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丙型肝炎病毒高变区1中介导感染的关键氨基酸残基鉴定
1
作者
解冰
劳文
光
+6 位作者
刘文宇
关默
刘小青
陶清源
王岩
赵平
戚中田
《微生物与感染》
2011年第4期225-230,共6页
丙型肝炎病毒(HCV)包膜E2蛋白氨基端的高变区1(HVR1)由27个氨基酸组成,是HCV蛋白中变异频率最高的肽段。HVR1含中和抗体表位,同时对HCV细胞侵入起重要作用,其结构与功能的关系目前尚不清楚。本研究对H77株包膜蛋白基因中的HVR1进行了一...
丙型肝炎病毒(HCV)包膜E2蛋白氨基端的高变区1(HVR1)由27个氨基酸组成,是HCV蛋白中变异频率最高的肽段。HVR1含中和抗体表位,同时对HCV细胞侵入起重要作用,其结构与功能的关系目前尚不清楚。本研究对H77株包膜蛋白基因中的HVR1进行了一系列缺失突变,然后将突变体表达质粒与假病毒包装质粒共转染人胚肾(HEK)293T细胞,用蛋白免疫印迹法检测细胞中HCV包膜E2蛋白的表达,用荧光定量聚合酶链反应检测培养上清液中的HCV假病毒(HCVpp)含量,以人肝癌细胞Huh7.5为靶细胞检测HCVpp的感染力。结果显示,缺失整个HVR1或HVR1中部分氨基酸残基对HCV包膜蛋白表达及HCVpp产量均无明显影响,但对HCVpp感染力产生不同影响。缺失第16～24位氨基酸残基导致HCVpp感染力增强,缺失第1～8位或1～12位氨基酸残基仅部分降低HCVpp感染力,缺失第13～15位和25～27位中的任意一个氨基酸残基均导致HCVpp感染力低于原型的5%。结果提示,HVR1中第13～15位和25～27位的6个氨基酸是介导HCV感染的关键氨基酸残基。
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关键词
丙型肝炎病毒
高变区1
侵入细胞
关键氨基酸残基
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职称材料
含CpG免疫刺激序列的质粒增强HBsAg诱导的免疫应答
2
作者
解冰
唐紫薇
+7 位作者
劳文
光
李建军
王岩
朱诗应
陶清源
戚中田
赵平
陈志辉
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期145-149,共5页
目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细...
目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细胞因子IFN-γ、IL-12,进一步将重组HBsAg分别联合这两种质粒免疫小鼠,检测小鼠的细胞和体液免疫应答。结果质粒pKO-CG6与载体pKO在体外均能有效激活健康人及HBV感染者PBMC增殖反应,并促进IFN-γ、IL-12的产生,其中pKO-CG6的免疫刺激活性强于载体pKO。小鼠体内试验表明,虽然载体pKO也具有免疫佐剂作用,但pKO-CG6更能显著增强HBsAg诱导的免疫应答,尤其是细胞免疫应答。结论含有多拷贝D型CpG ODN的质粒能有效激活HBV感染者的PBMC,并增强HBsAg在小鼠体内的免疫原性。
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关键词
乙型肝炎病毒
CPG寡脱氧核苷酸
质粒
免疫佐剂
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职称材料
分析化学设计性实验教学的探讨
被引量：
2
3
作者
周婷婷
劳文
光
+3 位作者
逄志骏
臧兴禹
闻俊
范国荣
《基础医学教育》
2012年第3期203-205,共3页
分析化学自主设计性实验教学,采用学生分组的实施方法,首先通过文献检索研读与分析,综述已有的实验技术,提出小组的实验方案。其次组员与教师一起对实验方案中的难点与关键技术进行讨论和总结,完善实验方案。第三,学生按照既定的实验方...
分析化学自主设计性实验教学,采用学生分组的实施方法,首先通过文献检索研读与分析,综述已有的实验技术,提出小组的实验方案。其次组员与教师一起对实验方案中的难点与关键技术进行讨论和总结,完善实验方案。第三,学生按照既定的实验方案实施,并且根据实验过程中的问题,修正实验方法,完成实验。最后,学生撰写实验报告并进行汇报,与教师一起交流经验,分享成果,发挥了学生主观能动性,锻炼了实践能力,培养了创新思维。
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关键词
分析化学
实验教学
实践能力
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职称材料
题名
丙型肝炎病毒高变区1中介导感染的关键氨基酸残基鉴定
1
作者
解冰
劳文
光
刘文宇
关默
刘小青
陶清源
王岩
赵平
戚中田
机构
第二军医大学微生物学教研室
出处
《微生物与感染》
2011年第4期225-230,共6页
基金
国家自然科学基金(81071364)
国家重点基础研究发展计划(973)(2009CB522503)
+1 种基金
"十一五"国家科技重大专项(2012ZX10004-801-002-005)
上海市重点建设学科(B901)
文摘
丙型肝炎病毒(HCV)包膜E2蛋白氨基端的高变区1(HVR1)由27个氨基酸组成,是HCV蛋白中变异频率最高的肽段。HVR1含中和抗体表位,同时对HCV细胞侵入起重要作用,其结构与功能的关系目前尚不清楚。本研究对H77株包膜蛋白基因中的HVR1进行了一系列缺失突变,然后将突变体表达质粒与假病毒包装质粒共转染人胚肾(HEK)293T细胞,用蛋白免疫印迹法检测细胞中HCV包膜E2蛋白的表达,用荧光定量聚合酶链反应检测培养上清液中的HCV假病毒(HCVpp)含量,以人肝癌细胞Huh7.5为靶细胞检测HCVpp的感染力。结果显示,缺失整个HVR1或HVR1中部分氨基酸残基对HCV包膜蛋白表达及HCVpp产量均无明显影响,但对HCVpp感染力产生不同影响。缺失第16～24位氨基酸残基导致HCVpp感染力增强,缺失第1～8位或1～12位氨基酸残基仅部分降低HCVpp感染力,缺失第13～15位和25～27位中的任意一个氨基酸残基均导致HCVpp感染力低于原型的5%。结果提示,HVR1中第13～15位和25～27位的6个氨基酸是介导HCV感染的关键氨基酸残基。
关键词
丙型肝炎病毒
高变区1
侵入细胞
关键氨基酸残基
Keywords
Hepatitis C virus
Hypervariable region 1
Cell entry
Key amino acid residue
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
含CpG免疫刺激序列的质粒增强HBsAg诱导的免疫应答
2
作者
解冰
唐紫薇
劳文
光
李建军
王岩
朱诗应
陶清源
戚中田
赵平
陈志辉
机构
第二军医大学基础部微生物学教研室
中国人民解放军总政治部机关门诊部
第二军医大学长海医院感染科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期145-149,共5页
基金
国家自然科学基金(30500452
30771929)
上海市重点建设学科基金(B901)~~
文摘
目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细胞因子IFN-γ、IL-12,进一步将重组HBsAg分别联合这两种质粒免疫小鼠,检测小鼠的细胞和体液免疫应答。结果质粒pKO-CG6与载体pKO在体外均能有效激活健康人及HBV感染者PBMC增殖反应,并促进IFN-γ、IL-12的产生,其中pKO-CG6的免疫刺激活性强于载体pKO。小鼠体内试验表明,虽然载体pKO也具有免疫佐剂作用,但pKO-CG6更能显著增强HBsAg诱导的免疫应答,尤其是细胞免疫应答。结论含有多拷贝D型CpG ODN的质粒能有效激活HBV感染者的PBMC,并增强HBsAg在小鼠体内的免疫原性。
关键词
乙型肝炎病毒
CPG寡脱氧核苷酸
质粒
免疫佐剂
Keywords
hepatitis B virus
CpG oligodeoxynucleotides
plasmids
immunologic adjuvants
分类号
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
分析化学设计性实验教学的探讨
被引量：
2
3
作者
周婷婷
劳文
光
逄志骏
臧兴禹
闻俊
范国荣
机构
第二军医大学药学院药物分析学教研室
上海市药物(中药)代谢产物研究重点实验室
出处
《基础医学教育》
2012年第3期203-205,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30801541)
上海市教委重点课程建设基金资助项目(药物分析学)
文摘
分析化学自主设计性实验教学,采用学生分组的实施方法,首先通过文献检索研读与分析,综述已有的实验技术,提出小组的实验方案。其次组员与教师一起对实验方案中的难点与关键技术进行讨论和总结,完善实验方案。第三,学生按照既定的实验方案实施,并且根据实验过程中的问题,修正实验方法,完成实验。最后,学生撰写实验报告并进行汇报,与教师一起交流经验,分享成果,发挥了学生主观能动性,锻炼了实践能力,培养了创新思维。
关键词
分析化学
实验教学
实践能力
Keywords
analytical chemistry
experimental teaching
practice competence
分类号
R916 [医药卫生—药学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
丙型肝炎病毒高变区1中介导感染的关键氨基酸残基鉴定
解冰
劳文
光
刘文宇
关默
刘小青
陶清源
王岩
赵平
戚中田
《微生物与感染》
2011
0
下载PDF
职称材料
2
含CpG免疫刺激序列的质粒增强HBsAg诱导的免疫应答
解冰
唐紫薇
劳文
光
李建军
王岩
朱诗应
陶清源
戚中田
赵平
陈志辉
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
下载PDF
职称材料
3
分析化学设计性实验教学的探讨
周婷婷
劳文
光
逄志骏
臧兴禹
闻俊
范国荣
《基础医学教育》
2012
2
下载PDF
职称材料
已选择
0
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