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A型塞内卡病毒VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 被引量：1
1
作者 秦文珍 李挺 +11 位作者 赵欣 董苏洁 翟焕杰 叶晨倩 叶曼青 童武 郑浩 于海 单同领 童光志 兰道亮 孔宁 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期195-200,共6页
A型塞内卡病毒(SVA)是一种新兴的猪病原体,可引起母猪水泡样病变和仔猪急性死亡。本研究将SVA的VP1基因分别克隆到原核表达载体pCold-I和pCold-TF,并将测序正确的重组质粒VP1-pCold-I、VP1-pCold-TF转化BL21(DE3)大肠杆菌中,诱导表达重... A型塞内卡病毒(SVA)是一种新兴的猪病原体,可引起母猪水泡样病变和仔猪急性死亡。本研究将SVA的VP1基因分别克隆到原核表达载体pCold-I和pCold-TF,并将测序正确的重组质粒VP1-pCold-I、VP1-pCold-TF转化BL21(DE3)大肠杆菌中,诱导表达重组蛋白。结果显示:VP1-pCold-I表达的目的蛋白在沉淀(包涵体)中,VP1-pCold-TF表达的蛋白为可溶性蛋白。分别纯化上述表达的蛋白,并免疫BALB/c小鼠,经四次免疫后得到多克隆抗体。经Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定,制备的多克隆抗体具有良好的Western blot效价和IFA效价,为相关基础研究和应用研究提供了工具。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 VP1 原核表达 多克隆抗体
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A型塞内卡病毒3D蛋白原核表达及多克隆抗体制备
2
作者 程群 孙大格 +5 位作者 翟雪滢 杨心雨 叶晨倩 叶曼青 孔宁 单同领 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期191-195,共5页
A型塞内卡病毒(SVA)是一种无囊膜的单股正链小RNA病毒,是塞内卡病毒属的唯一成员,其感染后可引起仔猪的急性死亡和母猪水泡样病变。SVA编码的非结构蛋白3D在病毒增殖及拮抗宿主天然免疫反应中发挥着重要的作用。本研究旨在原核表达SVA 3... A型塞内卡病毒(SVA)是一种无囊膜的单股正链小RNA病毒,是塞内卡病毒属的唯一成员,其感染后可引起仔猪的急性死亡和母猪水泡样病变。SVA编码的非结构蛋白3D在病毒增殖及拮抗宿主天然免疫反应中发挥着重要的作用。本研究旨在原核表达SVA 3D蛋白,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。以SVA RNA为模板,通过RT-PCR试验扩增3D基因,并将3D基因克隆至原核表达载体pCold-Ⅰ中,构建重组质粒3D-pCold-Ⅰ。将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达3D蛋白,纯化该重组蛋白后免疫BALB/c小鼠制备SVA 3D蛋白的多克隆抗体。结果显示,原核表达的SVA 3D蛋白是一种可溶性蛋白,其分子质量约为55 kDa。经Western blot和IFA试验鉴定,制备的SVA 3D多克隆抗体具有良好的反应性,本研究为SVA的基础研究和应用研究提供了工具。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 3D蛋白 原核表达 多克隆抗体
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猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白的研究进展
3
作者 苏朗驹 黄宗洋 +4 位作者 黄俊 张琬玓 孙敬帅 叶曼青 李智丽 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第3期200-208,共9页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)是猪流行性腹泻(PED)的病原,PEDV可导致猪的急性腹泻、脱水甚至死亡。PEDV最早在1971年被报道,如今,它已成为引起仔猪腹泻的最常见病原体之一,对我国养猪行业造成极大的经济损失。核衣壳(N)蛋白是PEDV主要的结构... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是猪流行性腹泻(PED)的病原,PEDV可导致猪的急性腹泻、脱水甚至死亡。PEDV最早在1971年被报道,如今,它已成为引起仔猪腹泻的最常见病原体之一,对我国养猪行业造成极大的经济损失。核衣壳(N)蛋白是PEDV主要的结构蛋白质之一。本文对PEDV N蛋白的核定位信号、生理功能、与宿主细胞互作和检测方法四个方面的研究进展综述,以期能对N蛋白的了解更够更加深入,并为PED防控提供参考作用。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 核衣壳蛋白 核定位 宿主细胞 检测方法 研究进展
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猪流行性腹泻病毒与宿主细胞互作研究进展
4
作者 黄宗洋 孙敬帅 +4 位作者 黄俊 张琬玓 苏朗驹 叶曼青 李智丽 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期203-210,共8页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)是导致仔猪腹泻最常见的病原之一。猪流行性腹泻(PED)自1971年被发现后,至今仍对全球养猪业造成巨大威胁,给我国养猪业造成了严重的经济损失。为成功建立感染并能够在宿主体内进行高效复制和扩散,PEDV需要与宿主... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是导致仔猪腹泻最常见的病原之一。猪流行性腹泻(PED)自1971年被发现后,至今仍对全球养猪业造成巨大威胁,给我国养猪业造成了严重的经济损失。为成功建立感染并能够在宿主体内进行高效复制和扩散,PEDV需要与宿主细胞进行紧密的互作。因此,了解PEDV与宿主细胞的相互作用是阐明病毒致病机制的基础和疫病防控的前提。本文从四个方面对PEDV与宿主细胞互作的研究进展进行了综述,包括PEDV与细胞受体和内体系统的互作、PEDV与宿主细胞基因转录和蛋白合成系统的互作、PEDV与宿主细胞内质网应激系统及细胞凋亡系统的互作,以及PEDV与宿主细胞天然免疫系统的互作。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 宿主 相互作用 天然免疫
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