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人血管生长素基因的化学合成与克隆 被引量：3
1
作者 应康 刘景昌 +2 位作者 吴小舟 叶蕴辉 谢毅 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期409-416,共8页
采用固相亚磷酸胺法化学合成并克隆人血管生长素基因。该基因全长４２３ｂｐ，其中３６９ｂｐ的结构基因全部选用大肠杆菌偏爱的密码子。在结构基因上游设置了适合原核非融合蛋白表达的核糖体结合位点和Ｓ－Ｄ序列。采用两级退火一步拼... 采用固相亚磷酸胺法化学合成并克隆人血管生长素基因。该基因全长４２３ｂｐ，其中３６９ｂｐ的结构基因全部选用大肠杆菌偏爱的密码子。在结构基因上游设置了适合原核非融合蛋白表达的核糖体结合位点和Ｓ－Ｄ序列。采用两级退火一步拼接法成功克隆全长基因。该基因适合在多种融合或非融合原核表达载体中表达。 展开更多
关键词 血管生长素 基因重组 固相合成 无性系
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人18周胎儿脑cDNA文库的构建及鉴定 被引量：2
2
作者 林卿 杨岐生 +6 位作者 殷明 金丽娟 肖谷田 叶蕴辉 刘建平 王玮 谢毅 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期512-516,共5页
许多脑基因的特异性表达对人脑的发育、分化有着重要的作用．为了研究这些基因的结构和功能，构建了一个人18周胎儿脑cDNA文库．抽提总mRNA后，经过一系列的酶促反应合成cDNA．分级分离柱除去小片段后克隆到λgt10载体中．转染宿主菌C60... 许多脑基因的特异性表达对人脑的发育、分化有着重要的作用．为了研究这些基因的结构和功能，构建了一个人18周胎儿脑cDNA文库．抽提总mRNA后，经过一系列的酶促反应合成cDNA．分级分离柱除去小片段后克隆到λgt10载体中．转染宿主菌C600hfl后文库包装效率为4．6×106pfu／μg，cDNA平均插入片段大于1．2kbp．根据已知序列设计引物，从cDNA文库中扩增出神经生长因子（NGF）的全长编码基因． 展开更多
关键词 胎儿 人脑cDNA文库 胚胎学 基因 人类遗传学
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恶性疟原虫核糖体小亚基rRNA部分基因片段的克隆及序列分析
3
作者 杨晓明 谢毅 +4 位作者 李明 毕惠祥 叶蕴辉 吴小舟 李英杰 《新乡医学院学报》 CAS 1997年第4期355-357,360,共4页
目的了解我国恶性疟原虫云南地理株核糖体小亚基rDNA的核苷酸序列。方法根据已知恶性疟原虫核糖体小亚基rDNA序列．在其基因的中下游分别设计引物，采用聚合酶链式反应（PCR）技术，从云南省来源的恶性疟体外培养原虫的基因组DNA中扩增... 目的了解我国恶性疟原虫云南地理株核糖体小亚基rDNA的核苷酸序列。方法根据已知恶性疟原虫核糖体小亚基rDNA序列．在其基因的中下游分别设计引物，采用聚合酶链式反应（PCR）技术，从云南省来源的恶性疟体外培养原虫的基因组DNA中扩增出的基因片段酶切后将其插入pUC118／119载体，用Biosystems373ADNA序列分析仪测定。结果我国恶性疟原虫云南地理株核糖体小亚基rDNA核苷酸序列，与巴西IMTM22／7G8株的序列比较，在该基困的第1563位有一个A被T替换。结论该突变点位于真核生物核糖作小亚基rRNA基因已知序列种类的第三个可变区域内。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 核糖体小亚基 RDNA DNA序列分析
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