四色流式分析冠心病患者外周血单核细胞亚群及单核细胞-血小板聚集体的变化 被引量：8

1

作者 杨国红 卢芮伊 +6 位作者 孙海英 张玲 姬文婕 周欣 石蕊 姜铁民 李玉明 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期29-33,共5页

目的:建立基于四色的流式细胞术检测外周血单核细胞亚群及各亚群单核细胞-血小板聚集体(MPA)的方法,并观察冠心病患者外周血单核细胞亚群及各亚群MPA的变化特点。方法:本研究纳入经冠状动脉造影证实的冠心病患者和健康对照者各25例,记... 目的:建立基于四色的流式细胞术检测外周血单核细胞亚群及各亚群单核细胞-血小板聚集体(MPA)的方法,并观察冠心病患者外周血单核细胞亚群及各亚群MPA的变化特点。方法:本研究纳入经冠状动脉造影证实的冠心病患者和健康对照者各25例,记录所有研究对象的一般临床资料,并采集外周静脉血,依据单核细胞和血小板的标志性分子CD86、CD14、CD16和CD41对单核细胞亚群和MPA进行四色的流式细胞术(FCM)分析。利用抗CD86-PE-Cy5圈出总的单核细胞(总Mon)群,利用抗CD14-FITC和抗CD16-PE将总Mon分为:经典型(CD14++CD16-,Mon1)、中间型(CD14++CD16+,Mon2)和非经典型(CD14+CD16++,Mon3)3个亚群,最后应用CD41-PE-Cy7分析总Mon和各个亚群的MPA,并应用Flow-count TM荧光微球对各个亚群及MPA的绝对量进行计数,比较两组研究对象外周血单核细胞各亚群及各亚群MPA的差异。结果:冠心病组患者外周血Mon2和Mon3所占百分比和绝对计数均显著高于对照组(P<0.05),而Mon1和总Mon两组间比较差异无统计学意义;与对照组相比,冠心病患者总MPA和Mon2相关MPA所占百分比和绝对计数亦显著增高(P<0.05),而Mon1相关MPA和Mon3相关MPA的百分比及绝对计数两组间比较差异无统计学意义。结论:基于CD14、CD16、CD86和CD41的四色流式分析能够有效定量分析外周血单核细胞各亚群及各亚群MPA。中间型单核细胞及其形成的MPA水平显著升高,为临床上冠心病患者的诊治策略提供了新思路。 展开更多

关键词 单核细胞 亚群 血小板 单核细胞-血小板聚集体 流式细胞术

原文传递

干扰NaV1.9对RAW264.7细胞增殖、吞噬和迁移的影响 被引量：3

2

作者 罗悦晨 周欣 +4 位作者 姬文婕 孙海英 卢芮伊 姜铁民 李玉明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期225-228,共4页

目的应用RNA干扰技术沉默RAW264.7小鼠巨噬细胞中电压门控性钠通道(VGSCs/NaVs)α亚单位NaV1.9基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能的影响。方法通过LipofectamineTM2000将短发夹RNA(shRNA)干扰质粒转... 目的应用RNA干扰技术沉默RAW264.7小鼠巨噬细胞中电压门控性钠通道(VGSCs/NaVs)α亚单位NaV1.9基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能的影响。方法通过LipofectamineTM2000将短发夹RNA(shRNA)干扰质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选获得稳定细胞株。用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定干扰效率,CCK-8法测定稳定细胞株的增殖活性,流式细胞术检测细胞的细胞周期及吞噬能力,Transwell小室法检测细胞的迁移功能。结果成功建立稳定干扰NaV1.9的细胞株,RT-PCR法鉴定干扰效率达80%。CCK-8法及流式细胞术结果显示,降低NaV1.9的表达使细胞增殖活性下降(P<0.05);流式细胞术结果显示,抑制NaV1.9的表达使细胞吞噬能力降低(P<0.05);Transwell小室法结果显示,干扰NaV1.9的表达使细胞迁移能力减弱(P<0.05)。结论建立了稳定干扰NaV1.9的RAW264.7细胞株,下调NaV1.9的表达使巨噬细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能显著降低。 展开更多

关键词 NAV1 9 RAW264 7 增殖 吞噬能力 迁移能力

下载PDF 职称材料

心肌梗死后心室重塑的治疗新靶点:免疫细胞中介的炎症反应 被引量：3

3

作者 卢芮伊 周欣 +1 位作者 姬文婕 李玉明 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2013年第24期11-13,共3页

心肌梗死是引起全球范围内致死和致残的主要病因之一。心肌梗死后缺血区心肌的功能丧失可通过Laplace定律以心室腔的扩大为代价，维持射血分数；但长时间室壁应力的增加势必引起心室梗死区和非梗死区结构和功能的改变，进而导致心力衰... 心肌梗死是引起全球范围内致死和致残的主要病因之一。心肌梗死后缺血区心肌的功能丧失可通过Laplace定律以心室腔的扩大为代价，维持射血分数；但长时间室壁应力的增加势必引起心室梗死区和非梗死区结构和功能的改变，进而导致心力衰竭出现。目前的临床治疗主要通过早期再灌注治疗减少梗死面积，同时降低左心室负荷，从而改善心肌梗死后的心室重塑。 展开更多

关键词 心肌梗死 再灌注治疗 心室重塑 炎症反应 免疫细胞 死后 新靶点 Laplace定律

原文传递

健康体检者循环单核细胞亚群与性别及年龄的关系 被引量：2

4

作者 李彭军 韩慧文 +4 位作者 葛兰 孙海英 卢芮伊 周欣 李玉明 《武警医学》 CAS 2014年第1期5-8,共4页

目的观察成年健康人循环单核细胞各亚群细胞的数量和比例,探讨成年国人外周血单核细胞各亚群与性别和年龄的关系。方法连续纳入2012-05在武警后勤学院附属医院健康体检中心进行常规体检的175名成年人,采集外周静脉血后以枸橼酸钠抗凝,进... 目的观察成年健康人循环单核细胞各亚群细胞的数量和比例,探讨成年国人外周血单核细胞各亚群与性别和年龄的关系。方法连续纳入2012-05在武警后勤学院附属医院健康体检中心进行常规体检的175名成年人,采集外周静脉血后以枸橼酸钠抗凝,进行CD14/CD16/CD86三色流式细胞术分析,探讨单核细胞各亚群数量和比例的年龄和性别分布特点。结果 45人因检出糖尿病、高血压病等相关临床疾病或可疑疾病而未纳入统计。130位成年人中,男性与女性健康体检者比较,外周血经典型单核细胞(CD14++CD16-)计数与比例差异无统计学意义(P=0.091,P=0.701),中间型单核细胞(CD14++CD16+,P=0.082,P=0.474)、非经典型单核细胞(CD14+CD16++,P=0.085,P=0.756)差异均无统计学意义。CD14++CD16-型、CD14+CD16++型单核细胞计数与比例统计在不同年龄段人群中差异无统计学意义。CD14++CD16+单核细胞计数随着受试者年龄的增加而增加[青年组单核细胞计数为11(6.5,13.5),中年组为9.5(7.0,18.0),老年组为9(7.0,17.5),P=0.012],同时CD14++CD16+型单核细胞比例也有增高趋势,差异无统计学意义。结论本研究首次证实国人循环单核细胞亚群存在年龄分布的差异,尤其是CD14++CD16+型单核细胞亚群随年龄增加而增多,对国人单核细胞亚群相关研究具有参考价值。 展开更多

关键词 单核细胞亚群 性别 年龄 健康成年人

下载PDF 职称材料

外周血白细胞-血小板聚集体在肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者和健康人群的分布差异 被引量：2

5

作者 葛兰 周欣 +5 位作者 孙海英 卢芮伊 石蕊 曾山 姜铁民 李玉明 《武警后勤学院学报（医学版）》 CAS 2013年第4期245-248,F0003,共5页

【目的】观察外周血白细胞与血小板形成的聚集体在肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者和健康人群的分布情况。【方法】采集2011年11月-2012年5月期间,我中心收治的66例肌钙蛋白阴性的不稳定心绞痛患者外周血,以枸橼酸钠抗凝后采用流式细... 【目的】观察外周血白细胞与血小板形成的聚集体在肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者和健康人群的分布情况。【方法】采集2011年11月-2012年5月期间,我中心收治的66例肌钙蛋白阴性的不稳定心绞痛患者外周血,以枸橼酸钠抗凝后采用流式细胞术分别分析粒细胞-血小板、单核细胞-血小板以及淋巴细胞-血小板聚集体的数量和比例。并采用相同方法对51例性别和年龄匹配的健康体检者进行白细胞-血小板聚集体的检测。【结果】与健康体检者相比,冠心病组患者外周血白细胞血小板聚集体的计数显著高于健康对照组[8 162 cells/μl（6 748-12 925）vs.5 911 cells/μl（4 722-7 252）,P〈0.001;以中位数和四分位间距表示,下同]。单核细胞-血小板聚集体百分比较健康对照组明显升高[23.25%（14.01%-40.40%）vs.17.88%（14.23%-24.25%）,P〈0.05],而粒细胞[9.06%（7.15%-11.48%）vs.9.50%（8.14%-11.30%）,P=0.470]和淋巴细胞[7.32%（6.14%-8.94%）vs.7.23%（5.57%-8.03%）,P=0.321]与血小板聚集体百分比在两组间没有显著性差异。【结论】肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者外周血白细胞血小板聚集体较健康人群明显升高,其中单核细胞-血小板聚集体增高更为明显,提示单核细胞-血小板聚集体对于冠心病患者危险分层具有潜在应用价值。 展开更多

关键词 冠心病 白细胞-血小板聚集体 单核细胞-血小板聚集体

原文传递

Krüppel样因子4基因干扰对RAW264.7细胞凋亡和吞噬的影响 被引量：2

6

作者 姬文婕 陈雪芬 +4 位作者 马永强 胡道川 卢芮伊 周欣 魏路清 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期341-344,共4页

目的应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW264.7巨噬细胞Krüppel样因子4(KLF4)基因,建立稳定干扰细胞株,观察其对细胞增殖、凋亡和吞噬活性的影响。方法针对小鼠KLF4基因设计合成重组KLF4 shRNA质粒,脂质体法将重组质粒转染至RAW264.7细胞,... 目的应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW264.7巨噬细胞Krüppel样因子4(KLF4)基因,建立稳定干扰细胞株,观察其对细胞增殖、凋亡和吞噬活性的影响。方法针对小鼠KLF4基因设计合成重组KLF4 shRNA质粒,脂质体法将重组质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。Western blot法检测细胞中KLF4蛋白的表达;CCK-8法检测细胞增殖活性;AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞的凋亡情况;荧光素标记的大肠杆菌结合流式细胞仪检测细胞的吞噬活性。结果 KLF4 shRNA能明显抑制RAW264.7细胞的KLF4蛋白的表达,抑制率76%以上;从第3天开始,shKLF4组细胞的生长速度明显低于NC组(转染阴性质粒pGPU6/GFP/Neo-NC)(P<0.05);WT组(野生型RAW264.7)、NC组和shKLF4组的细胞凋亡率分别为:1.73%、6.85%和12.76%,shKLF4组明显高于NC组(P<0.05);各组细胞的平均荧光强度分别为:WT组(122.0±2.80)、NC组(48.97±5.69)和shKLF4组(80.10±4.61),与NC组相比,shKLF4组的细胞吞噬活性明显增高(P<0.05)。结论成功构建了稳定干扰KLF4基因表达的RAW264.7巨噬细胞株,KLF4下调能够明显抑制RAW264.7细胞增殖,促进细胞凋亡,增强细胞的吞噬活性。 展开更多

关键词 Krüppel样因子4 RNA干扰 小鼠巨噬细胞RAW264.7 增殖 吞噬

下载PDF 职称材料

Sonoclot凝血分析法评价冠心病血小板氯吡格雷反应性研究 被引量：2

7

作者 孙海英 周欣 +7 位作者 卢芮伊 杨国红 郭兆增 石 蕊 曾山 姬文婕 姜铁民 李玉明 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期50-53,共4页

目的探讨Sonoclot凝血分析法评价冠心病患者氯吡格雷反应性的有效性。方法选取2012年武警后勤学院附属医院心脏中心收治的82例冠心病患者,分别用Sonoclot凝血分析法和舒血管刺激磷蛋白(VASP)法检测血小板反应性。以血小板VASP测定的血... 目的探讨Sonoclot凝血分析法评价冠心病患者氯吡格雷反应性的有效性。方法选取2012年武警后勤学院附属医院心脏中心收治的82例冠心病患者,分别用Sonoclot凝血分析法和舒血管刺激磷蛋白(VASP)法检测血小板反应性。以血小板VASP测定的血小板反应指数≥50%为氯吡格雷低反应性的标准,探讨Sonoclot凝血分析法与血小板VASP磷酸化法的相关性。结果 Sonoclot凝血分析法中ADP和NON通路中凝血速率差值与凝血酶原时间呈正相关(r=0.22,P<0.05);血小板功能的差值与血小板VASP磷酸化呈正相关(r=0.38,P<0.01);受试者工作特征曲线分析,Sonoclot凝血分析法判定氯吡格雷反应性的曲线下面积为0.67(P<0.01),敏感度为72.34%,特异度为57.14%。结论 Sonoclot凝血分析法与血小板VASP磷酸化法之间存在相关性,可以用于氯吡格雷反应性的评价。 展开更多

关键词 冠心病 凝血功能 血小板反应性 流式细胞术

原文传递

干扰盐皮质激素受体基因对RAW264.7细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1

8

作者 姬文婕 胡道川 +4 位作者 陈雪芬 马永强 卢芮伊 周欣 魏路清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2261-2265,共5页

目的:应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达... 目的:应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。细胞分为3组:野生型(WT)组、阴性对照(NC)组和干扰(shMR)组。荧光显微镜下观察确定细胞的转染效率;实时定量PCR法检测细胞中MR mRNA的表达;CCK-8方法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡情况。结果:(1)MR shRNA能明显抑制RAW264.7细胞的MR基因表达,抑制率70%以上。(2)从第3 d开始,shMR组细胞的生长速度明显低于NC和WT组(P<0.05),说明MR shRNA能明显抑制细胞增殖。(3)WT、NC和shMR组的增殖指数分别为(37.2±0.5)%、(37.5±1.6)%和(31.0±1.3)%,shMR组的细胞周期出现改变,S期和G2/M期比例明显下降,增殖指数下降(P<0.05)。(4)WT、NC和shMR组的细胞凋亡率分别为(2.18±0.36)%、(6.65±0.81)%和(7.70±1.34)%,shMR组略高于NC组,但二者的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究成功构建了稳定干扰MR基因表达的RAW 264.7细胞株,MR shRNA能够明显抑制RAW 264.7细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。 展开更多

关键词 受体 盐皮质激素 RNA干扰 RAW 264 7细胞 细胞增殖 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

基于CoroNa^(TM) Green检测细胞内Na^+浓度的流式细胞术分析方法的建立和评价 被引量：1

9

作者 毕莹 卢芮伊 +3 位作者 周欣 姬文婕 杨国红 李玉明 《天津医科大学学报》 2012年第4期428-431,共4页

目的:建立并评价以CoroNa Green检测细胞内Na+含量变化的流式细胞术方法。方法:完全生长培养基培养的H9c2心肌细胞分别给予Na+通道阻断剂TTX(最终作用浓度分别为10、50 nmol/L)和Na+通道激动剂Veratridine(最终作用浓度分别为5、10μmol... 目的:建立并评价以CoroNa Green检测细胞内Na+含量变化的流式细胞术方法。方法:完全生长培养基培养的H9c2心肌细胞分别给予Na+通道阻断剂TTX(最终作用浓度分别为10、50 nmol/L)和Na+通道激动剂Veratridine(最终作用浓度分别为5、10μmol/L),加CoroNa Green后用流式细胞仪对其信号进行检测;H9c2心肌细胞在含有NaCl(最终作用浓度分别为25、50、100、150 mmol/L)的完全生长培养基中培养24 h,加CoroNa Green后用流式细胞仪对其信号进行检测。结果:与阳性对照组相比,等渗状态给予Na+通道阻断剂TTX大于10 nmol/L时胞内荧光信号强度明显减少(P<0.05),而Na+通道激动剂Veratridine对胞内荧光信号强度无明显影响(P>0.05);在高渗状态下,随着NaCl浓度的增高,细胞内荧光信号明显增强(P<0.05),提示Na+内流明显增多。结论:CoroNa Green作为新型的荧光Na+指示剂,与流式细胞术结合,可以简便、有效的检测细胞内游离Na+含量。 展开更多

关键词 Na+ CORONA Green 流式细胞术

下载PDF 职称材料

针灸联合康复运动训练治疗帕金森病的临床分析

10

作者 程松杨 王安琪 +1 位作者 卢芮伊 李杨 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2023年第6期98-101,共4页

针对帕金森病患者进行中医结合康复训练的方式,重点讨论针灸联合康复运动训练的应用疗效。方法 在帕金森患者的选择上,其入院时间为2022年1月到2022年12月,总计人数74人需要。通过电脑随机抽样法来分组,每组37人。对照组患者实施常规西... 针对帕金森病患者进行中医结合康复训练的方式,重点讨论针灸联合康复运动训练的应用疗效。方法 在帕金森患者的选择上,其入院时间为2022年1月到2022年12月,总计人数74人需要。通过电脑随机抽样法来分组,每组37人。对照组患者实施常规西药治疗,试验组在上述基础上联合针灸与康复运动训练治疗,观察治疗前后的主要症状评分、精神行为和情绪(UPDRS-I)、日常生活活动(UPDRS-II)、运动功能部分(UPDRS-Ⅲ)评分、治疗前及治疗后患者的生活质量改善效果。结果 试验组治疗后各指标均明显改善,P<0.05。结论 针灸联合康复运动训练治疗帕金森病具有良好的临床效果。 展开更多

关键词 针灸 康复运动训练 帕金森病 临床效果

下载PDF 职称材料

单核细胞亚群在大鼠心肌缺血再灌注模型中的动态变化及意义 被引量：5

11

作者 卢芮伊 周欣 +6 位作者 姬文婕 罗悦晨 杨国红 孙海英 葛兰 姜铁民 李玉明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期131-134,共4页

目的观察单核细胞不同亚群在大鼠心肌缺血再灌注(I/R)模型中的动态变化,并探讨其与I/R损伤后炎症程度及组织修复的关系。方法 Wistar大鼠16只随机分为缺血再灌注组(I/R组)和假手术组(sham组)。采用结扎左冠状动脉前降支45 min后再灌注... 目的观察单核细胞不同亚群在大鼠心肌缺血再灌注(I/R)模型中的动态变化,并探讨其与I/R损伤后炎症程度及组织修复的关系。方法 Wistar大鼠16只随机分为缺血再灌注组(I/R组)和假手术组(sham组)。采用结扎左冠状动脉前降支45 min后再灌注的方法制备I/R模型。于术前、术后1、3、5、7、14 d抽取大鼠尾静脉血,运用流式细胞术将单核细胞分为CD172a+CD43low和CD172a+CD43high两个亚群,检测各时间点单核细胞亚群的比例,并于术后第30天取心脏行Masson及麦胚凝集素(WGA)染色,观察心肌梗死区纤维化程度及心肌细胞肥大程度与单核细胞表型变化的关系。结果 I/R组CD172a+CD43low单核细胞比例在术后第1天较基线显著升高(P<0.05),第3天达到高峰(P<0.01),之后逐渐下降,从第7天起与基线水平一致;Sham组CD172a+CD43low单核细胞比例在术后第1天升高,与基线相比差异有统计学意义(P<0.05),从第3天起降至基线水平;与sham组相比,I/R组第3天时CD172a+CD43low比例较显著性升高(P<0.01),其余时间点则无显著性差异。两组大鼠CD172a+CD43high细胞比例在各组呈现与CD43low相反的变化。Masson及WGA染色结果显示,I/R组大鼠心肌存在大量胶原纤维的沉积(P<0.05),且心肌细胞存在不同程度的肥大(P<0.01)。术后第3天CD172a+CD43low单核细胞比例与术后30 d左室壁心肌纤维化程度的相关性分析结果显示两者呈正相关(r=0.86,P<0.05)。结论研究表明大鼠心肌I/R后单核细胞亚群发生了动态变化,具有促炎症表型的CD172a+CD43low单核细胞可能成为心肌I/R损伤的治疗靶点。 展开更多

关键词 单核细胞 亚群 缺血再灌注 流式细胞术

下载PDF 职称材料