期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到108篇文章
< 1 2 … 6 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
大鼠脑组织单胺类递质及其代谢产物的检测方法研究 被引量：22
1
作者 刘师莲 张兆莲 +4 位作者 刘贤锡 刘传华 张峰 秦延江 祁维平 《山东大学学报（医学版）》 CAS 2002年第5期472-473,475,共3页
目的 :研究大鼠脑组织中单胺类递质及其代谢产物的高效液相反相离子对色谱测定法。方法 :采用LiChrosorbC18,10 μm色谱柱 ,流动相为甲醇 :水 (4 0 :60 ) ,含 0 .0 2 8g LEDTANa2 ,0 .15g LSDS ,0 .2ml LH2 SO4(pH 2 .5～ 3 ) ,荧光检... 目的 :研究大鼠脑组织中单胺类递质及其代谢产物的高效液相反相离子对色谱测定法。方法 :采用LiChrosorbC18,10 μm色谱柱 ,流动相为甲醇 :水 (4 0 :60 ) ,含 0 .0 2 8g LEDTANa2 ,0 .15g LSDS ,0 .2ml LH2 SO4(pH 2 .5～ 3 ) ,荧光检测波长 :λEX=2 85 ,λEM=3 3 3。结果 :对 87只大鼠脑组织中 4种单胺类递质及其代谢产物的含量进行了同时测定 ,高香草酸 (HVA) 2 .5 0～ 40 .0 μg ml、去甲肾上腺素 (NE) 0 .0 1～ 0 .5 0 μg ml、多巴胺 (DA)0 .0 5～ 1.0 0 μg ml、5 羟色胺 (5 HT) 0 .0 2 5～ 0 .5 0 μg ml,峰面积与其含量呈良好的线性关系。 结论 :该法操作简便、快速、准确 ,为组织中单胺类递质及其代谢产物检测的一种理想方法 ,并适用于临床相关研究。 展开更多
关键词 脑组织单胺类递质 代谢产物 神经调节剂 高压液相色谱法 大鼠 近交系
下载PDF
HPLC法同时测定人血浆中舒必利、氯氮平、氯丙嗪浓度 被引量：21
2
作者 刘师莲 刘传华 +3 位作者 秦延江 赵全芹 刘贤锡 李逢利 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期365-368,共4页
目的:建立同时测定人血浆中舒必利、氯氮平、氯丙嗪药物浓度的高效液相色谱方法。方法:血浆样品用乙酸乙酯萃取,氮气吹干;残留物用甲醇溶解后进样。色谱柱为C_(18)柱(250 mm×4.6mm),流动相为甲醇-水(80:20,含0.5％三乙胺和0.05％... 目的:建立同时测定人血浆中舒必利、氯氮平、氯丙嗪药物浓度的高效液相色谱方法。方法:血浆样品用乙酸乙酯萃取,氮气吹干;残留物用甲醇溶解后进样。色谱柱为C_(18)柱(250 mm×4.6mm),流动相为甲醇-水(80:20,含0.5％三乙胺和0.05％冰醋酸,pH=7.6～7.8),流速:1.0mL·min^(-1),柱温:35T,紫外检测波长:250nm。结果:本法可同时测定血浆中3种药物浓度。舒必利在0.2～1.0μg·mL^(-1)、氯氮平在0.05～1.0μg·mL^(-1)、氯丙嗪在0.01～0.16μg·mL^(-1)范围内,峰面积与其浓度呈良好的线性关系;日内RSD分别为2.9％～3.9％,3.1％～4.1％,3.0％～4.3％;日间RSD分别为3.9％～4.8％,3.8％～5.1％,4.3％～5.3％(n=4)。结论:方法简便、快速、准确,适用于舒必利、氯氮平、氯丙嗪3种药物临床血药浓度的同时检测。 展开更多
关键词 血浆 舒必利 氯氮平 氯丙嗪 血药浓度 抗精神病药 高效液相色谱
下载PDF
人ODC基因第三外显子反义RNA腺病毒载体的构建 被引量：9
3
作者 张岩 刘贤锡 +3 位作者 胡海燕 耿昭 王晓明 张冰 《山东大学学报（医学版）》 CAS 2003年第4期371-374,共4页
目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因第三外显子反义RNA的腺病毒载体。方法:RT-PCR方法克隆出人ODC基因第三外显子的片段,插入pMD18-T载体中,经SalⅠ、BglⅡ酶切,插入穿梭质粒pAd-Track-CMV形成重组质粒pAdTrack-CMV-ODCr。经PmeⅠ酶切线... 目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因第三外显子反义RNA的腺病毒载体。方法:RT-PCR方法克隆出人ODC基因第三外显子的片段,插入pMD18-T载体中,经SalⅠ、BglⅡ酶切,插入穿梭质粒pAd-Track-CMV形成重组质粒pAdTrack-CMV-ODCr。经PmeⅠ酶切线性化后,转入pAdesy-1细菌中与含腺病毒基因骨架的质粒pAdesy-1同源重组。将重组质粒pAdesy-ODCr经PacⅠ酶切后,转染293细胞包装成腺病毒颗粒,经荧光显微镜和PCR方法对重组腺病毒进行鉴定。结果:用RT-PCR方法从人前列腺癌组织中扩增出120bp的cDNA片段,经测序证实为ODC基因第三外显子的片段。重组质粒pAdTrack-CMV-ODCr转入pAdesy-1细菌中获得多个阳性克隆。重组质粒pAdesy-ODCr转染293细胞进行包装,经荧光显微镜观察可见其在293细胞中表达。进一步通过PCR法证实其含有目的基因。结论:成功地构建了ODC基因第三外显子反义RNA重组腺病毒载体,为研究其抗肿瘤的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 腺病毒载体 反义RNA 外显子
下载PDF
大肠癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义研究 被引量：7
4
作者 孙爱华 刘贤锡 +5 位作者 何庆泗 刘传华 胡海燕 王伟 张岩 张冰 《中国现代普通外科进展》 CAS 2004年第3期150-152,共3页
目的 :研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因在结直肠癌中的表达 ,探讨其在大肠癌形成中的作用。方法 :建立测定ODC基因mRNA表达的逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)最适条件 ,在半定量水平测定 31例结直肠癌的癌旁正常组织和癌组织中的ODCmRNA表达的... 目的 :研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因在结直肠癌中的表达 ,探讨其在大肠癌形成中的作用。方法 :建立测定ODC基因mRNA表达的逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)最适条件 ,在半定量水平测定 31例结直肠癌的癌旁正常组织和癌组织中的ODCmRNA表达的相对水平 ,观察其与临床病理学指标的关系。结果 :31例结直肠癌中ODC基因表达较癌旁正常组织高 ,差异显著 (P <0 .0 1) ,ODC基因表达在性别、病理类型之间差异无显著意义 (P >0 .0 5 ) ,在Dukes分期之间差异有显著意义 (P =0 .0 12 )。结论 :ODC在大肠癌组织中表达增高并与恶性程度呈正相关 ,提示ODC表达增加与大肠癌发生、浸润及转移有关 ,为大肠癌病因及诊断和治疗方法研究提供了实验依据。 展开更多
关键词 结直肠肿籀·鸟氨酸脱羧酶·基因表达
下载PDF
RP-HPLC法测定六味地黄丸中没食子酸的含量 被引量：9
5
作者 刘传华 解希田 +3 位作者 刘贤锡 贾继辉 刘师莲 王晓明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期590-591,共2页
目的:建立 RP-HPLC 法测定六味地黄丸中没食子酸含量的方法。方法:色谱柱:日本岛津 GL Sciences Inc.C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%醋酸水溶液(30∶70),流速:1mL·min^(-1),检测波长为273nm。结果:没食子酸在4-40... 目的:建立 RP-HPLC 法测定六味地黄丸中没食子酸含量的方法。方法:色谱柱:日本岛津 GL Sciences Inc.C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%醋酸水溶液(30∶70),流速:1mL·min^(-1),检测波长为273nm。结果:没食子酸在4-40μg·mL^(-1)范围内,峰面积积分值与浓度呈良好的线性关系(r=0.9995);平均回收率为99.5%,RSD 为2.1%。结论:该法准确、快速、灵敏,重复性好。 展开更多
关键词 RP-HPLC法测定 六味地黄丸 没食子酸 平均回收率 日本岛津 检测波长 线性关系 酸含量 色谱柱 水溶液 流动相 积分值 峰面积 RSD 重复性
下载PDF
质粒载体系统介导的人肿瘤细胞RNA干扰作用 被引量：7
6
作者 宋现让 柳永蕾 +2 位作者 刘贤锡 魏玲 王兴武 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第9期807-812,共6页
目的研究质粒载体介导的肿瘤细胞RNA干扰效果.方法构建以H1 RNA为启动子的针对GFP基因不同序列片段的RNAi质粒pLasRiGFP1/2/3.将其与pcdna3.1EGFP共转染HEK293、Hela和SPCA1细胞或单独转染SPCA1-GFP,用倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪分... 目的研究质粒载体介导的肿瘤细胞RNA干扰效果.方法构建以H1 RNA为启动子的针对GFP基因不同序列片段的RNAi质粒pLasRiGFP1/2/3.将其与pcdna3.1EGFP共转染HEK293、Hela和SPCA1细胞或单独转染SPCA1-GFP,用倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪分析GFP表达.结果 pLasRiGFP1、pLasRiGFP2和pLasRiGFP3在HEK293中对GFP表达的抑制率分别为97.5%、97%和89%,Hela细胞中为83%、90%和90%,SPCA1细胞中为65%、55%和40%.pLasRiGFP1与pLasRiGFP2在SPCA1-GFP细胞对GFP的抑制率分别为53%和58%.RNAi作用在48～96 h最强,并随RNAi质粒增加抑制效果呈增强趋势,但到达一定量后作用趋势平缓.结论 H1 RNA为启动子的RNAi质粒能有效介导肿瘤细胞RNAi,其作用存在剂量和时间效应,受靶序列、细胞类型等因素的影响. 展开更多
关键词 RNA干扰 肿瘤细胞 质粒载体 GFP
下载PDF
前列腺癌的早期信号——IGF-I 被引量：9
7
作者 迟伟玲 刘贤锡 《生命的化学》 CAS CSCD 1999年第1期39-40,共2页
前列腺癌是男性易发的疾病，在欧美发病率极高，在高龄男性中仅次于肺癌。我国前列腺癌发病率在逐渐增加。人前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）是前列腺上皮分泌的一种糖蛋白。前列腺癌发生时会释放大量ＰＳＡ进入血液，因此测定血清ＰＳＡ在... 前列腺癌是男性易发的疾病，在欧美发病率极高，在高龄男性中仅次于肺癌。我国前列腺癌发病率在逐渐增加。人前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）是前列腺上皮分泌的一种糖蛋白。前列腺癌发生时会释放大量ＰＳＡ进入血液，因此测定血清ＰＳＡ在前列腺癌的诊断和治疗后追踪方面有重... 展开更多
关键词 前列腺癌 早期信号 IGF-Ⅰ
下载PDF
ODC,AdoMetDC双反义腺病毒对肺癌增殖和侵袭抑制作用的体外和体内研究(英文) 被引量：9
8
作者 田辉 刘贤锡 +2 位作者 张冰 孙启峰 孙东峰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第7期709-717,共9页
鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-甲硫氨酸脱羧酶(AdoMetDC)是多胺体内合成的2个关键酶.研究腺病毒Ad-ODC-AdoMetDCas介导的ODC和AdoMetDC反义RNA对肺癌多胺合成,细胞增殖以及侵袭的抑制作用.用活细胞计数和流式细胞术分别检测Ad-ODCas和Ad-ODC-Ad... 鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-甲硫氨酸脱羧酶(AdoMetDC)是多胺体内合成的2个关键酶.研究腺病毒Ad-ODC-AdoMetDCas介导的ODC和AdoMetDC反义RNA对肺癌多胺合成,细胞增殖以及侵袭的抑制作用.用活细胞计数和流式细胞术分别检测Ad-ODCas和Ad-ODC-AdoMetDCas对肺癌A-549细胞增殖的影响,蛋白质印迹和HPLC方法分别检测腺病毒对肺癌A-549细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺含量的抑制作用,TUNEL标记检测法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对肺癌细胞凋亡的影响,Matrigel侵袭实验分析腺病毒对肺癌A-549细胞侵袭活性的改变,裸鼠皮下移植瘤模型研究Ad-ODC-AdoMetDCas对体内肺癌生长的抑制作用.实验结果显示,Ad-ODC-AdoMetDCas明显抑制肺癌A-549细胞的增殖,导致细胞凋亡,显著降低肺癌A-549细胞的体外侵袭能力,肺癌A-549细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后细胞内3种多胺含量都明显降低,Ad-ODC-AdoMetDCas对已形成的裸鼠皮下移植瘤具有明显的抑制作用.实验表明,ODC和AdoMetDC双反义腺病毒具有显著抑制肺癌增殖和侵袭的作用,对于肺癌的防治研究具有一定的前景. 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 S-甲硫氨酸脱羧酶 多胺 肺癌 基因治疗
下载PDF
肺癌组织中乙酰肝素酶与血管内皮生长因子-C的表达 被引量：9
9
作者 田辉 刘贤锡 王善政 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第16期976-979,共4页
目的　探讨乙酰肝素酶 (HPSE)和血管内皮生长因子 C(VEGF C)的表达与肺癌发生、发展的关系。方法　应用免疫组织化学SABC法对 6 5例肺癌 (其中鳞癌 31例、腺癌 2 5例、大细胞癌3例、小细胞癌 6例 )患者的肺癌组织中HPSE和VEGF C蛋白的... 目的　探讨乙酰肝素酶 (HPSE)和血管内皮生长因子 C(VEGF C)的表达与肺癌发生、发展的关系。方法　应用免疫组织化学SABC法对 6 5例肺癌 (其中鳞癌 31例、腺癌 2 5例、大细胞癌3例、小细胞癌 6例 )患者的肺癌组织中HPSE和VEGF C蛋白的表达进行测定 ,并与癌旁组织和正常肺组织对比 ,结合肺癌的临床病理学特征及预后进行分析。结果　肺癌组织中HPSE和VEGF C蛋白的阳性率分别为 5 1% ( 33/6 5 )和 5 7% ( 37/6 5 ) ,明显高于正常肺组织的 5 % ( 3/6 5 )、6 % ( 4 /6 5 )和癌旁组织 9% ( 6 /6 5 )和 12 % ( 8/6 5 ) ( χ2 =34 6 ,38 8和 2 6 7,2 8 6 ;均P <0 0 1) ;不同病理类型、分化程度的肺癌组织中HPSE和VEGF C蛋白阳性率差异均无显著性 ( χ2 =0 39和 0 4 1,0 4 5和 0 0 4 ,均P >0 0 5 ) ;Ⅲ、Ⅳ期患者肺癌组织中HPSE和VEGF C蛋白阳性率均为 95 % ( 2 1/2 2 ) ,明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者的 2 8% ( 12 /43)和 37% ( 16 /43) ( χ2 =2 6 6和 2 0 1,P <0 0 1) ;生存 3年或以下的肺癌组织中HPSE和VEGF C蛋白阳性率 88% ( 2 2 /2 5 )和 96 % ( 2 4 /2 5 )明显高于生存 3年或以上者的 2 8%( 10 /36 )和 36 % ( 13/36 ) ( χ2 =2 1 5和 2 2 2 ,P <0 0 1)。结论　肺癌组织中存在HPSE和VEGF C的高表达 , 展开更多
关键词 肺癌组织 VEGF-C C蛋白 阳性率 血管内皮生长因子-C 高表达 患者 乙酰肝素酶 分化程度 生存
原文传递
抑癌基因p73 FHIT和PTEN蛋白表达与肺癌临床病理学特征及预后关系探讨 被引量：6
10
作者 田辉 刘贤锡 王善政 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期196-199,共4页
目的:探讨抑癌基因p73、FHIT和PTEN与肺癌发生、发展的关系。方法:应用免疫组化SABC法检测65例肺癌组织、癌旁组织和正常肺组织中p73、FHIT和PTEN基因蛋白的表达。结果:肺癌组织中p73蛋白阳性表达率明显高于正常肺组织和癌旁组织(P<0... 目的:探讨抑癌基因p73、FHIT和PTEN与肺癌发生、发展的关系。方法:应用免疫组化SABC法检测65例肺癌组织、癌旁组织和正常肺组织中p73、FHIT和PTEN基因蛋白的表达。结果:肺癌组织中p73蛋白阳性表达率明显高于正常肺组织和癌旁组织(P<0.05),正常肺组织和癌旁组织中FHIT和PTEN蛋白阳性表达率明显高于肺癌组织(P<0.05);不同类型和不同分化程度肺癌组织中p73、FHIT和PTEN蛋白的阳性表达率比较差异无显著性(P>0.05);肺癌组织中p73、FHIT和PTEN蛋白阳性表达率与临床分期和患者预后有明显相关性(P<0.05)。结论:p73、FHIT和PTEN基因蛋白表达缺失在不同类型和不同分化程度在肺癌发生、发展中可能存在着普遍意义,三者可作为判断肺癌生物学行为和患者预后的参考指标。 展开更多
关键词 肺肿瘤 抑癌基因p73 FHIT PTEN 免疫组织化学
下载PDF
鸟氨酸脱羧酶基因反义RNA对前列腺癌细胞生长的抑制作用 被引量：5
11
作者 张岩 刘贤锡 +2 位作者 张冰 胡海燕 龚磊 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期128-133,共6页
为研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因反义RNA对前列腺癌细胞的生长抑制作用 ,将表达ODC第 3外显子反义RNA的重组腺病毒rAd ODC Ex3as分别感染前列腺癌细胞株PC 3和LNCap .通过MTT法观察其对前列腺癌细胞增殖的影响 ,并确定不同细胞合适的感染... 为研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因反义RNA对前列腺癌细胞的生长抑制作用 ,将表达ODC第 3外显子反义RNA的重组腺病毒rAd ODC Ex3as分别感染前列腺癌细胞株PC 3和LNCap .通过MTT法观察其对前列腺癌细胞增殖的影响 ,并确定不同细胞合适的感染滴度 ,再采用Western印迹和流式细胞术检测rAd ODC Ex3as对细胞中ODC表达的抑制作用、对细胞周期和凋亡的影响以及与CDK抑制物p2 1的关系 .实验显示 ,rAd ODC Ex3as分别以 5 0MOI、2 5MOI感染PC 3和LNCap细胞可明显抑制其生长增殖 ,而不引起细胞毒性作用 ;其对两种细胞中ODC表达的抑制作用分别为4 5 %和 5 9% .流式细胞DNA含量分析证实 ,rAd ODC Ex3as可引起PC 3和LNCap细胞周期G1期阻滞 ,但并未引起凋亡 .通过Western印迹发现 ,细胞中ODC表达的降低可诱导p2 1蛋白的过表达 .结果表明 ,rAd ODC Ex3as在体外能有效地干扰ODC基因的表达 ,并通过诱导p2 1的过表达使其细胞周期停于G1期 ,从而抑制前列腺癌细胞PC 3和LNCap的增殖 ,为其进一步基因治疗的研究打下基础 . 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 腺病毒 基因治疗 反义RNA 前列腺癌细胞
下载PDF
亚麻籽木酚素的提取及其对裸鼠乳腺移植瘤生长的影响 被引量：5
12
作者 王晓蕾 张莲英 +4 位作者 胡晓燕 孙道旭 吴伟芳 刘传华 刘贤锡 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2007年第3期176-178,共3页
目的分离、纯化亚麻籽木酚素——开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷(SDG),并研究其对裸鼠乳腺移植瘤生长的影响。方法从亚麻籽中提取、纯化SDG,高效液相色谱分析其纯度;选用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231对裸鼠进行异种移植;第6周将移植成功的... 目的分离、纯化亚麻籽木酚素——开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷(SDG),并研究其对裸鼠乳腺移植瘤生长的影响。方法从亚麻籽中提取、纯化SDG,高效液相色谱分析其纯度;选用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231对裸鼠进行异种移植;第6周将移植成功的裸鼠随机分为3组:对照组、SDG组和亚麻籽组。每周测量瘤体大小并计算瘤表面积,同时记录裸鼠体重、摄食量。第10周处死动物,测量瘤体质量、瘤块大小,记录肿大淋巴结数。肝脏、肺脏进行病理切片检查。结果获得纯度为88.0%的SDG产品;与对照组相比,SDG、亚麻籽2组肿瘤表面积、瘤块质量、瘤体积明显降低(P<0.05),肿大淋巴结有所减少。各组动物体重及摄食量无明显差别,肝、肺均未见肿瘤转移。结论SDG可抑制裸鼠MDA-MB-231细胞乳腺移植瘤的生长。 展开更多
关键词 亚麻籽 木酚素 开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷 乳腺癌 裸鼠
下载PDF
通过T-A克隆技术构建含免疫刺激序列CpG基序的抗SBR DNA疫苗(英文) 被引量：4
13
作者 姜广水 刘贤锡 +4 位作者 杨小青 杨丕山 卞继峰 李静 耿昭 《北京口腔医学》 CAS 2002年第3期109-113,共5页
目的 :构建含免疫刺激序列、能够阻止变形链球菌在牙面粘附的防龋DNA疫苗。方法 :根据原核表达质粒 pS BR CTA2 B基因序列 ,设计针对编码变形链球菌表面蛋白抗原AgⅠ /Ⅱ分子中唾液蛋白结合区段 (SBR)的特异性PCR引物 ,利用PCR技术由质... 目的 :构建含免疫刺激序列、能够阻止变形链球菌在牙面粘附的防龋DNA疫苗。方法 :根据原核表达质粒 pS BR CTA2 B基因序列 ,设计针对编码变形链球菌表面蛋白抗原AgⅠ /Ⅱ分子中唾液蛋白结合区段 (SBR)的特异性PCR引物 ,利用PCR技术由质粒 pSBR CTA2 B扩增目的DNA片断 ;通过T A克隆技术将目的DNA片段克隆于中间载体 pMD1 8 T ,鉴定插入方向后 ,选择插入方向正确的克隆 ,将目的DNA从中间载体释放 ,再克隆至含有CpG免疫刺激序列的真核表达载体pcDNA3 1。结果 :通过对重组质粒pcDNA3 1 SBR进行酶切图谱分析和DNA序列测定分析 ,证明真核表达重组质粒 pcD NA3 1 SBR构建成功、开放阅读框架正确。结论 :利用T A克隆等技术可成功将编码SBR的DNA片段克隆到含有免疫刺激序列CpG的真核表达载体 pcDNA3 1的适当部位 ,构建出真核表达重组质粒pcDNA 3 1 展开更多
关键词 免疫刺激序列 CPG基序 龋病 DNA疫苗 T-A克隆
下载PDF
反义人端粒酶RNA亚基对胆囊癌端粒酶活性及细胞生长的抑制作用 被引量：4
14
作者 靳斌 姜希宏 +4 位作者 王学浩 王伟 徐克森 刘博 刘贤锡 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1422-1424,i020,共4页
目的　探讨反义RNA技术对胆囊癌细胞端粒酶活性的影响及对胆囊癌细胞生长增殖的作用。方法　根据测定的胆囊癌人端粒酶RNA亚基 (hTR)基因的序列结果 ,并根据真核表达载体多克隆酶切位点的物理图谱 ,体外合成反义RNA及正义RNA的基因序列 ... 目的　探讨反义RNA技术对胆囊癌细胞端粒酶活性的影响及对胆囊癌细胞生长增殖的作用。方法　根据测定的胆囊癌人端粒酶RNA亚基 (hTR)基因的序列结果 ,并根据真核表达载体多克隆酶切位点的物理图谱 ,体外合成反义RNA及正义RNA的基因序列 ,并构建入 pTriEx 4真核表达载体 ,酶切鉴定正确后 ,采用脂质转染法导入胆囊癌细胞。TRAP法检测端粒酶活性 ,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况 ,电镜观察细胞微观形态变化。结果　实验组胆囊癌细胞的端粒酶活性较对照组明显减低 ,正义组、转染空载体及单纯脂质体转染的细胞端粒酶活性与未转染细胞比较则变化不明显。反义RNA基因作用后 ,G0 /G1期细胞比例明显增高 ,S期细胞比例明显降低。细胞的分裂、增殖受到明显抑制。反义RNA基因转化后 ,10d凋亡率为 11.10 %。 13d后凋亡率为 2 9.0 2 %。电镜下可见明显凋亡细胞。结论　反义RNA技术对胆囊癌细胞端粒酶活性有明显的抑制作用 ;并抑制胆囊癌细胞的生长 ,促进细胞的凋亡 ;且克服了反义寡核苷酸作用时间短的缺点。 展开更多
关键词 胆囊癌 端粒酶活性 端粒酶RNA 癌细胞 反义RNA 凋亡率 抑制作用 酶切位点 真核表达载体 基因作用
原文传递
抗弓形虫M cA b的建立及应用研究 被引量：4
15
作者 张洪花 赵丽 +7 位作者 王昌源 刘贤锡 韩广东 甄天民 刘湘萍 公茂庆 刘凤梅 刘玉磊 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第2期109-111,共3页
应用杂交瘤技术 ,建立了 5株分泌抗弓形虫单克隆抗体的杂交瘤细胞。其中 1E9和 4C10 2株分泌的 Mc Ab效价达 1∶ 12 80 0。该 2株单克隆抗体均属 Ig G1亚类 ,其识别的弓形虫抗原分别为 P2 2、P2 8。1E9和 4C10 Mc Ab混合后与兔抗弓形虫... 应用杂交瘤技术 ,建立了 5株分泌抗弓形虫单克隆抗体的杂交瘤细胞。其中 1E9和 4C10 2株分泌的 Mc Ab效价达 1∶ 12 80 0。该 2株单克隆抗体均属 Ig G1亚类 ,其识别的弓形虫抗原分别为 P2 2、P2 8。1E9和 4C10 Mc Ab混合后与兔抗弓形虫抗体联合 ,进行双抗体夹心 EL ISA测定弓形虫的敏感性分别为 12 .5和 2 5个虫体 / m l。检测 146份有不良孕产史妇女血清 ,11份弓形虫循环抗原 ( CAg)阳性 ( 7.5 3% )。检测 11份自然流产物 ,1份 CAg阳性 ,该流产物转种小鼠后证实确含有弓形虫。 92份育龄妇女血清 1份弓形虫 CAg阳性 ( 1.0 9% )。有不良孕产史的妇女血清弓形虫 CAg阳性率明显高于育龄妇女血清阳性率 ( P<0 .0 5 )。弓形虫经 1E9、4C10 Mc Ab处理后对小鼠腹腔巨噬细胞攻击 ,感染率分别为 7.8%和 7.5 % ,而对照组感染率为 14.5 % ,证明该 展开更多
关键词 弓形虫 单克隆抗体 循环抗体 抑制实验
下载PDF
鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶双反义腺病毒对大肠癌细胞生长的抑制作用 被引量：4
16
作者 龚磊 姜春英 +3 位作者 张冰 胡海燕 王伟 刘贤锡 《中国现代普通外科进展》 CAS 2007年第1期21-25,共5页
目的:研究鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(AdoMetDC)双反义腺病毒(Ad-ODC-AdoMetDCas)对大肠癌细胞生长的抑制作用,并初步探讨其参与细胞周期调节的分子机制。方法:将Ad-ODC-AdoMetDCas感染大肠癌细胞株HT-29,通过MTS法观察其... 目的:研究鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(AdoMetDC)双反义腺病毒(Ad-ODC-AdoMetDCas)对大肠癌细胞生长的抑制作用,并初步探讨其参与细胞周期调节的分子机制。方法:将Ad-ODC-AdoMetDCas感染大肠癌细胞株HT-29,通过MTS法观察其对HT-29细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞周期的影响,采用Western blot检测Ad-ODC-AdoMetDCas对细胞中ODC、AdoMetDC及细胞周期调节蛋白(Cyclin D1 and CDK4)的表达的影响,利用RT-PCR检测Ad-ODC-AdoMetDCas对细胞周期蛋白Cyclin D1的mRNA水平的影响。结果:Ad-ODC-AdoMetDCas可抑制HT-29细胞中ODC和AdoMetDC蛋白的表达,并可明显抑制细胞的增殖,引起细胞周期Gl期阻滞,抑制G1期主要的细胞周期蛋白Cyclin D1的转录和翻译。结论:Ad-ODC-AdoMetDCas可有效下调ODC和AdoMetDC的表达,并通过抑制Cyclin D1的表达使其细胞周期停滞于G1期,从而抑制大肠癌细胞HT-29的增殖,为进一步研究大肠癌的基因治疗打下基础。 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶 细胞周期蛋白D1 结直肠肿瘤
下载PDF
鸟氨酸脱羧酶基因沉默抑制宫颈癌细胞生长的研究 被引量：4
17
作者 迟伟玲 宋现让 刘贤锡 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第16期1215-1219,共5页
目的:探讨鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因作为宫颈癌治疗靶基因的可行性。方法:采用慢病毒介导的RNA干扰技术,沉默Hela细胞ODC基因,建立ODC稳定沉默的细胞系Hela/ODC,用定量RT-PCR和免疫印迹检测ODC的表达水平。用MTT实验、克隆形成实验、细胞... 目的:探讨鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因作为宫颈癌治疗靶基因的可行性。方法:采用慢病毒介导的RNA干扰技术,沉默Hela细胞ODC基因,建立ODC稳定沉默的细胞系Hela/ODC,用定量RT-PCR和免疫印迹检测ODC的表达水平。用MTT实验、克隆形成实验、细胞倍增时间和细胞周期分析评价ODC基因沉默对Hela细胞生长的影响。结果:Hela/ODC的ODC mRNA和蛋白质表达水平均明显下降,mRNA水平下调93.4%。Hela/ODC的增殖受到明显抑制,细胞倍增时间从22.3h延长到32.0h,细胞周期分析S期细胞增加,G0/G1期和G2/M期细胞显著减少。结论:慢病毒载体介导RNA干扰能够稳定沉默ODC基因表达,从而成功抑制肿瘤细胞的生长,表明以ODC基因为靶基因进行宫颈癌的基因治疗是可行的。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 鸟氨酸脱羧酶 基因沉默 肿瘤细胞 培养的
下载PDF
大肠癌及癌旁组织ODC活性及多胺含量研究 被引量：5
18
作者 刘贤锡 姜春英 《中国肛肠病杂志》 1996年第4期11-12,共2页
利用化学定量法和高效液相色谱法分析测定大肠癌癌组织及近、远旁正常组织鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）、腐胺、精脒和精胺的含量。结果显示，大肠癌组织中ＯＤＣ活性及三种多胺的含量均显著高于癌旁正常组织（Ｐ〈０．００１），提示ＯＤＣ... 利用化学定量法和高效液相色谱法分析测定大肠癌癌组织及近、远旁正常组织鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）、腐胺、精脒和精胺的含量。结果显示，大肠癌组织中ＯＤＣ活性及三种多胺的含量均显著高于癌旁正常组织（Ｐ〈０．００１），提示ＯＤＣ活性及多胺含量升高在大肠癌的形成中起重要作用。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 癌旁组织 鸟氨酸脱羧酶 多胺
原文传递
良性增生前列腺组织中鸟氨酸脱羧酶活性及多胺含量的变化 被引量：4
19
作者 刘贤锡 赵春华 +5 位作者 林毓琴 罗道春 张虞毅 余东安 徐祗顺 傅善基 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期138-141,共4页
采用比色法和高效液相层析法分别测定了２１例良性增生和８例健康人前列腺组织全匀浆及不同细胞中鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）和多胺水平。结果显示增生组全匀浆和间质细胞中ＯＤＣ活性分别为正常组相应部分的３．２和２．５倍；增生组每克... 采用比色法和高效液相层析法分别测定了２１例良性增生和８例健康人前列腺组织全匀浆及不同细胞中鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）和多胺水平。结果显示增生组全匀浆和间质细胞中ＯＤＣ活性分别为正常组相应部分的３．２和２．５倍；增生组每克湿重组织中腐胺、精脒和精胺的含量分别为正常组的２．２、３．４和６．０倍。提示ＯＤＣ活性及多胺含量升高与良性前列腺增生症的发生可能有密切关系。 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 聚胺 前列腺增生
下载PDF
含变链菌SBR基因的双启动子质粒pCN-SSIE的构建及其免疫原性检测 被引量：2
20
作者 刘浩 姜广水 +3 位作者 卞继峰 刘贤锡 孙继军 王晓华 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2005年第5期479-484,共6页
目的:构建含有编码变形链球菌致龋毒力因子SBR基因的双启动子防龋DNA疫苗pCN-SSIE,以减毒沙门菌为载体进行高效黏膜免疫。方法:通过PCR扩增编码变形链球菌表面蛋白抗原的唾液结合区段(SBR)基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将SBR基... 目的:构建含有编码变形链球菌致龋毒力因子SBR基因的双启动子防龋DNA疫苗pCN-SSIE,以减毒沙门菌为载体进行高效黏膜免疫。方法:通过PCR扩增编码变形链球菌表面蛋白抗原的唾液结合区段(SBR)基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将SBR基因插入到双启动子表达载体pCMVnir中,在SBR基因上游和下游依次插入人工合成的tPA信号肽基因序列、核糖体内部进入位点(IRES)基因和EGFP基因,构建质粒pCN-SSIE。通过DNA测序和酶切分析证明,双启动子表达质粒pCN-SSIE构建成功后,再用该质粒转化减毒沙门菌SL3261和转染CHO细胞,检测SBR在原核细胞和真核细胞中的表达状况,最后用pCN-SSIE裸质粒通过肌内注射免疫小鼠,检测其血清中的抗SBR特异抗体。结果:DNA测序和酶切分析均证明,构建的双启动子表达质粒pCN-SSIE开放读码框架正确;质粒在原核和真核细胞中均能正常表达;在免疫小鼠的血清中检测到了高水平的抗SBR特异IgG。结论:构建成功双启动子表达质粒pCN-SSIE,在体外真核和原核细胞中均能正常表达,用其作为DNA疫苗免疫动物,可诱导明显的免疫应答。 展开更多
关键词 DNA疫苗 减毒沙门氏菌 龋病 变形链球菌
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 6 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部