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靶向沉默HIF-1α和Survivin基因对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响 被引量:4
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作者 刘娟娟 +1 位作者 赵艳 赵厚育 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第4期377-382,388,共7页
目的:探讨RNAi靶向沉默人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和/或生存素(Survivin)基因对裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响。方法:设计合成靶向沉默HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒,采用脂质体转染法将HIF-1α和/或Sur... 目的:探讨RNAi靶向沉默人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和/或生存素(Survivin)基因对裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响。方法:设计合成靶向沉默HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒,采用脂质体转染法将HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒转染到CNE-2细胞;取35只4~6周龄的雌性BALA/c裸鼠,随机均分为HIF-1α干扰组、Survivin干扰组、HIF-1α&Survivin干扰组(联合干扰组)、空载组和阴性对照组;分别给予相应转染后的CNE-2细胞注射至裸鼠右侧腋窝皮下,待各组裸鼠成瘤后,给予5Gy X-射线照射,每隔3 d放疗1次,共15Gy X-射线,观察各组裸鼠放疗前后的肿瘤体积,照射结束3 d后处死裸鼠,测量瘤体体积,计算肿瘤体积增加率;RT-q PCR法检测瘤体组织中的HIF-1α和Survivin mRNA表达水平,Western Blot法检测HIF-1α和Survivin蛋白表达水平,TUNEL试剂盒检测鼻咽癌裸鼠移植瘤中细胞凋亡。结果:HIF-1α干扰组、Survivin干扰组与联合干扰组经过放射治疗后肿瘤体积增加率明显小于空载体组与阴性对照组(P<0.05);HIF-1α干扰组、Survivin干扰组与联合干扰组瘤体组织中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白质表达水平显著低于空载组与阴性对照组,细胞凋亡率高于空载组与阴性对照组(P<0.05);HIF-1α干扰组、Survivin干扰组及联合干扰组瘤体组织中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白质表达水平及细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单独干扰HIF-1α、Survivin基因与联合干扰HIF-1α和Survivin基因均能够增加鼻咽癌裸鼠移植瘤对放疗敏感性,但联合干扰并没有进一步提高鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 缺氧诱导因子-1Α 生存素 放射疗法 计算机辅助 放疗敏感性
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沉默HIF-1α对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响 被引量:3
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作者 赵艳 +1 位作者 刘娟娟 赵厚育 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第4期373-376,共4页
目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法:15只4~6周龄雌性裸鼠,随机均分为为HIF-1α干扰组、空载组及阴性对照组;采用脂质体转染法将HIF-1α的microRNA干扰质粒转染CNE-2细胞,RT-q PCR检测其沉默效应,将转... 目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法:15只4~6周龄雌性裸鼠,随机均分为为HIF-1α干扰组、空载组及阴性对照组;采用脂质体转染法将HIF-1α的microRNA干扰质粒转染CNE-2细胞,RT-q PCR检测其沉默效应,将转染HIF-1α干扰质粒的CNE-2细胞、转染空载质粒的CNE-2细胞以及CNE-2细胞分别接种于3组裸鼠右腋皮下,建立鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型,形成肉眼可见的肿瘤后再喂养16 d,观察各组成瘤时间及肿瘤体积;RT-q PCR检测3组移植瘤中HIF-1α基因的表达,蛋白质印迹法检测3组移植瘤中HIF-1α蛋白的表达。结果:成功构建裸鼠移植瘤模型,HIF-1α干扰组、阴性对照组、空载组裸鼠成瘤时间分别为(8.60±1.40)、(4.60±0.55)、(4.80±0.84)d,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤体积分别为(128.60±77.70)、(1 411.10±212.50)、(1 306.80±154.60)mm3,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α干扰组瘤体组织中的HIF-1α基因和蛋白的表达量明显降低(P<0.05)。结论:沉默HIF-1α基因能有效抑制人鼻咽癌裸鼠移植瘤成瘤时间和肿瘤的生长。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 缺氧诱导因子-1Α 肿瘤移植 RNA干扰
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