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miR-31促进骨髓间充质干细胞的增殖和迁移 被引量:4
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作者 张玉娟 +3 位作者 杜若琛 田峰 付媛 王春芳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第1期66-71,共6页
背景:骨髓间充质干细胞已被广泛应用于临床治疗神经退行性相关疾病,但由于细胞在受损伤部位的存活率和迁移率低,从而降低了其疗效。目的:探讨miR-31是否能提高骨髓间充质干细胞的迁移和增殖能力。方法:培养和鉴定C57BL/6小鼠骨髓间充质... 背景:骨髓间充质干细胞已被广泛应用于临床治疗神经退行性相关疾病,但由于细胞在受损伤部位的存活率和迁移率低,从而降低了其疗效。目的:探讨miR-31是否能提高骨髓间充质干细胞的迁移和增殖能力。方法:培养和鉴定C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,将细胞分为对照组、miR-31 agomir组和miR-31 antagomir组。将第3代骨髓间充质干细胞接种于6孔板(1×105/孔),待细胞达到50%-80%融合度,将miR-31 agomir和miR-31 antagomir用不含血清的DMEM/F12培养基稀释后添加到6孔板,转染24 h后,用CCK-8分析细胞的增殖水平以及Transwell实验分析细胞的迁移能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2和CXC趋化因子受体4的蛋白表达。结果与结论:①在不加转染试剂的情况下将miR-31成功转染至骨髓间充质干细胞,并发出红色荧光;②转染后,与对照组相比,miR-31 agomir组细胞的增殖能力增强,与时间呈正比(P<0.05);与对照组相比,miR-31 agomir组细胞的迁移能力增强(P<0.05),基质金属蛋白酶2和CXC趋化因子受体4蛋白表达上调(P<0.05);③结果表明,miR-31可以提高骨髓间充质干细胞的增殖能力,并且促进骨髓间充质干细胞的迁移,这为间充质干细胞高效靶向迁移至损伤部位奠定了基础。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 MICRORNA miR-31 细胞迁移 脊髓损伤 CCXC趋化因子受体4 基质金属蛋白酶2
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小鼠海马结构与脊髓损伤后抑郁症高发病率的关系研究 被引量:7
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作者 王雅丽 杜若琛 +7 位作者 高渊涛 李宵 李承罡 王菲 田峰 李鹏飞 王春芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期461-467,共7页
目的:探究脊髓损伤引发的抑郁高风险率是否与海马生理结构的改变有关。方法:制作小鼠脊髓损伤模型,分别在损伤后不同时期采用Basso Mouse Scale(BMS)评分对小鼠术后运动功能进行评估;并通过糖水偏好实验和悬尾实验评估小鼠的抑郁情况;H... 目的:探究脊髓损伤引发的抑郁高风险率是否与海马生理结构的改变有关。方法:制作小鼠脊髓损伤模型,分别在损伤后不同时期采用Basso Mouse Scale(BMS)评分对小鼠术后运动功能进行评估;并通过糖水偏好实验和悬尾实验评估小鼠的抑郁情况;HE染色观察海马组织内部细胞的变化;电镜观察海马亚细胞结构突触的结构变化;RT-qPCR检测突触蛋白标志物突触小泡蛋白(SYP)和突触后致密蛋白95(PSD-95)在mRNA水平上的变化。结果:行为学实验显示模型组小鼠有显著的抑郁行为,且在第7天抑郁程度最显著(P<0.01);HE染色显示,与对照组相比,模型组海马细胞排列紊乱,数量减少,形态欠规则;电镜结果显示,与对照组相比,模型组海马超微结构突触数量减少,突触活动区长度变短,突触后致密物厚度变薄,突触间隙宽度增加,突触界面曲率减小(P<0.05);RT-qPCR结果显示模型组SYP和PSD-95 mRNA表达水平较对照组降低(P<0.05)。结论:海马生理结构的改变是脊髓损伤后抑郁症高风险的原因之一。 展开更多
关键词 脊髓损伤 抑郁症 海马 突触
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Hopx报告基因小鼠谱系示踪乳腺干细胞
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作者 石建云 李文静 +5 位作者 彭映 贾振华 张书锦 谭露露 杜若琛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第13期2720-2727,共8页
背景:乳腺干细胞对于乳腺组织的发育和稳态维持十分重要。乳腺癌的发生与乳腺干细胞有着紧密联系。最新研究表明,Hopx作为形态发生和细胞分化的重要转录调节因子已被证实在神经、肠道、毛囊等多种成体干细胞中表达,然而其在乳腺中的作... 背景:乳腺干细胞对于乳腺组织的发育和稳态维持十分重要。乳腺癌的发生与乳腺干细胞有着紧密联系。最新研究表明,Hopx作为形态发生和细胞分化的重要转录调节因子已被证实在神经、肠道、毛囊等多种成体干细胞中表达,然而其在乳腺中的作用至今尚未见报道。目的:探究Hopx是否可以作为乳腺干细胞的特异性标志物。方法:①选取8周龄雌性Hopx-LacZ转基因小鼠,利用β-半乳糖苷酶染色检测Hopx在乳腺组织中的本底表达情况。②选取4周龄、6周龄、8周龄及妊娠14.5 d的雌性野生型小鼠,分别进行乳腺全组织洋红染色及K14、K8免疫荧光染色。③选取8周龄与妊娠17.5 d的雌性Hopx-CreERT2;Rosa26LacZ转基因小鼠,进行乳腺β-半乳糖苷酶染色。④选取4周龄雌性Hopx-CreERT2;Rosa26LacZ转基因小鼠,通过腹腔注射他莫昔芬(隔天注射1次,注射3次)来激活Cre/loxp系统,注射后4周进行乳腺β-半乳糖苷酶染色;选取8周龄雌性Hopx-CreERT2;Rosa26LacZ转基因小鼠,通过腹腔注射他莫昔芬(隔天注射1次,注射3次)来激活Cre/loxp系统,末次注射后4,10周进行乳腺β-半乳糖苷酶染色。⑤选取8周龄雌性Hopx-CreERT2;Rosa26LacZ转基因小鼠,通过腹腔注射他莫昔芬(隔天注射1次,注射3次)来激活Cre/loxp系统,注射后2周使Hopx-CreERT2;Rosa26LacZ转基因小鼠怀孕,对第1次妊娠17.5 d、第3次妊娠17.5 d的小鼠乳腺组织进行β-半乳糖苷酶染色。结果与结论:①β-半乳糖苷酶染色结果显示,8周龄Hopx-LacZ转基因小鼠的乳腺导管内确实含有Hopx阳性细胞且位于基底上皮,数量较少。②乳腺全组织染色及免疫荧光染色结果显示,野生型小鼠的乳腺在青春期、成熟期及妊娠期等不同发育阶段具有各自相应时期依赖性的特征,并且经历了一系列复杂的上皮重塑过程。③β-半乳糖苷酶染色结果显示,与8周龄雌性Hopx-CreERT2;Rosa26LacZ转基因小鼠相比,妊娠17.5 d的Hopx-C 展开更多
关键词 Hopx 乳腺干细胞 谱系追踪 妊娠期 腺泡形成
人脐带间充质干细胞对自然衰老大鼠海马自噬水平的影响 被引量:6
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作者 张茹鑫 李承罡 +5 位作者 杜若琛 李宵 赵碧春 张玉娟 王春芳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期796-804,共9页
目的本研究探究移植人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)是否能通过调节自然衰老大鼠自噬水平来改善学习记忆及认知衰退。方法 SD大鼠屏障环境饲养至衰老年龄(24月龄),行为学挑选出认知衰退明显... 目的本研究探究移植人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)是否能通过调节自然衰老大鼠自噬水平来改善学习记忆及认知衰退。方法 SD大鼠屏障环境饲养至衰老年龄(24月龄),行为学挑选出认知衰退明显的老年鼠,分为细胞移植组(H组)和生理盐水组(C组),3月龄SD大鼠为正常组(N组)。H组:尾静脉注射hUCMSCs细胞混悬液500μL,剂量为每只2×106个,C组和N组分别尾静脉注射无菌生理盐水。时间均为每周1次,连续4周。通过Morris水迷宫,Y迷宫及新物体识别实验观察其学习记忆能力变化;通过HE染色观察大鼠海马神经元形态改变;通过Western Blot检测海马LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、P62的相对表达量。结果 (1)行为学结果显示H组和N组学习记忆能力显著高于C组。(2) HE染色中H组和N组海马CA1区和DG区神经细胞排列较规整,细胞结构完整,细胞核饱满,C组CA1区神经元数量减少,细胞排列疏松,细胞核固缩,呈退行性病变。(3) H组和N组中P62蛋白含量显著低于C组,Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ显著高于C组。结论静脉注射人脐带间充质干细胞改善自然衰老大鼠的学习记忆及认知衰退,可能与干预后自噬水平的恢复有关。 展开更多
关键词 衰老 自噬 人脐带间充质干细胞 认知衰退 大鼠
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长时程抑郁小鼠模型建立及行为与神经病理特征观察 被引量:6
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作者 田野 栗鋆 +6 位作者 杜若琛 李宵 王菲 王雅丽 邵宏元 王春芳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期358-363,共6页
目的构建新型长时程抑郁模型(long-term depression model,LTD)小鼠,并对比此种小鼠与常见抑郁小鼠模型的优劣。方法通过早期母婴分离,以及断乳后持续慢性应激来构建LTD小鼠,对比其与慢性不可预知温和刺激模型(chronic unpredictable wi... 目的构建新型长时程抑郁模型(long-term depression model,LTD)小鼠,并对比此种小鼠与常见抑郁小鼠模型的优劣。方法通过早期母婴分离,以及断乳后持续慢性应激来构建LTD小鼠,对比其与慢性不可预知温和刺激模型(chronic unpredictable wild stress,CUMS)、早期应激模型(early life stress model,ELS)小鼠长期抑郁样行为改变,并对比e GFP转基因的LTD小鼠与对照小鼠海马神经元变化。结果与CUMS、ELS小鼠相比,LTD小鼠在行为学上能更长期的表现出稳定的抑郁状态,组织切片显示LTD小鼠海马CA1区和CA3区呈退行性变性。结论成功的构建了LTD小鼠,此模型小鼠能导致更长久抑郁样行为,表现出长期的心理应激状态,是一种适合用于长期模拟抑郁状态的模式小鼠。 展开更多
关键词 抑郁症 工具鼠 行为学 应激
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营养转运相关基因调控区多态性与黄羽肉鸡饲料转化率关联分析 被引量:2
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作者 王政 郭文婕 +6 位作者 程瑾 罗榕 薛毅 张利环 朱芷葳 李慧锋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2343-2352,共10页
旨在探讨多个营养转运相关基因调控区的多态性,并筛选影响肉鸡饲料转化率的关键变异位点。本研究采集了439只雄性黄羽肉鸡的血液DNA样本,利用PCR直接测序的方法在鸡群高、低饲料转化率的两尾样本组中(高FCR组>3.40,低FCR组<2.35,... 旨在探讨多个营养转运相关基因调控区的多态性,并筛选影响肉鸡饲料转化率的关键变异位点。本研究采集了439只雄性黄羽肉鸡的血液DNA样本,利用PCR直接测序的方法在鸡群高、低饲料转化率的两尾样本组中(高FCR组>3.40,低FCR组<2.35,样本数均为12个)对3个单糖转运基因(GLUT2、GLUT 5和SGLT 1)、8个氨基酸转运基因(B^(0)AT1、B^(0+)AT、CAT1、CAT2、LAT1、y^(+)LAT1、y^(+)LAT 2和rBAT)和1个营养调控基因(FGF 1)上游1 kb内的多态性位点进行检测。依据两尾样本组中基因型频率的差异,筛选潜在影响饲料转化率的变异位点。采用PCR-RFLP技术在全群样本中对变异位点进行基因分型,并分析这些多态性位点与饲料转化率等性状的关联性。结果显示,本研究在12个基因的上游1 kb范围内共寻找到111个SNPs位点,其中有8个SNPs位点在两尾样本组中的基因型频率存在差异,分别为GLUT 2基因的-379A>G,SGLT 1基因的-490G>A,B 0AT 1基因的-639T>C,rBAT基因的-46G>A、-90G>T、-180T>C、-235G>A和FGF 1基因的-884T>C位点。在全群样本中对GLUT 2基因的-379A>G、B 0AT 1基因的-639T>C和FGF 1基因的-884T>C位点的基因分型和关联分析发现,B 0AT 1基因的-639T>C位点与饲料转化率存在显著相关(P<0.05),TC基因型个体的饲料转化率显著低于TT和CC基因型个体(P<0.05),表现出杂合子优势。FGF 1基因的-884T>C位点也与饲料转化率显著相关(P<0.05),CC和TT基因型个体的饲料转化率显著低于TC基因型个体(P<0.05),此外,GLUT 2基因的-379A>G与饲料转化率或生长性状均无显著相关。本研究分析了多个营养转运相关基因调控区的遗传变异,为将这些变异位点作为遗传标记用于提高黄羽肉鸡饲料转化率的分子选育提供了依据。 展开更多
关键词 黄羽肉鸡 饲料转化率 关联分析 营养转运
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淫羊藿中药添加剂对贵妃鸡产蛋性能和蛋品质的影响 被引量:5
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作者 陈员玉 吴国清 +3 位作者 牛颜冰 马艳琴 李慧锋 《山西农业科学》 2019年第8期1481-1484,共4页
为了研究日粮中添加含有淫羊藿等味中药的降脂增蛋散复方添加剂对贵妃鸡产蛋性能、蛋品质及蛋黄胆固醇的影响,选用28周龄贵妃鸡96只,每组32只,分为对照组、低剂量添加剂组、高剂量添加剂组(对照组喂基础日粮,低剂量组喂基础日粮添加1.12... 为了研究日粮中添加含有淫羊藿等味中药的降脂增蛋散复方添加剂对贵妃鸡产蛋性能、蛋品质及蛋黄胆固醇的影响,选用28周龄贵妃鸡96只,每组32只,分为对照组、低剂量添加剂组、高剂量添加剂组(对照组喂基础日粮,低剂量组喂基础日粮添加1.12g/kg的复方中药添加剂,高剂量组喂基础日粮添加11.2g/kg的复方中药添加剂)。结果表明,试验组鸡的产蛋性能和蛋品质均有所增加,且随添加剂量的增加效果更加明显;高剂量组的蛋黄胆固醇含量有显著性降低。使用含有党参、淫羊藿等药材的复方中药添加剂可以提高贵妃鸡的产蛋性能和蛋品质。 展开更多
关键词 中药添加剂 淫羊藿 贵妃鸡 生产性能 蛋品质
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神经干细胞联合骨髓间充质干细胞移植对小鼠脊髓损伤的修复作用 被引量:4
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作者 赵碧春 +4 位作者 杜若琛 石尧 李宵 张茹鑫 王春芳 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2021年第2期168-174,共7页
目的:研究神经干细胞(NSCs)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对小鼠脊髓损伤(SCI)的作用。方法:分别培养与鉴定绿色荧光蛋白(e GFP)转基因小鼠的NSCs与td Tomato红色荧光蛋白转基因小鼠的BMSCs;将两种细胞进行Transwell共培养,并用免疫... 目的:研究神经干细胞(NSCs)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对小鼠脊髓损伤(SCI)的作用。方法:分别培养与鉴定绿色荧光蛋白(e GFP)转基因小鼠的NSCs与td Tomato红色荧光蛋白转基因小鼠的BMSCs;将两种细胞进行Transwell共培养,并用免疫荧光染色观察巢蛋白(nestin)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,鉴定BMSCs的分化情况;将24只3月龄雌性小鼠随机分为3组:对照组(control)、移植组(BMSCs)和共培养BMSCs移植组(BMSCs+NSCs),利用撞击法制备小鼠SCI模型,并在损伤局部移植细胞和培养基,利用BMS评分在不同时间点评估小鼠脊髓功能恢复情况;Western Blot检测脊髓损伤部位的神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的蛋白表达水平。结果:荧光倒置显微镜下可见分离培养的NSCs呈现绿色荧光,BMSCs呈现红色荧光,经细胞免疫荧光检测可见共培养后的BMSCs阳性表达神经干细胞和神经元特异性标记物,BMS评分结果显示细胞移植5 d后,移植组和共培养BMSCs移植组小鼠有差异,第7 d差异最明显,Western Blot结果显示共培养BMSCs移植组NGF和BDNF蛋白表达水平高于移植组和对照组。结论:小鼠NSCs与BMSCs在Transwell小室中共培养后,有利于BMSCs向神经方向分化,并有利于SCI小鼠运动功能的恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 Transwell共培养 神经干细胞 骨髓间充质干细胞 小鼠
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tdTomato转基因小鼠的建系及其在细胞示踪方面的应用研究 被引量:3
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作者 王菲 +8 位作者 高渊涛 田峰 田野 李宵 李承罡 杜若琛 李鹏飞 王雅丽 王春芳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期1-9,共9页
目的构建稳定表达的tdTomato转基因小鼠并建系,观察其细胞及组织的荧光表达水平以及其干细胞共培养后的荧光表达水平。方法使用Gateway clone技术和DNA显微注射法构建含有tdTomato表达载体的受精卵,移植至假孕母鼠体内,待其自然生产。... 目的构建稳定表达的tdTomato转基因小鼠并建系,观察其细胞及组织的荧光表达水平以及其干细胞共培养后的荧光表达水平。方法使用Gateway clone技术和DNA显微注射法构建含有tdTomato表达载体的受精卵,移植至假孕母鼠体内,待其自然生产。使用双向鉴定法鉴定并挑取饲养阳性小鼠并建系。另提取tdTomato阳性小鼠的神经干细胞分别与eGFP小鼠的骨髓间充质干细胞、原代神经干细胞共培养。结果成功构建了tdTomato转基因小鼠并建系,与野生型小鼠相比,tdTomato转基因小鼠生化指标和生长性状无明显差异,其组织切片及脑源神经干细胞均可观察到红色荧光。示踪实验表明注射部位可观察到明显的荧光成像,共培养实验可以清晰的观察到细胞分化后荧光的稳定表达。结论tdTomato转基因小鼠的组织和细胞能稳定表达红色荧光,可以利用荧光鼠的自发荧光特性,研究干细胞共培养后的分化方向。 展开更多
关键词 工具鼠 tdTomato 转基因小鼠 细胞共培养
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人脐带间充质干细胞治疗脊髓损伤有效性与安全性的Meta分析 被引量:2
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作者 石尧 韩树峰 +6 位作者 杜若琛 景志杰 赵碧春 张茹鑫 张玉娟 王春芳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第25期4093-4100,共8页
目的:目前脊髓损伤仍缺乏十分有效的治疗手段,细胞治疗可能是一种很有前景的治疗手段,其中人脐带间充质干细胞由于其具有易获取、低成本、伦理争议少和免疫原性低等优点受到广泛关注。但目前临床上并没有大范围使用人脐带间充质干细胞,... 目的:目前脊髓损伤仍缺乏十分有效的治疗手段,细胞治疗可能是一种很有前景的治疗手段,其中人脐带间充质干细胞由于其具有易获取、低成本、伦理争议少和免疫原性低等优点受到广泛关注。但目前临床上并没有大范围使用人脐带间充质干细胞,对其有效性和安全性还有争议。文章使用Meta分析来评价人脐带间充质干细胞治疗脊髓损伤的有效性和安全性。方法:应用计算机检索英文数据库(PubMed、Web of Science、Cochrane、EMbase)和中文数据库(中国知网、万方医学网和维普数据库),搜集人脐带间充质干细胞治疗脊髓损伤的临床研究文献,检索时间为各数据库建库至2021年4月。由2位研究人员独立阅读纳入文献、提取资料和评价质量,随机对照试验使用改良Jadad评分量表对纳入文献进行评分,并使用Cochrane风险偏倚评估工具进行偏倚风险评估,队列研究采用NOS量表进行评价,使用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入10篇文献,370例患者,包括6篇随机对照试验,4篇队列研究,文献总体质量较高。Meta分析结果显示:①人脐带间充质干细胞移植组的ASIA感觉功能评分(MD=5.20,95%CI:3.50-6.90,P<0.00001)、AIS分级改善率(RR=2.26,95%CI:1.40-3.65,P=0.0008)、日常生活能力评分(Barthel指数)(MD=5.12,95%CI:1.04-9.20,P=0.01)均高于对照组;②人脐带间充质干细胞移植组在ASIA运动功能评分(MD=3.48,95%CI:-0.14-7.10,P=0.06)、ASIA感觉功能评分中细化的针刺觉(MD=7.58,95%CI:-0.44-15.59,P=0.06)、轻触觉(MD=7.67,95%CI:-0.42-15.77,P=0.06)评分方面,与对照组相比差异无显著性意义;③敏感性分析结果显示,在人脐带间充质干细胞移植组ASIA运动功能评分高于对照组(MD=6.14,95%CI:4.46-7.81,P<0.00001),在日常生活能力评分方面,结论与之前保持一致。纳入的10篇文献中,均报道未有严重不良反应发生,但是个别病例存在轻微的不良反应,经对症治疗后均消� 展开更多
关键词 脊髓损伤 干细胞治疗 间充质干细胞 人脐带间充质干细胞 ASIA评分 AIS分级 日常生活能力评分 META分析
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转录因子USF1调控鸡小肠上皮细胞中糖类转运蛋白表达 被引量:2
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作者 张利环 李玲香 +5 位作者 张瑜 王文魁 朱芷葳 王钦德 李慧锋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1713-1720,共8页
为了研究转录因子USF1在鸡小肠上皮细胞中调控糖转运蛋白基因表达的机制,本试验在生物信息学分析的基础上通过构建真核表达载体pcDNA3.1-USF1,在鸡小肠上皮细胞中过表达转录因子USF1,用绝对荧光定量PCR的方法检测分析了USF1对SGLT1、GL... 为了研究转录因子USF1在鸡小肠上皮细胞中调控糖转运蛋白基因表达的机制,本试验在生物信息学分析的基础上通过构建真核表达载体pcDNA3.1-USF1,在鸡小肠上皮细胞中过表达转录因子USF1,用绝对荧光定量PCR的方法检测分析了USF1对SGLT1、GLUT2和GLUT5基因表达的影响。结果表明,受到USF1基因过表达的影响,糖类转运蛋白GLUT2和SGLT1 mRNA在鸡小肠上皮细胞中的表达量极显著增高(P<0.01);而GLUT5mRNA表达量没有显著变化(P>0.05)。结合本研究结果,经过对这3个糖类转运蛋白基因5′上游调控区USF1结合位点的深入分析,认为在鸡小肠上皮细胞中转录因子USF1对糖转运蛋白基因GLUT2和SGLT1的表达具有正向调控的作用。 展开更多
关键词 USF1 糖类转运蛋白 过表达 小肠上皮细胞
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鸡主要组织相容性复合体B区域多态性分析 被引量:2
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作者 袁海旭 王明月 +4 位作者 赵越 王敏 赵春江 连玲 《中国家禽》 北大核心 2018年第20期8-13,共6页
为研究不同品种间BF1基因的结构变异,B-F exon2多态性以及TAPBP、BRD2、DMA、DMB2、TAP1、TAP2基因上14个SNPs位点的多态性,以农大3号矮小鸡、白来航鸡和藏鸡三个品种为研究对象,通过PCR扩增不同品种B-F1基因检测B-F1基因及启动子序列... 为研究不同品种间BF1基因的结构变异,B-F exon2多态性以及TAPBP、BRD2、DMA、DMB2、TAP1、TAP2基因上14个SNPs位点的多态性,以农大3号矮小鸡、白来航鸡和藏鸡三个品种为研究对象,通过PCR扩增不同品种B-F1基因检测B-F1基因及启动子序列增强子A的缺失现象。同时利用红色原鸡B-F exon2序列设计引物后测序;选择TAPBP、TAP1、TAP2、BRD2、DMA、DMB2基因上的部分SNPs利用KASP技术进行分型。结果显示:根据缺失情况,将BF1基因分为A、B和Bdel三种,从而决定了AA、AB、ABdel、BB、BBdel和BdelBdel六种基因型,农大3号矮小鸡中存在两种基因型,白来航鸡存在四种基因型;藏鸡存在三种基因型。利用测序发现农大3号矮小鸡、白来航鸡和藏鸡在B-F exon 2序列上分别存在45、37、37个突变位点。通过KASP分型技术检测TAPBP、BRD2、DMA、DMB2、TAP1、TAP2基因上14个SNPs位点的多态性,发现农大3号矮小鸡、白来航鸡、藏鸡分别存在14、9、13个突变位点。 展开更多
关键词 农大3号矮小鸡 白来航鸡 藏鸡 SNP MHC—B 多态性 结构变异
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miR-31改善2型糖尿病小鼠的肝损伤 被引量:1
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作者 付媛 王宇斐 +5 位作者 何金凤 杜若琛 张玉娟 王春芳 张轩萍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1226-1233,共8页
2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)是一种代谢性疾病,在世界范围内发病率逐年增高,会导致肝等多种组织器官损伤。miR-31在不同物种间是保守的,与代谢性疾病密切相关,但在2型糖尿病肝损伤中的作用尚未阐明。本研究的目的为探究miR-31对2... 2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)是一种代谢性疾病,在世界范围内发病率逐年增高,会导致肝等多种组织器官损伤。miR-31在不同物种间是保守的,与代谢性疾病密切相关,但在2型糖尿病肝损伤中的作用尚未阐明。本研究的目的为探究miR-31对2型糖尿病肝损伤的影响及其潜在的作用机制。取4~6周龄雄性FVB小鼠与筛选为阳性的过表达miR-31转基因小鼠,随机分为FVB小鼠对照组(C)、FVB小鼠诱导糖尿病组(DM)和过表达miR-31转基因小鼠诱导糖尿病组(31DM)。适应性喂养1周,采用高脂喂养联合腹腔注射链脲佐霉素(STZ)诱导T2DM小鼠模型,继续喂养6周。小鼠的一般情况及相关代谢指标显示,miR-31改善了T2DM小鼠的摄食饮水量升高,体重减轻及糖脂代谢紊乱。HE染色及肝组织学活动指数(histological activity index,HAI)评分结果显示,miR-31改善了T2DM小鼠肝组织中的炎症状况,降低了HAI评分。RT-qPCR结果显示,T2DM小鼠肝中miR-31高表达伴随转录激活因子6(activating transcription factor 6,ATF6)mRNA的表达降低。进一步Western印迹结果表明,miR-31抑制了T2DM小鼠肝中内质网应激相关蛋白质,例如ATF6、葡萄糖调节蛋白78(glucoregulatory protein 78,GRP78)和C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达。综上所述,miR-31可能通过调节糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗,抑制ATF6、GRP78和CHOP等内质网应激因子,从而改善T2DM小鼠的肝损伤。 展开更多
关键词 2型糖尿病 微RNA miR-31 内质网应激 肝损伤
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人脐带间充质干细胞移植对慢性应激模型小鼠抑郁行为的改善作用
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作者 赵碧春 李承罡 +4 位作者 张玉娟 杜若琛 张茹鑫 王春芳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期528-535,共8页
目的探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)尾静脉移植对慢性不可预测性温和应激(CUMS)模型小鼠抑郁行为的改善作用。方法获得第3代hUCMSCs;将60只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组(给予生理盐水)、细胞组(移植hUCMSCs)、氟西汀(flu)... 目的探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)尾静脉移植对慢性不可预测性温和应激(CUMS)模型小鼠抑郁行为的改善作用。方法获得第3代hUCMSCs;将60只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组(给予生理盐水)、细胞组(移植hUCMSCs)、氟西汀(flu)给药组(给予flu),每组15只。构建6周CUMS小鼠抑郁模型;从第3周开始将hUCMSCs、生理盐水以尾静脉注射的方式移植给小鼠;从第5周开始每天给予小鼠flu灌胃;记录各组小鼠每周的体重变化;通过蔗糖偏好实验、悬尾实验、强迫游泳实验及旷场实验评估小鼠抑郁模型及治疗效果;HE染色观察海马CA1及CA3区细胞变化;透射电子显微镜检测海马CA3区突触的超微结构变化;Real-time PCR检测海马突触可塑性关键蛋白突触素(SYP)和突触后致密物95(PSD-95)的mRNA表达情况。结果hUCMSCs可以改善因CUMS导致的小鼠体重下降;行为学实验观察到,模型组小鼠出现抑郁行为,细胞组和给药组小鼠抑郁行为得到改善;HE染色观察到,与模型组相比,细胞组和给药组小鼠海马CA1及CA3区细胞排列整齐,数量增多;透射电子显微镜观察到,与模型组相比,细胞组和给药组海马CA3区亚细胞结构突触数量更多,突触间隙更窄,突触棘密度更大;Real-time PCR检测到,细胞组和给药组比模型组SYP和PSD-95的mRNA表达更多。结论hUCMSCs移植具有抗抑郁作用,这种作用与改善海马的突触可塑性有关。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 抑郁 突触可塑性 慢性不可预测性温和应激 实时定量聚合酶链反应 透射电子显微术 小鼠
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敲减突触结合蛋白1通过抑制 IL-6/STAT3信号通路改善结肠炎病变 被引量:1
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作者 石建云 吴晓甜 +5 位作者 贺磊 申晶 冯艳林 王德平 曹济民 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1370-1380,共11页
突触结合蛋白1 (synaptotagmin 1,Syt1)属于突触结合蛋白家族一员,在神经递质囊泡转运和胞吐中发挥作用。Syt1在肠道上皮中有表达,但其在结肠炎中的生物学功能尚不明确。本工作以Syt1转基因小鼠结合葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate... 突触结合蛋白1 (synaptotagmin 1,Syt1)属于突触结合蛋白家族一员,在神经递质囊泡转运和胞吐中发挥作用。Syt1在肠道上皮中有表达,但其在结肠炎中的生物学功能尚不明确。本工作以Syt1转基因小鼠结合葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导型溃疡性结肠炎模型,通过qRT-PCR、免疫染色及Western印迹检测Syt1在生理状态及肠炎状态下在结肠中表达的动态变化;采用H&E染色、免疫染色、Western印迹等方法,观察Syt1在结肠炎的炎症反应及肠道上皮再生修复中的作用。结果显示:正常野生小鼠的结肠上皮及结直肠癌患者癌旁组织的肠上皮细胞中均有较高水平的Syt1表达;DSS处理使Syt1在结肠中表达显著升高(P<0.01)。DSS诱导小鼠肠炎模型中,相较于对照组,Syt1敲减小鼠体重降低情况、结肠炎性红肿和长度缩短等均显著减轻(P<0.05),而再生隐窝数量则增多、Ki67增殖细胞也增多(P<0.01);结肠组织中的CD45免疫细胞、F4/80巨噬细胞浸润减少(P<0.001),炎症性肠病相关的促炎因子IL-1β、IL-6和TNFα分泌也减少(P<0.05)。免疫组化及Western印迹结果进一步显示,Syt1敲减小鼠中,IL-6和p-STAT3表达显著下调(P<0.05)。以上研究结果表明,敲减Syt1可能通过抑制IL-6/STAT3信号通路改善结肠炎病变程度。 展开更多
关键词 突触结合蛋白1 结肠炎 炎症反应 上皮再生 IL-6/STAT3信号通路
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