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Ⅱ型肺泡上皮细胞Brg1基因条件敲低小鼠的基因型鉴定 被引量：1
1
作者 司道祝 彭单伊 +9 位作者 张荣 夏耘秋 牛超 苟好 刘姜 王莉佳 田代印 刘恩梅 邹琳 符州 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第3期280-287,共8页
该文旨在鉴定特异敲低Ⅱ型肺泡上皮细胞中Brg1(Brahma-related gene 1)基因小鼠的基因型,为进一步研究Brg1在肺相关疾病中的作用奠定基础。将两对转基因小鼠Brg1fl/fl和SP-C-rt TA/(tet O)7-Cre进行繁殖交配,将得到纯合子、杂合子及野生... 该文旨在鉴定特异敲低Ⅱ型肺泡上皮细胞中Brg1(Brahma-related gene 1)基因小鼠的基因型,为进一步研究Brg1在肺相关疾病中的作用奠定基础。将两对转基因小鼠Brg1fl/fl和SP-C-rt TA/(tet O)7-Cre进行繁殖交配,将得到纯合子、杂合子及野生型3种基因型。出生后1周龄剪尾提取基因组DNA,PCR法判定基因型。用多西环素诱导法诱导(tet O)7-Cre重组酶活性,靶向剪切Ⅱ型肺泡上皮细胞上Brg1基因,磁珠分选法提取小鼠原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,通过观察细胞生长特征、检测pro SP-C表达鉴定原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,RT-PCR法、Western blot检测Brg1表达水平。结果显示,成功繁殖了Brg1纯合子小鼠,通过磁珠分选法成功分离了原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,用多西环素诱导法成功敲低了Ⅱ型肺泡上皮细胞Brg1基因。该结果为相关研究提供动物模型奠定了基础。 展开更多
关键词 Brg1 Ⅱ型肺泡上皮细胞 基因敲低 基因型
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体外诱导人脐带间充质干细胞向Ⅱ型肺泡上皮细胞分化 被引量：1
2
作者 刘姜 彭单伊 +7 位作者 苟好 吴羡 司道祝 牛超 田代印 刘恩梅 邹琳 符州 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第3期365-372,共8页
该研究旨在通过条件培养基诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)向II型肺泡上皮细胞(type II alveolar epithelial cells,AEC2s)分化,为后续研究h UC-MSCs来源的AEC2s在肺部疾病中的治疗作... 该研究旨在通过条件培养基诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)向II型肺泡上皮细胞(type II alveolar epithelial cells,AEC2s)分化,为后续研究h UC-MSCs来源的AEC2s在肺部疾病中的治疗作用奠定基础。h UC-MSCs分为实验组和对照组,实验组用小气道上皮细胞生长基础培养基培养2天后添加生长因子诱导培养,对照组用20%血清的DMEM/F12培养。第14天观察细胞形态;Western blot、免疫荧光、流式细胞术和ELISA法检测肺泡表面活性蛋白C(surfactant protein C,SP-C)及前肺泡表面活性蛋白C(pro-surfactant protein C,pro SP-C)。利用透射电镜观察板层小体。结果显示,实验组细胞形态由长梭形向多边形转变,细胞内有pro SP-C表达,培养基上清中有SP-C分泌,透射电镜观察到板层小体;而对照组细胞形态无明显改变,未检测到pro SP-C表达、SP-C分泌和板层小体形成。该研究结果表明,体外诱导培养可促进h UC-MSCs向AEC2s分化,通过该方法有望大量获得h UC-MSCs来源的AEC2s用于肺部疾病治疗研究。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 Ⅱ型肺泡上皮细胞 分化
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重庆火锅锅底油脂有害物质的现状
3
作者 陈汉 曹玉志 +4 位作者 司道祝 邓钦引 唐维 石冬梅 程淑群 《光谱实验室》 CAS 2013年第6期3052-3056,共5页
在现况调查的基础上,随机抽样采集重庆市8家麻辣火锅和8家鱼火锅锅底油样品,在不同加热时间(0、60、120min)和加热温度(100、120、150℃)条件下,分别采用滴定法、紫外分光光度法、气相色谱法测定其酸价、羰基价、反式油酸含量。结果显... 在现况调查的基础上,随机抽样采集重庆市8家麻辣火锅和8家鱼火锅锅底油样品,在不同加热时间(0、60、120min)和加热温度(100、120、150℃)条件下,分别采用滴定法、紫外分光光度法、气相色谱法测定其酸价、羰基价、反式油酸含量。结果显示随着加热时间的延长和加热温度的升高,酸价和反式油酸含量逐渐升高(P<0.05),羰基价无明显变化(P>0.05)。在相同的加热时间和加热温度下,麻辣火锅锅底油的酸价和反式油酸含量明显高于鱼火锅(P<0.05),羰基价无明显变化(P>0.05)。表明重庆火锅锅底油对人们的身体健康存在潜在危害。 展开更多
关键词 火锅锅底油 反式脂肪酸 酸价 羰基价
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