目的研究FANCD2 sh RNA干扰对人头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)细胞SIHN-005A化疗敏感度的影响,并初步探讨其可能机制。方法应用前期实验获得的FANCD2基因沉默效应稳定的人HNSCC SIHN-005A细胞,以嘌呤霉素持续...目的研究FANCD2 sh RNA干扰对人头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)细胞SIHN-005A化疗敏感度的影响,并初步探讨其可能机制。方法应用前期实验获得的FANCD2基因沉默效应稳定的人HNSCC SIHN-005A细胞,以嘌呤霉素持续筛选;Western blot检测沉默效应;CCK-8法检测顺铂作用后细胞增殖抑制率;Hoechst法检测细胞凋亡;Western blot检测Cyclin D1、Bax/Bcl-2、HIF-1α蛋白的表达。结果实验组细胞FANCD2蛋白表达明显下降,FANCD2蛋白沉默效率达60.5%。实验组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组和空白对照组,且具有浓度及时间依赖性,实验组细胞对CDDP的IC50值明显低于阴性对照组和空白对照组。FANCD2基因沉默后实验组细胞凋亡率明显增高。加用CDDP后,Cyclin D1、Bcl-2、HIF-1α蛋白表达水平较加用CDDP前明显下调,Bax蛋白明显增强。结论沉默FANCD2可增加SIHN-005A细胞对化疗药物CDDP的敏感度,其机制可能与FANCD2 sh RNA干扰引起Bax/bcl-2、Cyclin D1、HIF-1α的表达变化有关。展开更多
