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慢病毒干扰水通道蛋白4促进脊髓损伤修复与其上调电压依赖性阴离子通道2相关性的研究 被引量：1
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作者 吕芾 张华阳 +4 位作者 黄守娟 向轩颐 郑莉 张晓 张奇兰 《成都医学院学报》 CAS 2019年第6期687-695,共9页
目的采用慢病毒干扰水通道蛋白4(AQP4)的表达,观察电压依赖性阴离子通道2(VDAC2)在脊髓损伤后的表达变化,探讨VDAC2的差异性表达对脊髓损伤修复过程的影响。方法将SD大鼠随机分为脊髓钝挫伤(SCC)组、假手术(Sham)组、AQP4慢病毒干扰(AQP... 目的采用慢病毒干扰水通道蛋白4(AQP4)的表达,观察电压依赖性阴离子通道2(VDAC2)在脊髓损伤后的表达变化,探讨VDAC2的差异性表达对脊髓损伤修复过程的影响。方法将SD大鼠随机分为脊髓钝挫伤(SCC)组、假手术(Sham)组、AQP4慢病毒干扰(AQP4-SH-LV)组和空载(Vector)组。采用Allen′s法制备SCC模型;Gene MANIA生物信息学方法预测AQP4与VDAC2的关联;通过注射包装AQP4siRNA的质粒,构建慢病毒干扰AQP4的SCC模型。BBB评分评价大鼠后肢的运动功能;苏木精-伊红(HE)染色显示脊髓组织损伤状况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定VDAC2mRNA表达量;免疫组织化学染色(IHC)检测VDAC2定位及半定量情况。结果1)BBB评分结果显示,脊髓钝挫伤后1dSCC组和Vector组得分明显降低,接近0分。AQP4-SH-LV组得分的下降趋势与Vector组相似,但各时间点评分均高于后者。HE染色结果显示,脊髓顿挫伤后脊髓组织发生水肿,干扰AQP4后水肿程度有所减轻。2)qRT-PCR结果表明,与Sham组相比,SCC组各时间点VDAC2的mRNA转录水平降低(P<0.05);慢病毒干扰AQP4,SCC术后第7天,AQP4-SH-LV组体内VDAC2mRNA转录水平较Vector组上调(P<0.05)。3)免疫组化结果显示,VDAC2免疫阳性产物主要分布于细胞质。SCC组各时间点VDAC2免疫阳性细胞数均低于Sham组(P<0.05);AQP4-SH-LV组各时间点VDAC2免疫阳性细胞数均高于Vector组。4)GeneMANIA结果显示,AQP4和VDAC2两分子间具有特定的生理联系,如共表达、共定位、共享蛋白质结构域等。结论脊髓损伤后,大鼠体内VDAC2的转录水平下降,不利于脊髓组织损伤后的恢复。慢病毒干扰AQP4可上调VDAC2转录水平,并促进脊髓损伤的修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 细胞水肿 VDAC2 AQP4 线粒体
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