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苦参碱诱导人肝癌细胞分化、凋亡时对G_1细胞周期调节因子的调控 被引量：85
1
作者 司维柯 高利宏 +3 位作者 刘斌 陈安 李鹏 姚婕 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第8期848-851,共4页
目的:观察苦参碱诱导人肝癌细胞分化、凋亡时,G1细胞周期调节因子的变化,探讨苦参碱对肿瘤细胞增殖的调控。方法:0、0.3、0.8、1.5g/L苦参碱作用HepG2细胞3天,免疫组化检测p53、Rb、p21、p27、p16、cyclinD1蛋白表达;原位杂交检测p53、c... 目的:观察苦参碱诱导人肝癌细胞分化、凋亡时,G1细胞周期调节因子的变化,探讨苦参碱对肿瘤细胞增殖的调控。方法:0、0.3、0.8、1.5g/L苦参碱作用HepG2细胞3天,免疫组化检测p53、Rb、p21、p27、p16、cyclinD1蛋白表达;原位杂交检测p53、cyclinD1mRNA的表达。真彩色图像分析对基因表达强弱进行定量,结果用MicrosoftExcel软件统计处理。结果:用药后细胞周期负调控因子p53、Rb、p21、p27、p16表达增强;正调控因子cyclinD1表达减弱。结论:苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2分化、凋亡的机制可能与苦参碱上调了G1细胞周期负调节因子的表达,下调了G1期正调节因子cyclinD1表达有关。 展开更多
关键词 苦参碱 肝细胞癌 细胞周期 调节因子 细胞凋亡 细胞调控
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苦参碱诱导人肝癌细胞系HepG_2凋亡的研究 被引量：72
2
作者 司维柯 陈安 +3 位作者 李鹏 刘斌 高利宏 姚婕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期816-820,共5页
目的　观察苦参碱是否能诱导人肝癌细胞系HepG2 凋亡及凋亡相关基因的变化。方法　 0～ 3 .0g/L苦参碱处理HepG2 细胞 ,光镜和电镜下观察细胞形态 ;TUNEL法原位检测DNA断裂 ;流式细胞仪检测凋亡峰 ;AnnexinV FITC/PI双标记检测早期凋亡 ... 目的　观察苦参碱是否能诱导人肝癌细胞系HepG2 凋亡及凋亡相关基因的变化。方法　 0～ 3 .0g/L苦参碱处理HepG2 细胞 ,光镜和电镜下观察细胞形态 ;TUNEL法原位检测DNA断裂 ;流式细胞仪检测凋亡峰 ;AnnexinV FITC/PI双标记检测早期凋亡 ;免疫组化和原位杂交法检测wp5 3 ,bcl 2 ,bax ,c myc ,Fas等凋亡相关基因的表达 ,采用真彩色图像分析仪定量检测。结果　 1.5～ 3 .0g/L苦参碱可诱导HepG2 凋亡 ,并且使凋亡相关基因wp5 3 ,bax ,Fas表达上调 ,而抗凋亡基因bcl 2 ,c myc表达下调。结论　一定浓度的苦参碱可诱导人肝癌细胞HepG2 凋亡 ,并且该凋亡与凋亡相关基因表达增强和抗凋亡相关基因表达减弱有关。 展开更多
关键词 苦参碱 肝细胞癌 凋亡 HEPG2
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苦参碱对HepG_2细胞代谢水平和基因水平的影响 被引量：64
3
作者 司维柯 李鹏 姚婕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1346-1349,共4页
目的　观察苦参碱抑制HepG2 细胞增殖时 ,代谢水平和基因水平的变化 ,以揭示苦参碱抑制HepG2 细胞增殖的机制。方法　 0～ 1 5g/L苦参碱作用HepG2 细胞 3d ,免疫组化检测AFP、PCNA、wp5 3、Rb、N ras、c myc蛋白的表达 ,原位杂交法检测w... 目的　观察苦参碱抑制HepG2 细胞增殖时 ,代谢水平和基因水平的变化 ,以揭示苦参碱抑制HepG2 细胞增殖的机制。方法　 0～ 1 5g/L苦参碱作用HepG2 细胞 3d ,免疫组化检测AFP、PCNA、wp5 3、Rb、N ras、c myc蛋白的表达 ,原位杂交法检测wp5 3、c mycmRNA的表达 ,真彩色图像定量分析检测结果 ,Microsoft-Excel软件统计学处理结果 ;放免法检测cAMP、cGMP量的改变 ;亲和层析法分离肝癌GGT(HSGGT)并检测HSGGT和GGT酶活性。结果　苦参碱处理HepG2 细胞后 ,与细胞代谢相关的指标发生变化 :cAMP升高 ,cAMP/cGMP比值升高 ;AFP、PCNA、cGMP、GGT、HSGGT量均降低。与基因相关的指标发生变化 :抑癌基因wp5 3、Rb表达增强 ,癌基因c myc表达减弱 ,N ras表达变化不明显。结论　一定浓度苦参碱处理HepG2 细胞后 ,在代谢水平和基因水平上均抑制了HepG2 的恶性增殖 ,表明苦参碱通过调节抑癌基因和癌基因的表达 。 展开更多
关键词 苦参碱 HEPG2细胞 代谢 基因水平 肝细胞癌 癌基因 抑癌基因
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苦参碱抑制HepG2细胞增殖及其剂量与抑制方式关系的研究 被引量：53
4
作者 司维柯 潘静 +1 位作者 陆华 李招权 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第2期185-189,共5页
目的研究0.05g·L^(-1)～3.5g·1^(-1)浓度苦参碱对人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制及其剂量与抑制方式的关系,为进一步研究苦参碱抑制HepG2细胞增殖的机制打下基础;为临床应用苦参碱治疗肿瘤奠定基础。方法苦参碱处理细胞后,MTT... 目的研究0.05g·L^(-1)～3.5g·1^(-1)浓度苦参碱对人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制及其剂量与抑制方式的关系,为进一步研究苦参碱抑制HepG2细胞增殖的机制打下基础;为临床应用苦参碱治疗肿瘤奠定基础。方法苦参碱处理细胞后,MTT法、细胞计数法、H^3-TdR掺入法测定HetG2细胞存活率、细胞生长曲线、DNA合成率的变化;台盼蓝拒染法和细胞外液LDH活性测定观察细胞膜的完整性。结果苦参碱浓度小于0.2g·L^1时不能抑制HepG2的增殖,细胞存活率大于80％;0.7g·L^(-1)～0.8g·L^1时,HepG2对药物中度敏感,细胞存活率为30％～50％:大于1.0g·L^1时为抗HepG2的敏感药物浓度,细胞存活率小于30％;苦参碱大于3.0g·L^(-1)时,细胞膜完整性破坏,以坏死细胞为主。而苦参碱对大鼠肝细胞影响很小,达1.5g·L^(-1)时,细胞存活率仍为72.4％。结论一定浓度苦参碱可抑制HepG2细胞增殖并且抑制作用呈时间和剂量依赖性。0.8g·L^(-1)可作为诱导HepG2细胞分化的作用浓度;1.5g·L^(-1)～2.5g·L^(-1)可作为诱导HepG2凋亡的作用浓度;苦参碱大于3.0g·L^(-1)时主要引起HepG2坏死。 展开更多
关键词 苦参碱 药理学 剂量 肿瘤细胞 药物作用
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苦参碱对HepG_2细胞系增殖能力的影响 被引量：33
5
作者 司维柯 张广运 +1 位作者 马立强 康格非 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期451-451,458,共2页
关键词 苦参碱 肝肿瘤 中医药疗法 HEPG2细胞 细胞增殖
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苦参碱对人肝癌细胞HepG_2的细胞形态影响和相关增殖因素的变化 被引量：14
6
作者 司维柯 肖桃元 康格非 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第6期553-556,共4页
目的　观察苦参碱作用于HepG2 细胞后 ,光镜和电镜下细胞形态结构改变以及AFP、PCNA和分裂指数的变化。方法　倒置显微镜下观察活细胞形态 ;光镜下观察Wright和苏丹Ⅲ染色的细胞形态和分裂指数 ;扫描和透射电镜观察细胞表面和内部超微... 目的　观察苦参碱作用于HepG2 细胞后 ,光镜和电镜下细胞形态结构改变以及AFP、PCNA和分裂指数的变化。方法　倒置显微镜下观察活细胞形态 ;光镜下观察Wright和苏丹Ⅲ染色的细胞形态和分裂指数 ;扫描和透射电镜观察细胞表面和内部超微结构改变 ;免疫组化和图像分析 ,检测AFP和PCNA。结果　未用药细胞具有肿瘤细胞典型的形态特征 ,细胞的分裂指数为 5 3 .8‰ ,胞浆内未见透明颗粒和空泡 ,苏丹Ⅲ染色为阴性。免疫组化染色AFP和PCNA为阳性。苦参碱处理细胞后 ,细胞数量减少 ,散在生长 ,形态呈多形性 ,细胞浆内充满圆形、透明的颗粒。Wright染色 ,细胞浆呈空泡状 ,细胞核变小 ,核浆比减小 ,核仁变小、数目减少 ,细胞的分裂指数降低。苏丹Ⅲ染色 ,胞浆内有阳性的颗粒。电镜下 ,细胞表面微绒毛变短、变粗 ,甚至消失。核内异染色质增多 ,核仁变小、甚至消失。细胞浆内滑面内质网扩张 ,并有脂肪空泡和自噬小体形成。胞浆局部还出现了较多的板层状排列的粗面内质网。细胞核膜和胞膜均完整。AFP和PCNA量 ,随用药浓度和作用时间的增加而降低。结论　苦参碱对HepG2 细胞的生长增殖有抑制作用 ,使HepG2 细胞的某些恶性增殖表型减弱或消失 ,反应了该细胞的恶性程度和侵袭力均减弱或消失。 展开更多
关键词 苦参碱 肝细胞癌 细胞形态 HEPG2 细胞增殖
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流式细胞术分析苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡 被引量：26
7
作者 司维柯 罗朝学 陈庆海 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期213-214,共2页
目的　为探讨苦参碱抑制HepG2增殖的机制。方法　以不同浓度苦参碱作用于HepG2细胞不同时间用PI及AnnexinV FITC/PI双标记两法检测凋亡细胞。结果　 0 8,1 5 ,2 0g/L苦参碱处理细胞 72h ,细胞均出现了凋亡峰 ,凋亡细胞分别为 10 5 7,... 目的　为探讨苦参碱抑制HepG2增殖的机制。方法　以不同浓度苦参碱作用于HepG2细胞不同时间用PI及AnnexinV FITC/PI双标记两法检测凋亡细胞。结果　 0 8,1 5 ,2 0g/L苦参碱处理细胞 72h ,细胞均出现了凋亡峰 ,凋亡细胞分别为 10 5 7,16 37,10 85 % ;细胞早期凋亡检测 :2 0 ,1 5 ,3 0g/L苦参碱分别作用 6h、12h、12h ,凋亡细胞分别达 7 7,8 6 ,15 7% ;当 3 0g/L苦参碱作用 12h ,坏死细胞达 2 1 9%。结论　一定浓度苦参碱可诱导HepG2细胞凋亡 ,凋亡与坏死相伴存在并呈剂量和时间依赖性。 展开更多
关键词 苦参碱 肿瘤细胞 培养 细胞凋亡 流式细胞术 肝肿瘤
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苦参诱导K562细胞分化的研究 被引量：19
8
作者 司维柯 秦建平 +2 位作者 蒋纪恺 王霞文 魏明竟 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期309-310,共2页
K562细胞属于人红白血病细胞株，是骨髓多能干细胞。以苦参作诱导分化剂，可使K562细胞有分化现象并向多方向分化，这为临床探索中药非杀伤性治疗白血病打下了良好的基础。
关键词 苦参 K562细胞 细胞分化
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苦参碱及氧化苦参碱抑制A549细胞增殖及诱导细胞凋亡的比较研究 被引量：16
9
作者 王源 司维柯 +1 位作者 李鹏 姚婕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期778-780,共3页
目的　观察比较苦参碱及氧化苦参碱对A5 49细胞系增殖能力的影响及其对A5 49细胞凋亡的诱导效应。方法　以不同剂量的苦参碱及氧化苦参碱分别作用A5 49细胞 ,观察细胞形态 ,MTT法检测细胞的增殖能力 ,TNUEL法原位检测DNA断裂 ,流式细胞... 目的　观察比较苦参碱及氧化苦参碱对A5 49细胞系增殖能力的影响及其对A5 49细胞凋亡的诱导效应。方法　以不同剂量的苦参碱及氧化苦参碱分别作用A5 49细胞 ,观察细胞形态 ,MTT法检测细胞的增殖能力 ,TNUEL法原位检测DNA断裂 ,流式细胞仪检测凋亡。结果　苦参碱在浓度为 0 5g L时即表现出明显的抑制A5 49增殖的作用 ,浓度在1 0g L时TUNEL原位检测DNA断裂为强阳性 ,流式细胞仪检测出凋亡峰 ;相同浓度的氧化苦参碱没有明显的抑制A5 49增殖的作用 ,当其浓度增加到 10倍出现对A5 49抑制增殖的作用 ,但是TUNEL原位检测DNA断裂为弱阳性 ,流式细胞仪不能检测出凋亡峰。结论　苦参碱可抑制A5 49细胞系增殖并诱导其凋亡 ;相同浓度下氧化苦参碱不能抑制A5 49细胞系增殖 。 展开更多
关键词 苦参碱 氧化苦参碱 A549细胞 凋亡
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苦参碱与氧化苦参碱影响荷瘤小鼠肿瘤生长及其免疫调节作用的研究 被引量：20
10
作者 李军 司维柯 +2 位作者 赵宸 李招权 潘静 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第27期2719-2721,共3页
目的探讨苦参碱(MA)与氧化苦参碱(OM)在体内的抑瘤作用及免疫调节机制。方法分别以一定剂量MA与OM处理荷HepG2肝癌细胞的裸鼠和荷H22肝癌细胞的昆明小鼠,检测肿瘤大小,并观察MA与OM对小鼠引起的迟发型超敏反应(DTH)、淋巴细胞增殖、碳... 目的探讨苦参碱(MA)与氧化苦参碱(OM)在体内的抑瘤作用及免疫调节机制。方法分别以一定剂量MA与OM处理荷HepG2肝癌细胞的裸鼠和荷H22肝癌细胞的昆明小鼠,检测肿瘤大小,并观察MA与OM对小鼠引起的迟发型超敏反应(DTH)、淋巴细胞增殖、碳粒廓清率、溶血素试验、脾脏系数、WBC计数等免疫学指标变化。结果 25、50及100 mg/kg的MA与OM对裸鼠体内肿瘤无抑制作用,OM对荷H22肝癌细胞昆明小鼠的抑瘤作用明显,各免疫指标与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 OM可以调动机体的免疫功能,产生抑瘤效应,在肿瘤化疗辅助用药方面具有应用前景。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 苦参碱 抑瘤作用 免疫调节
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苦参碱与氧化苦参碱抑制HepG2细胞增殖的对比研究 被引量：16
11
作者 李鹏 司维柯 +1 位作者 王源 姚婕 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2004年第5期261-264,共4页
目的比较研究苦参碱与氧化苦参碱体外抑制肝癌HepG2细胞增殖的效果并初步探讨其机制。方法不同剂量苦参碱与氧化苦参碱注射液处理细胞 ,细胞计数及溴化四唑蓝实验观察细胞增殖抑制 ;光镜观察细胞形态改变 ;流式细胞仪和Tunnel实验观察... 目的比较研究苦参碱与氧化苦参碱体外抑制肝癌HepG2细胞增殖的效果并初步探讨其机制。方法不同剂量苦参碱与氧化苦参碱注射液处理细胞 ,细胞计数及溴化四唑蓝实验观察细胞增殖抑制 ;光镜观察细胞形态改变 ;流式细胞仪和Tunnel实验观察细胞凋亡并检测细胞周期 ;免疫组化观察凋亡相关基因Bax与Bcl 2的表达。结果 0 .8g/L苦参碱处理细胞 3d即可明显抑制HepG2细胞增殖 ,细胞存活率为 5 1% ;1.5g/L苦参碱可明显诱导细胞凋亡 ,用药后大量细胞被阻滞于S期 ;1.5g/L的苦参碱使HepG2细胞凋亡相关基因Bax表达增强 ,Bcl 2的表达减弱。与苦参碱同浓度的氧化苦参碱不能抑制细胞增殖 ,1.5g/L氧化苦参碱处理细胞 3d ,细胞存活率仍为84 .2 % ;氧化苦参碱的浓度增至 8.0g/L时才出现明显凋亡峰。结论体外苦参碱诱导HepG2细胞凋亡能力强于氧化苦参碱 ,并调控了凋亡相关基因的表达 ,而氧化苦参碱浓度 6倍于苦参碱时细胞才出现凋亡。 展开更多
关键词 苦参碱 氧化苦参碱 HEPG2细胞 凋亡
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伴刀豆球蛋白A识别正常与肝癌γ-谷氨酰转移酶的实验观察 被引量：15
12
作者 司维柯 李士敏 +4 位作者 罗朝学 胡珍国 何长生 王源 魏明竞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期294-295,共2页
目的 :观察伴刀豆球蛋白A是否能有效的区分出正常与肝细胞肝癌特异γ 谷氨酰转移酶 (HCC SGGT) ,为进一步建立简便、快速、灵敏、特异的检测肝癌特异GGT的方法奠定基础。方法 :用植物凝集素亲和微柱法 ,二步洗脱 ,分离 10例正常人、5例... 目的 :观察伴刀豆球蛋白A是否能有效的区分出正常与肝细胞肝癌特异γ 谷氨酰转移酶 (HCC SGGT) ,为进一步建立简便、快速、灵敏、特异的检测肝癌特异GGT的方法奠定基础。方法 :用植物凝集素亲和微柱法 ,二步洗脱 ,分离 10例正常人、5例肝细胞肝癌病人、5例良性肝病病人血清中的GGT ,用速率法检测酶活性。得到层析图谱、总酶活性比和亲和率。结果 :正常与良性肝病病人血清第一步洗脱的酶活性较低(平均峰高分别为 1 62 ,1 2 6) ,而肝癌病人血清第一步洗脱的酶活性较高 (平均峰高为 16 8)。总酶活性比分别为 0 2 4,0 13 ,0 48;亲和率分别为 80 6% ,88 1% ,67 6%。结论 :伴刀豆球蛋白A与正常人、良性肝病病人血清中的GGT亲和性较强 ,与肝癌病人血清中的GGT亲和性较弱 ,伴刀豆球蛋白A能有效的区分出正常与肝癌特异GGT ,利用该特性可建立检测肝癌特异GGT的植物凝集素亲和法。 展开更多
关键词 肝肿瘤 γ-谷所酰转移酶 伴刀豆球蛋白A
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苦参碱诱导HepG2细胞分化相关代谢指征的变化 被引量：12
13
作者 司维柯 李招权 +1 位作者 张玮 陆华 《肿瘤研究与临床》 CAS 2001年第4期223-225,共3页
目的 :研究苦参碱抑制 Hep G2细胞增殖的机制。方法 :(0～ 1.5 ) g/ L苦参碱作用 Hep G2细胞 3天 ,免疫细胞化学和放免法检测 AFP、PCNA、c AMP、c GMP量的改变 ;亲和层析法分离肝癌 GGT(HSGGT) ,酶动力法检测 HSGGT和 GGT酶活性。结果 ... 目的 :研究苦参碱抑制 Hep G2细胞增殖的机制。方法 :(0～ 1.5 ) g/ L苦参碱作用 Hep G2细胞 3天 ,免疫细胞化学和放免法检测 AFP、PCNA、c AMP、c GMP量的改变 ;亲和层析法分离肝癌 GGT(HSGGT) ,酶动力法检测 HSGGT和 GGT酶活性。结果 :反应细胞分化的指标 c AMP升高 ,c AMP/ c GMP比值升高。反应细胞增殖的指标 AFP、PCNA、c GMP、GGT、HSGGT量均降低。结论 :苦参碱在代谢水平上诱导了 Hep G2细胞分化 ,是苦参碱抑制 Hep G2细胞增殖的机制之一。 展开更多
关键词 苦参碱 肝细胞癌 分化 代谢
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GGT的性质和分子水平的研究 被引量：9
14
作者 司维柯 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 1997年第2期54-56,共3页
GGT广泛分布于哺乳动物的多种组织中，它与谷胱甘肽的代谢有关，在临床实验室中常作为诊断肝胆胰疾病较灵敏的指标。在酶的研究中发现，该酶分子量和pI常报道不一，这主要与它的糖基组成有关，因此有多种形式的次级同工酶存在。GGT属膜... GGT广泛分布于哺乳动物的多种组织中，它与谷胱甘肽的代谢有关，在临床实验室中常作为诊断肝胆胰疾病较灵敏的指标。在酶的研究中发现，该酶分子量和pI常报道不一，这主要与它的糖基组成有关，因此有多种形式的次级同工酶存在。GGT属膜结合酶，由一先导链结合于生物膜上，若酶基因中缺失该肽段的基因序列，则合成酶（突变型）不能结合在膜上，但酶活性不变，GGT的酶活性中心既可与谷氨酰胺结合又可与γ-谷氨酰基结合，故它有双重催化活性。鼠和人GGT的基因序列很相近。人类GGT基因存在—GGT基因家族，它们的表达具有某些组织限定性和特异性。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转移酶 性质 分子
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Wnt5a基因在血液病及白血病细胞株中的表达 被引量：10
15
作者 李招权 司维柯 +2 位作者 潘静 袁媛 邹全明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期927-930,共4页
本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:... 本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:5例AML中4例均为阴性或弱阳性,仅1例完全缓解的病例表达呈强阳性。K562、HL-60细胞的Wnt5a表达也为阴性,Jurkat细胞的Wnt5a表达阳性。6例CML的Wnt5a表达均为阴性。4例ALL中3例为表达阳性或弱阳性,1例表达为阴性;2例CLL为阴性表达;2例MM中Wnt5a表达1例为弱阳性,1例为阴性;3例淋巴瘤中有1例为弱阳性,2例为阴性;2例AA、2例IDA、3例ITP、1例ET及PVWnt5a表达均为阳性或弱阳性。结论:在31例血液病标本及髓系白血病细胞株中,除ALL外,有明显的Wnt5a表达缺失或降低,而非恶性血液病例中Wnt5a表达普遍呈阳性,提示Wnt5a的表达下调可能与髓系白血病的发生有关。 展开更多
关键词 WNT5A 血液病 白血病细胞株 基因表达
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多渠道网络教学在《临床血液学检验》教学中的应用探讨 被引量：11
16
作者 张晓丽 潘静 +1 位作者 司维柯 杨忠 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第20期2852-2853,共2页
《临床血液学检验》是检验医学的一门重要的专业课,它是应用多种实验方法和技术分析研究血液和造血器官的病理变化,用于造血系统疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后监测的一门学科[1]。当前,不断涌现的各种先进诊断方法和仪器设备已... 《临床血液学检验》是检验医学的一门重要的专业课,它是应用多种实验方法和技术分析研究血液和造血器官的病理变化,用于造血系统疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后监测的一门学科[1]。当前,不断涌现的各种先进诊断方法和仪器设备已经逐步替代了传统检验人员的手工方法。在临床血液学检验中出现的较先进的诊断方法如荧光原位杂交、流式细胞术、聚合酶链反应（PCR）等大大地提高了血液疾病检测的准确率, 展开更多
关键词 临床血液学检验 疾病检测 造血系统疾病 教学效果 形态学检查 聚合酶链反应 骨髓象 鉴别诊断 传统检验 手工方法
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血清GGT的测定现状与临床诊断价值 被引量：11
17
作者 司维柯 陈宏础 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 1991年第6期254-257,共4页
γ-谷氨酰转肽酶(EC,2,322).又称γ—谷氨酰转移酶(γ-Glutamyle transferaseGGT),1950年由Hanes 等首先发现,它催化转谷氨酰基的反应。该酶属膜结合酶,分子量9～30万道尔登,最适pH8.9。GGT 是目前临床诊断酶中在体外活性最稳定的,这对... γ-谷氨酰转肽酶(EC,2,322).又称γ—谷氨酰转移酶(γ-Glutamyle transferaseGGT),1950年由Hanes 等首先发现,它催化转谷氨酰基的反应。该酶属膜结合酶,分子量9～30万道尔登,最适pH8.9。GGT 是目前临床诊断酶中在体外活性最稳定的,这对该酶的实验室测定和质控血清制作都带来了方便。GGT 在人体组织中存在广泛,以肾含量最高。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰 转移酶 血清
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过表达外源性CCN1对人骨肉瘤细胞系143B生长和迁移的影响 被引量：10
18
作者 司维柯 何通川 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期565-570,共6页
采用AdEasy系统构建带有标记基因GFP和FC的重组腺病毒AdCCN1,并感染人骨肉瘤细胞,观察外源性CCN1对肿瘤细胞生长和迁移的影响.PCR扩增FC编码序列标记的人CCN1,克隆到pAdTrack-TO4中获得重组穿梭载体pAdTrack-CCN1.PmeⅠ线性化该质粒并... 采用AdEasy系统构建带有标记基因GFP和FC的重组腺病毒AdCCN1,并感染人骨肉瘤细胞,观察外源性CCN1对肿瘤细胞生长和迁移的影响.PCR扩增FC编码序列标记的人CCN1,克隆到pAdTrack-TO4中获得重组穿梭载体pAdTrack-CCN1.PmeⅠ线性化该质粒并电转到有腺病毒骨架质粒的BJ/AdEasy-1菌中,同源重组获得腺病毒质粒pAdCCN1,PacⅠ线性化并转染293细胞,包装制备AdCCN1.卡那霉素抗性筛选、XbaⅠ与KpnⅠ酶切鉴定,荧光显微镜和Western印迹检测标记基因GFP和FC表达,鉴定获得的复制缺陷型重组腺病毒AdCCN1.AdCCN1与AdGFP分别感染人骨肉瘤细胞143B,通过MTT实验、胶原集落形成实验、划痕愈合和室移动实验,观察CCN1对143B增殖和迁移的影响.酶切鉴定表明,带有FC标记的CCN1被成功克隆到穿梭载体pAdTrack中.卡那霉素抗性筛选并酶切鉴定,获得重组腺病毒质粒pAdCCN1.Western印迹和荧光显微镜观察,确定与CCN1共表达的FC和GFP表达.AdCCN1感染骨肉瘤细胞,与对照比较细胞数量增多,集落形成增加,细胞划痕逐渐愈合,迁移至膜上的细胞数量明显增加.应用AdEasy系统高效快速构建了带有标记GFP和FC的重组腺病毒AdCCN1,为监控腺病毒转基因的效果提供了便捷的工具.AdCCN1感染骨肉瘤细胞后可促进细胞增殖和迁移,提示CCN1在肿瘤发生和转移中可能起到重要作用. 展开更多
关键词 CCN1/Cvr61 重组腺病毒 骨肉瘤细胞 增殖 迁移
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苦参碱抗人肝癌细胞株HepG2的作用及其机制研究 被引量：5
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作者 司维柯 李鹏 +1 位作者 王源 姚婕 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 2003年第5期288-290,共3页
苦参碱是中药苦参的主要抗肿瘤活性成分 ,体外实验研究表明 :苦参碱可抑制肝癌细胞增殖 ,其抑制方式与药物剂量和作用时间有关。一定浓度苦参碱诱导HepG2在细胞水平、代谢水平和基因水平均发生了不同程度的分化。苦参碱可诱导HepG2细胞... 苦参碱是中药苦参的主要抗肿瘤活性成分 ,体外实验研究表明 :苦参碱可抑制肝癌细胞增殖 ,其抑制方式与药物剂量和作用时间有关。一定浓度苦参碱诱导HepG2在细胞水平、代谢水平和基因水平均发生了不同程度的分化。苦参碱可诱导HepG2细胞凋亡。苦参碱抑制HepG2细胞增殖是通过激活G1期抑癌基因 p5 3、Rb、p2 1、p2 7、p16和促凋亡基因Bax的表达 ,抑制癌基因c myc和抗凋亡基因Bcl 2的表达 ,从而诱导细胞分化、凋亡 ,其中起主导作用的可能是Wp5 3和Rb基因。 展开更多
关键词 苦参碱 肝癌细胞 分化 凋亡
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低氧诱导因子-1α对骨形态发生蛋白2诱导的干细胞成软骨、成骨分化的影响 被引量：10
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作者 周年 黄伟 +8 位作者 廖军义 胡宁 陈筱蓉 梁熙 司维柯 杨忠 易世雄 凡廷旭 赵辰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1243-1248,共6页
目的探讨低氧通路中关键转录调控因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨形态发生蛋白2(bone morpho-genetic protein 2,BMP2)诱导干细胞骨、软骨分化的影响,阐明HIF-1α在干细胞成骨、软骨分化中的作用。方... 目的探讨低氧通路中关键转录调控因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨形态发生蛋白2(bone morpho-genetic protein 2,BMP2)诱导干细胞骨、软骨分化的影响,阐明HIF-1α在干细胞成骨、软骨分化中的作用。方法构建相应腺病毒AdBMP2、AdHIF-1α、AdGFP,单独或共同感染干细胞,Western blot法检测成软骨、成骨分化关键转录调控因子Sox9、Runx2的表达,Real-time PCR法检测成软骨、成骨分化标志物COL2A1、aggrecan、COL1A1和ALP mRNA表达,Alcian blue、ALP及Alizarin red S染色检测软骨细胞外基质及骨基质钙盐沉积情况。进行干细胞裸鼠皮下移植,观察不同处理组形成骨块的组织结构情况,探讨HIF-1α对BMP2诱导干细胞成骨、软骨分化的影响。结果诱导分化后第1、3天,BMP2+HIF-1α组Sox9蛋白表达明显高于BMP2单独处理组,而BMP2+HIF-1α组Runx2蛋白表达明显低于BMP2单独处理组。诱导分化后第7、9天,BMP2+HIF-1α组COL2A1、aggrecan mRNA相对表达明显高于BMP2单独处理组(P<0.05),而BMP2+HIF-1α组COL1A1、ALP mRNA相对表达明显低于BMP2单独处理组(P<0.05)。Alcian blue染色发现BMP2+HIF-1α组软骨细胞外基质分泌多于BMP2单独处理组,染色更深;ALP染色发现BMP2+HIF-1α组ALP的活性弱于BMP2单独处理组;茜素红染色发现BMP2+HIF-1α组较BMP2单独处理组骨基质钙盐沉积更少;体内试验组织学观察见BMP2+HIF-1α组软骨成分更多,骨化不明显,BMP2单独处理组软骨成分少,软骨内骨化更明显。结论HIF-1α明显增强了BMP2诱导的干细胞成软骨分化,抑制了成骨分化及软骨内骨化,维持了软骨分化表型。 展开更多
关键词 低氧诱导因子-1Α 骨形态发生蛋白2 干细胞 软骨分化 成骨分化
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