸扩增曲线信号最强;LSDV127基因序列分析结果显示,3份皮肤结节标本(17、18和19)的病毒核苷酸序列相似性为100%,与俄罗斯、泰国、越南和南非等LSDV分离株聚为一支,亲缘关系较近,核苷酸序列相似性在99.7%~100%之间。共采集鉴定条带库蠓、连斑库蠓和尖喙库蠓3种,库蠓标本4822只,库蚊标本150只。所有采集自发病牛圈舍的库蠓和库蚊标本LSDV核酸检测结果均为阴性。【结论】在自然感染LSDV的牛中,血液、鼻分泌物和皮肤结节等不同部位都可能为节肢动物媒介获得并传播LSDV提供很好的感染源;蠓、蚊等节肢动物媒介是否参与了当地LSDV的传播有必要进一步调查。 展开更多

关键词 牛结节性皮肤病病毒(LSDV) 蠓 蚊 序列分析

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一例鸭传染性浆膜炎的诊治报告

3

作者 江琳 吕顺燕 +2 位作者 白娜娜 常志顺 信爱国 《云南畜牧兽医》 2024年第2期15-17,共3页

为了解昆明市宜良县某鸭场送检病鸭的发病原因,无菌采集鸭脑组织,划线培养分离细菌,16S rRNA基因测序,药敏试验。结果显示,分离菌株在血平板上长出凸起、光滑、有光泽、不溶血的奶油状菌落;分离菌株核苷酸序列与鸭疫里氏杆菌同源性高达1... 为了解昆明市宜良县某鸭场送检病鸭的发病原因,无菌采集鸭脑组织,划线培养分离细菌,16S rRNA基因测序,药敏试验。结果显示,分离菌株在血平板上长出凸起、光滑、有光泽、不溶血的奶油状菌落;分离菌株核苷酸序列与鸭疫里氏杆菌同源性高达100%;该菌株对利福平、呋喃唑酮等敏感,对庆大霉素、苯唑西林、克林霉素耐药。结果表明送检病鸭病因为鸭疫里氏杆菌感染引起的鸭传染性浆膜炎,根据药敏试验结果建议养殖场选用恩诺沙星、强力霉素进行治疗,疫病于7 d后得到有效控制。 展开更多

关键词 鸭 鸭传染性浆膜炎 鸭疫里氏杆菌

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雌激素受体α在大鼠心脏组织的分布 被引量：1

4

作者 高瞻 朱妙章 +4 位作者 于军 董明清 郭海涛 吕顺燕 臧益民 《心脏杂志》 CAS 2000年第6期435-436,439,共3页

目的 :观察不同性别 ,不同雌激素水平时雌激素受体α(ERα)在大鼠心脏及培养的心肌和心脏成纤维细胞的分布。方法 :通过免疫组织化学方法观察正常雄性及雌性 SD大鼠、卵巢切除大鼠、假手术及雌激素替代治疗大鼠心脏组织 ERα的分布 ,以... 目的 :观察不同性别 ,不同雌激素水平时雌激素受体α(ERα)在大鼠心脏及培养的心肌和心脏成纤维细胞的分布。方法 :通过免疫组织化学方法观察正常雄性及雌性 SD大鼠、卵巢切除大鼠、假手术及雌激素替代治疗大鼠心脏组织 ERα的分布 ,以及雌激素对培养的心肌细胞和心脏成纤维细胞 ERα表达的影响。结果 :ERα免疫反应阳性物质呈部位特异性地分布于大鼠心脏组织中 ;不同性别大鼠未见明显差异 ;卵巢切除大鼠心脏组织 ERα免疫反应阳性物质明显减少 ;雌激素替代治疗组 ERα的表达恢复至正常水平 ;离体培养的心肌细胞及心脏成纤维细胞 ERα染色阳性 ,给予生理剂量雌激素后 ,心肌及心脏成纤维细胞 ERα阳性染色明显增强。结论 :ERα不仅存在于心脏组织中 ,且其表达受雌激素的调控。 展开更多

关键词 受体 雌激素 心脏 大鼠 免疫组织化学

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大鼠钠尿肽B受体cDNA探针克隆载体的构建

5

作者 董明清 朱妙章 +4 位作者 于军 高瞻 吕顺燕 郭海涛 冯华松 《心脏杂志》 CAS 2000年第5期387-388,391,共3页

目的 :构建大鼠钠尿肽 B受体 c DNA探针克隆载体 ,为研究该受体基因表达奠定基础。方法 :设计钠尿肽 B受体特异的 PCR引物 ,提取大鼠肺组织总 RNA,进行反转录 PCR,扩增目的片段 ,回收目的片段 ,将其克隆入p GEM- T载体 ,酶切鉴定并用双... 目的 :构建大鼠钠尿肽 B受体 c DNA探针克隆载体 ,为研究该受体基因表达奠定基础。方法 :设计钠尿肽 B受体特异的 PCR引物 ,提取大鼠肺组织总 RNA,进行反转录 PCR,扩增目的片段 ,回收目的片段 ,将其克隆入p GEM- T载体 ,酶切鉴定并用双脱氧法测序。结果 :PCR反应产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定与所设计引物大小一致 ,克隆入 p GEM- T载体后酶切可切出所需片段 ,测序证实为所设计序列。结论 :构建的 p GEM- T重组质粒为进一步研究该受体基因表达。 展开更多

关键词 钠尿肽受体 克隆 CDNA探针

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东川区山羊布鲁氏菌病流行病学调查监测浅析

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作者 吕顺燕 《云南畜牧兽医》 2022年第1期27-30,共4页

东川区2017—2021年连续5年开展山羊布鲁氏菌病流行病学调查监测工作,累计对4175户农户所存栏的161974只山羊进行随机采样,对42095份血清采用虎红平板凝集试验(RBT)初筛及试管凝集试验(SAT)进行复检,最终对检测的24只抗体阳性羊只进行... 东川区2017—2021年连续5年开展山羊布鲁氏菌病流行病学调查监测工作,累计对4175户农户所存栏的161974只山羊进行随机采样,对42095份血清采用虎红平板凝集试验(RBT)初筛及试管凝集试验(SAT)进行复检,最终对检测的24只抗体阳性羊只进行溯源及无害化处理。通过监测,全区山羊布鲁氏菌病抗体阳性率呈逐年下降趋势,全面掌握了东川区山羊布鲁氏菌病的疫病动态、流行规律及疫点分布情况等,为山羊布鲁氏菌病的净化工作奠定了坚实的基础。 展开更多

关键词 山羊 布鲁氏菌病 东川区

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云南省蠓虫标本检出星状病毒序列

7

作者 杨绍昌 吕顺燕 +3 位作者 何于雯 李楠 孟锦昕 王静林 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2020年第6期655-659,共5页

目的探索云南省师宗县蠓虫携带虫媒病毒情况。方法采用RT-PCR方法对2013年7月采集自云南省师宗县的74批3 705只蠓虫进行检测,然后对扩增条带进行克隆测序。采用DNAStar软件中MegAlign进行同源性分析,使用MEGAX软件ALIGN进行序列比对和基... 目的探索云南省师宗县蠓虫携带虫媒病毒情况。方法采用RT-PCR方法对2013年7月采集自云南省师宗县的74批3 705只蠓虫进行检测,然后对扩增条带进行克隆测序。采用DNAStar软件中MegAlign进行同源性分析,使用MEGAX软件ALIGN进行序列比对和基于Maximum Likelihood (ML)方法进行遗传进化分析。结果在云南省采集74批蠓虫样品中3批标本(SZC33、SZC42和SZ625C8-2)扩增出600 bp左右大小电泳条带;经过对以上PCR产物直接进行测序,SZC33和SZ625C8-2样本获得西藏环状病毒序列,而SZC42样品测序失败;对SZC42样品PCR产物进行克隆,挑取5个克隆进行测序,5个克隆均获得一段长为589个核苷酸(nucleotide,nt)序列,经BLASTx比对发现这5个克隆的核苷酸序列均与美国蚊虫中发现的星状病毒样病毒(culex bastrovirus-like virus, CAVL)的非结构蛋白基因氨基酸同源性最高,遗传进化分析结果显示云南省蠓虫(SZC42)样本检测到的病毒基因序列与美国蚊虫中检测到的CAVL(NC040647)、巴西污水中检测到的星状病毒(Astrovirus,AV)(MF042208)以及越南蝙蝠检测到的AV(NC032426)遗传进化关系较近,但形成独立的进化分支。结论云南省蠓虫中发现的SZC42病毒序列为星状病毒序列。 展开更多

关键词 蠓虫 星状病毒 系统进化分析

原文传递

鹅源金黄色葡萄球菌分离鉴定及其诊治分析

8

作者 吕顺燕 江琳 +3 位作者 王喜 李珂 常志顺 信爱国 《云南畜牧兽医》 2023年第4期1-3,共3页

为确诊昆明市东川区某养鹅场疑似葡萄球菌感染鹅群的致病原因,采集发病鹅的脑组织、肿胀关节脓液及肝脏等病料进行细菌分离鉴定。结果显示,从病料中分离到1株细菌,分离菌在普通营养琼脂平板上形成光滑、湿润、无色、表面凸起的圆形菌落... 为确诊昆明市东川区某养鹅场疑似葡萄球菌感染鹅群的致病原因,采集发病鹅的脑组织、肿胀关节脓液及肝脏等病料进行细菌分离鉴定。结果显示,从病料中分离到1株细菌,分离菌在普通营养琼脂平板上形成光滑、湿润、无色、表面凸起的圆形菌落,在血琼脂平板上能产生β溶血,镜检呈革兰氏阳性葡萄串状;生化鉴定结果符合金黄色葡萄球菌反应特征;分离菌16S rRNA扩增序列分析表明,其匹配度最高的均是金黄色葡萄球菌各株系的16S rRNA序列,综合研判分离菌株为鹅源金黄色葡萄球菌。药敏试验显示,该菌株对头孢噻肟、阿米卡星等敏感,对强力霉素、庆大霉素等中度敏感,对氨苄西林、大观霉素等具有耐药性;该分离菌株接种试验小鼠具有较强的致病性。结果表明,金黄色葡萄球菌是引起该场鹅群感染的致病因素之一,该分离菌对多种抗菌药具有耐药性,应引起重视。研究结果为该地区鹅病的临床诊治提供参考。 展开更多

关键词 鹅 金黄色葡萄球菌 分离鉴定 东川区

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珠江上游地区蚊虫乙型脑炎病毒核酸检测及PrM和E基因序列分析 被引量：3

9

作者 吕顺燕 王静林 +5 位作者 李楠 胡骑 何于雯 赵德宏 陈红宇 李华春 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第2期336-343,共8页

试验旨在了解珠江上游地区乙型脑炎病毒(JEV)主要传播媒介蚊虫的种类、分布及携带JEV基因型和分子特征。2013年7月在珠江上游地区师宗县采集蚊虫和库蠓标本,并对蚊虫进行分类鉴定;同时采用黄病毒属引物对采集到的蚊虫和库蠓标本进行检测... 试验旨在了解珠江上游地区乙型脑炎病毒(JEV)主要传播媒介蚊虫的种类、分布及携带JEV基因型和分子特征。2013年7月在珠江上游地区师宗县采集蚊虫和库蠓标本,并对蚊虫进行分类鉴定;同时采用黄病毒属引物对采集到的蚊虫和库蠓标本进行检测,阳性标本用JEV PrM和E基因特异引物进行扩增、测序,然后采用生物信息学软件进行序列分析。在4个采集点共采集蚊虫3 705只,分别属于库蚊、按蚊、伊蚊和阿蚊4个属的7种蚊虫,牛圈以中华按蚊、骚扰阿蚊为优势蚊种,羊圈以中华按蚊、骚扰阿蚊为优势蚊种,猪圈以三带喙库蚊、中华按蚊和骚扰阿蚊为优势蚊种。采用JEV PrM和E基因特异引物对采集到蚊虫和库蠓标本分162批进行扩增、测序,采用生物信息学软件进行序列分析。结果显示,4株蚊虫携带的病毒均为基因Ⅰ型JEV,与疫苗株SA14-14-2E蛋白存在15个氨基酸差异位点,在8个影响病毒毒力的重要位点上未发生突变。以上结果提示珠江上游地区存在多种蚊虫种类,三带喙库蚊和中华按蚊是该地区的优势蚊种,三带喙库蚊是当地JEV的主要传播媒介,在当地的媒介中存在基因Ⅰ型JEV流行,而流行株的毒力并未降低。 展开更多

关键词 乙型脑炎病毒 蚊虫分类 库蠓 PrM基因 E基因

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东川区畜禽标准化规模养殖场发展现状及对策 被引量：1

10

作者 吕顺燕 和东华 《湖北畜牧兽医》 2016年第3期63-64,共2页

自2008年昆明市人民政府出台《关于昆明地区"一湖两江"流域范围规模畜禽养殖迁建扶持的指导意见》(昆政发〔2008〕60号)和《关于进一步加快畜牧业发展的意见》(昆政发〔2008〕61号)文件以来,东川区不断调整农村养殖结构,畜禽... 自2008年昆明市人民政府出台《关于昆明地区"一湖两江"流域范围规模畜禽养殖迁建扶持的指导意见》(昆政发〔2008〕60号)和《关于进一步加快畜牧业发展的意见》(昆政发〔2008〕61号)文件以来,东川区不断调整农村养殖结构,畜禽规模养殖有了一定发展,但总体上畜禽规模化养殖程度不高,饲养和经营管理水平低下是制约畜牧业发展的重要因素。目前仍处于广大农户散养向标准化、规模化养殖的过渡时期,标准化畜禽规模养殖仍有待加强和完善,本文将根据现状及存在问题,提出相应措施和对策。 展开更多

关键词 畜禽养殖 标准化 规模化 东川区

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云南省师宗县蚊虫中版纳病毒核酸检测及其序列分析

11

作者 吕顺燕 李楠 +3 位作者 何于雯 孟锦昕 杨绍昌 王静林 《云南畜牧兽医》 2020年第3期13-16,共4页

为了解云南省师宗县五龙乡和高良乡的蚊虫携带版纳病毒(BAV)情况。2013年7月在师宗县五龙乡和高良乡牛圈、猪圈、羊圈采集蚊虫标本,共采集库蚊、按蚊、伊蚊、Lufzia和阿蚊等5个属的7种蚊虫3705只,分为88批进行研磨,从蚊虫悬液中提取总R... 为了解云南省师宗县五龙乡和高良乡的蚊虫携带版纳病毒(BAV)情况。2013年7月在师宗县五龙乡和高良乡牛圈、猪圈、羊圈采集蚊虫标本,共采集库蚊、按蚊、伊蚊、Lufzia和阿蚊等5个属的7种蚊虫3705只,分为88批进行研磨,从蚊虫悬液中提取总RNA,反转录合成CDNA,采用版纳病毒12节段特异引物进行检测,其中1批蚊虫样本(SZ32)版纳病毒RT-PCR扩增阳性,扩增阳性产物进行测序,获得849个核苷酸(nt)序列。采用生物信息学软件进行同源性和遗传进化分析,结果显示从SZ32批蚊虫样本获得的序列与云南省和越南分离的版纳病毒位于A1基因亚型的进化分支内,核苷酸和氨基酸同源性分别在93.7%~98.4%、95.6%~98.7%,而与中国北方地区分离的版纳病毒(A2基因亚型病毒)和印度尼西亚分离的版纳病毒(B基因型)位于不同进化分支内,核苷酸同源性低于91.3%,氨基酸同源性低于93.4%,提示SZ32批蚊虫中检测到版纳病毒。表明在云南省师宗县的蚊虫存在A1基因亚型版纳病毒流行,其遗传进化关系与云南省边境地区流行的版纳病毒株较密切。 展开更多

关键词 版纳病毒 蚊虫 序列分析

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