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浙江省2004-2007年细菌性痢疾流行特征分析 被引量:21
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作者 余昭 罗芸 +3 位作者 秦淑文 叶菊 缪梓萍 朱水荣 《中国预防医学杂志》 CAS 2009年第5期356-358,共3页
目的分析2004-2007年浙江省细菌性痢疾流行特征,为以后的防制工作提供依据。方法对全国传染病疫情信息网报告病例和浙江省历年疫情资料汇编录入Excel 2003整理后用SPSS 12.0统计软件进行统计分析。结果浙江省2004-2007年细菌性痢疾平均... 目的分析2004-2007年浙江省细菌性痢疾流行特征,为以后的防制工作提供依据。方法对全国传染病疫情信息网报告病例和浙江省历年疫情资料汇编录入Excel 2003整理后用SPSS 12.0统计软件进行统计分析。结果浙江省2004-2007年细菌性痢疾平均年发病率42.91/10万,发病高峰一般在每年的8-9月份,发病高峰年龄段均集中在0-10岁。多数暴发疫情发生在学校。福氏志贺菌是散发病例的优势菌种,而宋内志贺菌是暴发疫情的优势菌种。结论浙江省细菌性痢疾发病情况处于较为稳定的水平,加强学校和托幼机构的疫情防控是当前和今后一个时期的工作重点,必须对学校和托幼机构的卫生加强管理。 展开更多
关键词 细菌性痢疾 流行特征 病原学检测
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浙江省海、水产品霍乱弧菌污染状况调查及分子生物学研究 被引量:18
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作者 叶菊 程苏云 +4 位作者 陆群英 罗芸 吕华坤 孟真 姜理平 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第2期214-216,269,共4页
目的:了解浙江省海、水产品霍乱弧菌污染情况及海、水产品中霍乱弧菌的毒力特征,并对其进行耐药性和同源性分析,研究其分子特征及流行病学意义。方法:2005年7~9月采集浙江省温州、宁波、舟山的海、水产品及杭州某批发市场的甲鱼,... 目的:了解浙江省海、水产品霍乱弧菌污染情况及海、水产品中霍乱弧菌的毒力特征,并对其进行耐药性和同源性分析,研究其分子特征及流行病学意义。方法:2005年7~9月采集浙江省温州、宁波、舟山的海、水产品及杭州某批发市场的甲鱼,对检出的霍乱弧菌菌株进行耐药性分析,采用聚合酶链反应(PCR)方法进行霍乱弧菌肠毒素基因(Ctx)、小带联结毒素基因(Zot)、辅助霍乱肠毒素(Ace)的检测,并参照美国CDC PulseNet的统一方法进行脉冲场凝胶电泳(PF—GE)分型并作同源性分析。结果:从采集的990份海、水产品标本中检出14株霍乱弧菌,其中分离自青蛙1株、甲鱼9株、贝类1株、甲壳类1株、鱼类1株、其它1株。经耐药性分析,菌株对诺氟沙星、头孢噻肟100%敏感;对复方新诺明、萘啶酸耐药率最高,达64.3%,其次为庆大霉素、利福平,耐药率为35.7%。毒力基因检测表明,14株霍乱弧菌中3种毒力基因均阳性的有5株,占35.7%;携带Ctx的有7株,占50.0%;只携带Zot的有4株,占28.6%;另有3株毒力基因均阴性,占21.4%。脉冲场凝胶电泳分型显示,2株稻叶1f同源;2株小川1k同源;1株小川19k降解;9株0139群霍乱弧菌除1株死亡未作分析外,其余8株分为3个型。结论:此次海、水产品检测的霍乱弧菌血清型较多,但以0139群霍乱弧菌为主,其脉冲场凝胶电泳分型较多,这与浙江省近几年霍乱时有散发和多菌型并存的特点一致。耐药率及毒力基因携带情况与广东省有较大的差别。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 毒力基因 耐药率 脉冲场凝胶电泳
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2004-2006年浙江省沿海地区伤寒副伤寒疫情及监测结果分析 被引量:15
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作者 秦淑文 陈恩富 +6 位作者 谢淑云 柴程良 莫顺堂 韦余东 叶菊 余昭 吕华坤 《中国预防医学杂志》 CAS 2008年第4期284-286,共3页
目的分析浙江省2004-2006年沿海地区伤寒副伤寒流行趋势,为制定伤寒副伤寒防控措施提供依据。方法将浙江省沿海地区近三年伤寒副伤寒报告病例和监测点监测报表资料录入EXCEL2003整理后用SPSS12.0统计软件进行统计分析。结果沿海地区伤... 目的分析浙江省2004-2006年沿海地区伤寒副伤寒流行趋势,为制定伤寒副伤寒防控措施提供依据。方法将浙江省沿海地区近三年伤寒副伤寒报告病例和监测点监测报表资料录入EXCEL2003整理后用SPSS12.0统计软件进行统计分析。结果沿海地区伤寒副伤寒呈下降趋势,发病曲线由双峰型变为单峰型,且峰值逐年降低。病例在宁波和温州以农民、工人、学生为主,台州地区以民工、农民、学生为主,病例年龄集中在20~50岁,男性略多于女性。疑似病例和临床诊断病例阳性率没有明显差别,恢复期患者带菌率显著高于健康从业人员,病原菌以甲型副伤寒沙门菌为主,甲型副伤寒对利福平和萘啶酸耐药,且耐药率在97%以上。暴发疫情以水型为主。结论浙江省沿海地区伤寒副伤寒发病总体呈发病率逐年下降的趋势,但甲型副伤寒的发病呈上升趋势,对病例应规范治疗彻底治愈、加强恢复期患者的监测,发现阳性应及时隔离治疗,有利于疫情的控制。 展开更多
关键词 伤寒 副伤寒 沿海地区 流行病学
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浙江省209株沙门菌PFGE指纹图谱研究 被引量:13
4
作者 梅玲玲 罗芸 +5 位作者 叶菊 朱敏 张俊彦 潘军航 龚璞 杨婷婷 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第11期2478-2481,2492,共5页
目的:建立浙江省沙门菌PFGE指纹图谱资料库,为查明沙门菌食源性疾病污染源,确定各病例之间的病原学关系,及时处理大范围内呈散发特征的沙门菌事件提供科学依据。方法:收集、提取全省历年来在各类食品和腹泻病人中分离的209株沙门菌的D... 目的:建立浙江省沙门菌PFGE指纹图谱资料库,为查明沙门菌食源性疾病污染源,确定各病例之间的病原学关系,及时处理大范围内呈散发特征的沙门菌事件提供科学依据。方法:收集、提取全省历年来在各类食品和腹泻病人中分离的209株沙门菌的DNA,用限制性内切酶Xbal切割,脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术建立PFGE指纹图谱,用BioNu-merics V5.1软件UPGMA方法进行聚类分析。结果:209株沙门菌分成10个基因型别160种PFGE基因指纹图谱。其中67株德尔卑沙门菌可分为6个型别35种PFGE指纹图谱,主要集中在1个PFGE指纹图谱型别中。14株肠炎沙门菌分属3个型别8种PFGE指纹图谱,相似系数在0.800-1.000之间。鼠伤寒沙门菌间的PFGE指纹图谱差异较大。结论:PFGE指纹图谱与血清学型别无相关性,该方法在研究沙门菌分子流行病学、确定各病例之间的病原学关系效果良好。 展开更多
关键词 沙门菌 脉冲凝胶电泳 PFGE指纹图谱
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浙江省部分地区2003年痢疾志贺菌菌群分布和耐药性分析 被引量:12
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作者 叶菊 朱水荣 +2 位作者 莫顺堂 罗芸 孟真 《疾病监测》 CAS 2005年第2期80-81,共2页
目的 了解浙江省志贺菌的菌型分布及耐药情况 ,提高防治措施的针对性 ,避免抗生素的滥用。方法  15 8株志贺菌均按GB16 0 0 2 - 1995标准进行鉴定分型并采用kirby -Bauer法检测其对 14种抗生素的敏感性。结果  15 8株志贺菌中福氏志... 目的 了解浙江省志贺菌的菌型分布及耐药情况 ,提高防治措施的针对性 ,避免抗生素的滥用。方法  15 8株志贺菌均按GB16 0 0 2 - 1995标准进行鉴定分型并采用kirby -Bauer法检测其对 14种抗生素的敏感性。结果  15 8株志贺菌中福氏志贺菌 113株 (占 71 .5 2 % ) ;鲍氏志贺菌2 2株 (占 13. 92 % ) ;宋内志贺菌 14株 (占 8 .86 % ) ;痢疾志贺菌 9株 (占 5 . 70 % ) ;91株志贺菌对氨苄西林耐药最高达 95 .6 0 % ,其次为链霉素 (72. 5 3% ) ;对头孢他啶最敏感 ,其敏感性高达 95. 6 0 %。结论 近年来浙江省志贺菌的菌型分布及其对抗生素的敏感性均发生了明显的变化 ,医疗卫生部门应加强对志贺菌菌型及耐药性监测。 展开更多
关键词 痢疾志贺菌 浙江省 耐药性分析 2003年 菌群分布 kirby-Bauer法 医疗卫生部门 菌型分布 福氏志贺菌 鲍氏志贺菌 宋内志贺菌 耐药性监测 志贺菌菌型 抗生素 敏感性 耐药情况 防治措施 氨苄西林 头孢他啶 针对性 链霉素
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副溶血性弧菌快速检测方法研究 被引量:13
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作者 程苏云 罗芸 +1 位作者 叶菊 杨婷婷 《疾病监测》 CAS 2007年第9期642-645,共4页
目的以检测toxR基因作为副溶血性弧菌种水平上的特异性基因鉴定,建立一种快速、准确、简便的副溶血性弧菌(VP)筛选方法。方法根据toxR基因序列设计合成引物,扩增被检VP所含的相应基因。分别用标准株及地方株做对照,同时与常规鉴定方法... 目的以检测toxR基因作为副溶血性弧菌种水平上的特异性基因鉴定,建立一种快速、准确、简便的副溶血性弧菌(VP)筛选方法。方法根据toxR基因序列设计合成引物,扩增被检VP所含的相应基因。分别用标准株及地方株做对照,同时与常规鉴定方法比较。结果对浙江省2005年收集的286株来自临床病人和海产品的可疑VP鉴定,用常规方法鉴定出VP占总数的62.24%;用toxR基因检测,鉴定率占所有菌株的61.54%;两者差异无统计学意义(χ2=0.03,P>0.05),对40份海产品增菌液直接检测toxR基因与常规增菌分离鉴定法,均有37份标本检出VP,检出率为92.5%。结论该检测方法快捷、特异性好、敏感性高,可以作为VP快速筛选方法。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 toxR基因 分离培养 PCR
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浙江省伤寒副伤寒沙门菌耐药及分子分型 被引量:13
7
作者 罗芸 叶菊 +4 位作者 徐宝祥 张政 金大智 占利 杨婷婷 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期328-330,共3页
目的了解浙江省伤寒副伤寒沙门菌耐药及分子分型特点,为伤寒副伤寒防制工作提供依据。方法采用WHO推荐的改良K-B纸片法,对209株甲型副伤寒沙门菌和5株伤寒沙门菌进行14种抗生素敏感性试验;运用脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)方法对119株甲型... 目的了解浙江省伤寒副伤寒沙门菌耐药及分子分型特点,为伤寒副伤寒防制工作提供依据。方法采用WHO推荐的改良K-B纸片法,对209株甲型副伤寒沙门菌和5株伤寒沙门菌进行14种抗生素敏感性试验;运用脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)方法对119株甲型副伤寒沙门菌进行分子分型及流行病学特征分析。结果209株甲型副伤寒沙门菌对红霉素、萘啶酸和利福平100%耐药,对阿米卡星100%敏感,对环丙沙星的敏感率仅为58%;5株伤寒沙门菌对红霉素和利福平100%耐药,对头孢噻吩、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、氨苄西林、阿米卡星和阿莫西林/克拉维酸100%敏感;不同地区间的甲型副伤寒沙门菌对大部分药物敏感率一致,只有多西环素存在较大差异;119株甲型副伤寒沙门菌共产生20种PFGE带型,并主要集中在2种同源性较高的型别。结论2008年浙江省伤寒副伤寒以甲型副伤寒菌株为优势株,不同地区甲型副伤寒沙门菌对大部分抗生素敏感率一致;高发地区(台州)的菌株PFGE带型比较分散,可能与菌株变异有关。 展开更多
关键词 伤寒 副伤寒 耐药率 脉冲场凝胶电泳
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实时PCR在大肠杆菌O157∶H7快速检测中的应用 被引量:13
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作者 张建华 陆群英 +3 位作者 程苏云 卢亦愚 叶菊 罗芸 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期839-841,M0004,共4页
目的建立一种快速、敏感、特异的大肠杆菌O157∶H7的定量检测方法。方法根据GenBank公布的O157∶H7大肠杆菌rfbE基因序列,应用分子生物学软件进行序列比对,在该基因的保守区设计引物和TaqMan探针,对荧光定量PCR反应条件进行优化,建立实... 目的建立一种快速、敏感、特异的大肠杆菌O157∶H7的定量检测方法。方法根据GenBank公布的O157∶H7大肠杆菌rfbE基因序列,应用分子生物学软件进行序列比对,在该基因的保守区设计引物和TaqMan探针,对荧光定量PCR反应条件进行优化,建立实时荧光定量PCR检测大肠杆菌O157∶H7的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行了评价。结果所有大肠杆菌O157∶H7菌株的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性;该方法检测的灵敏度可达1cfu/μL,重复性检测的变异系数均小于5%。在模拟污染牛奶中,可检出1×102cfu/μL的细菌。从细菌核酸提取至完成检测约需3h。结论本研究建立的基于Taqman探针技术的实时PCR检测体系具有快速、灵敏度高、特异性强等优点,可用于大肠杆菌O157∶H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。 展开更多
关键词 实时PCR TAQMAN探针 大肠杆菌O157:H7 检测
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多重荧光PCR结合Allglo探针技术检测艰难梭菌相关毒素基因 被引量:12
9
作者 金大智 罗芸 +7 位作者 罗丽 张政 叶菊 张严峻 吴方 方小飞 李辉 王贤军 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期32-35,共4页
目的采用多重荧光PCR结合Allglo探针技术,建立一种快速、特异、灵敏的鉴定艰难梭菌相关毒素基因的方法,并对浙江杭州地区腹泻患者的产毒型艰难梭菌感染现状进行调查研究。方法应用型研究。针对艰难梭菌毒素tcdA和tcdB基因设计引物和... 目的采用多重荧光PCR结合Allglo探针技术,建立一种快速、特异、灵敏的鉴定艰难梭菌相关毒素基因的方法,并对浙江杭州地区腹泻患者的产毒型艰难梭菌感染现状进行调查研究。方法应用型研究。针对艰难梭菌毒素tcdA和tcdB基因设计引物和相应的Allglo探针,优化PCR扩增体系,并评价其特异性、灵敏度、重复性。收集2012年8至12月杭州市第一人民医院的门诊腹泻患者粪便标本共180份,对粪便中携带tcdA和tcdB基因的产毒型艰难梭菌进行鉴定,同时通过对tcdA和tcdB基因直接测序进一步验证荧光PCR检测结果的可靠性。结果本试验建立的结合Allglo探针的多重荧光PCR方法可同时、准确、特异地鉴定艰难梭菌tcdA和tcdB基因,灵敏度可达10CFU/mI。定量检测tcdA基因的循环阈值(Ct)值变异系数分别为2.30%、0.42%、0.81%,检测tcdB基因的ct值变异系数分别为1.91%、1.02%、1.18%,均小于5%。在180份腹泻粪便样本中,检测m26份阳性样本,阳性率为14.4%,其中tcdA和tcdB毒素基因均阳性的样本为23份(23/26,88.5%),仅tcdA毒素基因阳性的样本为2份(2/26,7.7%);仅tcdB毒素基因阳性的样本为1份(1/26,3.8%)。同时,采用直接测序方法对样本进行扩增检测和序列比对,与荧光定量PCR结果完全一致。结果显示浙江杭州地区腹泻患者感染的产毒型艰难梭菌以同时携带tcdA和tcdB毒素基因的菌株为主。结论本研究建立的Allglo探针的多重荧光PCR方法可用于临床上快速、准确地检测产毒型艰难梭菌。 展开更多
关键词 梭菌 难辨 细菌毒素类 肠毒素类 细胞毒素类 荧光 聚合酶链反应
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浙江省O157大肠杆菌监测及其分子生物学特性 被引量:11
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作者 叶菊 占利 +4 位作者 陆群英 罗芸 程苏云 张政 吕华坤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期247-251,共5页
目的了解肠出血性大肠杆菌O157∶H7和其他O157大肠杆菌在浙江省动物、人群中的分布、流行以及PFGE分型、毒力基因携带状况。方法按全国O157∶H7监测方案在5-10月份肠道传染病高发季节,采集全省各地(市)肠道门诊腹泻病人粪便,进行O157大... 目的了解肠出血性大肠杆菌O157∶H7和其他O157大肠杆菌在浙江省动物、人群中的分布、流行以及PFGE分型、毒力基因携带状况。方法按全国O157∶H7监测方案在5-10月份肠道传染病高发季节,采集全省各地(市)肠道门诊腹泻病人粪便,进行O157大肠杆菌分离培养,并用免疫磁珠分离法对浙江省5个监测点的宿主动物进行O157∶H7分离培养、鉴定,可疑菌株以PCR法检测O157∶H7抗原、志贺样毒素(stx1和stx2)、粘附抹平因子(eaeA)及溶血素(hly)4种毒力基因。用脉冲场凝胶电泳(pulse field gel electrophoresis,PFGE)方法进行同源性分析,同时选择14种抗生素进行药敏试验,并将分析结果与本省首株患者粪便中分离的产志贺样毒素的O157∶H7菌株进行比较。结果全省5个监测点2006年共监测动物粪便标本2377份,分离到4株O157∶H7菌株,阳性率为0.17%;同时在绍兴、舟山肠道门诊腹泻病人粪便中分离到2株O157:H?菌株。4株O157∶H7菌株,stx2、Hly、eaeA均阳性,stx1均阴性;2株O157∶H?菌株仅1株携带eaeA毒力基因。脉冲场凝胶电泳分型显示,4株O157∶H7菌株分3个型,除金华地区2006年分离所得2株完全相似外,其它相同地区不同年代分离的O157∶H7菌株及相同年代不同地区分离的O157∶H7菌株则完全不相似。2株O157∶H?菌株1株PF-GE电泳条带降解,另1株与其它O157∶H7菌株电泳条带差异明显。结论浙江省大肠杆菌0157菌株在动物中以携带stx2毒力基因的O157∶H7菌株为主,但在腹泻患者中则以不带志贺样毒素的O157∶H?菌株为主。不同地区分离的O157∶H7菌株PFGE分型差异明显。羊、奶牛是携带stx2毒力基因的O157∶H7大肠杆菌的主要宿主。各级疾控应加强对宿主动物和腹泻病人大肠杆菌O157的分离监测和流行病学调查。 展开更多
关键词 大肠杆菌 O157∶H7 毒力基因 PFGE 监测
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浙江沿海地区海及水产品霍乱弧菌污染状况调查分析 被引量:11
11
作者 吕华坤 陈恩富 +5 位作者 谢淑云 柴程良 韦余东 莫顺堂 叶菊 罗芸 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期336-338,共3页
目的了解浙江省沿海地区的海及水产品霍乱弧菌污染状况和菌型特征,为制定海及水产品卫生管理措施和霍乱防治对策提供科学依据。方法选择3个沿海县市,分别在农贸市场、养殖场(或捕捞点)、餐馆等场所采集990份海及水产品标本,标本经碱性... 目的了解浙江省沿海地区的海及水产品霍乱弧菌污染状况和菌型特征,为制定海及水产品卫生管理措施和霍乱防治对策提供科学依据。方法选择3个沿海县市,分别在农贸市场、养殖场(或捕捞点)、餐馆等场所采集990份海及水产品标本,标本经碱性蛋白胨水增菌,4号培养基选择性培养,生化鉴定和血清、噬菌体分型,毒力基因检测。结果海及水产品带菌率为1.41%,其中甲鱼带菌率最高为8.9%。有稻叶型、小川型、0139群等3个血清型,各型菌株数分别为2株、2株、10株。12株菌株中9株有毒力基因,其中5株有3个毒力基因,1株只有 CTX、ACE 毒力基因,3株只有 ZOT 毒力基因。结论浙江省沿海地区海及水产品受到霍乱弧菌污染,霍乱弧菌3种菌型全有,大多具有毒力基因,能引起霍乱暴发的危险。 展开更多
关键词 弧菌 霍乱 水产品 污染 分析
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浙江省钩端螺旋体PCR检测方法建立与应用 被引量:10
12
作者 姜理平 孟真 +3 位作者 程苏云 占利 罗芸 叶菊 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第8期1392-1394,共3页
目的:为更好的进行钩端螺旋体病监测,为预防措施提供依据。方法:建立PCR检测方法,进行灵敏度、特异性研究。探索钩端螺旋体PCR扩增DNA条件。对浙江省2006年分离菌11株进行PCR鉴定,对龙游、常山捕获的一百只鼠和一百只蛙肝、脾、肾标本... 目的:为更好的进行钩端螺旋体病监测,为预防措施提供依据。方法:建立PCR检测方法,进行灵敏度、特异性研究。探索钩端螺旋体PCR扩增DNA条件。对浙江省2006年分离菌11株进行PCR鉴定,对龙游、常山捕获的一百只鼠和一百只蛙肝、脾、肾标本在提取其DNA后进行PCR检测。结果:所建立PCR检测方法具备较高灵敏度和较好特异性。对2006年分离的钩体菌株进行的PCR鉴定结果与血清学鉴定结果相符。鼠和蛙肝、脾、肾标本进行PCR检测,PCR检测阳性率10%,钩体菌株培养分离率仅为1%。2χ=15.58,P<0.05有显著差异。测序及培养均能证实PCR检测结果具有特异性。结论:钩体PCR检测方法的建立能更加准确的反映野生动物自然带毒率。钩体PCR检测方法可推广应用。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 钩端螺旋体 监测
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一组长角血蜱中检出莱姆病螺旋体和斑点热群立克次体复合感染 被引量:9
13
作者 孟真 姜理平 +3 位作者 陆群英 程苏云 叶菊 占利 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1217-1220,共4页
目的了解浙江省山区野生动物和蜱中莱姆病、斑点热、埃立克体病(无形体病)的感染情况。方法采用巢式PCR对采集的鼠、蜱标本进行莱姆病伯氏疏螺旋体、斑点热群立克次体、埃立克体(无形体)特异性核酸片段检测分析。结果从121份鼠标本... 目的了解浙江省山区野生动物和蜱中莱姆病、斑点热、埃立克体病(无形体病)的感染情况。方法采用巢式PCR对采集的鼠、蜱标本进行莱姆病伯氏疏螺旋体、斑点热群立克次体、埃立克体(无形体)特异性核酸片段检测分析。结果从121份鼠标本和105组蜱标本中检出阳性结果14份。鼠标本中检出伯氏疏螺旋体5S~23S rDNA间隔区片段1份和埃立克体(无形体)16S rDNA 5’端片段2份。蜱标本中检出阳性11份,包括伯氏疏螺旋体5S-23S rDNA间隔区片段3份和斑点热群立克次体外膜蛋白OmpA基因5’端片段8份。其中1组长角血蜱成虫标本为伯氏疏螺旋体和斑点热群立克次体复合感染,5S-23S rRNA基因间隔区和ompA基因片段均阳性,分别与伯氏疏螺旋体法雷氏基因型和马赛立克次体株等关系较近。结论在同一组长角血蜱成虫中同时检出莱姆病疏螺旋体和斑点热群立克次体复合感染。 展开更多
关键词 长角血蜱 伯氏疏螺旋体 斑点热群立克次体 复合感染
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不同来源STECO157:H7生物学特性研究 被引量:8
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作者 程苏云 叶菊 +1 位作者 占利 陆群英 《疾病监测》 CAS 2007年第8期519-522,共4页
目的探讨浙江省产志贺毒素大肠埃希菌O157:H7菌株PFGE分型及携带毒力基因以及耐药情况。方法菌株生化、血清鉴定按API20E鉴定系统;大肠杆菌O157:H7诊断血清凝集试验;采用聚合酶链反应(PCR)法检测O、H抗原及毒力基因SLT1、SLT2、Hly、eae... 目的探讨浙江省产志贺毒素大肠埃希菌O157:H7菌株PFGE分型及携带毒力基因以及耐药情况。方法菌株生化、血清鉴定按API20E鉴定系统;大肠杆菌O157:H7诊断血清凝集试验;采用聚合酶链反应(PCR)法检测O、H抗原及毒力基因SLT1、SLT2、Hly、eaeA;STECO157:H7分型用脉冲场凝胶电泳(pulse field gel electrophoresis,PFGE)方法进行;14种抗生素进行药敏试验采用K-B法。结果5株可疑菌株经生化和血清鉴定符合O157:H7特性;毒力基因检测所有分离株SLT2、Hly、eaeA三种毒力基因均阳性而SLT1均阴性;脉冲场凝胶电泳分型结果显示,有2株菌PFGE电泳条带完全相同,其余3株菌电泳条带不同,5株菌共分为4个带型;经耐药性分析,菌株对头孢噻吩、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星100%敏感;对复方新诺明、氨苄西林100%耐药。结论STEC 0157:H7菌株在浙江省一些地区存在,并且携带SLT2毒力基因,PFGE型别较多,同时也有人间感染病例的出现,提示应加强O157:H7监测力度,防止该菌在人间的感染和流行。 展开更多
关键词 STECO157:H7 毒力基因 PFGE
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腹泻样本中创伤弧菌的检测分析 被引量:8
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作者 潘军航 叶菊 +2 位作者 朱敏 罗芸 张政 《疾病监测》 CAS 2012年第1期59-61,共3页
目的了解浙江省部分地区腹泻患者创伤弧菌的感染情况。方法对2010年6-10月采集的标本,经3%氯化钠碱性蛋白胨水于37℃增菌后,划线纤维二糖多粘菌素E平板于40℃培养18~24 h,挑取可疑菌落进行分子生物学鉴定。结果在144份腹泻患者粪便样... 目的了解浙江省部分地区腹泻患者创伤弧菌的感染情况。方法对2010年6-10月采集的标本,经3%氯化钠碱性蛋白胨水于37℃增菌后,划线纤维二糖多粘菌素E平板于40℃培养18~24 h,挑取可疑菌落进行分子生物学鉴定。结果在144份腹泻患者粪便样本中检测分离到2株创伤弧菌,阳性率为1.39%(2/144);均为生物Ⅰ型,其基因型为vcgC/16S rRNA B型。药敏结果显示分离的创伤弧菌对氨基糖苷类抗生素耐药如阿米卡星、庆大霉素。结论在监测的腹泻样本中分离到具有较强致病能力的创伤弧菌,且氨基糖苷类抗生素耐药,应加强对海水产品和腹泻样本中创伤弧菌的检测及耐药分析,预防创伤弧菌的感染暴发。 展开更多
关键词 创伤弧菌 腹泻 检测
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利用MLST技术对浙江省大肠杆菌O157的分子流行病学研究 被引量:7
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作者 叶菊 占利 +3 位作者 梅玲玲 罗芸 姚苹苹 姜理平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期901-904,共4页
目的对浙江省2005-2010年大肠杆菌O157分离株进行分子分型研究,了解菌株间的遗传进化关系,为浙江省大肠杆菌O157监测及爆发疫情的控制提供基础。方法选择Pasteur大肠杆菌多位点序列分型(Multilocus SequenceTyping,MLST)方案,对大肠杆菌... 目的对浙江省2005-2010年大肠杆菌O157分离株进行分子分型研究,了解菌株间的遗传进化关系,为浙江省大肠杆菌O157监测及爆发疫情的控制提供基础。方法选择Pasteur大肠杆菌多位点序列分型(Multilocus SequenceTyping,MLST)方案,对大肠杆菌O157分离株及882364菌株进行MLST分型,确定菌株序列型(Sequence type,ST);采用DNAsp、eBURST、START2等软件进行分析。结果 30株菌中,27株O157∶H7菌株具备相同序列型(ST-284),占90%(27/30),其他3株菌序列型分别为ST-367、ST-125、ST-296。8个管家基因核苷酸多态性(Pi)范围为0.00119(polB)~0.00648(uidA),putP基因多态性位点比例最高(4.6%),trpA基因多态性位点比例最低(0.4%)。进化分析结果显示,这些序列型分别属于Group 1及Group 11群。结论浙江省动物源性大肠杆菌O157∶H7的主要序列型为ST-284,与江苏省病人株882364(ST-296)具有同一个进化祖先,提示应加强浙江省大肠杆菌O157病原学监测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 多位点序列分型(MLST) 管家基因 分子流行病学
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浙江省引起暴发的宋内志贺菌的耐药性及分子分型研究(2006) 被引量:7
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作者 占利 叶菊 +2 位作者 罗芸 程苏云 陆群英 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第4期696-698,共3页
目的:了解引起浙江省菌痢暴发的宋内志贺菌耐药性及分子分型情况,为流行病学溯源及合理有效使用抗生素提供依据。方法:77株志贺菌均按GB16002-1995标准进行鉴定分型,并采用Kirby-Bauer法检测其对14种抗生素的敏感性,并采用WHONET5.3软件... 目的:了解引起浙江省菌痢暴发的宋内志贺菌耐药性及分子分型情况,为流行病学溯源及合理有效使用抗生素提供依据。方法:77株志贺菌均按GB16002-1995标准进行鉴定分型,并采用Kirby-Bauer法检测其对14种抗生素的敏感性,并采用WHONET5.3软件,对菌株的耐药性进行分析。同时,通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对菌株进行分子分型,通过同源性分析以确定菌株间的亲缘关系。结果:77株宋内志贺菌对氨苄西林、利福平的耐药率最高,达100.0%,其次是红霉素98.7%;对诺氟沙星、环丙沙星最敏感,其敏感性高达98.7%。脉冲场凝胶电泳分型77株试验菌株共分为3个PFGE基因型,1型16株占20.8%,庆元、苍南菌痢暴发可能源于同一宋内志贺菌克隆系;2型34株占44.2%,常山、龙湾菌痢暴发可能源于同一宋内志贺菌克隆系;3型27株,均分离自江山,占35.0%。结论:宋内志贺菌是2006年引起浙江省菌痢暴发的主要菌型,多重耐药现象严重,基因型间差异较小,抗生素型与基因型间无明确关系。 展开更多
关键词 志贺菌 耐药性 脉冲场凝胶电泳 分子分型
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肠炎血清型沙门菌多重PCR检测方法的建立及应用 被引量:7
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作者 占利 叶菊 +3 位作者 梅玲玲 程苏云 罗芸 杨婷婷 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期244-247,251,共5页
目的为临床确诊及基层实验室快速准确鉴定肠炎血清型沙门菌提供实验室支持,同时为沙门菌传统血清学鉴定方法提供技术补充。方法根据沙门菌菌体抗原A/D1群基因、鞭毛抗原基因(fliC-HG)及肠炎沙门菌特异性基因片段(sdfI)设计引物,建立多重... 目的为临床确诊及基层实验室快速准确鉴定肠炎血清型沙门菌提供实验室支持,同时为沙门菌传统血清学鉴定方法提供技术补充。方法根据沙门菌菌体抗原A/D1群基因、鞭毛抗原基因(fliC-HG)及肠炎沙门菌特异性基因片段(sdfI)设计引物,建立多重PCR体系并进行反应条件优化。对所建立的体系的特异性进行检测,并将该体系应用于浙江省2009-2010年分离的共计53株样本的检测。结果建立并优化了肠炎沙门菌检测的多重PCR体系,该体系具有高特异性,可准确快速鉴定肠炎血清型沙门菌,也可区分A群及D1群血清群的沙门菌,并能检测鞭毛抗原为HG的沙门菌,对实际样本检测符合率达100%。结论该体系能正确鉴定肠炎血清型沙门菌,可作为沙门菌传统血清学分型的辅助方法,可弥补商品化血清质量参差不齐的缺陷。并为肠炎沙门菌的监测与实验室诊断提供了一种简单快速、重复性好的新方法。 展开更多
关键词 多重PCR 肠炎沙门菌 血清型 SDF Ⅰ基因
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一种艰难梭菌毒素基因检测方法的临床应用评价 被引量:7
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作者 王丽倩 罗芸 +4 位作者 黄忱 叶菊 宋小军 金大智 王贤军 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期511-514,共4页
目的 通过与BD MAX试剂盒检测临床粪便标本中艰难梭菌毒素基因的比对,评价本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法.方法 本研究为临床应用研究.2014年7月1日至9月30日采集浙江中医药大学附属杭州市第一医院的腹泻患者粪便标本147份... 目的 通过与BD MAX试剂盒检测临床粪便标本中艰难梭菌毒素基因的比对,评价本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法.方法 本研究为临床应用研究.2014年7月1日至9月30日采集浙江中医药大学附属杭州市第一医院的腹泻患者粪便标本147份,分别采用BD MAX和本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法进行检测.BD MAX试剂盒采用自动化核酸提取和PCR检测;实验室前期研发方法通过提取粪便DNA后进行荧光定量PCR检测,最后采用SPSS10.0软件进行分析.结果 147份标本中,两方法均检出艰难梭菌毒素B基因阳性33份,阴性114份,其中有4份标本的结果不一致.以BD MAX试剂盒的结果为标准,得出本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法的敏感度为93.94%(31/33),特异度为98.25%(112/114),阳性预测值为93.94 %(31/33)和阴性预测值为98.25 %(112/114).且上述两种方法检测结果的一致性较好(Kappa值为0.922,P〈0.01).结论 本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法与BD MAX试剂盒性能相似,敏感度高、特异度强,同时该方法成本低并可直接对腹泻标本进行测定,无需配套提取仪器,更适合我国临床开展常规艰难梭菌毒素基因检测. 展开更多
关键词 难辨梭菌 细菌毒素类 分子诊断技术
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市售海虾副溶血性弧菌多血清群混合污染状况研究 被引量:6
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作者 叶菊 梅玲玲 +3 位作者 罗芸 占利 徐宝祥 朱敏 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第10期2591-2592,2594,共3页
目的:了解市售海虾类副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)污染状况,为浙江省预防控制副溶血性弧菌食源性疾病提供技术支撑。方法:选择夏冬两个季节,从杭州市15个农贸市场采集基围虾、明虾、白虾。采用MPN法定量检测副溶血性弧菌,... 目的:了解市售海虾类副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)污染状况,为浙江省预防控制副溶血性弧菌食源性疾病提供技术支撑。方法:选择夏冬两个季节,从杭州市15个农贸市场采集基围虾、明虾、白虾。采用MPN法定量检测副溶血性弧菌,参照GB/T4789.7-2008方法分离、鉴定副溶血性弧菌,采用血清凝集试验对菌株进行血清型分析。结果:78件海虾74件检出副溶血性弧菌,副溶血性弧菌检出率高达94.9%。不同的季节其检出率无显著差异(P>0.05),但夏季副溶血性弧菌的污染浓度显著高于冬季(P<0.001);血清群集中在O1、O5、O11,三个血清型共占总分离菌株数的51.3%。多种O抗原群副溶血性弧菌混合污染情况夏季明显高于冬季(P<0.005)。结论:本省市售虾类副溶血性弧菌污染情况十分严重,夏季尤其突出,因此加强市售海虾类副溶血性弧菌的监测,对控制副溶血性弧菌食物中毒或食源性疾病发生有着重要的意义。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 定量监测 血清群
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