目的:探讨补肺益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病(C O P D)的机制。方法:以A549细胞为研究对象,实验分为NC组(20%对照组大鼠血清)、RAPA组(20%对照组大鼠血清+40nmol/L雷帕霉素)、FS组(20%补肺益肾方大鼠血清)、FS+RAPA组(20%补肺益肾方大鼠血...目的:探讨补肺益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病(C O P D)的机制。方法:以A549细胞为研究对象,实验分为NC组(20%对照组大鼠血清)、RAPA组(20%对照组大鼠血清+40nmol/L雷帕霉素)、FS组(20%补肺益肾方大鼠血清)、FS+RAPA组(20%补肺益肾方大鼠血清+40nmol/L雷帕霉素)、CSE组(20%对照组大鼠血清+5%CSE)、CSE+RAPA组(20%对照组大鼠血清+5%CSE+40nmol/L雷帕霉素)、CSE+FS组(5%CSE+20%补肺益肾方大鼠血清)、CSE+FS+RAPA组(5%CSE+20%补肺益肾方大鼠血清+40nmol/L雷帕霉素)。采用qPCR检测PI3K、AKT、mTOR、ULK1、ATG8、ATG10、ATG14 mRNA表达;采用Western blot检测p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-ULK1、ATG8、ATG10、ATG14蛋白表达。结果:与CSE组比较,CSE+RAPA、CSE+FS及CSE+FS+RAPA组A549细胞PI3K、AKT、mTOR mRNA表达和p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达显著降低(P<0.01),ATG8、ATG14 mRNA表达和p-ULK1、ATG8、ATG14蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:补肺益肾方治疗COPD的机制可能与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进细胞自噬有关。展开更多
文摘目的:探讨补肺益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病(C O P D)的机制。方法:以A549细胞为研究对象,实验分为NC组(20%对照组大鼠血清)、RAPA组(20%对照组大鼠血清+40nmol/L雷帕霉素)、FS组(20%补肺益肾方大鼠血清)、FS+RAPA组(20%补肺益肾方大鼠血清+40nmol/L雷帕霉素)、CSE组(20%对照组大鼠血清+5%CSE)、CSE+RAPA组(20%对照组大鼠血清+5%CSE+40nmol/L雷帕霉素)、CSE+FS组(5%CSE+20%补肺益肾方大鼠血清)、CSE+FS+RAPA组(5%CSE+20%补肺益肾方大鼠血清+40nmol/L雷帕霉素)。采用qPCR检测PI3K、AKT、mTOR、ULK1、ATG8、ATG10、ATG14 mRNA表达;采用Western blot检测p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-ULK1、ATG8、ATG10、ATG14蛋白表达。结果:与CSE组比较,CSE+RAPA、CSE+FS及CSE+FS+RAPA组A549细胞PI3K、AKT、mTOR mRNA表达和p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达显著降低(P<0.01),ATG8、ATG14 mRNA表达和p-ULK1、ATG8、ATG14蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:补肺益肾方治疗COPD的机制可能与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进细胞自噬有关。
