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Jagged1活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨分化但抑制增殖 被引量：7
1
作者 王汝杰 刘复州 +7 位作者 沈伟伟 胡旭 陈培 毛德举 卓云云 陈武桂 周跃 初同伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期865-869,共5页
目的:探讨Jagged1通过活化Notch通路对RAW 264.7细胞向破骨分化及增殖的影响。方法:将RAW 264.7细胞分三组培养:对照组(细胞培养基+鼠RANKL 50 ng/L)、Jagged1组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组(细胞培... 目的:探讨Jagged1通过活化Notch通路对RAW 264.7细胞向破骨分化及增殖的影响。方法:将RAW 264.7细胞分三组培养:对照组(细胞培养基+鼠RANKL 50 ng/L)、Jagged1组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白+DAPT),实时荧光定量PCR检测各组破骨细胞标志基因组织蛋白酶K(Cathepsin K,CK)、抗酒石酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)、降钙素受体(Calcitionin receptor,CTR)及Notch靶基因HES-1、HEY-1 mRNA的表达,TRAP染色鉴定破骨细胞,扫描电镜检测破骨细胞溶骨功能。免疫荧光检测NICD的表达变化,CCK-8检测RAW 264.7细胞增殖。结果:Jagged1组TRAP、CK、CTR及HES-1、HEY-1 mRNA的表达、TRAP+细胞数较对照组及DAPT组明显升高(P<0.05),而DAPT组与对照组均无明显变化;细胞免疫荧光显示Jagged1组NICD除表达于细胞膜、细胞质外,细胞核也有较高表达,对照组及DAPT组细胞核中NICD无明显表达;细胞培养48 h,Jagged1组细增殖较对照组及DAPT组出现明显抑制。结论:Jagged1通过活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨细胞分化、抑制其增殖。 展开更多
关键词 JAGGED1 破骨细胞 NOTCH 细胞分化 细胞增殖
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siRNA沉默Sema 4D对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响 被引量：5
2
作者 陈武桂 沈伟伟 +3 位作者 胡旭 卓云云 毛德举 初同伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期454-458,共5页
目的:观察siRNA沉默信号素4D(semaphorin 4D,Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、Western blotting检测干扰效率,筛选有效序列。si... 目的:观察siRNA沉默信号素4D(semaphorin 4D,Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、Western blotting检测干扰效率,筛选有效序列。siRNA有效干扰MDA-MB-231细胞Sema 4D表达后,CCK-8法及Transwell迁移实验检测细胞增殖及迁移能力的变化。结果:Sema 4D siRNA转染MDA-MB-231细胞后Sema 4D的(mRNA及蛋白)表达水平明显下降(P<0.05),其中以siRNA-C最明显(P<0.05);与空白、阴性对照组相比,siRNA-C沉默MDA-MB-231细胞Sema 4D表达可明显抑制MDA-MB-231细胞增殖(均P<0.05),同时明显减弱细胞的迁移能力[穿膜细胞数:(105.60±12.07)vs(196.20±9.04)、(186.40±6.69)个,均P<0.05]。结论:siRNA沉默Sema 4D可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并抑制细胞迁移,可作为乳腺癌基因治疗的潜在位点。 展开更多
关键词 SIRNA 信号素4D 乳腺癌 增殖 迁移
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倒置肱骨近端钢板内固定在踝关节融合术中的应用 被引量：3
3
作者 史庆轩 李昊 +6 位作者 赵刚 唐胜斌 马青元 梁晓松 卓云云 李建华 罗永忠 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第17期1615-1617,共3页
[目的]评价前路倒置肱骨近端锁定钢板内固定及结合滑动植骨法在踝关节融合术中的临床应用及疗效。[方法]收治各类踝关节终末期病变13例,采用踝关节前正中入路暴露踝关节前方,凿除踝关节软骨面,结合胫骨滑动植骨法,摆正踝关节位置,取肱... [目的]评价前路倒置肱骨近端锁定钢板内固定及结合滑动植骨法在踝关节融合术中的临床应用及疗效。[方法]收治各类踝关节终末期病变13例,采用踝关节前正中入路暴露踝关节前方,凿除踝关节软骨面,结合胫骨滑动植骨法,摆正踝关节位置,取肱骨近端锁定钢板倒置于踝关节前方行内固定。[结果]所有患者随访6~50个月,X线片示踝关节全部融合。按AOFAS踝-后足功能评价系统,本组优11例,良2例。[结论]前路倒置肱骨近端锁定钢板内固定技术具有操作简单、暴露充分、固定牢靠等优点,适合于复杂踝关节终末期病变的踝关节融合术。 展开更多
关键词 踝关节融合术 肱骨近端锁定钢板 倒置 滑动植骨
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膝关节镜治疗绒毛结节性滑膜炎并发骨化性肌炎一例 被引量：3
4
作者 卓云云 李建华 吴波 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1052-1054,共3页
骨化性肌炎是一种主要发生在骨骼肌系统软组织内的非肿瘤性、良性的异位骨化病变,可发生在横纹肌、韧带、肌腱、筋膜、关节囊、皮下脂肪等组织中。临床通常将其分为三种类型：进行性骨化性肌炎、非创伤性骨化性肌炎和创伤性骨化性肌炎。
关键词 骨化性肌炎 创伤性骨化性肌炎 绒毛结节性滑膜炎
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CD147对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：2
5
作者 卓云云 王洪凯 +5 位作者 沈伟伟 陈武桂 毛德举 胡旭 张超 初同伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期168-175,共8页
目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,EMP,又称CD147)对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:将CD147过表达慢病毒、短发夹RNA(short hairpin RNA,... 目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,EMP,又称CD147)对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:将CD147过表达慢病毒、短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)干扰CD147表达的慢病毒及阴性对照(negative control,NC)慢病毒分别感染肺癌A549细胞,获得CD147稳定过表达的A549EMP细胞、稳定干扰CD147表达的A549sh EMP细胞和阴性对照A549NC细胞。应用CCK-8(cell counting kit-8)法、细胞划痕实验和Transwell小室法分别检测A549EMP、A549sh EMP和A549NC细胞的增殖、迁移及侵袭能力;蛋白质印迹法检测A549EMP、A549sh EMP和A549NC细胞中β-catenin的核表达情况。结果:A549EMP细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显高于未进行慢病毒感染的空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05),而A549sh EMP细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显低于空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05)。A549EMP细胞β-catenin的核表达水平明显高于空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05),而A549sh EMP细胞β-catenin的核表达水平明显低于空白对照A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05)。结论:CD147可增强肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与β-catenin的激活有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 细胞增殖 细胞运动 肿瘤浸润 CD147 BETA-CATENIN
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RNA干扰Semaphorin 4D表达对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响 被引量：2
6
作者 陈武桂 沈伟伟 +3 位作者 胡旭 卓云云 毛德举 初同伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期283-291,共9页
目的 :研究Semaphorin 4D(Sema 4D)表达沉默对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响,初步探讨该蛋白在乳腺癌发生和发展中的作用。方法 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Sema 4D在不同转移潜能的乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7中的表达... 目的 :研究Semaphorin 4D(Sema 4D)表达沉默对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响,初步探讨该蛋白在乳腺癌发生和发展中的作用。方法 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Sema 4D在不同转移潜能的乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7中的表达水平。采用短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)慢病毒感染法,建立Sema 4D稳定低表达的MDA-MB-231细胞系,然后采用CCK-8法、FCM法、划痕愈合实验及Transwell迁移实验检测细胞增殖、周期分布及迁移能力的变化。结果 :Sema 4D在MDA-MB-231细胞中表达水平明显高于MCF-7细胞(P<0.05);sh RNA慢病毒感染可明显下调MDA-MB-231细胞中Sema4D的表达;与空白对照组比较,Sema 4D干扰组的MDA-MB-231细胞增殖明显被抑制(P<0.05),G0/G1期细胞所占比例明显增高(P<0.05),而细胞迁移能力明显降低(P<0.05)。结论:Sema 4D在高转移潜能的乳腺癌MDA-MB-231细胞中高表达,sh RNA干扰Sema 4D表达可抑制该细胞的增殖和迁移,并阻滞细胞周期于G1期。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 信号素4D 细胞增殖 细胞周期 细胞迁移分析
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有限稀释法分选人骨肉瘤143-B干细胞及鉴定
7
作者 毛德举 胡旭 +7 位作者 张莹 沈伟伟 陈武桂 陈培 何建荣 卓云云 张超 初同伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期16-23,共8页
目的:探索人骨肉瘤143-B干细胞的分选及鉴定方法。方法:采用有限稀释法对143-B细胞进行干细胞的分选,并检测所获取细胞表面干细胞标志物Nanog和OCT4的表达水平;对所获取的细胞进行成骨及成脂诱导分化,以检测其是否具有多向分化的潜能;... 目的:探索人骨肉瘤143-B干细胞的分选及鉴定方法。方法:采用有限稀释法对143-B细胞进行干细胞的分选,并检测所获取细胞表面干细胞标志物Nanog和OCT4的表达水平;对所获取的细胞进行成骨及成脂诱导分化,以检测其是否具有多向分化的潜能;动物成瘤实验鉴定细胞的成瘤能力,耐药实验检测顺铂对细胞半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)的影响。结果:分选获得的单克隆143-L细胞具有较高的成球能力;143-L细胞表面Nanog和OCT4 m RNA和蛋白的表达水平均明显高于亲代143-B细胞;对其进行成骨及成脂多向诱导分化成功。143-L细胞的成瘤能力及耐药能力(顺铂对143-B及143-L细胞的IC50值分别为0.83和2.51μg/m L)均明显高于143-B细胞。结论:有限稀释法可以用于143-B细胞干细胞的分选。 展开更多
关键词 骨肉瘤 肿瘤干细胞 肿瘤干细胞测定 143-B细胞
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