哇巴因和乌头碱诱发豚鼠和大鼠心律失常的离子作用靶点 被引量：63

1

作者 龚冬梅 单宏丽 +2 位作者 周宇宏 董德利 杨宝峰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期328-332,共5页

目的 观察畦巴因和乌头碱对豚鼠和大鼠心肌单细胞离子通道的作用,确定两药诱发心律失常时离子靶点和最佳靶点,建立细胞水平的心律失常模型。方法 用全细胞膜片钳技术记录哇巴因和乌头碱对酶解法分离的豚鼠和大鼠心肌细胞离子通道的作用... 目的 观察畦巴因和乌头碱对豚鼠和大鼠心肌单细胞离子通道的作用,确定两药诱发心律失常时离子靶点和最佳靶点,建立细胞水平的心律失常模型。方法 用全细胞膜片钳技术记录哇巴因和乌头碱对酶解法分离的豚鼠和大鼠心肌细胞离子通道的作用。结果 5;μmol·L^(-1)哇巴因使豚鼠心肌细胞APD延长、I_(Ca-L)增加、I_k减少、I_(k1)减少;1μmol·L^(-1)乌头碱使大鼠心肌细胞APD延长、I_(Ca-L)增加、I_(to)减少、I_(k1)增加。结论 哇巴因和乌头碱诱发心律失常的离子靶点有APD,I_(Ca-L),I_k,I_(to)和I_(k1)而最佳靶点应为APD,I_(Ca-L),I_k和I_(to)。在单细胞水平分别应用哇巴因和乌头碱诱发豚鼠和大鼠心律失常.具有稳定性高、条件可控、重复性好等优点,可用于药物筛选和机制研究。 展开更多

关键词 哇巴因 乌头碱 豚鼠 心律失常 大鼠 离子通道 离子靶点

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红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响 被引量：57

2

作者 单宏丽 徐长庆 +4 位作者 刘凤芝 李玉荣 杨宝峰 许宏远 娄延平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期351-354,共4页

目的　观察红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响。方法　采用膜片钳全细胞式记录技术。结果　红花黄素（３３ μｇ· Ｌ－ １） 能延长单个心室肌细胞动作电位时程，由（３５９３３ ±２７１８） ｍｓ ... 目的　观察红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响。方法　采用膜片钳全细胞式记录技术。结果　红花黄素（３３ μｇ· Ｌ－ １） 能延长单个心室肌细胞动作电位时程，由（３５９３３ ±２７１８） ｍｓ 延长至（４１３３３ ±６１８８）ｍｓ（ Ｐ＜ ００５ ，ｎ ＝ ６） 。同时增加内向 Ｌ型钙电流的峰值，由（ － １０２１ ±７４） ｐ Ａ 至（ － １４３６ ±２１２） ｐ Ａ（ Ｐ＜ ００５ ，ｎ ＝ ７） 。结论　由于红花黄素具有上述电生理作用。 展开更多

关键词 红花黄素 心室肌细胞 膜电流 动作电位

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丹参酮Ⅱ-A对大鼠心室肌细胞膜钾电流的影响 被引量：40

3

作者 于海波 徐长庆 +3 位作者 单宏丽 董德利 杨宝峰 娄延平 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2002年第2期112-114,共3页

目的　研究丹参酮Ⅱ A(tanshinone ,TSN)对酶解分离的大鼠单个心室肌细胞的内向整流钾电流 (Ik1 )和瞬时外向电流 (Ito)的影响。方法　采用膜片钳全细胞记录技术。结果　应用CdCl2 0 .3mmol·L- 1 阻断钙电流发现 :TSN可抑制Ik1 和... 目的　研究丹参酮Ⅱ A(tanshinone ,TSN)对酶解分离的大鼠单个心室肌细胞的内向整流钾电流 (Ik1 )和瞬时外向电流 (Ito)的影响。方法　采用膜片钳全细胞记录技术。结果　应用CdCl2 0 .3mmol·L- 1 阻断钙电流发现 :TSN可抑制Ik1 和Ito。 1 0、2 0、40 μmol·L- 1 使Ik1 稳态电流由用药前 - 32 66 5pA± 381 6pA分别降至 - 2 90 1 0pA±52 8 3pA(P <0 .0 5 ,n =7) ,- 2 581 .0pA± 335 .7pA(P <0 .0 1 ,n=7) ,- 1 931 .9pA± 2 1 9.2pA(P <0 .0 1 ,n =7) ,抑制率分别为 1 2 1 %、2 3 4%、32 8%。较低浓度的TSN对Ito的作用不明显 ,较高浓度有抑制作用。 1 0、2 0、40 μmol·L- 1 使Ito峰值由用药前 2 374 4pA± 2 2 2 9pA分别降至 2 1 4 9 4pA± 341 3pA(P >0 .0 5 ,n =7) ,1 893 .1pA± 350 .8pA(P <0 .0 5 ,n=7) ,1 661 .3pA± 360 .0pA(P <0 .0 5 ,n =7) ,抑制率分别为 9%、2 0 1 %、30 0 %。结论　由于TSN对钾通道的阻滞作用 。 展开更多

关键词 丹参酮Ⅱ-A 大鼠 心室肌细胞膜 钾电流 影响 膜片钳 中药

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抗心律失常药物作用最佳靶点研究 被引量：31

4

作者 杨宝峰 单宏丽 +2 位作者 龚冬梅 董德利 杜智敏 《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第1期1-5,共5页

目的:通过研究乌头碱、哇巴因致心律失常作用的离子靶点,揭示抗心律失常药物作用的最佳靶点。方法:采用全细胞膜片钳技术研究乌头碱、硅巴因对大鼠单个心室肌细胞动作电位时程(APD)、L-型钙电流(ICa)、钠电流(INa)、内向整流钾电流(IK1... 目的:通过研究乌头碱、哇巴因致心律失常作用的离子靶点,揭示抗心律失常药物作用的最佳靶点。方法:采用全细胞膜片钳技术研究乌头碱、硅巴因对大鼠单个心室肌细胞动作电位时程(APD)、L-型钙电流(ICa)、钠电流(INa)、内向整流钾电流(IK1)以及瞬时外向钾电流(Ito)的作用。结果:乌头碱(1μM)使大鼠单个心室肌细胞90%复极化动作电位时程(APD90)从给药前的150.23±7.02ms延长至236.03±23.22ms(n=8,p<0.01)。ICa在0mV刺激电位下从-727.9±178.0pA增加至-1082.1±222.2pA(n=6,p<0.01);IK1在-110mV刺激电位下从-2122.0±511.1pA增加到-2536.3±386.5pA;乌头碱(1μM)抑制Ito,在+50mV刺激电压下,Ito从3203.6±617.1pA下降到2809.0±547.3pA。同时增加INa。哇巴因5μM使大鼠心肌细胞APD缩短(APD90从86.3±25.2ms缩短至58.9±20.8msn=5,p<0.01),ICa在+10mV刺激电位下从-1326.9±318.9pA减少到-782.3±395.3pA;使Ik1从-1868.3±187.8pA增加到-2392.8±366.7pA(刺激电压-120mV,n=10,p<0.01);使Ito从1272.7±317.6pA增加到1706.6±485.5pA(刺激电压+60mV,n=5,p<0.01)。结论:乌头碱、哇巴因诱发心律失常发生的活性点或最佳靶点是ICa,INa,IK1,Ikr和Iks。APD缩短或过度延长均可致心律失常。 展开更多

关键词 抗心律失常药物 动作电位时程(APD) 离子靶点 最佳靶点 全细胞膜片钳技术

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一种筛选抗心律失常药物新模型的建立 被引量：35

5

作者 杨宝峰 单宏丽 +3 位作者 周宇宏 龚冬梅 董德利 杜智敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期217-221,共5页

目的　建立一种细胞水平的心律失常模型 ,以用于抗心律失常药物的筛选和评价。方法　酶解法分离单个大鼠心室肌细胞 ,在细胞水平给予传统诱发心律失常药物乌头碱 ,应用膜片钳技术观察记录应用乌头碱后心肌动作电位时程 (APD)、钠电流 (I... 目的　建立一种细胞水平的心律失常模型 ,以用于抗心律失常药物的筛选和评价。方法　酶解法分离单个大鼠心室肌细胞 ,在细胞水平给予传统诱发心律失常药物乌头碱 ,应用膜片钳技术观察记录应用乌头碱后心肌动作电位时程 (APD)、钠电流 (INa)、L 型钙电流 (ICa L)、内向整流钾电流(IK1)及瞬时外向钾电流 (Ito)的变化。结果　应用乌头碱 1μmol·L-1使大鼠单个心室肌细胞 90 %复极化动作电位时程(APD90 )从给药前的 ( 15 0 2 3± 7 0 2 )ms延长至 ( 2 3 6 0 3±2 3 2 2 )ms(n =8,P <0 0 1)。应用奎尼丁 10 μmol·L-1后动作电位时程延长与乌头碱组比较 ,APD90 进一步延长 (n =6,P <0 0 5 ) ,但应用维拉帕米 10 μmol·L-1后被乌头碱延长的APD恢复近于正常 ,在乌头碱的作用下 ,除极电压为 0mV时ICa L从 ( 72 7 9± 178 0 ) pA增加至 ( 10 82 1± 2 2 2 2 ) pA(n =6,P <0 0 1) ;钠电流 (INa)在 - 5 0mV刺激电压下从( 2 5 4± 5 5 3 ) pA增加至 ( 45 3 0 2± 475 1) pA(n =4,P <0 0 5 ) ;IK1在 - 12 0mV的刺激电压下 ,Ik1的内向成分从( 2 0 0 7 1± 3 5 9 3 ) pA增加至 ( 2 3 17 7± 40 1 8)pA(n =10 ,P <0 0 1) ;奎尼丁、维拉帕米对乌头碱诱发的钠电流和钙电流增加有抑制的作用。结论　乌头碱使? 展开更多

关键词 抗心律失常 药物筛选模型 离子通道 乌头碱

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冬虫夏草水提液对单个心室肌细胞钾通道的影响 被引量：24

6

作者 王赫 周宇宏 +3 位作者 单宏丽 陈庆文 张妍 杨宝峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期536-539,共4页

目的　观察冬虫夏草水提液对豚鼠及大鼠心室肌细胞钾通道的作用 ,探讨冬虫夏草的抗心律失常作用机制。方法　应用全细胞膜片钳技术记录冬虫夏草水提物对豚鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流 (IK1)、延迟整流钾电流 (IK)及大鼠心室肌细胞... 目的　观察冬虫夏草水提液对豚鼠及大鼠心室肌细胞钾通道的作用 ,探讨冬虫夏草的抗心律失常作用机制。方法　应用全细胞膜片钳技术记录冬虫夏草水提物对豚鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流 (IK1)、延迟整流钾电流 (IK)及大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流 (Ito)的影响。结果　应用 0 1g·L-1(生药浓度 )冬虫夏草水提液使豚鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流在实验电压 - 12 0mV时从给药前(- 36 37± 5 15 ) pA/pF减少到 (- 2 9 70± 5 90 ) pA/ pF(n=5 ,P <0 0 5 ) ;延迟整流钾电流在实验电压 +70mV时 ,从给药前 (9 2 1± 2 4 2 ) pA/ pF增加至 (11 5 4± 2 98)pA/ pF(n =6 ,P <0 0 1) ;使大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流 (Ito)在实验电压 +5 0mV时 ,从给药前 (13 36± 0 88) pA/ pF增加至 (16 4 8± 1 0 9) (n =4 ,P <0 0 1)。结论　冬虫夏草抗心律失常作用与它对心肌细胞钾通道的作用有关。它增加IK,Ito的同时抑制IK1。 展开更多

关键词 冬虫夏草 心律失常 离子通道 膜片钳技术

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延胡索乙素对豚鼠单个心室肌细胞钾离子通道的影响 被引量：24

7

作者 刘玉梅 周宇宏 +3 位作者 单宏丽 冯铁明 乔国芬 杨宝峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期599-601,共3页

目的研究延胡索乙素(dltetrahydropalmatine,THP)对正常豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨延胡索乙素抗心律失常作用机制。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录延胡索乙素对豚鼠单个心室肌细胞钾电流的影响... 目的研究延胡索乙素(dltetrahydropalmatine,THP)对正常豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨延胡索乙素抗心律失常作用机制。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录延胡索乙素对豚鼠单个心室肌细胞钾电流的影响。结果延胡索乙素可明显抑制延迟整流钾电流(IK)和内向整流钾电流(IK1),并呈剂量依赖性。结论延胡索乙素抗心律失常作用机制可能与它对心肌细胞钾通道作用有关,THP可抑制IK和IK1,使动作电位时程(APD)和有效不应期(ERP)延长从而发挥其抗心律失常作用。 展开更多

关键词 延胡索乙素 心肌细胞 膜片钳

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二氢杨梅素诱导人肺腺癌细胞系AGZY-83-a凋亡的实验研究 被引量：25

8

作者 尹梅梅 潘振伟 +4 位作者 蔡本志 单宏丽 黄大雁 吕延杰 杨宝峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期626-630,共5页

目的研究二氢杨梅素(dihydromyricetin)对人肺腺癌细胞系AGZY-83-a凋亡的影响及其相关机制。方法采用MTT法检测二氢杨梅素对人肺腺癌细胞AGZY-83-a存活率的影响,应用TUNEL法和Caspase-3活性检测观察二氢杨梅素对AGZY-83-a凋亡的作用,并... 目的研究二氢杨梅素(dihydromyricetin)对人肺腺癌细胞系AGZY-83-a凋亡的影响及其相关机制。方法采用MTT法检测二氢杨梅素对人肺腺癌细胞AGZY-83-a存活率的影响,应用TUNEL法和Caspase-3活性检测观察二氢杨梅素对AGZY-83-a凋亡的作用,并通过共聚焦显微镜观察二氢杨梅素对肺腺癌细胞内钙的影响。结果MTT结果显示,二氢杨梅素50μmol·L-1对AGZY-83-a的增殖有明显抑制作用,并呈剂量和时间依赖关系;TUNEL实验结果显示二氢杨梅素可以引起AGZY-83-a发生凋亡,且具有剂量依赖性;Caspase-3活性检测结果显示二氢杨梅素可增加肺腺癌细胞Caspase-3活性,说明二氢杨梅素可以诱导AGZY-83-a凋亡;二氢杨梅素可升高肺腺癌细胞内钙,平均荧光强度FI可增加20多倍。结论二氢杨梅素可通过增加细胞内钙诱导AGZY-83-a细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 二氢杨梅素 凋亡 AGZY-83-a细胞 CA^2+

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大黄素对豚鼠单个心室肌细胞胞浆游离钙浓度及L-型钙电流的影响 被引量：14

9

作者 刘影 单宏丽 +2 位作者 孙宏丽 何树庄 杨宝峰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期5-8,共4页

目的　研究大黄素 (emodin)对豚鼠心室肌细胞钙信号的影响。方法　酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测量豚鼠心室肌细胞钙信号的变化。结果　在静息状态下 ,1～10 0 μmol·L- 1 大黄素... 目的　研究大黄素 (emodin)对豚鼠心室肌细胞钙信号的影响。方法　酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测量豚鼠心室肌细胞钙信号的变化。结果　在静息状态下 ,1～10 0 μmol·L- 1 大黄素对 [Ca2 +]i 均无影响 ;对 6 0mmol·L- 1 KCl诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有不同的影响 ,1μmol·L- 1 表现为促进作用 ;10 μmol·L- 1 无作用 ;10 0 μmol·L- 1 则表现为抑制作用。膜片钳研究结果表明 ,1μmol·L- 1 大黄素可明显促进L 型钙电流 ,10 μmol·L- 1 对L 型钙电流无影响 ;10 0 μmol·L- 1 明显抑制L 型钙电流。结论　大黄素对心肌细胞内钙及L 展开更多

关键词 大黄素 豚鼠 心室肌细胞 胞浆游离钙浓度 L-型钙电流 心血管系统疾病

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哇巴因诱发大鼠心律失常作用靶点的研究 被引量：17

10

作者 龚冬梅 单宏丽 +2 位作者 董德利 周宇宏 杨宝峰 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2002年第2期87-90,共4页

目的　观察哇巴因对大鼠心室肌细胞动作电位时程、钾通道的作用 ,探讨哇巴因诱发心律失常的作用机制 ,为寻找新的抗心律失常药物提供依据。方法　应用全细胞膜片钳技术记录哇巴因对大鼠心肌细胞动作电位时程 (APD)、内向整流钾电流 (Ik... 目的　观察哇巴因对大鼠心室肌细胞动作电位时程、钾通道的作用 ,探讨哇巴因诱发心律失常的作用机制 ,为寻找新的抗心律失常药物提供依据。方法　应用全细胞膜片钳技术记录哇巴因对大鼠心肌细胞动作电位时程 (APD)、内向整流钾电流 (Ik1 )、瞬时外向钾电流 (Ito)的作用。结果　①哇巴因 5μmol/L使大鼠心室肌细胞动作电位时程从给药前的 86 .3ms± 2 5 .2ms(APD90 ) ,缩短至 58.9ms± 2 0 .8ms(n =5 ,P <0 .0 1 ,给药 1 0min) ;②哇巴因 5μmol/L可增加大鼠心室肌细胞内向整流钾电流 ,使Ik1 从 - 1 868pA± 1 88pA增加到 - 2 393pA± 367pA(刺激电压 - 1 2 0mV ,n=1 0 ,P <0 .0 1 ) ;③哇巴因 5μmol/L可增加大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流 ,使Ito从 1 2 73pA± 31 8pA增加到 1 70 7pA± 486pA(刺激电压 +60mV ,n =5 ,P <0 .0 1 )。结论　哇巴因诱发室性心律失常可能与它缩短心室肌细胞动作电位时程有关 ,而Ito的增加使二期平台期缩短 ,Ik1 的增加使三期复极加快 ,均参与了动作电位时程缩短的过程。同时增加Ik1 将影响静息膜电位 。 展开更多

关键词 哇巴因 诱发 大鼠 心律失常 靶点 研究 钾通道 膜片钳 强心药

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红花黄素对氧自由基所致的心肌细胞电生理异常的保护作用 被引量：11

11

作者 单宏丽 徐晨光 +2 位作者 杨宝峰 李玉荣 徐长庆 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2002年第4期259-262,共4页

目的　研究红花黄素 (saffloweryellowpigment,SYP)对氧自由基引起的豚鼠单个心室肌细胞电生理异常的保护作用。方法　采用全细胞膜片钳技术 ,观察预先应用红花黄素 (3.3μg L)后 ,对外源性氧自由基 (1mmol L的H2 O2 )引起单个豚鼠心室... 目的　研究红花黄素 (saffloweryellowpigment,SYP)对氧自由基引起的豚鼠单个心室肌细胞电生理异常的保护作用。方法　采用全细胞膜片钳技术 ,观察预先应用红花黄素 (3.3μg L)后 ,对外源性氧自由基 (1mmol L的H2 O2 )引起单个豚鼠心室肌细胞动作电位时程 (actionpotentialduration ,APD)和离子电流改变的影响。结果　红花黄素能明显缩短H2 O2 诱发的动作电位时程 ;减轻H2 O2 对钙电流的抑制作用 ;但不能改变H2 O2 对内向整流钾电流(Ik1 )的抑制作用。结论　预先应用红花黄素对H2 O2 损伤有一定的拮抗作用 ,说明其能够清除氧自由基 。 展开更多

关键词 电生理异常 红花黄素 外源性氧自由基 心室肌细胞 全细胞膜片钳技术 豚鼠 缺血性心脏病

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海马干细胞分化的神经元电生理特征的初步探讨 被引量：12

12

作者 沈红 林志国 +4 位作者 马晓燕 单宏丽 王鹤 冯建斌 杨富明科 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第4期300-303,共4页

目的探讨大鼠海马干细胞分化的神经元的电生理特征。方法无血清方法分离、培养新生大鼠海马干细胞,诱导其分化为神经元,采用全细胞膜片钳技术记录分化的神经元的静息膜电位、动作电位及离子单通道等电生理指标。结果海马干细胞分化的神... 目的探讨大鼠海马干细胞分化的神经元的电生理特征。方法无血清方法分离、培养新生大鼠海马干细胞,诱导其分化为神经元,采用全细胞膜片钳技术记录分化的神经元的静息膜电位、动作电位及离子单通道等电生理指标。结果海马干细胞分化的神经元具有一定的电生理特征,记录到静息膜电位及动作电位,其50%和90%复极化动作电位时程分别为69.75±4.57ms及79.75±6.45ms,并同时记录到三种外向钾电流。结论在现有培养条件下海马干细胞可分化为具有一定电生理特征的神经元。 展开更多

关键词 海马 干细胞分化 神经元 电生理 膜片钳

原文传递

冬虫夏草对豚鼠心室肌细胞胞浆钙离子浓度及L-型钙电流的影响 被引量：8

13

作者 王赫 单宏丽 +3 位作者 孙宏丽 陈庆文 张妍 杨宝峰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期895-898,共4页

目的　研究冬虫夏草 (Codycepssinensis,CS)水提液对豚鼠单个心室肌细胞胞浆内钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)及L 型钙电流 (ICa L)的影响。方法　酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测定豚鼠心室肌... 目的　研究冬虫夏草 (Codycepssinensis,CS)水提液对豚鼠单个心室肌细胞胞浆内钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)及L 型钙电流 (ICa L)的影响。方法　酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测定豚鼠心室肌细胞 [Ca2 + ]i以及ICa L的变化。结果　应用 0 1mg/mL (生药浓度 )冬虫夏草水提液 ,在静息状态下对 [Ca2 + ]i 无影响 ;对 6 0mmol/LKCl诱导的胞浆 [Ca2 + ]i升高有促进作用 ,峰值荧光强度在 12 0s时由12 0 4 3± 2 38 4增加至 185 5 2± 32 1 0 (n =6 ,P <0 0 5 )。膜片钳研究结果表明 ,冬虫夏草水提液可明显促进ICa L,使ICa L从 (- 15 1± 2 3)pA/ pF增加到 (- 19 7± 3 2 ) pA/pF (刺激电压为 10mV ,n =8,P <0 0 1)。 结论　冬虫夏草水提液促进心肌细胞钙内流 ,是该药治疗缓慢型心律失常的机制之一。 展开更多

关键词 冬虫夏草 L-型钙电流 膜片钳技术

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氧自由基致豚鼠心室肌细胞跨膜电位变化的离子电流基础 被引量：9

14

作者 徐长庆 李玉荣 +4 位作者 杨宝峰 单宏丽 孙可青 李全凤 朱世军 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期121-124,共4页

目的 :旨在揭示氧自由基参与缺血 /再灌注性心律失常发生的离子电流基础。方法 :采用膜片钳全细胞式记录技术 ,观察H2 O2 ( 1mmol/L)对豚鼠心室肌细胞跨膜电位和相关离子电流的影响。结果 :H2 O2 使豚鼠心肌单细胞的静息电位 (RP)降低 ... 目的 :旨在揭示氧自由基参与缺血 /再灌注性心律失常发生的离子电流基础。方法 :采用膜片钳全细胞式记录技术 ,观察H2 O2 ( 1mmol/L)对豚鼠心室肌细胞跨膜电位和相关离子电流的影响。结果 :H2 O2 使豚鼠心肌单细胞的静息电位 (RP)降低 ,动作电位时程 (APD)显著缩短 ,对动作电位幅度 (APA)和超射 (OS)及钠电流的峰值 (INa)均无明显影响 ;明显抑制内向整流钾电流 (IK1) ,尤其在超极化时 ;增强延迟外向钾电流 (IK) ,尤其快组分 (IKr)增加显著 ,而慢组分 (IKs)增加不十分显著 ;抑制或取消L 型钙电流 (ICa)。结论 :活性氧所致心室细胞跨膜电位的变化具有明显的离子电流基础 。 展开更多

关键词 心肌细胞 跨膜电位 离子电流 氧自由基 心律失常

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15-羟廿碳四烯酸对缺氧性大鼠颈内动脉环的收缩作用及机制 被引量：9

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作者 朱雨岚 单宏丽 +1 位作者 李倩 朱大岭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1327-1331,共5页

目的研究15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对正常及缺氧状态的离体大鼠颈内动脉环的作用,探讨15-HETE在缺血/缺氧性脑损伤的病理生理过程中的作用.方法 16只Wistar大鼠随机分为两组即对照组:其氧浓度(FiO2)为21%和缺氧组:置于FiO2为10%的缺氧箱... 目的研究15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对正常及缺氧状态的离体大鼠颈内动脉环的作用,探讨15-HETE在缺血/缺氧性脑损伤的病理生理过程中的作用.方法 16只Wistar大鼠随机分为两组即对照组:其氧浓度(FiO2)为21%和缺氧组:置于FiO2为10%的缺氧箱中(n=8).9 d后将大鼠处死,游离颈内动脉(ICA)制备血管环,KH液中分别加入不同浓度15-HETE以及2 mmol·L-1 4-AP、10-2 mol·L-1 TEA、10-6 mol·L-1 GLYB后平衡15 min后,再加入15-HETE,观察不同浓度15-HETE、不同K+通道阻断剂对颈内动脉环收缩反应程度的变化.结果 15-HETE以浓度依赖方式(10-8 mol·L-1～10-6mol·L-1)使游离颈内动脉环张力增加,对缺氧组大鼠颈内动脉环张力作用更为明显,与正常对照组相比差异有显著性(15-HETE浓度为10-8 mol·L-1、10-7 mol·L-1时,P<0.05,10-6 mol·L-1时,P<0.01,n=8);2 mmol·L-1 4-AP使颈内动脉环血管张力增高(P<0.05，n=8),但预先应用 2 mmol·L-1 4-AP后浴液中加入10-6 mol·L-1 15-HETE,血管张力无进一步增加的趋势;10-2 mol·L-1 TEA、10-6 mol·L-1 GLYB,对血管环张力差异无显著性(P>0.05,n=8);但进一步应用15-HETE使血管环张力增加,变化幅度接近单纯应用15-HETE组.结论 15-HETE收缩ICA,缺氧情况下尤为明显;Kv通道在15-HETE所致的ICA收缩中起作用. 展开更多

关键词 15-羟廿碳四烯酸 电压依赖钾通道 缺氧 颈内动脉

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缺血性心律失常相关微小RNA在大鼠心脏的表达变化 被引量：7

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作者 潘振伟 吕延杰 +4 位作者 初文峰 许超千 白云龙 单宏丽 杨宝峰 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第2期95-97,共3页

目的筛查缺血预适应大鼠心脏微小RNA(microRNA,或miRNA)的表达变化,寻找与缺血性心律失常相关的微小RNA。方法SD大鼠随即分为假手术组和缺血预适应组(IP),每组3只。应用手术套管法建立在体大鼠心肌缺血预适应模型(5min缺血、5min再灌,... 目的筛查缺血预适应大鼠心脏微小RNA(microRNA,或miRNA)的表达变化,寻找与缺血性心律失常相关的微小RNA。方法SD大鼠随即分为假手术组和缺血预适应组(IP),每组3只。应用手术套管法建立在体大鼠心肌缺血预适应模型(5min缺血、5min再灌,三个循环)。建模4h后取材提取RNA,应用微小RNA芯片技术检测IP组非缺血再灌注区(a)I、P组缺血再灌注区(b)和假手术组(c)心肌组织小RNA的表达情况。结果同假手术组相比,缺血再灌区心肌有4个miRNA上调,5个miRNA下调;缺血预适应组非缺血再灌区有23个miRNA上调,包括三个肌肉特异表达的miRNA(mir-1、mir-133和mir-206),另有9个miRNA表达下调。结论在心肌缺血预适应过程中,心肌微小RNA的表达发生明显变化,这些微小RNA可能对缺血预适应介导的抗心律失常起重要调节作用,为缺血性心律失常机制研究提供了新思路。 展开更多

关键词 微小RNA 缺血预适应 心律失常 大鼠

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Lin28B/let-7d环路调控成纤维细胞功能参与肺纤维化发生 被引量：8

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作者 梁海海 李天宇 +1 位作者 解岩 单宏丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期175-180,共6页

目的研究Lin28B/let-7d环路诱导肺成纤维细胞增殖、分化的作用及分子机制,为临床肺纤维化的治疗提供新的策略。方法气管注射博来霉素(bleomycin,BLM)造成小鼠肺纤维化模型;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子(transforming growth facto... 目的研究Lin28B/let-7d环路诱导肺成纤维细胞增殖、分化的作用及分子机制,为临床肺纤维化的治疗提供新的策略。方法气管注射博来霉素(bleomycin,BLM)造成小鼠肺纤维化模型;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1诱导人胚肺成纤维细胞(MRC-5)纤维性变;qRT-PCR检测组织及细胞中Lin28B、collagen 1α1、collagen 3α1变化;Western blot检测Lin28B蛋白表达;MTT、Edu染色和免疫荧光实验分别检测细胞活力、增殖及成纤维细胞向肌成纤维细胞的转变。结果 Lin28B在肺纤维化小鼠和细胞中表达明显升高。Lin28B可诱导MRC-5细胞胶原合成增加,而过表达let-7d则减轻Lin28B的这一作用。进一步研究发现,Lin28B可诱导成纤维细胞增殖,并促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转变,这一作用是通过抑制let-7d来实现的。结论 Lin-28B通过抑制let-7d进而促进成纤维细胞增殖、分化,最终增加成纤维细胞胶原合成,诱发肺纤维化的发生,Lin28B可能作为肺纤维化的治疗新靶点。 展开更多

关键词 肺纤维化 Lin28B let-7d MRC-5细胞 肌成纤维细胞 细胞增殖

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大黄素对豚鼠单个心室肌细胞胞浆游离钙浓度的影响 被引量：3

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作者 刘影 孙宏丽 +4 位作者 单宏丽 宋维华 董德利 何树庄 杨宝峰 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2003年第2期122-124,共3页

目的　研究大黄素 (Emodin)对豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法　酶解法分离单个豚鼠心肌细胞 ,用与钙离子特异性结合的Fluo 3 Am标记细胞内游离钙离子 ,应用激光扫描共聚焦显微镜实时监测钙荧光强度 (FluorescentIn... 目的　研究大黄素 (Emodin)对豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法　酶解法分离单个豚鼠心肌细胞 ,用与钙离子特异性结合的Fluo 3 Am标记细胞内游离钙离子 ,应用激光扫描共聚焦显微镜实时监测钙荧光强度 (FluorescentIntensity ,FI)的变化 ,以平均荧光强度代表 [Ca2 + ]i。结果　在静息状态下 ,大黄素 1～10 0 μmol L对 [Ca2 + ]i 均无影响 ;大黄素 1μmol L对KCl 6 0mmol L诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有促进作用 ,平均荧光强度由 1876 .7± 5 5 1.3增加至 2 90 4 .8± 739.1(n =8,P <0 .0 5 ) ;10 μmol L对其无影响 ;10 0 μmol L则表现为抑制作用 ,平均荧光强度降至 12 14 .1± 334.8(n =8,P <0 .0 5 )。结论　大黄素低浓度 (1μmol L)对KCl诱导的细胞内钙增高有促进作用 ;高浓度 (10 0 μmol L)则表现为抑制作用。因此 。 展开更多

关键词 大黄素 豚鼠 单个心室肌细胞 脑浆游离钙 浓度 影响

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环维黄杨星D对分离大鼠心室肌细胞内Ca^(2+)和L型钙电流的影响 被引量：3

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作者 陈庆文 单宏丽 +2 位作者 孙宏丽 王赫 杨宝峰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期500-503,共4页

目的　研究环维黄杨星D(CD)对大鼠心室肌细胞内Ca2 + 动员和L型钙电流 (ICa L)的影响。方法　采用全细胞膜片钳和激光扫描共聚焦显微术研究CD对心肌细胞ICa L以及氯化钾、咖啡因诱发心肌细胞内Ca2 + 动员的影响。结果　CD浓度依赖性抑制... 目的　研究环维黄杨星D(CD)对大鼠心室肌细胞内Ca2 + 动员和L型钙电流 (ICa L)的影响。方法　采用全细胞膜片钳和激光扫描共聚焦显微术研究CD对心肌细胞ICa L以及氯化钾、咖啡因诱发心肌细胞内Ca2 + 动员的影响。结果　CD浓度依赖性抑制ICa L。指令电压为 10mV时 ,1和 10 μmol·L- 1 CD分别使ICa L 电流密度从 (- 9 9±1 8)pA pF降至 (- 6 4± 1 4 )pA pF和 (- 4 2± 0 6 )pA pF。共聚焦实验显示 1和 10 μmol·L- 1 CD不影响静息心肌细胞 [Ca2 + ]i,对氯化钾诱发 [Ca2 + ]i升高水平无明显抑制作用 ;咖啡因引起的细胞内Ca2 + 动员可被CD进一步增强。结论　CD浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞ICa L,并有促进咖啡因诱发心肌细胞内Ca2 + 展开更多

关键词 环维黄杨星D 心肌细胞 L型钙电流 细胞内CA^2+

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红花黄素对氧自由基所致的心肌细胞电生理异常的保护作用(英文) 被引量：5

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作者 单宏丽 杨宝峰 +2 位作者 李玉荣 李永华 徐长庆 《中国临床康复》 CSCD 2004年第30期6810-6812,共3页

背景:氧自由基诱导的功能异常可能使心脏、肝脏、肾脏及脑等组织缺血性疾病的主要致病因素,对损伤有保护作用的药物研究成为当前的热点。目的:研究红花黄素(Saffloweryellowpigment,SYP)对氧自由基引起的豚鼠单个心室肌细胞损伤的保护... 背景:氧自由基诱导的功能异常可能使心脏、肝脏、肾脏及脑等组织缺血性疾病的主要致病因素,对损伤有保护作用的药物研究成为当前的热点。目的:研究红花黄素(Saffloweryellowpigment,SYP)对氧自由基引起的豚鼠单个心室肌细胞损伤的保护作用。设计:非随机对照的实验研究。地点、材料和干预:本实验在哈尔滨医科大学药学院药理教研室完成。实验选用豚鼠30只,性别不限。以处置前单个心室肌细胞为正常对照,预先应用红花黄素(3.3μg/L)后,给予单个豚鼠心室肌细胞外源性氧自由基(1mmol/L的H2O2)。主要观察指标:采用全细胞膜片钳技术,观察单个豚鼠心室肌细胞动作电位时程(actionpotentialdurationAPD)和L-型钙电流、内向整流钾电流。结果:1mmol/L的H2O2导致豚鼠心室肌细胞损伤,表现为动作电位时程缩短,APD50和APD90分别由正常对照组的(331.2±31.9)ms和(380.8±28.2)ms缩短至(169.5±76.0)ms和(238.4±21.3)ms(n=8,t=3.834,P<0.01),红花黄素(3.3μg/L)能明显改善H2O2诱发的动作电位时程缩短;同时氧自由基H2O2抑制L-型钙电流,+10mV时,L-型钙电流峰值由对照的(-1023.45±74.34)pA减少到(-275.21±38.67)pA(n=6,P<0.001);H2O2(1mmol/L)也明显抑制内向整流钾电流(IK1),指令电位为-120mV时,IK1由对照组的(-2133. 展开更多

关键词 红花/药理学 自由基 心肌/细胞学 豚鼠 细胞学技术

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