FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法的优化和应用 被引量：10

1

作者 刘锡娟 丁慧荣 张宏 《生物学通报》 北大核心 2010年第3期51-55,共5页

对FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法进行优化和应用。通过对液流的调节,获得较稳定的分选设定值;在96孔微孔板盖上分选肉眼可见液滴,确定分选液滴在96孔微孔板每孔相对应的盖上的位置;分选结束后,计数单个细胞存在的细胞孔... 对FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法进行优化和应用。通过对液流的调节,获得较稳定的分选设定值;在96孔微孔板盖上分选肉眼可见液滴,确定分选液滴在96孔微孔板每孔相对应的盖上的位置;分选结束后,计数单个细胞存在的细胞孔数;分选细胞培养7d后,记录单个细胞存在孔数及单克隆形成的数量。结果5个细胞形成的液滴即肉眼清晰可见;96微孔板有单个细胞的孔数为80～90个,单个细胞获得率为83.3%～93.7%,培养7d后,有活细胞存在的孔数为5～38孔,即单克隆形成率为6.3%～42.2%。分选前在96孔微孔板板盖上分选肉眼可见液滴的简单方法使得对液流位置的判断直观可见;流式细胞仪96孔微孔板单细胞分选是一种简单易行,准确有效地获得单个细胞和单克隆的方法。 展开更多

关键词 流式细胞仪 96孔微孔板 分选 单个细胞 自动细胞设置分选装置(ACDU)

下载PDF 职称材料

FACSAria流式细胞仪无菌操作分选高纯度细胞亚群 被引量：7

2

作者 刘锡娟 丁慧荣 +2 位作者 田志华 韩海勃 张宏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第12期1811-1815,共5页

BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和... BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和阴性细胞亚群。将所有分选的细胞进行培养检测无菌状态,并观察细胞生长情况。FACSAria流式细胞仪分选得到的GFP阳性细胞群的分选纯度达99.6%,GFP阴性细胞群的分选纯度达98.8%,同时激光共聚焦荧光显微镜显示分选后的GFP阳性细胞明显富集;分选后的BGC823细胞和SMMC7721细胞常规培养,细胞均无污染且生长状态良好。 展开更多

关键词 流式细胞仪 无菌分选 高纯度

下载PDF 职称材料

人肺癌细胞原位移植瘤小鼠模型免疫细胞的多色流式细胞术检测方法的建立 被引量：5

3

作者 杨敏 燕翔 +4 位作者 刘锡娟 安国 丁慧荣 蔡英 葛会争 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第1期99-106,共8页

目的对肺癌原位接种的小鼠模型,设计并建立了11色的免疫细胞分类方法,对肿瘤微环境中的T细胞、巨噬细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞进行更加细致的分型,从而获得有关影响肿瘤细胞进展的研究手段。方法建立11色的上皮细胞、T细胞... 目的对肺癌原位接种的小鼠模型,设计并建立了11色的免疫细胞分类方法,对肿瘤微环境中的T细胞、巨噬细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞进行更加细致的分型,从而获得有关影响肿瘤细胞进展的研究手段。方法建立11色的上皮细胞、T细胞、巨噬细胞和NK细胞的标志物荧光基团的搭配方案,对有免疫功能的小鼠血液样本进行鉴定。进一步原位接种PC-9细胞于裸鼠体内,通过该搭配方案分析鉴定M1型、M2型巨噬细胞,以及不同成熟程度的NK细胞。结果11色免疫细胞的搭配方案能够使各种标志物发挥到最大的荧光效应,减少荧光串色。对小鼠血液标本,通过流式细胞学分析可以得到准确的淋巴细胞、巨噬细胞和NK细胞的分类和分型。对原位移植瘤样本,能够更精准的区分肿瘤细胞和各种免疫细胞及细胞亚型。采用溶瘤病毒干预措施,发现干预后的免疫细胞各个分型之间差异有统计学意义。结论在原位移植瘤的模型中,该11色免疫细胞的流式荧光抗体搭配方案可以对肿瘤微环境中的多种免疫细胞进行精确分类,为研究不同免疫细胞和肿瘤细胞之间的相互作用提供了有效的手段,并可以应用于大量的肿瘤微环境研究中。 展开更多

关键词 多色流式细胞术 肺癌 原位移植 免疫微环境 免疫细胞 溶瘤病毒

下载PDF 职称材料

柯达伊教学法在高校音乐教学中的应用

4

作者 刘锡娟 《戏剧之家》 2024年第19期190-192,共3页

随着素质教育的不断推进,高校音乐教学的重要性逐步凸显,有必要在高校音乐教学中引入各种新的教学方法。柯达伊教学法作为一种强调人声的音乐教学方法,将其应用于高校音乐教学中,可以促进学生音乐素养的提高,形成健全的音乐品格,具有较... 随着素质教育的不断推进,高校音乐教学的重要性逐步凸显,有必要在高校音乐教学中引入各种新的教学方法。柯达伊教学法作为一种强调人声的音乐教学方法,将其应用于高校音乐教学中,可以促进学生音乐素养的提高,形成健全的音乐品格,具有较高的音乐价值。本文从柯达伊教学法的内涵特征入手,梳理了柯达伊教学法在高校音乐教学中的应用思路,探讨了柯达伊教学法在高校音乐教学中的应用策略,以期为高校音乐教学的相关研究提供一些参考。 展开更多

关键词 柯达伊教学法 高校 音乐教学 音乐素养

下载PDF 职称材料

高校音乐教育与民族文化传承的融合发展

5

作者 刘锡娟 《当代音乐》 2024年第6期59-61,共3页

本文探讨了高校音乐教育在民族文化传承中的重要性,分析了现存的问题,如民族音乐与文化素养教育的对接问题,民族文化符号在教学创新中的应用研究欠缺,实习基地建设和管理模式待优化等。针对这些问题,提出了推进音乐课程与民族文化素养... 本文探讨了高校音乐教育在民族文化传承中的重要性,分析了现存的问题,如民族音乐与文化素养教育的对接问题,民族文化符号在教学创新中的应用研究欠缺,实习基地建设和管理模式待优化等。针对这些问题,提出了推进音乐课程与民族文化素养教育融合,引入民族文化符号学改革教学方法,多样化实习基地建设与管理,以及构建系统化的民族音乐文化传承人才培养体系的解决方案。高校音乐教育需在理论与实践、传承与创新之间找到平衡,以更好地服务于民族文化的传承与发展。 展开更多

关键词 高校音乐教育 民族文化传承 课程设置

下载PDF 职称材料

初中信息技术教学中学案导学的必要性 被引量：1

6

作者 张玫 刘锡娟 《中小学电教（综合）》 2014年第6期63-64,共2页

随着网络与多媒体技术的飞速发展,现代教育技术在中小学新课程改革中发挥着越来越重要的作用,传统的以教师为中心的课堂教学模式越来越不适应教学改革的发展。因此,如何提高课堂教学效率、充分保障教学活动中学生的主体地位成为摆在中... 随着网络与多媒体技术的飞速发展,现代教育技术在中小学新课程改革中发挥着越来越重要的作用,传统的以教师为中心的课堂教学模式越来越不适应教学改革的发展。因此,如何提高课堂教学效率、充分保障教学活动中学生的主体地位成为摆在中小学教师以及教育工作者面前的一大课题。本文就在实际教学过程中的一些探索和体会,通过不同课型中新旧两种教学方式的比较来具体分析信息技术学科两种教学方式的区别,进而得出信息技术教学中学案导学的必要性以及＂以学生为中心＂的教学模式的重要意义。 展开更多

关键词 信息技术教学 学案导学 教学模式 教学改革

原文传递

自体调节性T细胞可抑制恶性淋巴瘤细胞的增殖 被引量：1

7

作者 应志涛 郭军 +8 位作者 任军 孔艳 袁志宏 刘锡娟 张晨 郑文 宋玉琴 张运涛 朱军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期583-587,共5页

本研究探讨自体调节性T细胞对T细胞淋巴瘤细胞系EL4的作用及其机制。应用免疫磁珠分离法(MACS)分选获得C57BL/6小鼠CD4+CD25+T细胞(Treg细胞),流式细胞术检测细胞纯度及Foxp3表达情况,MTT比色法检测分选的Treg细胞对T细胞淋巴瘤细胞系EL... 本研究探讨自体调节性T细胞对T细胞淋巴瘤细胞系EL4的作用及其机制。应用免疫磁珠分离法(MACS)分选获得C57BL/6小鼠CD4+CD25+T细胞(Treg细胞),流式细胞术检测细胞纯度及Foxp3表达情况,MTT比色法检测分选的Treg细胞对T细胞淋巴瘤细胞系EL4的体外抑制作用,应用ELISA方法检测TGF-β1和IL-10的含量。结果表明:MACS分选获得CD4+CD25+T细胞纯度达91.6%,活细胞比例>95%,Foxp3表达率为78.9%。MTT比色法证实自体Treg细胞在体外能够明显抑制EL4细胞的增殖(p<0.05),且呈细胞因子非依赖性。作者首次证明,自体Treg细胞体外有明显抑制T细胞淋巴瘤细胞系EL4增殖的作用。 展开更多

关键词 调节性T细胞 淋巴瘤 FOXP3 EL4细胞系

下载PDF 职称材料

人工智能时代财务会计向管理会计的转型探索 被引量：2

8

作者 刘锡娟 《商业文化》 2021年第1期137-139,共3页

人工智能时代的到来影响着各行各业的发展趋向。在会计制度体系中,财务会计向管理会计的转型已经成为一种十分明显发展趋向。针对会计行业内的职业转型的研究,本文对智能时代的特点,财务会计和管理会计之间的区别和联系进行了阐述;对转... 人工智能时代的到来影响着各行各业的发展趋向。在会计制度体系中,财务会计向管理会计的转型已经成为一种十分明显发展趋向。针对会计行业内的职业转型的研究,本文对智能时代的特点,财务会计和管理会计之间的区别和联系进行了阐述;对转型过程中存在的问题进行了分析;并针对已出现的主要问题提出了部分合理的建议。望在人工智能时代,财务会计向管理会计的转型能顺利进行,保证国家工商业制度体系和国家经济健康发展。 展开更多

关键词 人工智能 财务会计 管理会计 转型

下载PDF 职称材料

托尼·莫里森在《宠儿》中的集体主义意识——写作中成长的非裔女作家

9

作者 王莉萍 刘锡娟 《南昌教育学院学报》 2013年第8期17-18,共2页

从上个世纪70年代后托尼.莫里森相继发表的五篇主要作品里可以看出这位生长于美国白人个人主义文化语境中的非裔黑人女作家在写作中不断寻找自己的民族历史和身份、思想意识不断成长和成熟的轨迹。在《宠儿》这部作品中莫里森尤其强化... 从上个世纪70年代后托尼.莫里森相继发表的五篇主要作品里可以看出这位生长于美国白人个人主义文化语境中的非裔黑人女作家在写作中不断寻找自己的民族历史和身份、思想意识不断成长和成熟的轨迹。在《宠儿》这部作品中莫里森尤其强化了自己的集体主义意识,认为黑人个体只有依靠家庭和社区集体的力量,团结起来,才能走出困境。 展开更多

关键词 托尼·莫里森 《宠儿》 集体主义意识

下载PDF 职称材料

词汇学习在外语教育基础阶段的重要性

10

作者 王莉萍 刘锡娟 《佳木斯教育学院学报》 2010年第2期10-11,共2页

随着西方语言流派和以多媒体为主的现代科技教学手段的兴起,近年来的外语教学越来越多地注重其教学方法和语言目的的策略研究,因而忽视了传统外语教学对语言构成的三大要素,尤其是词汇的基础性地位的认识。本文拟通过综合阐述国内外对... 随着西方语言流派和以多媒体为主的现代科技教学手段的兴起,近年来的外语教学越来越多地注重其教学方法和语言目的的策略研究,因而忽视了传统外语教学对语言构成的三大要素,尤其是词汇的基础性地位的认识。本文拟通过综合阐述国内外对词汇学习在外语学习中的地位和作用的研究,呼吁在基础外语教育阶段要重视词汇学习,提高对词汇量的教学要求。 展开更多

关键词 外语教学 词汇学习 词汇量

原文传递

中学数学概念记忆困难分析及应对策略

11

作者 刘锡娟 《湖南教育（数学教师）》 2006年第2期24-25,共2页

关键词 数学概念 记忆能力 中学 数学公式 数学定理 对症下药 认知理论

下载PDF 职称材料

敬畏耶和华是智慧的开端——刘姊妹的见证

12

作者 刘锡娟 《天风》 北大核心 2002年第1期50-51,共2页

生命与生活是不可分的,有美好的生命必然有美好的生活见证。在人生的导航中认识神,在工作中经历主爱的激励,在神学与信仰的反思中,看到重建中国教会和神学思想重新活跃的必然。

关键词 耶和华 敬畏 国教 上帝 教堂 智慧 开端 神秘 简朴

下载PDF 职称材料

用DAPI和Hoechst33342染色法检测DNA的流式细胞方法探讨 被引量：21

13

作者 刘锡娟 丁慧荣 张宏 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期480-484,共5页

目的:探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术。方法:分别用DAPI、Hochest和PI3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果。用标准荧光微球和DNA质量控... 目的:探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术。方法:分别用DAPI、Hochest和PI3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果。用标准荧光微球和DNA质量控制试剂盒做测试质控。结果:质控实验显示,紫外激光的变异系数(CV)为2.4;DAPI和Hoechst33342标记的小鸡红细胞核(chicken erythrocyte nuclei,CEN)出现4个峰,第2、第3和第4峰所在道数的平均值与第1峰的比值为2、3、4,且第1峰的CV均为2.4。DAPI、Hoechst33342标记小牛胸腺细胞核(calf thymocyte nuclei,CTN)出现2个峰,G2/G1为1.97,且G0/G1峰的CV为2.4。DAPI、Hoechst33342和PI3种染料标记的HT-29细胞呈现完整的细胞周期峰,结果分别为CV值3.40、3.02和4.42,G0/G1期含量为60.86%、60.22%和60.81%,S期含量为28.85%、29.70%和29.82%,G2/M期含量为10.29%、9.09%和9.37%,3种标记法测定结果一致。结论:本文探索的DAPI和Hoechst33342标记法简单易行,可作为具备紫外激光器的流式细胞仪的首选DNA荧光染料。 展开更多

关键词 染色与标记 流式细胞术 DNA 细胞周期

下载PDF 职称材料

GFP/DNA双标记法流式细胞仪分析荧光补偿调节方法的建立

14

作者 丁慧荣 刘锡娟 +1 位作者 田志华 张宏 《生物学通报》 2012年第6期54-58,共5页

用PI或Hoechst 33342标记表达GFP基因的BGH 823细胞DNA,流式检测分析时,需要做荧光补偿。以此为例,建立了线性(DNA含量)和对数(GFP表达量)放大信号之间的荧光补偿调节方法。结果表明,建立的补偿调节方法对于GFP/DNA双标记实验,完全适用... 用PI或Hoechst 33342标记表达GFP基因的BGH 823细胞DNA,流式检测分析时,需要做荧光补偿。以此为例,建立了线性(DNA含量)和对数(GFP表达量)放大信号之间的荧光补偿调节方法。结果表明,建立的补偿调节方法对于GFP/DNA双标记实验,完全适用和有效;它既实现了在同一散点图上同时呈现线性与对数放大,也提供了对数和线性2种不同荧光信号参数发生荧光重叠时进行补偿调节的方法。 展开更多

关键词 流式细胞术 绿色荧光蛋白(GFP)DNA含量 荧光补偿 对数放大 线性放大

下载PDF 职称材料

神秘的北纬30°区

15

作者 刘锡娟 《国防》 1992年第8期44-44,共1页

地球上北纬30°线所经过的地区,有许多不可思议又无法解释的怪事情。世界上最长的几条大河,如中国的长江,伊拉克的幼发拉底河以及美国的密西西比河都在北纬30°处入海。地球上最高的珠穆朗玛峰,最深的西太平洋马里亚纳海沟,也... 地球上北纬30°线所经过的地区,有许多不可思议又无法解释的怪事情。世界上最长的几条大河,如中国的长江,伊拉克的幼发拉底河以及美国的密西西比河都在北纬30°处入海。地球上最高的珠穆朗玛峰,最深的西太平洋马里亚纳海沟,也都在北纬30°附近。 展开更多

关键词 西太平洋 四川省自贡市 哈拉 百慕大三角区 火神 资任 达西 刘锡 令人

下载PDF 职称材料

一张检讨书

16

作者 刘锡娟 《家庭与家教》 2003年第1期17-,共1页

在我家最醒目的地方贴着一张检讨书.这不是一张孩子写的检讨书,而是一位不称职的母亲用钢笔一笔一画、端端正正地向孩子写的一张检讨书.而这位不称职的母亲就是我.每当我看到这张已有点陈旧且卷角的检讨书时,我的心就会涌起一股内疚和不... 在我家最醒目的地方贴着一张检讨书.这不是一张孩子写的检讨书,而是一位不称职的母亲用钢笔一笔一画、端端正正地向孩子写的一张检讨书.而这位不称职的母亲就是我.每当我看到这张已有点陈旧且卷角的检讨书时,我的心就会涌起一股内疚和不安,仿佛再次看到了孤立无助的女儿那双泪汪汪的大眼睛. 展开更多

关键词 检讨书 思考题

原文传递