2011年-2014年广西猪流行性腹泻病毒检测及其M基因的序列分析 被引量：21

1

作者 卢冰霞 秦毅斌 +12 位作者 何颖 李莹莹 梁家幸 黎珂钰 李斌 苏乾莲 周英宁 蒋冬福 卢敬专 闭炳芬 梁保忠 段群棚 赵武 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期549-557,共9页

本试验应用RT-PCR方法对2011年1月—2014年4月采自广西南宁、玉林等14个地区的331份仔猪腹泻粪便样品进行猪流行性腹泻病毒（PEDV）检测。结果显示331份样品中有210份为PEDV阳性,阳性率为63.44%。对其中25份阳性样品的PEDV M基因进行克... 本试验应用RT-PCR方法对2011年1月—2014年4月采自广西南宁、玉林等14个地区的331份仔猪腹泻粪便样品进行猪流行性腹泻病毒（PEDV）检测。结果显示331份样品中有210份为PEDV阳性,阳性率为63.44%。对其中25份阳性样品的PEDV M基因进行克隆和测序,将测序结果与GenBank中PEDV参考毒株的M基因序列进行同源性比对分析并构建系统进化树。25个PEDV M基因序列与51个参考毒株M基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为96.0%~99.9%、94.3%~99.6%。PEDV M基因遗传变异分析结果表明,广西2013年—2014年的PEDV流行毒株与北京、安徽、武汉、河北、广东等地2010年—2013年的流行毒株亲缘关系较近,而与中国早期分离株CH/S（GenBank登录号：JN547228）、疫苗株CV777（GenBank登录号：AF353511）和Attenuated DR13（GenBank登录号：JQ023162）的遗传距离较远。提示广西现流行的PEDV与早期毒株相比已发生较为明显的变异。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) M基因 遗传变异

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2014-2018年广西6种猪主要病毒性繁殖障碍疫病流行病学调查 被引量：16

2

作者 段群棚 陈忠伟 +12 位作者 何颖 周英宁 李晓玉 梁家幸 闭炳芬 杨思仪 蒋冬福 卢敬专 李斌 秦毅斌 卢冰霞 苏乾莲 赵武 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第2期526-535,共10页

试验旨在了解广西猪主要病毒性繁殖障碍疫病的发生态势,为预防和控制此类疫病提供科学依据。采用RT-PCR/PCR方法对2014年3月至2018年2月采自广西的349份流产胎儿样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(... 试验旨在了解广西猪主要病毒性繁殖障碍疫病的发生态势,为预防和控制此类疫病提供科学依据。采用RT-PCR/PCR方法对2014年3月至2018年2月采自广西的349份流产胎儿样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)及猪乙型脑炎病毒(JEV)6种主要病毒性繁殖障碍疫病病原的检测并分析其阳性检出率在不同年份、季节之间的差异及病原混合感染情况。结果显示,2014-2017年,6种病原的猪场阳性率从高到低依次为JEV(36.00%)、PRRSV(16.00%)、PCV2(9.00%)、PRV(7.00%)、PPV(6.00%)和CFSV(5.00%),样品阳性检出率从高到低依次为JEV(27.06%)、PRRSV(6.18%)、PRV(5.88%)、PCV2(3.82%)、CSFV(2.35%)和PPV(2.35%)。季节因素对6种病毒性繁殖障碍疫病的发生有一定影响:JEV在夏季、秋季检出率较高,春季、冬季检出率较低;PRRSV一年四季检出率均较高,且无明显差异;PCV2在春季检出率较高,其次是夏季和冬季,秋季检出率较低;PRV在春季、冬季检出率较高,夏季、秋季检出率均为0;PPV在夏季检出率较高,其次是春季和秋季,冬季检出率为0;CSFV在冬季检出率最高,其次是夏季,春季和秋季检出率均为0。流产胎儿以单一感染为主,6种病毒均存在不同程度单一感染情况,单一感染率JEV最高(23.82%)、PCV2最低(0.59%);混合感染以双重感染为主,其中以2016年双重感染情况较多,且感染组合多样;三重感染情况较少、仅在2016年送检样品中发现1例,未发现四重及四重以上感染情况。调查结果表明,2014-2017年,JEV均有较高的阳性检出率,已成为广西部分猪场母猪流产最主要病毒性病原。PRRSV和PRV仍是目前引起广西猪场母猪流产的主要病毒性病原。 展开更多

关键词 流产胎儿 病毒性繁殖障碍疫病 流行病学

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2017—2021年广西腹泻猪群主要病毒性腹泻病原检测 被引量：16

3

作者 段群棚 秦毅斌 +14 位作者 何文娜 赵武 卢冰霞 周英宁 全琛宇 赵硕 冯建远 梁家幸 蒋冬福 李斌 陈婷婷 许心婷 卢敬专 陈忠伟 何颖 《中国动物检疫》 CAS 2021年第10期1-8,共8页

为掌握广西地区导致猪群腹泻的主要病毒性病原的流行态势,为养殖场猪病毒性腹泻的综合防控提供依据,用实时荧光RT-PCR检测方法,对2017年1月—2021年6月广西14个地市489个猪场1206份临床腹泻样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(... 为掌握广西地区导致猪群腹泻的主要病毒性病原的流行态势,为养殖场猪病毒性腹泻的综合防控提供依据,用实时荧光RT-PCR检测方法,对2017年1月—2021年6月广西14个地市489个猪场1206份临床腹泻样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)等病原检测,并分析其阳性检出率在不同年份、季节、地区、年龄段猪群之间的差异以及病原混合感染情况。结果显示,2017—2021年,PEDV、PDCoV、PoRV、TGEV样品阳性检出率分别为49.67%、7.63%、4.56%和0.33%,场阳性检出率分别为53.37%、8.18%、8.18%和0.61%;病毒性腹泻病原有一定的季节性流行特征,多表现为冬、春季流行加重;PEDV、PDCoV普遍流行,PoRV局部流行,TGEV散发流行;4种病原对不同年龄段腹泻猪群的感染率存在差异,其中对哺乳仔猪危害最为严重;猪群以单一感染为主,主要为PEDV单一感染,阳性检出率为47.93%,混合感染均为二重感染且感染率较低。结果表明,导致广西地区猪群腹泻的主要病毒性病原主要为PEDV、PDCoV和PoRV,其中PEDV为最主要病原,其他病原也呈流行加重趋势,需进一步加强病原监测和疫病综合防控。 展开更多

关键词 猪病毒性腹泻 病原检测 猪流行性腹泻病毒 猪轮状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪丁型冠状病毒

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2013～2018年广西部分规模猪场主要病毒性腹泻疫病流行病学调查研究 被引量：13

4

作者 何颖 秦毅斌 +14 位作者 段群棚 张艺杰 卢冰霞 胡庭俊 李晓玉 周英宁 周展宏 刘磊 梁家幸 李斌 蒋冬福 卢敬专 苏乾莲 刘棋 赵武 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第3期86-93,共8页

为了解广西壮族自治区规模猪场主要病毒性腹泻疫病的流行情况,本研究采用RT-PCR方法,对2013~2018年广西壮族自治区14个地级市送检的1547份腹泻类样品进行猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪轮状病毒(Porcine r... 为了解广西壮族自治区规模猪场主要病毒性腹泻疫病的流行情况,本研究采用RT-PCR方法,对2013~2018年广西壮族自治区14个地级市送检的1547份腹泻类样品进行猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)和猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)4种猪的主要病毒性腹泻疫病的病原阳性率、季节影响因素和混合感染情况进行调查与分析。检测结果显示,2013~2018年,病毒平均样品阳性率从高到低依次为PEDV(54.94%)、PDCoV(4.52%)、PoRV(4.40%)和TGEV(0.00%),其中PEDV的样品阳性率、地区阳性率和秋冬季节阳性率均为最高。4种病毒均存在不同程度的单一感染或混合感染,其中单独感染以PEDV为主,其次是PDCo V和Po RV,TGEV单一感染率最低;混合感染中以PEDV+PDCo V和PEDV+Po RV双重感染为主,三重感染较少发生。结果表明,2013~2018年PEDV阳性检出率最高,已经成为引发广西规模猪场流行性腹泻的最主要病原,并且常与Po RV和PDCo V发生混合感染,是当前广西猪病毒性腹泻类疫病的防控重点。 展开更多

关键词 猪病毒性腹泻 混合感染 广西

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猪丁型冠状病毒CH/GX/1468B/2017的分离鉴定及全基因组序列分析 被引量：9

5

作者 秦毅斌 何苹萍 +12 位作者 卢冰霞 何颖 梁家幸 刘磊 段群棚 韦嫔媛 李斌 陈忠伟 周英宁 苏乾莲 蒋冬福 卢敬专 赵武 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期1907-1916,共10页

本研究于广西某猪场采集疑似感染猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)的腹泻仔猪小肠及其内容物进行病毒分离,并通过细胞病变(CPE)、RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和全基因序列测定分析对分离的病毒进行鉴定。结果显示,试验成... 本研究于广西某猪场采集疑似感染猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)的腹泻仔猪小肠及其内容物进行病毒分离,并通过细胞病变(CPE)、RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和全基因序列测定分析对分离的病毒进行鉴定。结果显示,试验成功分离到1株PDCoV,命名为CH/GX/1468B/2017(简称PDCoV 1468B)。该毒株可稳定有效地在LLC-PK细胞生长增殖,并引起典型CPE;该毒株已在LLC-PK细胞连续传代15代,病毒滴度随着传代次数的增加逐渐提高并稳定在108.10TCID50/mL以上。该毒株全基因组序列长25 399 nt;与23个GenBank中登录的参考毒株的全基因组序列比对显示,核苷酸同源性为97.2%~99.4%,其中PDCoV 1468B分离毒株与Vietnam/Binh21/2015株同源性最高,为99.4%。全基因组系统进化分析显示,PDCoV 1468B分离毒株属于Ⅱ群,与东南亚国家PDCoV毒株亲缘关系密切,处于同一进化分支。综上所述,本研究成功分离出PDCoV 1468B株并进行了全基因序列分析,为进一步开展PDCoV致病性等生物学特性研究及疫苗研制奠定了基础,同时可为PDCoV的遗传进化提供数据支持。 展开更多

关键词 猪丁型冠状病毒(PDCoV) 分离鉴定 全基因组 序列分析

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2013～2016年广西部分规模猪场猪伪狂犬病gE抗体检测分析 被引量：9

6

作者 段群棚 秦毅斌 +10 位作者 卢冰霞 何颖 陈忠伟 周英宁 李斌 梁家幸 闭炳芬 蒋冬福 苏乾莲 卢敬专 赵武 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第5期77-81,共5页

为了解广西壮族自治区规模猪场猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒感染情况和流行态势,对2013年1月～2016年12月广西14个地级市290个规模猪场共送检的8676份血清样品,应用gE-ELISA进行PRV gE抗体血清学检测。结果显示,290个猪场... 为了解广西壮族自治区规模猪场猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒感染情况和流行态势,对2013年1月～2016年12月广西14个地级市290个规模猪场共送检的8676份血清样品,应用gE-ELISA进行PRV gE抗体血清学检测。结果显示,290个猪场中,142个猪场为PRV野毒感染阳性场,阳性率为48.97%;受检猪血清样品8676份中,PRV gE抗体检出阳性数为1957份,阳性率为22.56%; 2013～2016年,PRV gE抗体检出阳性率分别为4.68%、21.16%、24.00%和29.85%,PRV gE抗体检出阳性率呈逐年上升趋势。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病 gE抗体 ELISA

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一例猪圆环病毒3型引起母猪流产病例的诊断和分析 被引量：8

7

作者 刘磊 卢冰霞 +12 位作者 陈忠伟 秦毅斌 段群棚 周英宁 何颖 李斌 梁家幸 闭炳芬 蒋冬福 卢敬专 杨思仪 苏乾莲 赵武 《养猪》 2019年第2期113-115,共3页

2018年11月广西一存栏1 000头母猪的规模化猪场出现多头怀孕后期母猪流产现象,并将2窝流产胎儿送实验室进行检测。为了解引起母猪流产的病因,实验室采用细菌分离培养方法进行细菌分离鉴定;采用PCR/RT-PCR检测的方法检测猪瘟病毒(CSFV)... 2018年11月广西一存栏1 000头母猪的规模化猪场出现多头怀孕后期母猪流产现象,并将2窝流产胎儿送实验室进行检测。为了解引起母猪流产的病因,实验室采用细菌分离培养方法进行细菌分离鉴定;采用PCR/RT-PCR检测的方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪乙脑病毒(JEV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和PCV3。结果在流产胎儿内脏组织中未分离到细菌;2窝流产胎儿内脏组织中均检测到PCV3,而其他病原均为阴性,表明PCV3感染可能是引起本次母猪流产的主要原因。 展开更多

关键词 猪圆环病毒3型 母猪 流产 检测 诊断

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桂科育成猪血常规指标的测定分析 被引量：8

8

作者 苏乾莲 梁家幸 +8 位作者 卿珍慧 周英宁 陈忠伟 蒋冬福 卢敬专 李斌 许松芳 段群棚 赵武 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1722-1726,共5页

【目的】检测桂科育成猪的血常规指标,明确不同功能细胞(红细胞、白细胞和血小板)的数量变化及形态分布情况,为桂科猪的免疫评估与抗病性能研究提供基础数据。【方法】于49日龄起每周对44头桂科育成猪(公母各半)采血1次,连续采样7周,测... 【目的】检测桂科育成猪的血常规指标,明确不同功能细胞(红细胞、白细胞和血小板)的数量变化及形态分布情况,为桂科猪的免疫评估与抗病性能研究提供基础数据。【方法】于49日龄起每周对44头桂科育成猪(公母各半)采血1次,连续采样7周,测定其血常规指标,并与长白猪和恩施黑猪的血常规指标进行比较分析。【结果】在桂科育成猪不同日龄的红细胞类检测指标中,红细胞计数(RBC)和血红蛋白含量(HGB)均在70日龄达最低值(6.85×1012/L和97.1 g/L),显著低于49、56、63、84和91日龄时的对应值(P<0.05,下同);平均红细胞血红蛋白(MCH)和平均血红蛋白浓度(MCHC)的变化规律基本一致,均在70日龄达最低值(15.11 pg和275.70 g/L)、91日龄达最高值(16.40 pg和314.30 g/L);红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)和红细胞体积分布宽度(RDW)的变化相对较稳定,不同日龄间均无显著差异(P>0.05,下同)。在白细胞类检测指标中,白细胞计数(WBC)于63日龄达最低值(13.71×10~9/L)、84日龄达最高值(17.52×10~9/L),二者差异显著;中性粒细胞计数(NEUT)在70日龄时达最低值(3.61×10~9/L),显著低于49和56日龄的对应值。淋巴细胞计数(LYMPH)的变化相对较稳定,受日龄增长的影响不显著。在血小板类检测指标中,血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)及血小板平均分布宽度(PDW)在不同日龄的变化相对较稳定,受日龄增长的影响不显著。与35日龄长白猪和5月龄以上恩施黑猪相比,桂科育成猪除HCT、平均血小板体积(MPV)、PCT和PDW等少数指标表现异常外,其他大部分血常规指标介于长白猪与恩施黑猪血常规指标范围内。【结论】桂科育成猪在血常规指标方面有一定的独特性,发育至49~91日龄时已具备较稳定的免疫系统。 展开更多

关键词 桂科育成猪 长白猪 恩施黑猪 血常规指标 测定分析

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一起引起童鸡大量死亡的疑似安卡拉病病例报告 被引量：7

9

作者 周英宁 梁家幸 +4 位作者 蒋冬福 卢敬专 段群棚 卢冰霞 赵武 《广西畜牧兽医》 2017年第2期70-71,共2页

安卡拉病（Angrara disease）是由Ⅰ群腺病毒血清4型感染引起的一种危害严重的新发鸡传染病，又称鸡心包积液综合征。本病主要危害3周龄-6周龄肉鸡，以产生大量心包积液及肝脏炎症坏死为主要特征。1987年3月本病首先于巴基斯坦卡拉奇的... 安卡拉病（Angrara disease）是由Ⅰ群腺病毒血清4型感染引起的一种危害严重的新发鸡传染病，又称鸡心包积液综合征。本病主要危害3周龄-6周龄肉鸡，以产生大量心包积液及肝脏炎症坏死为主要特征。1987年3月本病首先于巴基斯坦卡拉奇的安卡拉地区肉鸡场暴发流行而得名，随后在墨西哥及印度等地暴发流行。 展开更多

关键词 鸡传染病 安卡拉 病例报告 大量死亡 心包积液 暴发流行 血清4型 巴基斯坦

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猪丁型冠状病毒N基因原核表达及多克隆抗体制备 被引量：3

10

作者 刘磊 何颖 +14 位作者 陈忠伟 赵武 段群棚 赵硕 梁家幸 周英宁 全琛宇 许心婷 陈婷婷 许艺兰 李斌 蒋冬福 卢敬专 秦毅斌 卢冰霞 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第2期67-72,共6页

旨在研究猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白的抗原性,为下一步诊断试剂盒的研发提供依据。试验通过RT-PCR的方法扩增PDCoV CH/GX/1468B/2017株完整的N基因并构建原核表达质粒pET32a-N,将pET32a-N转化至大肠杆菌BL21... 旨在研究猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白的抗原性,为下一步诊断试剂盒的研发提供依据。试验通过RT-PCR的方法扩增PDCoV CH/GX/1468B/2017株完整的N基因并构建原核表达质粒pET32a-N,将pET32a-N转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,经诱导表达获得重组N蛋白,纯化后经Western blot方法检测其反应原性,免疫昆明小鼠制备重组N蛋白多克隆抗体并进行效价测定(间接ELISA法)和特异性验证(间接免疫荧光法)。结果显示:重组N蛋白在IPTG终浓度为1.0 mmol/L,37℃诱导表达6 h的条件下可获得最高表达量,该重组蛋白主要以可溶性蛋白的形式表达;Western blot结果显示,纯化后的重组N蛋白可以和PDCoV阳性猪血清发生特异性结合,具有良好的反应原性。制备的多克隆抗体的效价可达1∶64000,间接免疫荧光法结果表明其能特异性识别和结合PDCoV,说明重组N蛋白具有较好免疫原性。提示:PDCoV N蛋白抗原性好,可作为诊断试剂盒的候选抗原。 展开更多

关键词 猪丁型冠状病毒 N基因 原核表达 多克隆抗体 抗原性分析

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一例仔猪副伤寒病的诊疗报告 被引量：6

11

作者 蒋冬福 秦毅斌 +6 位作者 周英宁 何颖 李斌 梁家幸 卢敬专 段群棚 赵武 《养猪》 2019年第3期108-109,共2页

猪副伤寒即猪沙门氏菌病,其病原沙门氏菌在自然界中广泛分布,目前发现其血清型有千余种,对猪危害较大的是猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和猪伤寒沙门氏菌。猪副伤寒是一种引起断奶仔猪顽固性下痢、伴有卡他性或干酪性肺炎及慢性纤维... 猪副伤寒即猪沙门氏菌病,其病原沙门氏菌在自然界中广泛分布,目前发现其血清型有千余种,对猪危害较大的是猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和猪伤寒沙门氏菌。猪副伤寒是一种引起断奶仔猪顽固性下痢、伴有卡他性或干酪性肺炎及慢性纤维素性坏死性肠炎等为特征的传染病[1-2]。该病如果治疗不及时或混合感染其他疾病,死亡率较高,给养猪户造成较大经济损失。 展开更多

关键词 断奶仔猪 诊疗报告 副伤寒病 鼠伤寒沙门氏菌 猪沙门氏菌病 猪霍乱沙门氏菌 猪副伤寒 顽固性下痢

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2017-2020年广西部分猪场送检血清猪伪狂犬病抗体检测 被引量：5

12

作者 段群棚 赵硕 +13 位作者 周英宁 卢冰霞 何文娜 全琛宇 陈婷婷 许心婷 秦毅斌 赵武 梁家幸 蒋冬福 李斌 卢敬专 陈忠伟 何颖 《中国动物检疫》 CAS 2021年第12期5-11,共7页

为了解广西猪场伪狂犬病毒(PRV)感染和免疫状况,2017年1月—2020年12月,对部分猪场随机采样送检的血清样品,应用ELISA方法开展PRV血清抗体检测,并对检测结果进行不同年份、不同季节、不同地区、不同生长阶段猪群的统计分析。结果显示:... 为了解广西猪场伪狂犬病毒(PRV)感染和免疫状况,2017年1月—2020年12月,对部分猪场随机采样送检的血清样品,应用ELISA方法开展PRV血清抗体检测,并对检测结果进行不同年份、不同季节、不同地区、不同生长阶段猪群的统计分析。结果显示:从时间分布上看,2018年PRV gE抗体场阳性率(57.71%)和个体阳性率(24.75%)均最高,此后呈逐年下降趋势,其中个体阳性率下降明显(P<0.05),2020年下降至6.14%;各年间的PRV gB抗体场合格率差异不显著(P>0.05),均在90%以上,而2019年的个体阳性率(88.71%)最低,与其他年份差异显著(P<0.05)。冬季PRV gE和gB抗体个体阳性率最低,分别为14.96%和89.35%,与其他季节差异明显(P<0.05);冬季gE抗体场阳性率(42.97%)最低,与春季、秋季差异不显著(P>0.05),但显著低于夏季(P<0.05),而gB抗体场合格率一年四季差异不显著(P>0.05),均在95%以上。从空间分布上看,广西14个地市猪场均存在不同程度的PRV野毒感染,其中玉林市最严重,场阳性率和个体阳性率分别为69.51%和35.86%,而钦州市最轻,分别为16.67%和4.07%;PRV gB抗体个体合格率普遍较高,均在84%以上。从不同生长阶段猪群上看,后备母猪、育肥猪PRV gE和gB抗体个体阳性率均显著低于其他生长阶段猪群(P<0.05),其中gE抗体个体阳性率在13%以下,而gB抗体个体阳性率不足80%。结果表明,近年广西规模猪场PRV野毒感染率较高,而疫苗免疫并不能完全阻止野毒株感染。建议通过PRV净化和提高规模猪场生物安全水平等措施来控制其流行。本研究为制定合理的猪伪狂犬病防控与净化策略提供了依据。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病 gE抗体 gB抗体 血清学检测

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10株广西猪圆环病毒3型(PCV3)全基因组序列的遗传变异分析 被引量：5

13

作者 卢冰霞 刘磊 +12 位作者 周英宁 何颖 秦毅斌 段群棚 李斌 陈忠伟 梁家幸 苏乾莲 闭炳芬 蒋冬福 卢敬专 杨思仪 赵武 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期20-24,共5页

为了解广西猪群猪圆环病毒3型(PCV3)的遗传变异情况,以PCV3阳性DNA为模板,利用PCR的方法分2段扩增PCV3全基因序列并进行拼接,获得10株PCV3全基因组序列,全长均为2000 bp。10株广西PCV3全基因组序列之间的核苷酸同源性为98.6%~99.8%。与... 为了解广西猪群猪圆环病毒3型(PCV3)的遗传变异情况,以PCV3阳性DNA为模板,利用PCR的方法分2段扩增PCV3全基因序列并进行拼接,获得10株PCV3全基因组序列,全长均为2000 bp。10株广西PCV3全基因组序列之间的核苷酸同源性为98.6%~99.8%。与国内其他毒株的同源性为97.9%~99.8%;与国外其他毒株的同源性为98.8%~99.7%。10株广西PCV3 Cap基因的大小均为645 bp,编码214 aa。PCV3 Cap基因比较保守,10株广西PCV3 Cap基因与参考株相比,仅存在散在的突变位点。基于PCV3全基因和Cap基因构建的遗传进化树显示,两者结果基本相同,10株广西PCV3处于3a和3b两个亚群。本试验表明,广西地区猪群中流行的PCV3至少存在2个亚群,不同亚群PCV3毒株的致病性差异还有待进一步的研究。 展开更多

关键词 广西 PCV3 全基因 遗传变异

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6株鸽源新城疫病毒广西分离株F基因的遗传演化分析 被引量：5

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作者 卢冰霞 周英宁 +9 位作者 蒋冬福 卢敬专 段群棚 秦毅斌 黎珂钰 李斌 苏乾莲 何颖 赵武 梁家幸 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第4期79-84,共6页

应用RT-PCR方法对分离自广西不同鸽场的6株鸽源新城疫病毒F基因进行扩增、序列测定和分析。结果显示：只有1株分离株F基因的ORF全长为1 659 bp,编码552个氨基酸,其他5株分离株F基因的ORF全长均为1 662 bp,编码553个氨基酸,6株分离株的F... 应用RT-PCR方法对分离自广西不同鸽场的6株鸽源新城疫病毒F基因进行扩增、序列测定和分析。结果显示：只有1株分离株F基因的ORF全长为1 659 bp,编码552个氨基酸,其他5株分离株F基因的ORF全长均为1 662 bp,编码553个氨基酸,6株分离株的F0蛋白裂解位点的序列均为112RRQKRF117,符合强毒株的序列结构特性;核苷酸同源性比较显示,6株分离株与NDV基因Ⅵ型中的Ⅵb亚型同源性最高,为91.3%-99.3%（与比利时分离株11（JX901124）的同源性最高）,与其他基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ型毒株的同源性在81.3%-89.2%。与经典强毒株F48E9相比,核苷酸序列同源性为83.6%-84.8%,氨基酸序列同源性为89.2%-92.4%;与Ⅰ型疫苗株V4、I-2相比,核苷酸同源性分别为83.6%-85.1%和82.6%-84.2%,氨基酸序列同源性分别为88.1%-91.3%和87.7%-90.8%;与Ⅱ型疫苗株La Sota和B1相比,核苷酸同源性分别为81.7%-83.9%和82.0%-83.9%,氨基酸序列同源性分别为86.6%-89.9%和86.6%-89.9%。遗传进化分析显示,6株广西鸽源分离株与2011年比利时分离株11（JX901124）和中国毒株SDS、LLN713、BJP13、LJL404、P4的遗传关系最为接近,位于同一进化树分支上,属于基因Ⅵb亚型。 展开更多

关键词 新城疫病毒 F基因 遗传进化 鸽

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猪流行性腹泻病毒变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株多重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量：5

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作者 秦毅斌 卢冰霞 +8 位作者 段群棚 何颖 李斌 梁家幸 苏乾莲 周英宁 蒋冬福 卢敬专 赵武 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第11期2746-2751,共6页

为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株的S基因和ORF3基因,设计合成2对特异性扩增引物,用以扩增PEDV S基因和ORF3基因,通过目的片段的... 为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株的S基因和ORF3基因,设计合成2对特异性扩增引物,用以扩增PEDV S基因和ORF3基因,通过目的片段的数量和片段大小来判断PEDV的毒株类型;通过对退火温度等反应条件的优化,建立了检测不同PEDV毒株类型的多重RT-PCR鉴别检测方法。结果显示,所建立的多重RT-PCR鉴别检测方法能特异性区分PEDV变异毒株、经典毒株和弱毒疫苗株;PEDV变异毒株扩增出2条目的条带,分别为234 bp的ORF3基因片段和826 bp的S基因片段;PEDV经典毒株扩增出1条目的条带,片段大小为234 bp的ORF3基因片段;而弱毒疫苗株扩增出1条目的条带,片段大小为185 bp的ORF3基因片段;与猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪乙型脑炎病毒、猪细环病毒及猪细小病毒均无交叉反应;敏感性试验显示,该方法能检测到的最低核酸浓度为2.3×10-4ng/μl;且该方法具有良好的重复性。利用该方法对采集自广西部分地区的91份临床腹泻样品进行检测,样品中PEDV阳性样品有64份,其中变异毒株占89.06%(57/64),经典毒株占4.69%(3/64),弱毒疫苗株占6.25%(4/64)。结果表明,该多重RT-PCR鉴别检测方法特异性强、灵敏度高、操作简单,为猪流行性腹泻的流行病学及病原的鉴别诊断研究提供了可供借鉴的技术手段。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 变异毒株 经典毒株 弱毒疫苗株 RT-PCR 鉴别诊断

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猪源棒状杆菌的分离及其16S rRNA基因分析 被引量：5

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作者 秦毅斌 何苹萍 +12 位作者 卢冰霞 何颖 李斌 梁家幸 段群棚 陈忠伟 闭炳芬 周英宁 苏乾莲 蒋冬福 黎珂钰 卢敬专 赵武 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第3期95-99,共5页

本研究从某猪场发病保育猪的脓肿肺脏器官中分离到1株革兰阳性杆状菌,并进行形态特征、培养特性、生化特性、药敏试验、致病性试验及16S rRNA基因克隆与序列分析。结果显示,分离细菌在兔血琼脂平板和马血清胰蛋白胨大豆琼脂平板有氧条... 本研究从某猪场发病保育猪的脓肿肺脏器官中分离到1株革兰阳性杆状菌,并进行形态特征、培养特性、生化特性、药敏试验、致病性试验及16S rRNA基因克隆与序列分析。结果显示,分离细菌在兔血琼脂平板和马血清胰蛋白胨大豆琼脂平板有氧条件下生长良好,可以致小鼠死亡,对头孢类抗生素和喹诺酮类抗菌药敏感;系统进化分析显示,分离菌株与棒状杆菌属细菌遗传进化关系较密切,其16S rRNA基因序列与棒状杆菌代表菌株的同源性在91.7%～98.3%之间,表明分离菌为棒状杆菌（Corynebacterium）。 展开更多

关键词 棒状杆菌 分离鉴定 16S RRNA 基因分析

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2016—2018年广西猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查和PRRSV ORF5基因的遗传变异分析 被引量：5

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作者 刘磊 卢冰霞 +12 位作者 段群棚 何颖 秦毅斌 李斌 陈忠伟 周英宁 梁家幸 苏乾莲 蒋冬福 闭炳芬 卢敬专 杨思仪 赵武 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第20期90-94,97,共6页

为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异情况,试验应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法对2016—2018年广西14个地区规模化猪场的1564份主要脏器进行了PRRSV检测,选取部分阳性样品进行ORF5基因的扩增并进行序列... 为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异情况,试验应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法对2016—2018年广西14个地区规模化猪场的1564份主要脏器进行了PRRSV检测,选取部分阳性样品进行ORF5基因的扩增并进行序列分析。结果表明:共检测出PRRSV阳性样品467份,阳性率为29.9%。在广西14个地区规模化猪场送检的样品中均能检测到PRRSV。从年份上看,2016年的PRRSV阳性率最高,为43.9%;2017年为26.9%;2018年最低,为23.7%。获得的25条PRRSV ORF5基因序列中有1株与NADC30株同源性较高,1株与GM2株同源性较高,其余23株均与高致病性PRRSV同源性较高。在25株PRRSV中有21株与TJM、JXA1、HuN等高致病毒株亲缘关系较近,并位于同1个分支;2株处于经典株和变异株之间,分别形成2个分支;1株与NADC30株亲缘关系较近,位于同1个分支;1株与GM2株亲缘关系较近,位于同1个分支。PRRSV ORF5基因编码氨基酸序列分析结果表明,25个毒株均为毒力较强的野毒株。说明广西地区仍以高致病性PRRSV为主要流行毒株,但2018年新发现类NADC30毒株和类GM2毒株的流行。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 流行病学调查 ORF5 序列分析 遗传变异

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猪圆环病毒2型及3型快速二重PCR检测方法的建立及其应用 被引量：4

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作者 卢冰霞 刘磊 +12 位作者 陈忠伟 秦毅斌 何颖 段群棚 李斌 闭炳芬 苏乾莲 蒋冬福 卢敬专 梁家幸 周英宁 杨思仪 赵武 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第8期96-100,共5页

针对猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)基因的保守序列设计了2对扩增PCV2和PCV3的特异性引物,通过优化各反应条件,建立同时检测PCV2和PCV3的二重PCR检测方法。敏感性和特异性结果显示,1.08×10-8μg/μL是对PCV2和PCV3的最... 针对猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)基因的保守序列设计了2对扩增PCV2和PCV3的特异性引物,通过优化各反应条件,建立同时检测PCV2和PCV3的二重PCR检测方法。敏感性和特异性结果显示,1.08×10-8μg/μL是对PCV2和PCV3的最低检测限具有较好的灵敏度;而对猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)、大肠杆菌、链球菌、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌的检测结果均无条带,表明所建立的方法具有较好的特异性。应用该方法检测了2017年9月—2018年8月从广西14个地市猪场采集的533份病猪死猪内脏组织,结果显示:PCV2阳性率为23.8%,PCV3阳性率为14.8%, PCV2和PCV3混合感染率为2.8%。广西14个地市中有12个地市的猪场送检样品检测出PCV2,有10个地市的猪场送检样品检测出PCV3,表明PCV2和PCV3在广西受检猪群中普遍存在,要重视和做好PCV2和PCV3感染的防控工作。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) 猪圆环病毒3型(PCV3) 二重PCR

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广西猪繁殖与呼吸综合征病毒感染情况调查及其欧洲型毒株ORF5基因变异分析

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作者 赵硕 段群棚 +12 位作者 何颖 卢冰霞 许心婷 秦毅斌 李斌 全琛宇 梁家幸 周英宁 蒋冬福 陈婷婷 卢敬专 陈忠伟 赵武 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第5期135-144,共10页

为了解广西近期猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染情况及其欧洲型PRRSVORF5的遗传变异特点,2020年6月至2021年5月,采集广西14个设区市疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪病料、血清共782份,进行PRRSV的qRT-PCR分型检测及ORF5基因扩增... 为了解广西近期猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染情况及其欧洲型PRRSVORF5的遗传变异特点,2020年6月至2021年5月,采集广西14个设区市疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪病料、血清共782份,进行PRRSV的qRT-PCR分型检测及ORF5基因扩增,并运用SPSS23.0、DNAStar、MEGA X等生物学软件对检测结果及获得的PRRSVORF5基因序列进行分析。结果显示:样品检测总阳性率为29.54%,其中欧洲型(PRRSV-1)PRRSV阳性率为6.78%,美洲型(PRRSV-2)PRRSV阳性率为22.76%,表明受检猪群普遍存在PRRSV感染;在不同设区市中,贵港、崇左感染率最高(50.00%);在不同季度中,冬季感染率最高(41.00%);在不同年龄阶段猪群中,保育猪感染率最高(53.42%);感染主要以PRRSV-2为主,新发PRRSV-1感染;广西新发PRRSV-1在ORF5基因上存在相同独特的核苷酸及氨基酸变异特点,与中国香港分离欧洲株HKEU16亲缘关系较近,可能是在引种等贸易过程中所引进,并在饲养环境、免疫压力等多种因素的作用下发生了一定的变异;广西近期受检猪群普遍存在PRRSV-2感染,新出现PRRSV-1的感染,猪场应重视并及时调整、实施针对性的PRRS防控计划。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 感染情况 欧洲型 ORF5基因 遗传变异分析

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一起脑炎型猪链球菌病的诊治 被引量：4

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作者 蒋冬福 梁家幸 +4 位作者 周英宁 段群棚 卢敬专 秦毅斌 赵武 《广西畜牧兽医》 2016年第3期134-135,共2页

猪链球菌病主要由C、D、E、L、S、R等群链球菌所引发的一种人兽共患的传染病,属国家规定二类动物疫病[1]。1998-1999年江苏暴发R群2型猪链球菌病,发病率及死亡率高达50%左右,导致数万头生猪死亡,损失惨重;2005年四川则暴发大规模人感染... 猪链球菌病主要由C、D、E、L、S、R等群链球菌所引发的一种人兽共患的传染病,属国家规定二类动物疫病[1]。1998-1999年江苏暴发R群2型猪链球菌病,发病率及死亡率高达50%左右,导致数万头生猪死亡,损失惨重;2005年四川则暴发大规模人感染猪链球菌疫情,发病204例,死亡38例,危害严重[2]。上呼吸道、消化道和伤口是猪链球菌主要自然感染部位。猪链球菌疫情型别按危害严重程度依次为败血症型、脑炎型、关节炎型和淋巴结脓肿型等,以急性出血性败血症、神经症状、关节肿胀、化脓性淋巴结炎等为主要临床表现[1]。 展开更多

关键词 猪链球菌病 脑炎型 诊治 出血性败血症 自然感染 人兽共患 动物疫病 上呼吸道

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