樟油的提取及其抑菌性研究 被引量：19

1

作者 李爱民 唐永勤 卿玉波 《福建林业科技》 北大核心 2006年第4期121-123,共3页

通过蒸馏法从樟树的树根、树枝、鲜叶及落叶中提取樟油，然后将用蒸馏法从落叶中获得的樟油和用丙酮浸提法从落叶中获得的提取物分别配制成不同浓度的水溶液，采用抑菌圈法分别对常见的几种细菌进行抑菌研究，结果表明落叶巾的得油率最... 通过蒸馏法从樟树的树根、树枝、鲜叶及落叶中提取樟油，然后将用蒸馏法从落叶中获得的樟油和用丙酮浸提法从落叶中获得的提取物分别配制成不同浓度的水溶液，采用抑菌圈法分别对常见的几种细菌进行抑菌研究，结果表明落叶巾的得油率最高．用蒸馏法获得的樟油对大肠杆菌（Escherichia coli）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）、金黄葡萄球菌（Staphylococcus aureus）有一定的抑菌作用，其最低抑菌浓度（MIC）在0．125-0．25g·mL^-1之间．而丙酮浸提液对上述细菌的生长几乎没有抑制作用。 展开更多

关键词 樟树 樟油 提取 抑菌性

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成年版纳微型猪近交系克隆猪的制备 被引量：11

2

作者 叶雷 李红 +13 位作者 魏红江 许成盛 卿玉波 潘伟荣 李鸿辉 成文敏 富国文 信吉阁 李思 魏太云 李小兵 张崇义 汪霞 曾养志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1491-1498,共8页

本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细... 本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细胞冻存前和复苏后存活率分别为97.2%和92.6%(P>0.05),生长曲线呈"S"形,细胞群体倍增时间为36h,体外培养14代后仍能保持正常核型。以其作为核移植供体细胞,核移植重构胚卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数分别为61.9%、13.0%和37枚,移植了重构胚的3头代孕母猪均妊娠,并且有1头母猪产下1头正常的克隆猪。综上所述,利用版纳微型猪近交系成年猪能建立稳定的成纤维细胞系,该细胞系作为核移植供体细胞可获得版纳微型猪近交系克隆猪。 展开更多

关键词 版纳微型猪近交系 成年猪成纤维细胞 细胞培养 生物学特征 体细胞核移植

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版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞的体外培养及其生物学特征研究 被引量：7

3

作者 许成盛 魏红江 +6 位作者 李红 汪霞 杨朝霞 卿玉波 潘伟荣 信吉阁 曾养志 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期323-327,共5页

试验以版纳微型猪近交系新生猪耳部皮肤组织为材料,采用胰蛋白酶消化法培养成纤维细胞,并对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测。结果表明:版纳微型猪近交系新生猪成纤... 试验以版纳微型猪近交系新生猪耳部皮肤组织为材料,采用胰蛋白酶消化法培养成纤维细胞,并对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测。结果表明:版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态;细胞冻存前和复苏后存活率分别为98.0%和94.07%;生长曲线呈"S"型,倍增时间为33 h;对所制备的染色体核型分析显示2n=38(XY),并在体外培养14代后仍能保持正常核型。本研究建立了稳定的版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞的培养方法,将为体细胞克隆、转基因和异种器官移植等相关的研究提供技术基础。 展开更多

关键词 版纳微型猪近交系 成纤维细胞 细胞培养 生物学特征

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版纳微型猪近交系胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特征 被引量：5

4

作者 李红 魏红江 +3 位作者 许成盛 汪霞 卿玉波 曾养志 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期678-682,共5页

以版纳微型猪近交系妊娠47d的胎儿为材料,采用胰蛋白酶消化法消化培养胎儿成纤维细胞,对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测.结果表明,培养的版纳微型猪近交系胎儿成纤... 以版纳微型猪近交系妊娠47d的胎儿为材料,采用胰蛋白酶消化法消化培养胎儿成纤维细胞,对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测.结果表明,培养的版纳微型猪近交系胎儿成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态;细胞冻存前和复苏后的存活率分别为98.06%和92.12%;生长曲线呈"S"形,倍增时间为36h;对所制备染色体核型进行分析,显示2n=38,XY,并在体外培养14个代次后仍能保持正常核型. 展开更多

关键词 版纳微型猪近交系 胎儿成纤维细胞 细胞培养 生物学特征

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不同年龄二狼山绒山羊耳组织成纤维细胞的生物学特性 被引量：3

5

作者 奎华 Hoang Minh Thang +8 位作者 曾璐瑶 贾宝瑜 成文敏 郝志强 李鸿辉 赵红业 魏红江 王文 卿玉波 《养殖与饲料》 2018年第4期3-7,共5页

采用胶原酶消化法建立细胞系,观察细胞形态、测定细胞冻存前和复苏后的存活率、绘制细胞生长曲线,并对染色体核型进行分析,研究不同年龄的二狼山绒山羊耳组织成纤维细胞的生物学特性,分析年龄对二狼山绒山羊耳组织成纤维细胞体外培养的... 采用胶原酶消化法建立细胞系,观察细胞形态、测定细胞冻存前和复苏后的存活率、绘制细胞生长曲线,并对染色体核型进行分析,研究不同年龄的二狼山绒山羊耳组织成纤维细胞的生物学特性,分析年龄对二狼山绒山羊耳组织成纤维细胞体外培养的影响。试验结果表明,年龄对细胞形态无影响;冻存没有降低细胞的存活率(P>0.05);细胞的生长曲线呈典型的S型且年龄对细胞的生长无明显影响(P>0.05);染色体核型分析显示,不同年龄的山羊耳组织成纤维细胞系的染色体数目均为2 n=60(XY/XY),无染色体畸形。说明不同年龄,甚至年龄比较大的二狼山绒山羊个体(13岁)都可以通过胶原酶消化法建成稳定的成纤维细胞系,本试验使二狼山绒山羊种质资源在细胞水平得到保存,为二狼山绒山羊成纤维细胞系的建立以及开展其种质资源的保存提供一定的参考。 展开更多

关键词 二狼山绒山羊 成纤维细胞系 年龄 生物学特性

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准确确定昆明犬排卵时间的研究 被引量：2

6

作者 李静 万九生 +9 位作者 韦云芳 陈方良 毛爱国 唐树生 陈超 曹剑 魏红江 卿玉波 龙维虎 郭建雄 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第1期203-207,258-259,共7页

为了准确确定昆明犬的排卵时间,适时配种以提高昆明犬的配种效率,试验采用外部观察法,阴道细胞涂片法,试情法,排卵检测试剂盒,测定母犬外周血中雌激素(E2)、促黄体生成素(LH)和孕酮(P)水平,超声波诊断等方法综合判断母犬排卵的最佳时间... 为了准确确定昆明犬的排卵时间,适时配种以提高昆明犬的配种效率,试验采用外部观察法,阴道细胞涂片法,试情法,排卵检测试剂盒,测定母犬外周血中雌激素(E2)、促黄体生成素(LH)和孕酮(P)水平,超声波诊断等方法综合判断母犬排卵的最佳时间,通过外科手术观察卵巢输卵管发育排卵情况并进行活体取卵试验验证。结果表明:昆明犬母犬的排卵时间是在LH峰值出现后的48~72 h,即阴道出血后的9~10 d,阴道涂片角质化细胞达到90%,此时P浓度达到(12.79±1.25)ng/m L,超声波诊断可见卵泡。取卵准确率达80%,卵母细胞成熟率为55.0%,平均每只昆明犬取卵4枚。说明根据发情外部表现、阴道黏液涂片、超声波诊断、LH及P水平检测共同运用可以准确确定昆明犬的排卵时间,并通过外科手术进行活体取卵试验,在输卵管内可以收集到发育成熟的卵母细胞。 展开更多

关键词 昆明犬 发情 排卵时间 促黄体生成素(LH) 孕酮 卵母细胞

原文传递

离心参数对猪卵母细胞早期去脂效果的影响 被引量：2

7

作者 刘凤娟 刘晋冀 +7 位作者 李小兵 李思 潘伟荣 成文敏 贾宝瑜 赵红业 卿玉波 魏红江 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第2期240-248,共9页

【目的】卵母细胞脂肪含量较高是影响猪卵母细胞和胚胎冷冻效果不佳的主要原因,离心去脂可以提高冷冻成功率。本研究选用不同离心参数对猪卵母细胞进行离心去脂,通过研究其对卵母细胞早期去脂效果及其去脂后克隆胚胎的体内外发育和冷冻... 【目的】卵母细胞脂肪含量较高是影响猪卵母细胞和胚胎冷冻效果不佳的主要原因,离心去脂可以提高冷冻成功率。本研究选用不同离心参数对猪卵母细胞进行离心去脂,通过研究其对卵母细胞早期去脂效果及其去脂后克隆胚胎的体内外发育和冷冻的影响,筛选最适离心参数。【方法】设定不同离心参数对猪卵母细胞进行早期去脂,利用体细胞克隆技术构建重构胚,通过离心后卵母细胞脂肪层的分离、重构胚的卵裂率和囊胚率、冷冻—解冻后的存活率以及代孕母猪妊娠等分析重构胚玻璃化冷冻前后体内外的发育效果。【结果】离心转数为10 000 r/min、离心时间为20 min时,卵母细胞的早期去脂效果最好。早期去脂重构胚的卵裂率和囊胚率分别是65.38%和13.46%;冷冻—解冻的2~4细胞、5~8细胞、9~16细胞的重构胚的存活率和囊胚率分别为49.09%、52.75%、78.57%和12.72%、2.20%、21.42%,而且冷冻胚胎移植到代孕母猪体内后成功妊娠。【结论】本研究证明了猪卵母细胞早期去脂可直接用于胚胎冷冻,最适离心参数为10 000 r/min×20 min。 展开更多

关键词 离心参数 早期去脂 重构胚 玻璃化冷冻

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农科院校动物类专业大学生实验动物福利意识调查分析 被引量：3

8

作者 程美玲 张莹 +3 位作者 白华毅 卿玉波 潘伟荣 李莲军 《云南农业大学学报（社会科学版）》 2021年第1期150-153,共4页

调查农科院校动物类专业大学生的实验动物福利意识,倡导相关实验教师在教学中融入动物福利及伦理知识,培养学生人文关爱精神。研究设计调查问卷了解云南农业大学动物类专业学生对实验动物福利伦理的了解情况。结果表明:学生对动物福利... 调查农科院校动物类专业大学生的实验动物福利意识,倡导相关实验教师在教学中融入动物福利及伦理知识,培养学生人文关爱精神。研究设计调查问卷了解云南农业大学动物类专业学生对实验动物福利伦理的了解情况。结果表明:学生对动物福利伦理概念、动物实验“3R”原则、实验动物相关法律法规的认知度等均偏低;和新生相比,接受过相关动物实验课程的高年级学生有一点实验动物福利伦理方面的知识储备;学生对实验动物福利伦理及相关内容的认知度整体较差,教师有必要在以后的相关实验教学中加强实验动物福利教育、培养学生人文素养。 展开更多

关键词 动物科学 动物医学 动物福利 实验动物

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版纳微型猪近交系成纤维细胞系的建立及冻存方法研究 被引量：1

9

作者 查星琴 潘伟荣 +5 位作者 肖晶 成文敏 信吉阁 卿玉波 刘海京 曾养志 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期661-665,共5页

本试验旨在观察胶原酶对版纳微型猪近交系（Banna mini-pig inbred line,BMI）耳组织的消化效果,探讨不同冻存方法对耳组织成纤维细胞存活率的影响.用胶原酶Ⅳ消化法培养BMI 60日龄仔猪原代耳组织成纤维细胞,建立耳组织成纤维细胞系,比... 本试验旨在观察胶原酶对版纳微型猪近交系（Banna mini-pig inbred line,BMI）耳组织的消化效果,探讨不同冻存方法对耳组织成纤维细胞存活率的影响.用胶原酶Ⅳ消化法培养BMI 60日龄仔猪原代耳组织成纤维细胞,建立耳组织成纤维细胞系,比较-80℃条件下分别保存3,5,7,30 d后冻存效果.结果表明：BMI仔猪成纤维细胞具有典型的成纤维细胞特征;生长曲线呈“S”形,倍增时间为37.1h;-80℃冻存3,5,7d的成纤维细胞存活率与液氮保存（93.74％）差异不显著（P＞0.05）,冻存30 d的存活率（79.38％）显著低于其他各组（P＜0.05）,但经48 ～ 72 h培养后仍能贴壁生长.因此,可得出此结论：采用胶原酶Ⅳ消化法可消化BMI耳组织成纤维细胞,而且该细胞在-80℃条件下能进行短期保存. 展开更多

关键词 BMI(版纳微型猪近交系) 成纤维细胞 胶原酶Ⅳ 冷冻保存

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不同采集方法对猪卵母细胞的采集效率和成熟率的影响 被引量：1

10

作者 卿玉波 魏红江 +6 位作者 姜河海 信吉阁 李红 许成盛 查星琴 潘伟荣 曾养志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期629-634,共6页

本研究旨在开发出一种对COCs损伤小且采集效率和卵母细胞成熟率高的卵母细胞采集方法。从屠宰场采集来的卵巢运回实验室后随机分为3组,分别用抽吸法、解剖法和刀切过滤法3种方法采集COCs,然后进行体外成熟培养,通过对COCs采集效率、COC... 本研究旨在开发出一种对COCs损伤小且采集效率和卵母细胞成熟率高的卵母细胞采集方法。从屠宰场采集来的卵巢运回实验室后随机分为3组,分别用抽吸法、解剖法和刀切过滤法3种方法采集COCs,然后进行体外成熟培养,通过对COCs采集效率、COCs完整性及卵母细胞体外成熟率的比较,研究解剖法、刀切过滤法和抽吸法3种采集方法对猪卵母细胞的采集效率和成熟率的影响。结果表明:每个卵巢采集COCs个数,刀切过滤法显著高于解剖法和抽吸法(P<0.05),而解剖法仅为1.55个,显著低于抽吸法(P<0.05);采集效率抽吸法最佳,采集和挑选单个COCs的时间显著低于解剖法和刀切过滤法(P<0.05),刀切过滤法次之,但显著低于解剖法(P<0.05);A、B级COCs比例,解剖法高达99.23%,显著高于其他2种方法(P<0.05),刀切过滤法与抽吸法差异不显著(P>0.05);卵母细胞的成熟率,解剖法和刀切过滤法都达到80%,二者间差异不显著(P>0.05),但显著高于抽吸法(P<0.05);100个成熟卵母细胞所需的卵巢数量,刀切过滤法最少,仅为17.4个,而解剖法和抽吸法分别高达80.6和90.3个;需要的总采集时间(采集和挑选的时间),刀切过滤法最低,仅为126.6min,而解剖法最高,为758.9min。综上所述,与抽吸法和解剖法相比,刀切过滤法是一种高效、快速的卵母细胞采集方法。 展开更多

关键词 猪卵母细胞 体外成熟培养 抽吸法 解剖法 刀切过滤法

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电激活参数和培养基对猪卵母细胞孤雌发育的影响 被引量：1

11

作者 潘伟荣 魏太云 +3 位作者 信吉阁 张崇义 卿玉波 魏红江 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期415-418,共4页

为优化电激活和胚胎培养的相关技术体系,研究电激活参数和培养液对猪卵母细胞孤雌胚胎发育的影响。结果表明:在脉冲电压为150 V(以每1 mm电激槽宽计,下同)、脉冲持续时间为100μs、脉冲1次的电激活条件下,猪卵母细胞孤雌激活的效果较好... 为优化电激活和胚胎培养的相关技术体系,研究电激活参数和培养液对猪卵母细胞孤雌胚胎发育的影响。结果表明:在脉冲电压为150 V(以每1 mm电激槽宽计,下同)、脉冲持续时间为100μs、脉冲1次的电激活条件下,猪卵母细胞孤雌激活的效果较好;在脉冲持续时间和脉冲次数恒定的条件下,脉冲电压150 V组的囊胚率显著高于100 V组和125 V组(P<0.05),达46.3%;在脉冲电压和脉冲次数恒定的条件下,脉冲持续时间100μs的囊胚率显著高于75、125μs组(P<0.05),达50.5%;在脉冲电压和脉冲持续时间恒定的条件下,1次脉冲的卵裂率和囊胚率显著高于2次脉冲组(P<0.05),分别达82.7%、50.3%;PZM3和NCSU23培养液对猪孤雌激活胚胎发育的影响差异不显著(P>0.05),但PZM3培养液组的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数均略高于NCSU23组。 展开更多

关键词 猪卵母细胞 孤雌发育 激活参数 培养液

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兽医学教师动物伦理及福利意识调查 被引量：2

12

作者 李莲军 卿玉波 +1 位作者 贾宝瑜 魏红江 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期129-131,共3页

动物伦理是人类如何看待和对待动物的伦理,是人类伦理的延伸,是人类社会文明、进步的标志。动物福利是动物伦理的重要内容。动物福利强调的是在善待动物的基础上利用动物[1]。目前社会上虐待、残杀、虐吃动物现象层出不穷[2-3],漠视生... 动物伦理是人类如何看待和对待动物的伦理,是人类伦理的延伸,是人类社会文明、进步的标志。动物福利是动物伦理的重要内容。动物福利强调的是在善待动物的基础上利用动物[1]。目前社会上虐待、残杀、虐吃动物现象层出不穷[2-3],漠视生命、残酷折磨及残忍抛弃实验动物事件并非偶然[4],动物在被剥夺生命的同时还忍受着无情的虐待。 展开更多

关键词 动物伦理 动物福利 意识调查 实验动物 人类伦理 兽医学 人类社会文明 漠视生命

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应用虚拟仿真技术提高动物解剖学实验教学质量

13

作者 富国文 王绍卿 +2 位作者 卿玉波 李莲军 樊月圆 《新一代（理论版）》 2022年第2期160-162,共3页

随着现在国家经济的快速发展,动物医学在民国经济中占据的地位越来越重要,但居于传统意义的动物解剖医学已经不能满足动物医学对专业人才的需要。本文主要从动物解剖的现状教学出发,对利用虚拟仿真技术在动物解剖实验教学中的应用进行浅... 随着现在国家经济的快速发展,动物医学在民国经济中占据的地位越来越重要,但居于传统意义的动物解剖医学已经不能满足动物医学对专业人才的需要。本文主要从动物解剖的现状教学出发,对利用虚拟仿真技术在动物解剖实验教学中的应用进行浅析,进而证明,应用虚拟仿真技术在动物解剖医学中具有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 虚拟仿真技术 动物解剖学 实验教学

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滇南小耳猪受精卵采集效率评价

14

作者 曾璐瑶 吕朝相 +4 位作者 魏红江 昂小祥 卿玉波 张亚平 潘伟荣 《上海畜牧兽医通讯》 2016年第3期16-18,共3页

本研究对影响滇南小耳猪受精卵采集效率的主要因素进行了探讨,旨在对滇南小耳猪受精卵采集效率进行评价,并建立一套高效且完善的滇南小耳猪受精卵采集技术操作体系。对比不同发情时间和不同冲胚方法对滇南小耳猪受精卵发育情况、受精率... 本研究对影响滇南小耳猪受精卵采集效率的主要因素进行了探讨,旨在对滇南小耳猪受精卵采集效率进行评价,并建立一套高效且完善的滇南小耳猪受精卵采集技术操作体系。对比不同发情时间和不同冲胚方法对滇南小耳猪受精卵发育情况、受精率和冲胚率的影响,同时研究排卵数量和产仔数的关系。结果发现,Ⅰ型和Ⅱ型排卵率分别为94.6%和95.2%,平均排卵数分别为7.7、7.8枚/头,1-cell期受精卵比例分别为76.3%和73.2%。一步法和三步法冲胚,胚胎回收率分别为59.7%和76.3%,二者间差异显著(P<0.05)。滇南小耳猪青年母猪两侧卵巢平均排卵总数为7.7枚/头,产仔数为6.8头。结果表明,按照Ⅰ型查情和配种更有利于实验的正常操作,使用三步法冲胚可以提高受精卵的采集效率,而提高受精卵采集效率的关键应是改进采集方法。 展开更多

关键词 滇南小耳猪 受精卵采集 排卵

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猪卵母细胞Npm基因及其编码核质蛋白表达研究

15

作者 成文敏 潘伟荣 +2 位作者 卿玉波 魏红江 曾养志 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第5期5-8,共4页

核质蛋白是广泛存在于卵母细胞中的由Npm基因编码的一种酸性、磷酸化的蛋白质,为分子伴侣家族的一员。本研究通过RT-PCR检测成熟不同时期卵母细胞Npm mRNA基因表达,同时采用免疫组化以及Western blot检测成熟不同时期卵母细胞核质蛋白... 核质蛋白是广泛存在于卵母细胞中的由Npm基因编码的一种酸性、磷酸化的蛋白质,为分子伴侣家族的一员。本研究通过RT-PCR检测成熟不同时期卵母细胞Npm mRNA基因表达,同时采用免疫组化以及Western blot检测成熟不同时期卵母细胞核质蛋白定性和定量表达。结果:成熟不同时期卵母细胞中均可检测到Npm基因mRNA表达。采用免疫组化的方法在体外成熟0 h和11 h卵母细胞中可检测到核质蛋白表达,但成熟22 h、33 h、44 h的卵母细胞检测不到核质蛋白表达;采用Western blot技术在体外成熟0 h和11 h卵母细胞中检测不到核质蛋白,成熟22 h、33 h、44 h卵母细胞可检测到核质蛋白。结果说明随着卵母细胞体外成熟进程的推进,Npm基因及其编码的核质蛋白表达量不断增加,可为受精后精子核解聚或体细胞核重编程做准备。 展开更多

关键词 NPM 核质蛋白 卵母细胞 猪

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猪胎儿成纤维细胞和耳皮肤成纤维细胞培养方法的研究 被引量：8

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作者 信吉阁 成文敏 +5 位作者 潘伟荣 卿玉波 查星琴 富国文 魏红江 曾养志 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期1-4,180,共5页

为了研究猪胎儿成纤维细胞和耳皮肤成纤维细胞的分离培养体系,根据取样组织的不同,筛选出最佳的培养方法,试验以猪胎儿和耳皮肤为试验材料,用4种不同的培养分离方法,即胰酶热消化法、胰酶冷热结合消化法、胰酶室温消化法和组织块培养法... 为了研究猪胎儿成纤维细胞和耳皮肤成纤维细胞的分离培养体系,根据取样组织的不同,筛选出最佳的培养方法,试验以猪胎儿和耳皮肤为试验材料,用4种不同的培养分离方法,即胰酶热消化法、胰酶冷热结合消化法、胰酶室温消化法和组织块培养法,分离培养猪胎儿成纤维细胞和耳皮肤成纤维细胞,对比培养效果,筛选出最佳的培养方法。结果表明:胰酶室温消化法分离的猪胎儿成纤维细胞存活率显著高于胰酶热消化法和胰酶冷热结合消化法(P<0.05),细胞贴壁效果好,且操作简单;猪耳皮肤成纤维细胞原代培养中,胰酶热消化法和胰酶室温消化法分离的细胞数量少,组织块培养法所需的组织量少,且较胰酶冷热结合消化法操作简单。试验中培养的细胞呈典型的成纤维细胞形态,生长曲线呈"S"型,经冻存复苏后生长状态良好,说明胰酶室温消化法是猪胎儿成纤维细胞较好的培养方法,胰酶热消化法和胰酶室温消化法是猪耳皮肤成纤维细胞原代培养的理想培养方法。 展开更多

关键词 猪 胎儿成纤维细胞 耳皮肤成纤维细胞 培养方法

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体细胞克隆技术扩繁超细型二狼山绒山羊的应用研究

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作者 卿玉波 程雯 +9 位作者 角德灵 刘城 郝志强 郭建雄 李钰莹 张筱琳 李臻 李效宇 王文 魏红江 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1420-1427,共8页

【目的】通过体细胞克隆技术生产超细型二狼山绒山羊克隆个体,为该技术在地方优质羊品种资源扩繁及新品种培育中的应用提供理论依据。【方法】选择1只4岁龄羊绒细度为13.89μm的二狼山绒山羊(♂),采集耳组织并分离培养成纤维细胞,以其... 【目的】通过体细胞克隆技术生产超细型二狼山绒山羊克隆个体,为该技术在地方优质羊品种资源扩繁及新品种培育中的应用提供理论依据。【方法】选择1只4岁龄羊绒细度为13.89μm的二狼山绒山羊(♂),采集耳组织并分离培养成纤维细胞,以其为供体细胞,利用体细胞克隆技术开展超细型二狼山绒山羊的扩繁研究,通过克隆羊体重、羊绒细度、繁殖性能等指标评估该技术的可行性。【结果】试验成功建立了稳定的山羊卵母细胞体外成熟培养及体细胞克隆技术体系,卵母细胞成熟率为44.8%,孤雌激活卵裂率、囊胚率分别为83.0%、22.4%;二狼山绒山羊克隆胚的卵裂率、囊胚率分别为77.8%、13.7%。获得5只克隆羊个体,其生长发育正常,二狼山绒山羊母羊自然交配共获得16只健康的F1代个体,具有正常繁殖能力。克隆个体羊绒细度极显著低于同龄对照个体(P<0.01)。【结论】本研究通过体细胞克隆技术成功克隆了超细型二狼山绒山羊个体,其具备正常生产性能和繁殖性能,并保留了超细羊绒的特性,为地方优良羊种质资源扩繁和新品种培育应用研究奠定了基础。 展开更多

关键词 二狼山绒山羊 体细胞克隆 羊绒细度 繁殖性能

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CB·氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养中的作用 被引量：3

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作者 信吉阁 卿玉波 +3 位作者 成文敏 潘伟荣 魏红江 曾养志 《安徽农业科学》 CAS 2012年第22期11330-11332,共3页

[目的]研究CB、氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养体系中的作用,为优化相关技术体系提供依据。[方法]卵母细胞经体外成熟培养,采用不同孤雌激活方法(Ele.+CB组、CB组、Ele.组、对照组),研究CB在激活中的作用。激活后采用PZM3培养液... [目的]研究CB、氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养体系中的作用,为优化相关技术体系提供依据。[方法]卵母细胞经体外成熟培养,采用不同孤雌激活方法(Ele.+CB组、CB组、Ele.组、对照组),研究CB在激活中的作用。激活后采用PZM3培养液,并去除氨基酸成分,探索氨基酸对体外培养胚胎的作用。[结果]CB+Ele.组的卵裂率显著地高于其他3组(P<0.05),囊胚率为32.7%,囊胚细胞数为61.4,而其他3组均未出现囊胚。电激活(脉冲电压100 V/mm,脉冲时程100μs,脉冲次数1次)联合CB处理,可激活卵母细胞体外发育至囊胚,CB有助于提高卵裂率、囊胚率。添加氨基酸的培养液中的卵母细胞的卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数显著提高(P<0.05),表明氨基酸能提高猪孤雌激活胚胎培养效果。[结论]添加CB、氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养体系中能提高胚胎的培养效果。 展开更多

关键词 猪卵母细胞 孤雌激活 体外培养 CB 氨基酸

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版纳微型猪近交系AO血型A基因的克隆及生物信息学分析 被引量：1

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作者 潘伟荣 查星琴 +5 位作者 成文敏 卿玉波 肖晶 魏红江 曾养志 霍金龙 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第1期56-62,共7页

【目的】扩增版纳微型猪近交系AO血型A基因编码区全长序列,并对序列进行生物信息学分析。【方法】提取版纳微型猪近交系猪组织的RNA,反转录成为cDNA,利用RT-PCR方法扩增AO血型A基因编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化... 【目的】扩增版纳微型猪近交系AO血型A基因编码区全长序列,并对序列进行生物信息学分析。【方法】提取版纳微型猪近交系猪组织的RNA,反转录成为cDNA,利用RT-PCR方法扩增AO血型A基因编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与其他12种物种构建系统进化树。【结果】版纳微型猪近交系AO血型A基因编码区全长1 095 bp,编码364个氨基酸,氨基酸序列与GenBank上登录的猪AO基因氨基酸序列相似性为99.5%。【结论】版纳微型猪近交系的AO血型A基因除了与黑猩猩、人和小鼠亲缘关系较远外,与牦牛、藏羚羊、水牛、小须鲸、绵羊、羊驼、野骆驼、山羊的关系都较为接近,其中与山羊的亲缘关系最为接近。 展开更多

关键词 版纳微型猪近交系 AO血型A基因 克隆测序 生物信息学

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版纳微型猪近交系AO血型基因外显子7和外显子8遗传特征分析

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作者 潘伟荣 查星琴 +5 位作者 霍金龙 卿玉波 肖晶 魏红江 曾养志 成文敏 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期584-590,共7页

猪的UDP-N-乙酰半乳糖胺转移酶(UDP-N-acetylgalactosamine transferase,UDP-Gal NAc)是负责转移一分子的N-乙酰-D-半乳糖胺基(NAc Ga1)到H底物上形成A抗原,从而决定A型血的转移酶,AO血型系统的A基因编码A转移酶。采用PCR技术和直接测... 猪的UDP-N-乙酰半乳糖胺转移酶(UDP-N-acetylgalactosamine transferase,UDP-Gal NAc)是负责转移一分子的N-乙酰-D-半乳糖胺基(NAc Ga1)到H底物上形成A抗原,从而决定A型血的转移酶,AO血型系统的A基因编码A转移酶。采用PCR技术和直接测序的方法对版纳微型猪近交系UDP-Gal NAc基因外显子7和外显子8进行多态性分析,均仅检测到1种基因型。通过序列比较发现,版纳微型猪近交系UDP-Gal NAc基因外显子7和外显子8与NCBI数据库中14个其他物种的ABO血型基因存在较高的同源性。与人相比,猪外显子7第92~97位缺失编码两个氨基酸的6个碱基。构建的基因进化树分析结果显示版纳微型猪近交系与牛、羊、鲸亲缘关系最近。 展开更多

关键词 UDP-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因 版纳微型猪近交系 外显子7和8 PCR 序列分析

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