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恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体间接ELISA检测方法的建立及验证
1
作者
张文劲
李庆妮
+5 位作者
唐定
陈云丰
华
婉
璐
刘元浪
李新国
卢佳
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期1341-1346,1352,共7页
目的建立恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并进行验证。方法以SARS-CoV-2 Beta变异株灭活疫苗为包被抗原建立特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并优化方法的抗原包被浓度(1、2、4μg/mL)、待检血清稀释度(...
目的建立恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并进行验证。方法以SARS-CoV-2 Beta变异株灭活疫苗为包被抗原建立特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并优化方法的抗原包被浓度(1、2、4μg/mL)、待检血清稀释度(1∶800~1∶12800)、PBST封闭液(含1%BSA、2%BSA、1%脱脂奶、2%脱脂奶、1%BSA+1%脱脂奶)、封闭时间(30、60、90 min)、二抗稀释度(1∶5000、1∶10000、1∶15000、1∶20000)、血清及二抗孵育时间(30、60、90 min)、TMB显色反应时间(5、10、15、20、25、30 min)。采用建立的方法检测60份恒河猴阴性血清,确定阴、阳性临界值。验证该方法的敏感性及精密性。采用建立的方法及微量中和试验分别检测44份恒河猴血清抗SARS-CoV-2 Beta变异株特异性IgG抗体及中和抗体水平,并比较二者的相关性和一致性。结果确定最佳检测条件:抗原包被浓度为1μg/mL;封闭液为含1%脱脂奶粉的PBST,封闭时间为30 min;待检血清稀释度为1∶1600,孵育时间为90 min,二抗稀释度为1∶10000,孵育时间为30 min;底物显色时间为25 min。该方法的阳性临界值为0.093,阴性临界值为0.084,位于两者之间判为可疑。5份阳性血清测得阳性结果的血清稀释倍数均为1∶51200;精密性验证变异系数(CV)均<15%。44份恒河猴血清IgG抗体效价与中和抗体水平之间呈强相关(r=0.8580,P<0.0001);两种方法总符合率为90.9%,阳性符合率为93.6%,阴性符合率为84.6%;一致性检验Kappa为0.7838(95%CI:0.5865~0.9810)。结论建立的恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体间接ELISA检测方法具有良好的敏感性和精密性,与微量中和试验具有较强一致性,可用于恒河猴血清IgG抗体的检测。
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关键词
恒河猴
SARS-CoV-2变异株
特异性IGG抗体
间接ELISA法
原文传递
推进生态文明建设 弘扬彰武治沙精神
2
作者
华
婉
璐
《决策探索》
2021年第20期15-16,共2页
几代彰武治沙人敢为人先、百折不挠,硬是把漫天黄沙锁在“绿色长城”之外,使初心变恒心、沙漠变绿洲,铸就了矢志不渝、永不退缩、默默无闻、甘于奉献的彰武治沙精神。这是对中华民族精神的传承和弘扬,为其他同类地区提供了巨大的精神鼓...
几代彰武治沙人敢为人先、百折不挠,硬是把漫天黄沙锁在“绿色长城”之外,使初心变恒心、沙漠变绿洲,铸就了矢志不渝、永不退缩、默默无闻、甘于奉献的彰武治沙精神。这是对中华民族精神的传承和弘扬,为其他同类地区提供了巨大的精神鼓舞,是弘扬地域文化的精神家园、是推动地区转型振兴的强大精神动力。习近平总书记指出:“环境就是民生,青山就是美丽,蓝天也是幸福。”发展经济是为了民生,保护生态环境同样也是为了民生。这就需要坚定不移地贯彻绿色发展理念,实现经济社会发展和生态环境保护协同共进。
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关键词
彰武治沙
民族精神
生态文明
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职称材料
彰武县设施农业发展现状及对策——基于马克思主义哲学原理
3
作者
单立娜
华
婉
璐
《乡村科技》
2018年第7期18-19,共2页
设施农业是传统农业向现代农业转型发展的产物,其发展是有规律可循的,在发展过程中要按照辩证唯物主义要求,把尊重客观自然规律和发挥人的主观能动性有机结合起来,在充分发挥人的主观能动性的同时充分利用现有物质条件的基础上,努力创...
设施农业是传统农业向现代农业转型发展的产物,其发展是有规律可循的,在发展过程中要按照辩证唯物主义要求,把尊重客观自然规律和发挥人的主观能动性有机结合起来,在充分发挥人的主观能动性的同时充分利用现有物质条件的基础上,努力创造出新的条件,使传统农业向现代农业转变的步伐加快。基于此,本文从马克思主义哲学原理的角度,分析辽宁省彰武县设施农业的发展现状及成效,探究存在的问题,在此基础上提出发展建议。
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关键词
设施农业哲学原理
现状和成效
问题
建议
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职称材料
非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统运行效果评价
被引量:
1
4
作者
李庆妮
陈云丰
+5 位作者
刘元浪
唐定
华
婉
璐
张瑞安
卢佳
李新国
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第6期80-86,共7页
目的利用流感病毒作为模式病毒评价非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统的运行效果,为非人灵长类动物气溶胶吸入研究奠定实验基础。方法在生物安全三级实验室中,使用非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统产生流感病毒气溶胶,以此评价该...
目的利用流感病毒作为模式病毒评价非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统的运行效果,为非人灵长类动物气溶胶吸入研究奠定实验基础。方法在生物安全三级实验室中,使用非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统产生流感病毒气溶胶,以此评价该装置能否正常运行并产生特定粒径大小的气溶胶颗粒,同时评价装置运行过程中病毒气溶胶输出均一性、稳定性、气密性以及装置的消毒效果。结果该装置产生的气溶胶颗粒中值直径为(1.04±0.03)μm,不同浓度气溶胶发生液产生的病毒气溶胶均能到达头罩,且6个头罩间气溶胶浓度无显著性差异(P>0.05);流感病毒雾化30 min后存活率>50%;病毒气溶胶浓度与发生器病毒浓度的线性相关良好(R^(2)=0.9989);装置易泄漏处未检测到感染性病毒,使用过氧化氢消毒剂对气溶胶暴露系统管道及负压柜腔体消毒后无指示菌生长。结论非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统运行效果良好,装置管道气密性好,可消毒完全,为将来建立SARS-CoV-2及其它病毒气溶胶感染非人灵长类动物模型奠定了基础。
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关键词
非人灵长类动物
气溶胶
暴露
均一性
稳定性
气密性
流感病毒
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职称材料
题名
恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体间接ELISA检测方法的建立及验证
1
作者
张文劲
李庆妮
唐定
陈云丰
华
婉
璐
刘元浪
李新国
卢佳
机构
武汉生物制品研究所有限责任公司
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期1341-1346,1352,共7页
基金
国家重点研发计划(2020YFC0842100)。
文摘
目的建立恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并进行验证。方法以SARS-CoV-2 Beta变异株灭活疫苗为包被抗原建立特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并优化方法的抗原包被浓度(1、2、4μg/mL)、待检血清稀释度(1∶800~1∶12800)、PBST封闭液(含1%BSA、2%BSA、1%脱脂奶、2%脱脂奶、1%BSA+1%脱脂奶)、封闭时间(30、60、90 min)、二抗稀释度(1∶5000、1∶10000、1∶15000、1∶20000)、血清及二抗孵育时间(30、60、90 min)、TMB显色反应时间(5、10、15、20、25、30 min)。采用建立的方法检测60份恒河猴阴性血清,确定阴、阳性临界值。验证该方法的敏感性及精密性。采用建立的方法及微量中和试验分别检测44份恒河猴血清抗SARS-CoV-2 Beta变异株特异性IgG抗体及中和抗体水平,并比较二者的相关性和一致性。结果确定最佳检测条件:抗原包被浓度为1μg/mL;封闭液为含1%脱脂奶粉的PBST,封闭时间为30 min;待检血清稀释度为1∶1600,孵育时间为90 min,二抗稀释度为1∶10000,孵育时间为30 min;底物显色时间为25 min。该方法的阳性临界值为0.093,阴性临界值为0.084,位于两者之间判为可疑。5份阳性血清测得阳性结果的血清稀释倍数均为1∶51200;精密性验证变异系数(CV)均<15%。44份恒河猴血清IgG抗体效价与中和抗体水平之间呈强相关(r=0.8580,P<0.0001);两种方法总符合率为90.9%,阳性符合率为93.6%,阴性符合率为84.6%;一致性检验Kappa为0.7838(95%CI:0.5865~0.9810)。结论建立的恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体间接ELISA检测方法具有良好的敏感性和精密性,与微量中和试验具有较强一致性,可用于恒河猴血清IgG抗体的检测。
关键词
恒河猴
SARS-CoV-2变异株
特异性IGG抗体
间接ELISA法
Keywords
Rhesus monkey
SARS-CoV-2 variant strain
Specific IgG antibody
Indirect ELISA method
分类号
R373.1 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
推进生态文明建设 弘扬彰武治沙精神
2
作者
华
婉
璐
机构
中共彰武县委党校
出处
《决策探索》
2021年第20期15-16,共2页
文摘
几代彰武治沙人敢为人先、百折不挠,硬是把漫天黄沙锁在“绿色长城”之外,使初心变恒心、沙漠变绿洲,铸就了矢志不渝、永不退缩、默默无闻、甘于奉献的彰武治沙精神。这是对中华民族精神的传承和弘扬,为其他同类地区提供了巨大的精神鼓舞,是弘扬地域文化的精神家园、是推动地区转型振兴的强大精神动力。习近平总书记指出:“环境就是民生,青山就是美丽,蓝天也是幸福。”发展经济是为了民生,保护生态环境同样也是为了民生。这就需要坚定不移地贯彻绿色发展理念,实现经济社会发展和生态环境保护协同共进。
关键词
彰武治沙
民族精神
生态文明
分类号
X321 [环境科学与工程—环境工程]
D64 [政治法律—政治学]
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职称材料
题名
彰武县设施农业发展现状及对策——基于马克思主义哲学原理
3
作者
单立娜
华
婉
璐
机构
彰武县委党校
出处
《乡村科技》
2018年第7期18-19,共2页
文摘
设施农业是传统农业向现代农业转型发展的产物,其发展是有规律可循的,在发展过程中要按照辩证唯物主义要求,把尊重客观自然规律和发挥人的主观能动性有机结合起来,在充分发挥人的主观能动性的同时充分利用现有物质条件的基础上,努力创造出新的条件,使传统农业向现代农业转变的步伐加快。基于此,本文从马克思主义哲学原理的角度,分析辽宁省彰武县设施农业的发展现状及成效,探究存在的问题,在此基础上提出发展建议。
关键词
设施农业哲学原理
现状和成效
问题
建议
分类号
F327 [经济管理—产业经济]
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职称材料
题名
非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统运行效果评价
被引量:
1
4
作者
李庆妮
陈云丰
刘元浪
唐定
华
婉
璐
张瑞安
卢佳
李新国
机构
武汉生物制品研究所有限责任公司新发传染病研究室
武汉生物制品研究所有限责任公司生物安全三级实验室
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第6期80-86,共7页
基金
国家重点研发计划(2020YFC0842100)。
文摘
目的利用流感病毒作为模式病毒评价非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统的运行效果,为非人灵长类动物气溶胶吸入研究奠定实验基础。方法在生物安全三级实验室中,使用非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统产生流感病毒气溶胶,以此评价该装置能否正常运行并产生特定粒径大小的气溶胶颗粒,同时评价装置运行过程中病毒气溶胶输出均一性、稳定性、气密性以及装置的消毒效果。结果该装置产生的气溶胶颗粒中值直径为(1.04±0.03)μm,不同浓度气溶胶发生液产生的病毒气溶胶均能到达头罩,且6个头罩间气溶胶浓度无显著性差异(P>0.05);流感病毒雾化30 min后存活率>50%;病毒气溶胶浓度与发生器病毒浓度的线性相关良好(R^(2)=0.9989);装置易泄漏处未检测到感染性病毒,使用过氧化氢消毒剂对气溶胶暴露系统管道及负压柜腔体消毒后无指示菌生长。结论非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统运行效果良好,装置管道气密性好,可消毒完全,为将来建立SARS-CoV-2及其它病毒气溶胶感染非人灵长类动物模型奠定了基础。
关键词
非人灵长类动物
气溶胶
暴露
均一性
稳定性
气密性
流感病毒
Keywords
non-human primates
aerosol
exposure
uniformity
stability
air tightness
influenza virus
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体间接ELISA检测方法的建立及验证
张文劲
李庆妮
唐定
陈云丰
华
婉
璐
刘元浪
李新国
卢佳
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
原文传递
2
推进生态文明建设 弘扬彰武治沙精神
华
婉
璐
《决策探索》
2021
0
下载PDF
职称材料
3
彰武县设施农业发展现状及对策——基于马克思主义哲学原理
单立娜
华
婉
璐
《乡村科技》
2018
0
下载PDF
职称材料
4
非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统运行效果评价
李庆妮
陈云丰
刘元浪
唐定
华
婉
璐
张瑞安
卢佳
李新国
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2022
1
下载PDF
职称材料
已选择
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引证文献
统计分析
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