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肠道病毒TaqMan荧光定量RT-PCR法快速检测 被引量:31
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作者 严菊英 卢亦愚 +3 位作者 徐昌平 龚黎明 葛琼 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期818-820,共3页
目的建立一种特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法检测肠道病毒核酸,应用于暴发疫情的实验室应急检测。方法根据GenBank登录的肠道病毒基因序列,应用生物学软件进行序列比对,在肠道病毒基因的保守区设计特异性引物和TaqMan探针;对荧光... 目的建立一种特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法检测肠道病毒核酸,应用于暴发疫情的实验室应急检测。方法根据GenBank登录的肠道病毒基因序列,应用生物学软件进行序列比对,在肠道病毒基因的保守区设计特异性引物和TaqMan探针;对荧光RT-PCR反应条件进行优化,验证方法的特异性和灵敏度。同时对疑似肠道病毒感染者的临床样本进行检测。结果该方法对肠道病毒的检测有高度的特异性,可检出脊髓灰质炎、柯萨奇和埃可等肠道病毒,与腮腺炎、麻疹、风疹、乙型脑炎等病毒均无交叉反应。检测的灵敏度达0.1病毒效价滴定(TCID50);可直接从疑似肠道病毒感染者的脑脊液、疱疹液和粪便等标本中检测肠道病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需3 h左右。结论所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR是一种快速检测肠道病毒特异、敏感的方法,适用于由肠道病毒感染引起的应急疫情的实验室早期诊断。 展开更多
关键词 荧光定量RT-PCR TAQMAN探针 肠道病毒 临床标本
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新媒体时代数字化阅读的审视 被引量:27
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作者 朱咫渝 《现代情报》 CSSCI 2011年第2期26-29,共4页
阅读作为人从符号中获得意义的一种社会实践活动,随着媒介的变化而不断变化着。大众阅读方式从笨媒体时代、纸媒体时代、电子媒体时代到新媒体时代一路变迁,每个时期都有其特点。新媒体生态下出现了新的阅读形式,包括网络阅读、手机阅... 阅读作为人从符号中获得意义的一种社会实践活动,随着媒介的变化而不断变化着。大众阅读方式从笨媒体时代、纸媒体时代、电子媒体时代到新媒体时代一路变迁,每个时期都有其特点。新媒体生态下出现了新的阅读形式,包括网络阅读、手机阅读及电视阅读。数字化阅读是充满个性的阅读、是声色俱全的阅读、是互动式的阅读,它结合文字以外的声音、影像、气味、触感,让人类重归综合运用各种感官的全观认知经验。 展开更多
关键词 新媒体 纸本阅读 数字化阅读
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荧光定量RT-PCR技术快速检测SARS病毒核酸 被引量:24
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作者 冯燕 卢亦愚 +5 位作者 严菊英 李敏红 龚黎明 葛琼 周敏 《中国病毒学》 CSCD 2005年第3期228-231,共4页
建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量RTPCR方法用于检测严重急性呼吸道综合症病毒(severeacuterespiratorysyndromeassociatecoronavirus,SARSCoV)核酸。筛选针对SARS病毒基因保守区域设计的引物与TaqMan探针,并对荧光定量RTPC... 建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量RTPCR方法用于检测严重急性呼吸道综合症病毒(severeacuterespiratorysyndromeassociatecoronavirus,SARSCoV)核酸。筛选针对SARS病毒基因保守区域设计的引物与TaqMan探针,并对荧光定量RTPCR反应体系与反应条件进行优化,验证本方法的特异性、敏感度与重复性。实验结果表明:本方法对SARS病毒核酸的检测具有高度特异性,与甲1型、甲3型、乙型流感病毒、禽流感病毒H5N1、麻疹及其他呼吸道病毒均无交叉反应;检测灵敏度达0.1TCID50;从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,且操作简便,重复性好。本研究建立的TaqMan荧光定量RTPCR方法特异、敏感、快速,适合于临床实验室进行SARS病毒的早期快速检测。 展开更多
关键词 荧光定量RT-PCR TAQMAN探针 SARS病毒
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荧光定量RT-PCR快速检测乙型流感病毒核酸 被引量:22
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作者 卢亦愚 严菊英 +2 位作者 冯燕 茅海燕 《浙江预防医学》 2005年第3期1-3,共3页
目的 建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量RT -PCR方法用于检测乙型流感病毒核酸。方法 根据GenBank登录的流感毒株序列 ,应用生物学软件进行序列比对 ,在乙型流感病毒核蛋白(NP)基因的保守区设计引物和TaqMan探针进行筛选 ,... 目的 建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量RT -PCR方法用于检测乙型流感病毒核酸。方法 根据GenBank登录的流感毒株序列 ,应用生物学软件进行序列比对 ,在乙型流感病毒核蛋白(NP)基因的保守区设计引物和TaqMan探针进行筛选 ,对荧光定量RT -PCR反应条件进行优化 ,检测该方法的特异性和灵敏度。此外还对疑似乙型流感含漱液标本进行检测。结果 该方法对乙型流感病毒的检测有高度的特异性 ,对甲1 型、甲3型、禽流感病毒H5、SARS病毒及其他呼吸道病毒均无交叉反应 ,检测的灵敏度达 0 0 1TCID50 ,可从疑似流感患者含漱液中直接检测流感病毒核酸 ,从病毒核酸提取至完成检测仅需 3h左右。结论 本研究建立的TaqMan荧光定量RT -PCR是一种快速检测乙型流感病毒特异、敏感的新方法。 展开更多
关键词 荧光定量RT-PCR TAQMAN探针 乙型流感病毒 检测
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浙江省2005年麻疹病毒流行株基因特性分析 被引量:21
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作者 冯燕 严菊英 +4 位作者 卢亦愚 茅海燕 周敏 余蓓蓓 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期406-408,共3页
目的分析浙江省2005年麻疹病毒流行株的基因特性。方法对暴发疫情中分离的 4株麻疹病毒采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增血凝素蛋白(H)和核蛋白(N)基因,纯化产物进行核苷酸序列测定。结果浙江省2005年分离到的4株麻疹病毒流行株均... 目的分析浙江省2005年麻疹病毒流行株的基因特性。方法对暴发疫情中分离的 4株麻疹病毒采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增血凝素蛋白(H)和核蛋白(N)基因,纯化产物进行核苷酸序列测定。结果浙江省2005年分离到的4株麻疹病毒流行株均为麻疹H1基因型,属于中国麻疹病毒优势基因型。各分离株之间H基因氨基酸同源性为99.2%-99.7%,N基因氨基酸同源性为99.8%;与中国疫苗株沪191株的H基因和N基因比较,其氨基酸水平上的同源性分别为 95.2%-95.5%和95.5%。结论浙江省2005年分离到的麻疹病毒流行株属于同一性状毒株,均为 H1基因型;与中国疫苗株沪191株相比较,两者在基因特性上存在明显差异。 展开更多
关键词 麻疹病毒 基因型别 核苷酸序列
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浙江省麻疹病毒分离株的基因特性与免疫原性研究 被引量:20
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作者 严菊英 卢亦愚 +7 位作者 张健华 冯燕 茅海燕 龚黎明 葛琼 周敏 李敏红 《中国病毒学》 CSCD 2006年第1期1-5,共5页
为了研究浙江省1999~2003年麻疹病毒分离株的抗原性变化以及基因特性,阐明其基因特性与麻疹流行的关系,以及抗原性变化对疫苗免疫效果的影响。我们从麻疹患者含漱液中分离麻疹病毒株,制备大鼠免疫血清,与疫苗株沪191和Edmonston株等进... 为了研究浙江省1999~2003年麻疹病毒分离株的抗原性变化以及基因特性,阐明其基因特性与麻疹流行的关系,以及抗原性变化对疫苗免疫效果的影响。我们从麻疹患者含漱液中分离麻疹病毒株,制备大鼠免疫血清,与疫苗株沪191和Edmonston株等进行交叉中和试验,测定各毒株之间抗原比;并采集儿童麻疹疫苗免疫前后血清,分别测定其对不同毒株的中和抗体滴度;采用RT-PCR法扩增麻疹毒株血凝素蛋白(H)及核蛋白(N)基因,进行核苷酸序列测定。结果浙江99-1和浙江02-2株与沪191株之间的抗原比分别为3.0和7.3;儿童免疫后血清对浙江02-2株的麻疹中和抗体平均几何滴度(GMT)为15.03,明显低于沪191疫苗株(GMT为68.12);浙江省1999~2003年麻疹分离株之间,H基因氨基酸同源性为99.8%,N基因氨基酸同源性为98.5%~100.0%;与沪191疫苗株的H基因和N基因相比较,分离株与其在氨基酸水平上同源性分别为95.5%~95.7%和95.9%~96.3%。从基因进化树显示,1999~2003年浙江省分离到的麻疹毒株属于H1基因型,但与疫苗株沪191在抗原性和基因特性上已存在明显的差异。 展开更多
关键词 麻疹病毒 沪191疫苗株 抗原性 基因特性
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Taq Man荧光定量RT-PCR快速检测甲3型流感病毒 被引量:20
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作者 严菊英 卢亦愚 +2 位作者 冯燕 茅海燕 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第2期169-172,共4页
目的建立一种特异、灵敏、快速的荧光定量RTPCR方法用于检测甲3型流感病毒核酸。方法根据GenBank登录的流感毒株序列,应用生物学软件进行序列比对,在甲3型流感病毒血凝素(HA)基因的保守区设计引物和TaqMan探针、并进行筛选。对荧光RT-PC... 目的建立一种特异、灵敏、快速的荧光定量RTPCR方法用于检测甲3型流感病毒核酸。方法根据GenBank登录的流感毒株序列,应用生物学软件进行序列比对,在甲3型流感病毒血凝素(HA)基因的保守区设计引物和TaqMan探针、并进行筛选。对荧光RT-PCR反应条件进行优化,检测该方法的特异性和灵敏度。并对疑似流感含漱液标本进行检测。结果该方法对甲3型流感病毒的检测有高度的特异性,对甲1型、乙型、禽流感病毒H5、SARS病毒及其他呼吸道病毒均无交叉反应,检测的灵敏度达0.01TCID50,可从疑似流感患者含漱液中直接检测流感病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需3h左右。结论本研究建立的TaqMan荧光定量RTPCR是一种快速检测甲3型流感病毒特异、敏感的新方法。 展开更多
关键词 荧光定量RT-PCR TAQMAN探针 甲3型流感病毒 临床标本 检测
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浙江省登革热暴发疫情的病原学和分子生物学研究 被引量:22
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作者 严菊英 卢亦愚 +6 位作者 翁景清 茅海燕 冯燕 徐昌平 李婵 谢荣辉 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期339-344,共6页
2004年浙江省慈溪市发生了由输入病例引起的登革热暴发,共报告病例113例。为查明病因,从分子水平分析流行毒株的生物学特征,对疑似患者血清测定了登革病毒IgM和IgG抗体,并用C6/36和BHK-21细胞分离登革病毒。同时采用RT-PCR方法扩增病毒... 2004年浙江省慈溪市发生了由输入病例引起的登革热暴发,共报告病例113例。为查明病因,从分子水平分析流行毒株的生物学特征,对疑似患者血清测定了登革病毒IgM和IgG抗体,并用C6/36和BHK-21细胞分离登革病毒。同时采用RT-PCR方法扩增病毒E基因和NS1基因后又分别进行序列测定,并与不同国家和地区的登革热毒株进行同源性和进化树分析。结果表明,从患者血清中检测到登革病毒IgM和IgG抗体及登革I型病毒核酸;从18份疑似患者血清中分离到10株登革I型病毒;浙江登革I型分离株(ZJ/07/04)与登革I型夏威夷株、广东株和泰国株的E基因氨基酸同源性分别为96.3%、98.8%和99.2%,而与登革Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型毒株相同区域氨基酸同源性分别为68.3%、77.5%和62.8%。基因进化树显示浙江省登革病毒分离株与泰国株亲缘关系最近,在进化树的同一分支上。从病原学、血清学和分子生物学特征上均证实该次疫情的病因为由泰国输入的登革I型病毒。 展开更多
关键词 暴发 登革Ⅰ型 E基因 NS1基因 序列分析
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浙江省2008-2009年三起诺如病毒胃肠炎暴发的病原分子特征分析 被引量:21
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作者 龚黎明 葛琼 +5 位作者 陈寅 卢亦愚 张严峻 严菊英 周敏 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期490-493,共4页
目的分析浙汀省3起病毒性胃肠炎暴发疫情的诺如病毒分子特征。方法收集监测期间病毒性胃肠炎暴发疫情患者的粪便标本,采用荧光定量RT-PCR方法检测诺如病毒,并选择部分阳性标本扩增部分多聚酶区(RdRp)和衣壳蛋白区,同时采用3’RACE... 目的分析浙汀省3起病毒性胃肠炎暴发疫情的诺如病毒分子特征。方法收集监测期间病毒性胃肠炎暴发疫情患者的粪便标本,采用荧光定量RT-PCR方法检测诺如病毒,并选择部分阳性标本扩增部分多聚酶区(RdRp)和衣壳蛋白区,同时采用3’RACE(rapid amplification of cDNA 3’ends)扩增诺如病毒基因组3’末端,获得完整的开放读码框架(ORF)2和ORF3序列。结果3起暴发疫情共检测标本62份,诺如病毒阳性41份,其中诺如病毒Ⅰ(GⅠ)基因组阳性27例,Ⅱ基因组(GⅡ)阳性9例,GⅠ+GⅡ阳性5例。结果显示,引起浙江省2008—2009年3起病毒性胃肠炎暴发疫情的诺如病毒具有病毒基因型的多样性,包括GⅠ.8、GⅡ.b、GⅠ.2与GⅠ.6重组株、GⅠ.8和GⅡ.b混合感染。结论诺如病毒是浙江省病毒性腹泻暴发疫情的重要病原体,呈现出病毒基冈型的多样性,并在省内首次检测到诺如病毒的重组和混合感染毒株。 展开更多
关键词 诺如病毒 分子特征 重组 混合感染
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91例成人麻疹血清流行病学研究 被引量:21
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作者 夏时畅 卢亦愚 +2 位作者 严菊英 冯燕 《中国计划免疫》 2006年第1期25-28,共4页
目的探讨浙江省成人麻疹病例增多的原因。方法对4起麻疹流行中的91例成人患者,采集急性期和恢复期双份血清,检测麻疹血凝抑制抗体,用酶联免疫吸附试验测定IgG、IgM抗体。结果91例患者被确认为麻疹病例,发病年龄高峰在15~30岁。同... 目的探讨浙江省成人麻疹病例增多的原因。方法对4起麻疹流行中的91例成人患者,采集急性期和恢复期双份血清,检测麻疹血凝抑制抗体,用酶联免疫吸附试验测定IgG、IgM抗体。结果91例患者被确认为麻疹病例,发病年龄高峰在15~30岁。同时以急性期、恢复期IgM、IgG抗体的分布为标识进行分类,推算出91例患者中,麻疹减毒活疫苗(MV)原发性免疫失败或未免疫者为71例,占患者总数的78.0%;继发性免疫失败者为20人,占患者总数的22.0%。MV未免疫与原发性免疫失败病例中,有87.3%为未免疫或接种史不详。结论对不同人群应采取针对性的免疫措施与方案,以建立与完善人群的麻疹免疫屏障。 展开更多
关键词 麻疹 血清 流行病学 IGG IGM
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严重脓毒症和脓毒性休克的急诊集束化治疗依从性调查分析 被引量:20
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作者 朱莹 陶然君 +2 位作者 童建菁 陆一鸣 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期138-141,共4页
目的 调查严重脓毒症和脓毒性休克在急诊患者中的发生率以及针对严重脓毒症和脓毒性休克早期集束化治疗的依从性.方法 选择2009年5月至6月由救护车送至上海交通大学医学院附属瑞金医院急诊科的患者为调查对象,统计严重脓毒症和脓毒性休... 目的 调查严重脓毒症和脓毒性休克在急诊患者中的发生率以及针对严重脓毒症和脓毒性休克早期集束化治疗的依从性.方法 选择2009年5月至6月由救护车送至上海交通大学医学院附属瑞金医院急诊科的患者为调查对象,统计严重脓毒症和脓毒性休克的发生率,对符合诊断标准的患者分别统计早期复苏集束化治疗各项指标完成的依从性.结果 共纳入急诊就诊患者917例,其中符合严重脓毒症和脓毒性休克诊断标准者96例,发生率为10.47%.在符合诊断标准的患者中,早期复苏集束化治疗、使用抗菌药物前留取病原学标本、2 h内放置深静脉导管并监测中心静脉压(CVP)与中心静脉血氧饱和度(ScvO2)、3 h内使用广谱抗菌药物、6 h内早期目标导向治疗(EGDT)达标、12 h内乳酸下降或原乳酸≤2 mmol/L的依从性分别为1.04%、3.12%、2.08%、83.33%、1.04%、23.96%,急诊内科各指标的依从性依次为1.19%、3.57%、2.38%、83.33%、1.19%、26.19%,急诊外科各指标的依从性依次为0、0、0、83.33%、0、8.33%,急诊内、外科依从性比较差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 严重脓毒症和脓毒性休克在急诊就诊患者中占相当比例,但医师的认识不足;早期集束化治疗依从性较低,需加大指南的教育及执行程度. 展开更多
关键词 脓毒症 严重 休克 脓毒性 集束化治疗 依从性
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TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒 被引量:19
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作者 卢亦愚 严菊英 +3 位作者 冯燕 徐昌平 茅海燕 《中国病毒学》 CSCD 2006年第5期472-476,共5页
建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量RT-PCR方法,用于检测H5亚型禽流感病毒。针对H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异... 建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量RT-PCR方法,用于检测H5亚型禽流感病毒。针对H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异性、敏感性与准确性;并通过体外克隆技术建立病毒基因拷贝数进行定量分析。结果表明:引物与探针的优化浓度分别640nmol/L和480nmol/L,体系具有良好的保守性和特异性,与其他呼吸道病毒均无交叉反应。方法检测灵敏度为100拷贝/反应,标准曲线线性范围为107~102拷贝/反应,从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,操作简便,重现性好。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法特异、敏感、快速,适合于临床实验室进行H5亚型禽流感病毒的快速定量检测。 展开更多
关键词 荧光定量RT-PCR TAQMAN-MGB探针 H5亚型禽流感病毒(AIV H5)
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2018年浙江省健康人群乙型肝炎血清流行病学调查分析 被引量:15
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作者 周洋 +4 位作者 袁辰 严睿 唐学 何寒青 邓璇 《疾病监测》 CAS 2020年第10期904-908,共5页
目的了解2018年浙江省健康人群乙型肝炎(乙肝)病毒血清标志物流行情况。方法按照多阶段整群随机抽样的方法,抽取浙江省11个市及义乌市常住人口(居住6个月及以上)家庭中0~59岁人群进行问卷调查,并采集静脉血2 ml进行乙肝相关抗原抗体检... 目的了解2018年浙江省健康人群乙型肝炎(乙肝)病毒血清标志物流行情况。方法按照多阶段整群随机抽样的方法,抽取浙江省11个市及义乌市常住人口(居住6个月及以上)家庭中0~59岁人群进行问卷调查,并采集静脉血2 ml进行乙肝相关抗原抗体检测。结果共调查4194人,乙肝表面抗原(HBsAg)和乙肝表面抗体(HBsAb)阳性率分别为4.58%(192/4194)和63.92%(2681/4194)。<5岁、0~14岁、15~29岁、30~59岁人群HBsAg阳性率随年龄增加呈上升趋势(χ~2=85.228,P<0.001),HBsAb阳性率呈现先下降后上升趋势(χ~2=110.413,P<0.001)。调查人群乙肝疫苗接种率为63.02%(2643/4194),接种率随年龄的增长呈逐渐下降趋势(χ~2=2229.121,P<0.001)。多因素logistic分析结果显示,性别、乙肝疫苗接种史是影响成人HBsAg阳性率的主要因素,男性HBsAg阳性率高于女性(OR=1.404,95%CI:1.014~1.944),乙肝疫苗接种史者HBsAg阳性率低于无乙肝疫苗接种史者(OR=0.548,95%CI:0.371~0.810)。结论浙江省儿童乙肝防控工作取得显著成绩,但需提高成年人乙肝疫苗接种率,加强乙肝抗原抗体检测,以利于成年人乙肝防控工作。 展开更多
关键词 乙型肝炎 血清流行病学 乙肝表面抗原 乙肝表面抗体 健康人群
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TaqMan-MGB荧光定量逆转录聚合酶链反应快速检测甲型流感病毒 被引量:15
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作者 卢亦愚 严菊英 +4 位作者 徐昌平 茅海燕 冯燕 余蓓蓓 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第1期46-48,共3页
目的:建立一种特异、灵敏、快速检测甲型流感病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法。方法:根据GenBank登录的流感毒株序列,应用生物软件在甲型流感病毒膜蛋白(MP)基因的保守区设计与筛选引物和MGB探针,对荧光定量RT-PCR反应体系与条件进行优化... 目的:建立一种特异、灵敏、快速检测甲型流感病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法。方法:根据GenBank登录的流感毒株序列,应用生物软件在甲型流感病毒膜蛋白(MP)基因的保守区设计与筛选引物和MGB探针,对荧光定量RT-PCR反应体系与条件进行优化,验证方法的特异性和敏感性。并通过对疑似流感临床样本的检测,以评价该方法的实际应用价值。结果:该方法对甲型流感病毒的检测有高度的特异性、通用性,对乙型流感、麻疹、风疹、腮腺炎、RSV和腺病毒等其他呼吸道病毒均无交叉反应,检测的灵敏度达0.1TC ID50,可从疑似流感患者含漱液中直接检测流感病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需2.5 h左右,且操作简便,重复性好。结论:本研究建立的MGB荧光定量RT-PCR的方法具有特异、敏感、快速的特点,适用于甲型流感疫情的应急快速检测。 展开更多
关键词 荧光定量RT-PCR TAQMAN-MGB探针 甲型流感病毒 检测
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不同人群血清对麻疹疫苗株与流行株的中和能力比较 被引量:14
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作者 冯燕 卢亦愚 +4 位作者 严菊英 姜晓慧 徐昌平 李榛 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1123-1126,共4页
目的探讨不同人群血清对麻疹流行株与疫苗株中和能力的差异。方法采集麻疹患者急性期与恢复期血清、麻疹疫苗免疫前后儿童血清以及流动人口血清,分别对疫苗株沪191与2005年麻疹流行株进行中和抗体(NT)滴度测定。同时,利用疫苗株、浙江... 目的探讨不同人群血清对麻疹流行株与疫苗株中和能力的差异。方法采集麻疹患者急性期与恢复期血清、麻疹疫苗免疫前后儿童血清以及流动人口血清,分别对疫苗株沪191与2005年麻疹流行株进行中和抗体(NT)滴度测定。同时,利用疫苗株、浙江省当地流行株制备动物免疫血清,与相应毒株进行交叉中和试验,测定各毒株之间抗原比。结果疫苗免疫后儿童血清对疫苗株的中和抗体几何平均滴度(GMT)为50.82,高于流行株MVi/ZJ/05/7(GMT值为27.35)1.86倍;患者恢复期血清对流行株的中和能力(GMT值为386.95)显著高于疫苗株(GMT值为151.83);流动人口血清对流行株中和抗体GMT值均小于疫苗株,差异为2.22~4.17倍;MVi/zJ/99/1、MVi/ZJ/04/1和MVi/ZJ/05/7与疫苗株间抗原比分别为4.28、5.24和5.66。此外,部分患者急性期血清对疫苗株存在低滴度的中和抗体,GMT值1:4左右。结论不同人群血清对麻疹疫苗株与流行株的中和能力的差异有统计学意义,低滴度的疫苗抗体不能有效保护个体免受麻疹流行毒株的侵袭,应加强麻疹病毒变异与疫苗效果的相关研究。 展开更多
关键词 麻疹病毒 中和抗体 抗原变异 几何平均滴度
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浙江省2004~2007年急性驰缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒分析 被引量:15
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作者 葛琼 龚黎明 +3 位作者 严菊英 周敏 卢亦愚 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第10期1982-1983,2005,共3页
目的:对浙江省2004~2007年急性弛缓性麻痹病例(AFP)粪便标本中分离到的非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV)进行监测结果分析。方法:按照WHO规定的方法,用RDa和L2OB细胞对AFP患者的粪便标本进行病毒分离,对分离到的NPEV毒株进行型别鉴定... 目的:对浙江省2004~2007年急性弛缓性麻痹病例(AFP)粪便标本中分离到的非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV)进行监测结果分析。方法:按照WHO规定的方法,用RDa和L2OB细胞对AFP患者的粪便标本进行病毒分离,对分离到的NPEV毒株进行型别鉴定。结果:4年共分离到44株NPEV,分别为柯萨奇A组病毒1株(COXA4),埃可病毒(ECHO)28株,不能定型15株。结论:浙江省2004年~2007年分离到的NPEV中主要为ECHO病毒,未分离到COXB组株病毒,且NPEV感染有明显的夏秋季高峰,主要集中在小年龄组儿童。 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹病例 非脊髓灰质炎肠道病毒 型别
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Taq Man荧光定量逆转录聚合酶链反应快速检测麻疹病毒核酸 被引量:12
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作者 卢亦愚 严菊英 +2 位作者 冯燕 茅海燕 《中国计划免疫》 2005年第1期1-4,共4页
目的 建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量逆转录 聚合酶链反应 (RT-PCR)方法。 方法 检测麻疹病毒的核酸 ,对设计的引物与探针进行筛选与条件优化。结果 TagMan荧光定量RT-PCR方法具有对麻疹病毒核酸检测的高度特异性与准确... 目的 建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量逆转录 聚合酶链反应 (RT-PCR)方法。 方法 检测麻疹病毒的核酸 ,对设计的引物与探针进行筛选与条件优化。结果 TagMan荧光定量RT-PCR方法具有对麻疹病毒核酸检测的高度特异性与准确性 ,检测的敏感度可达 0.1TCID50 ,从病毒核酸提取至检测完成仅需 3个多小时 ,操作简便 ,而且大大减少了常规PCR扩增产物的污染机会。结论 采用TagMan荧光定量RT-PCR方法对麻疹病毒与相关的临床样本进行了检测 ,均获得了满意的结果 ,为麻疹病毒的分子生物学检测 。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 TaqMrdn探针 麻疹病毒 检测
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汽化过氧化氢对不同空间消毒效果观察 被引量:14
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作者 陆烨 陆龙喜 +5 位作者 李晔 蔡冉 胡国庆 陈恩富 赵振波 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2626-2628,共3页
目的观察管道输送汽化过氧化氢对不同空间终末消毒效果,为控制烈性传染病提供保障。方法采用不锈钢载体定量杀灭枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞、脊髓灰质炎病毒(SabinI型疫苗株)试验法,观察过氧化氢蒸汽在不同空间面积下发生剂量、作用时间... 目的观察管道输送汽化过氧化氢对不同空间终末消毒效果,为控制烈性传染病提供保障。方法采用不锈钢载体定量杀灭枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞、脊髓灰质炎病毒(SabinI型疫苗株)试验法,观察过氧化氢蒸汽在不同空间面积下发生剂量、作用时间的灭菌效果。结果用汽化过氧化氢灭菌器将含量为3.5%过氧化氢溶液按4.5g/min流量进行汽化熏蒸处理,在30m3模拟空间运行15、20、30、45、60、75、105min,在空间中心点过氧化氢均值依次分别为334.80、463.50、574.50、598.35、599.7、600.6、601.2mg/L;在9m3救护转运单元空间内按上述时间,空间中心点过氧化氢均值依次分别为447.15、528.9、600.75、631.05、630.6、629.25、630.30mg/L;启动汽化过氧化氢发生器运行105min,对不同空间不锈钢载体上的枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞杀灭对数值分别为>5.00,对不同空间不锈钢载体上的脊髓灰质炎病毒杀灭对数值分别为>4.00。结论汽化过氧化氢在规定作用时间内对空间表面熏蒸,可以将污染在载体上的细菌芽胞和病毒达到完全杀灭。 展开更多
关键词 汽化过氧化氢 杀灭效果 枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞 脊髓灰质炎病毒
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实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与RT-PCR法及细胞培养法检测甲_3型流行性感冒病毒的比较 被引量:14
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作者 李婵 卢亦愚 +3 位作者 严菊英 冯燕 茅海燕 《中国计划免疫》 2005年第5期360-363,共4页
目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、RT-PCR法及细胞培养法检测甲3型流行性感冒(流感)病毒的灵敏度与特异性。方法采用建立的实时荧光定量RT-PCR、RT-PCR及经典的狗肾传代细胞病毒分离等3种方法,同时对流感监测点送检... 目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、RT-PCR法及细胞培养法检测甲3型流行性感冒(流感)病毒的灵敏度与特异性。方法采用建立的实时荧光定量RT-PCR、RT-PCR及经典的狗肾传代细胞病毒分离等3种方法,同时对流感监测点送检的60份疑似流感标本检测甲3型流感病毒。结果细胞病毒分离的阳性数为10份,RT-PCR与实时荧光定量RT-PCR的阳性数分别为12份和15份。实时荧光定量RT-PCR的灵敏度达0.01TCID50,且对甲1型流感病毒、乙型流感病毒、禽流感病毒H5、严重急性呼吸道综合征冠状病毒及其它呼吸道病毒均无交叉反应,从病毒核酸提取至完成检测仅需3h左右。结论实时荧光定量RT-PCR由于检测在密封环境中进行,避免了产物与环境间的交叉污染,且是3种方法中最为快速敏感的方法,适用于公共卫生应急疫情的实验室快速诊断。 展开更多
关键词 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应 逆转录-聚合酶链反应 细胞培养法 甲3型流行性感冒病毒
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浙江省2002-2018年病毒性脑膜炎病原学与分子流行病学特征 被引量:11
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作者 缪梓萍 严菊英 +7 位作者 孙逸 陈寅 龚黎明 葛琼 潘军航 茅海燕 张严峻 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期562-566,共5页
目的了解2002-2018年浙江省病毒性脑膜炎病原学及分子流行病学特征。方法从设立的监测点医院采集疑似病毒性脑膜炎患者样本2173份,其中脑脊液1718份、粪便455份,用荧光定量PCR方法检测脑脊液中人类肠道病毒(HEV)、腮腺炎病毒(MuV)、单... 目的了解2002-2018年浙江省病毒性脑膜炎病原学及分子流行病学特征。方法从设立的监测点医院采集疑似病毒性脑膜炎患者样本2173份,其中脑脊液1718份、粪便455份,用荧光定量PCR方法检测脑脊液中人类肠道病毒(HEV)、腮腺炎病毒(MuV)、单纯疱疹病毒(HSV)、巨细胞病毒(CMV)和乙型脑炎病毒(JEV)核酸,粪便样本只检测HEV;用ELISA方法检测脑脊液中上述5种病毒IgM抗体;对HEV核酸阳性样本扩增病毒VP1基因和测序,确定病毒型别并进行进化分析。结果在2002-2018年2173份样本中检出HEV核酸阳性871份(40.1%),其中脑脊液1718份、阳性654份(38.1%),粪便455份、阳性217份(47.7%);871份HEV核酸阳性样本,VP1扩增测序阳性670份,其中HEV-A 5份、HEV-B 665份,涉及23个病毒血清型,分别为柯萨奇病毒(CV)A组CVA4、CVA6、CVA9、CVA10,CVB组1~5,埃可病毒(EchoV;E)E3、E4、E6、E7、E9、E11、E14、E16、E18、E21、E25、E30、E33和肠道病毒(EV)-71,位于前3位的分别为E30、E6和CVB5,该3个血清型间隔若干年呈现病毒活动性增强的趋势。从2012-2015和2018年795份脑脊液中检出HEV核酸阳性374份、MuV 6份、HSV和CMV均为5份,对其中的368份脑脊液同时检测5种病毒IgM抗体,HEV抗体阳性2份、JEV 6份、MuV 1份。670份HEV中除1份EV-71外,EchoV 517份、CV 152份,两者之比为3.4∶1,两类病毒间隔3~5年存在优势株交替变化的趋势。VP1进化树显示,浙江省HEV位于HEV-A和HEV-B分支上,E30存在h和i基因亚型。结论浙江省病毒性脑膜炎的主要病原为HEV-B;EchoV检出率明显高于CV,两类病毒存在交替变化的趋势;优势血清型E30、CVB5和E6间隔若干年呈现病毒活动性增强的趋势;监测点HEV活动强度与病毒性脑膜炎暴发疫情的发生两者之间在时间上有较好的相关性。 展开更多
关键词 病毒性脑膜炎 肠道病毒 埃可病毒 柯萨奇病毒
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