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TALEN介导的MYH9基因沉默及对细胞周期与凋亡的影响
被引量：
8
1
作者
朱显军
邓海军
+6 位作者
叶
耿
泰
沈智勇
李风萍
郭伟洪
杨庆斌
刘浩
李国新
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期375-380,共6页
目的利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因,观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法根据斯丹赛Fast TALETMTALEN试剂盒说明书,设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot...
目的利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因,观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法根据斯丹赛Fast TALETMTALEN试剂盒说明书,设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot等检测质粒活性,成功挑取MYH9基因敲低单克隆株,并对构建好的细胞株进行周期和凋亡检测。结果成功挑选的MGC803单克隆细胞株未检测到MYH9基因完全敲除;MYH9基因敲低后,MGC803细胞周期受阻于G2/M期(P<0.05),早期凋亡增加(P<0.05)。结论利用TALEN技术成功构建MGC803细胞MYH9基因敲低单克隆株,该模型有助于后期深入探讨胃癌MYH9基因功能。
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关键词
TALEN技术
MYH9
细胞周期
细胞凋亡
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职称材料
CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制
被引量：
4
2
作者
严力
叶
耿
泰
+3 位作者
沈智勇
朱显军
刘浩
李国新
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期767-771,776,共6页
目的检测胶原三股螺旋重叠蛋白(CTHRC1)在结直肠癌组织及细胞中的表达,探讨CTHRC1对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。方法应用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRC1在结直肠癌组织和5株结直肠癌细胞的表达;将靶向作用于CTHRC1...
目的检测胶原三股螺旋重叠蛋白(CTHRC1)在结直肠癌组织及细胞中的表达,探讨CTHRC1对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。方法应用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRC1在结直肠癌组织和5株结直肠癌细胞的表达;将靶向作用于CTHRC1的sh RNA和NC转染进LOVO细胞;CCK-8、Transwell、平板克隆检测细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。Western blotting检测转染后CTHRC1、ERK1/2、P-ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-catenin表达的变化。结果与正常黏膜组织相比,20例癌组织中的CTHRC1 m RNA的平均表达量为0.0411±0.054,显著高于正常黏膜组织P=0.016,蛋白水平的结果与之一致;同时,CTHRC1在SW620和LOVO细胞里的表达(m RNA水平和蛋白水平)均显著高于HT29细胞株;较之对照组,CTHRC1敲低组抑制了LOVO细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,差异均具有统计学意义P<0.05。当CTHRC1在m RNA和蛋白水平的表达均被明显抑制时,总ERK1/2在保持基本不变的的前提下,P-ERK1/2明显降低,EMT出现逆转(即MET,E-cadherin升高,N-cadherin、Vimentin、β-catenin降低)。结论 CTHRC1在结直肠癌组织及高转移潜能的人结直肠癌细胞株SW620和LOVO中高表达。敲低CTHRC1抑制了结直肠癌细胞株LOVO的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。CTHRC1通过增强ERK1/2的磷酸化所介导的EMT促进结直肠癌的侵袭转移。
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关键词
结直肠癌
胶原三股螺旋重叠蛋白
短发卡RNA
上皮间充质转化
ERK1/2
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职称材料
胃癌重要的调控因子——microRNAs
被引量：
2
3
作者
叶
耿
泰
蔡建春
《医学综述》
2011年第9期1324-1328,共5页
microRNAs(miRNAs)是细胞内一类保守的单链小分子RNA,仅19～25个核苷酸。miRNAs参与调节细胞的增殖、分化及凋亡等过程,对个体生长发育以及包括肿瘤在内的多种疾病的发生、发展起着重要的调节作用。近年来,胃癌相关miRNAs研究不断深入,...
microRNAs(miRNAs)是细胞内一类保守的单链小分子RNA,仅19～25个核苷酸。miRNAs参与调节细胞的增殖、分化及凋亡等过程,对个体生长发育以及包括肿瘤在内的多种疾病的发生、发展起着重要的调节作用。近年来,胃癌相关miRNAs研究不断深入,从miRNAs表达谱研究、特定miRNAs的功能性分析以及特定miRNAs表达异常的内在机制等方面揭示了miRNAs在胃癌发生、发展中扮演的角色,探索了miRNAs在胃癌早期诊断、早期治疗和预后评估等方面的价值。
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关键词
MICRORNAS
表达谱
胃肿瘤
单核苷酸多态性
基因突变
表观遗传
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职称材料
题名
TALEN介导的MYH9基因沉默及对细胞周期与凋亡的影响
被引量：
8
1
作者
朱显军
邓海军
叶
耿
泰
沈智勇
李风萍
郭伟洪
杨庆斌
刘浩
李国新
机构
南方医科大学南方医院普外科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期375-380,共6页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA021103)
公益性行业科研专项(201402015)
+4 种基金
国家科技支撑计划(2013BAI05B0503)
广东省省级科技计划项目(2014A020212629)
2015年南方医院院长基金(2015C020)
高等学校博士学科点专项科研基金(20124433110010)
国家临床重点专科建设项目~~
文摘
目的利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因,观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法根据斯丹赛Fast TALETMTALEN试剂盒说明书,设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot等检测质粒活性,成功挑取MYH9基因敲低单克隆株,并对构建好的细胞株进行周期和凋亡检测。结果成功挑选的MGC803单克隆细胞株未检测到MYH9基因完全敲除;MYH9基因敲低后,MGC803细胞周期受阻于G2/M期(P<0.05),早期凋亡增加(P<0.05)。结论利用TALEN技术成功构建MGC803细胞MYH9基因敲低单克隆株,该模型有助于后期深入探讨胃癌MYH9基因功能。
关键词
TALEN技术
MYH9
细胞周期
细胞凋亡
Keywords
transcription activator-like effector nuclease
MYH9 gene
cell cycle
cell apoptosis
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制
被引量：
4
2
作者
严力
叶
耿
泰
沈智勇
朱显军
刘浩
李国新
机构
南方医科大学南方医院普外科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期767-771,776,共6页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金(20124433110010)
国家临床重点专科建设项目
广东省高校优秀青年创新人才培养计划(育苗工程)项目(2013LYM_0006)
文摘
目的检测胶原三股螺旋重叠蛋白(CTHRC1)在结直肠癌组织及细胞中的表达,探讨CTHRC1对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。方法应用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRC1在结直肠癌组织和5株结直肠癌细胞的表达;将靶向作用于CTHRC1的sh RNA和NC转染进LOVO细胞;CCK-8、Transwell、平板克隆检测细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。Western blotting检测转染后CTHRC1、ERK1/2、P-ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-catenin表达的变化。结果与正常黏膜组织相比,20例癌组织中的CTHRC1 m RNA的平均表达量为0.0411±0.054,显著高于正常黏膜组织P=0.016,蛋白水平的结果与之一致;同时,CTHRC1在SW620和LOVO细胞里的表达(m RNA水平和蛋白水平)均显著高于HT29细胞株;较之对照组,CTHRC1敲低组抑制了LOVO细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,差异均具有统计学意义P<0.05。当CTHRC1在m RNA和蛋白水平的表达均被明显抑制时,总ERK1/2在保持基本不变的的前提下,P-ERK1/2明显降低,EMT出现逆转(即MET,E-cadherin升高,N-cadherin、Vimentin、β-catenin降低)。结论 CTHRC1在结直肠癌组织及高转移潜能的人结直肠癌细胞株SW620和LOVO中高表达。敲低CTHRC1抑制了结直肠癌细胞株LOVO的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。CTHRC1通过增强ERK1/2的磷酸化所介导的EMT促进结直肠癌的侵袭转移。
关键词
结直肠癌
胶原三股螺旋重叠蛋白
短发卡RNA
上皮间充质转化
ERK1/2
Keywords
colorectal cancer
collagen triple helix repeat containing 1
small hairpin RNA
epithelial-mesenchymal transition
ERK1/2
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
胃癌重要的调控因子——microRNAs
被引量：
2
3
作者
叶
耿
泰
蔡建春
机构
福建医科大学教学医院
厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤中心
出处
《医学综述》
2011年第9期1324-1328,共5页
文摘
microRNAs(miRNAs)是细胞内一类保守的单链小分子RNA,仅19～25个核苷酸。miRNAs参与调节细胞的增殖、分化及凋亡等过程,对个体生长发育以及包括肿瘤在内的多种疾病的发生、发展起着重要的调节作用。近年来,胃癌相关miRNAs研究不断深入,从miRNAs表达谱研究、特定miRNAs的功能性分析以及特定miRNAs表达异常的内在机制等方面揭示了miRNAs在胃癌发生、发展中扮演的角色,探索了miRNAs在胃癌早期诊断、早期治疗和预后评估等方面的价值。
关键词
MICRORNAS
表达谱
胃肿瘤
单核苷酸多态性
基因突变
表观遗传
Keywords
microRNAs
Expression profile
Gastric carcinoma
Single nucleotide polymorphism
Gene mutation
Epigenetics
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TALEN介导的MYH9基因沉默及对细胞周期与凋亡的影响
朱显军
邓海军
叶
耿
泰
沈智勇
李风萍
郭伟洪
杨庆斌
刘浩
李国新
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
8
下载PDF
职称材料
2
CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制
严力
叶
耿
泰
沈智勇
朱显军
刘浩
李国新
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
下载PDF
职称材料
3
胃癌重要的调控因子——microRNAs
叶
耿
泰
蔡建春
《医学综述》
2011
2
下载PDF
职称材料
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