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三氧化二砷对原发性肝癌的作用及其机理研究 被引量：94
1
作者 刘连新 朱安龙 +6 位作者 陈炜 郭化鑫 王秀琴 刘芝华 张亭栋 姜洪池 吴旻 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期33-36,共4页
目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对肝癌细胞系BEL 74 0 2的影响及其作用机理 ,并观察不同应用途径对原发性肝癌患者的治疗效果。方法　观察As2 O3 作用后肝癌细胞的形态学改变、并通过流式细胞仪和DNA梯状电泳观察细胞凋亡的情况 ,应用... 目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对肝癌细胞系BEL 74 0 2的影响及其作用机理 ,并观察不同应用途径对原发性肝癌患者的治疗效果。方法　观察As2 O3 作用后肝癌细胞的形态学改变、并通过流式细胞仪和DNA梯状电泳观察细胞凋亡的情况 ,应用逆转录聚合酶链式反应和荧光分光光度计检测半胱氨酸蛋白酶 3的变化情况。观察其对裸鼠移植瘤生长抑制的效果。并分别通过静脉滴注和动脉持续灌注观察其对原发性肝癌患者的治疗效果。结果　不同浓度的As2 O3 作用于肝癌细胞有明显的时间和剂量依赖性 ,发生作用后细胞生长明显受抑制 ,有明显的凋亡特征性改变 ;流式细胞仪分析存在G2 /M期阻滞 ,在G1峰前出现明显的凋亡峰 ;琼脂糖凝胶电泳出现明显的凋亡特征性梯状条带。随着As2 O3 作用时间的延长 ,半胱氨酸蛋白酶 3的mRNA无明显变化 ,而半胱氨酸蛋白酶 3蛋白质的活性逐渐增高。不同浓度的As2 O3 对于裸鼠肝癌移植模型有明显的抑制生长作用。对 2 8例患者的静脉输注治疗可明显改善患者的生存质量 ,并且具有毒副作用小的特点。 4 3例动脉灌注治疗患者中 ,30例肿瘤体积缩小或不变 ,有效率为 6 9 8% ,19例甲胎蛋白下降或降至正常。结论As2 O3 可明显抑制肝癌细胞的生长 ,其机理主要是诱导肝癌细胞凋亡 ; 展开更多
关键词 AS2O3 原发性肝癌 观察 患者 凋亡 治疗 肝癌细胞 半胱氨酸蛋白酶-3 作用位点 RNA
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功能基因组学的研究内容与方法 被引量：33
2
作者 赵剑华 王秀琴 +1 位作者 刘芝华 吴旻 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第1期6-8,共3页
基因组学的研究已从结构基因组学转向功能基因组学.综述了功能基因组学研究的内容和方法,主要包括应用微点阵、基因表达系列分析(SAGE)、蛋白质组、生物信息学等方法来研究基因组表达概况、基因组多样性。
关键词 人类基因组计划 功能基因组学 生物信息学
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抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达及其意义 被引量：31
3
作者 朱红霞 王益华 +5 位作者 周翠琦 张果 白瑾峰 全兰平 刘芝华 徐宁志 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期22-24,共3页
目的　检测抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达情况 ,并初步探讨survivin表达与食管癌的关系。方法　 2 7例新鲜的食管癌组织提取RNA ,利用半定量RT PCR方法 ,检测食管癌中survivin的mRNA表达水平 ,与其相配对的正常组织进行比较分析... 目的　检测抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达情况 ,并初步探讨survivin表达与食管癌的关系。方法　 2 7例新鲜的食管癌组织提取RNA ,利用半定量RT PCR方法 ,检测食管癌中survivin的mRNA表达水平 ,与其相配对的正常组织进行比较分析。通过在食管癌细胞系中转染survivin的显性负突变体 (surT34A) ,观察食管癌细胞在软琼脂中的集落形成能力 ,并利用流式细胞仪分析食管癌细胞对抗凋亡能力。结果　 2 7例食管癌组织中 ,有 18例survivin的表达高于配对的正常组织 ,食管癌组织中survivin的表达水平 (2 .0 8± 1.32 )明显高于正常对照组织 (1.2 2± 1.0 9)。在食管癌细胞系中也检测到survivin的表达。转染surT34A的EC970 6细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于对照细胞。survivin过表达可以使得EC970 6细胞在撤血清后凋亡减少 ,而surT34A则使EC970 6细胞凋亡增多。结论　survivin异常高表达与食管癌具有密切相关性。SurT34A可以抑制食管癌细胞的软琼脂集落形成能力 ,并使其对抗凋亡能力减弱 ,部分抑制食管癌细胞的恶性表型。 展开更多
关键词 食管癌细胞 表达 抗凋亡基因 食管癌组织 正常组织 集落形成 抗凋亡能力 琼脂 突变体 转染
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SLP-2基因反义核酸对食管鳞癌细胞系TE12生长和增殖的影响 被引量：24
4
作者 张立勇 丁芳 +3 位作者 刘仲敏 李文东 刘芝华 李衍达 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期155-159,共5页
背景与目的应用cDNA微阵列从食管鳞癌配对组织中得到一批在食管鳞癌中差异表达的基因,其中包括SLP-2(stomatin-likeprotein2,SLP-2),它在食管鳞癌中高表达。为验证SLP-2在食管鳞癌中的高表达,构建SLP鄄2真核表达载体,以探讨SLP鄄2与食... 背景与目的应用cDNA微阵列从食管鳞癌配对组织中得到一批在食管鳞癌中差异表达的基因,其中包括SLP-2(stomatin-likeprotein2,SLP-2),它在食管鳞癌中高表达。为验证SLP-2在食管鳞癌中的高表达,构建SLP鄄2真核表达载体,以探讨SLP鄄2与食管鳞癌发生、发展的关系。方法利用PCR从正常食管上皮cDNA中扩增SLP-2的开放阅读框,将SLP-2重组到pcDNA3.1/myc-His(-)中,构建SLP鄄2的真核表达质粒。然后将重组子导入食管鳞癌细胞系TE12中。半定量RT鄄PCR鉴定转染细胞,获得阳性细胞克隆。采用MTT比色法、平板克隆形成实验、流式细胞术和MTS比色法分析SLP鄄2对TE12细胞的影响。结果SLP鄄2在食管鳞癌中高表达。SLP鄄2基因反义转染抑制TE12细胞SLP鄄2表达时,可抑制细胞生长和增殖,导致S期阻滞,并抑制TE12细胞的粘附功能。结论食管鳞癌中SLP鄄2表达上调促进TE12细胞过度生长和增殖,并参与食管鳞癌的转移。 展开更多
关键词 食管肿瘤 SLP-2 细胞转染
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SLP-2 mRNA在子宫内膜癌中的表达及其意义 被引量：18
5
作者 冯旺琴 崔竹梅 +4 位作者 冯凤芝 祈秀娟 丁芳 李文东 刘芝华 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期553-557,共5页
目的探讨SLP-2mRNA在子宫内膜癌中的表达,及其在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法采用半定量RT-PCR技术检测32例子宫内膜癌组织和28例正常子宫内膜组织中SLP-2mRNA的表达情况;并用表达SLP-2基因的正义和反义质粒,分别转染子宫内膜癌... 目的探讨SLP-2mRNA在子宫内膜癌中的表达,及其在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法采用半定量RT-PCR技术检测32例子宫内膜癌组织和28例正常子宫内膜组织中SLP-2mRNA的表达情况;并用表达SLP-2基因的正义和反义质粒,分别转染子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞,RT-PCR技术检测转染前、后HEC-1B细胞中SLP-2mRNA的表达情况,观察转染前、后细胞的形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长情况,并绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果子宫内膜癌组织中SLP-2mRNA的表达水平为1.6±0.7,正常子宫内膜组织为0.7±0.3,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。表达SLP-2基因的正义和反义质粒成功转入HEC-1B细胞中,正义质粒转染后SLP-2mRNA表达水平增加约2.4倍,细胞生长变快,其中G1期减少12.5%,S期增高8.0%;反义质粒转染后SLP-2mRNA表达水平减少50%,细胞生长变慢,其中G1期增高10.5%,S期减少9.8%。结论子宫内膜癌中SLP-2mRNA的高表达与子宫内膜癌发生、发展有一定关系。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 蛋白质类 逆转录聚合酶链反应 转染 mRNA表达 子宫内膜癌 PCR技术检测 细胞生长曲线 其意义 表达及
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AP-1和肿瘤的关系研究进展 被引量：15
6
作者 周长春 刘芝华 齐军 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第1期1-5,共5页
转录因子AP-1(activatorprotein1),主要由Jun、Fos、ATF及JDP亚家族组成,亚家族单体以同源或异源二聚体的形式结合DNA靶序列,参与靶基因调节.对基因修饰小鼠和细胞的研究表明,AP-1参与细胞的正常生长和癌性转化过程,其在细胞中的作用取... 转录因子AP-1(activatorprotein1),主要由Jun、Fos、ATF及JDP亚家族组成,亚家族单体以同源或异源二聚体的形式结合DNA靶序列,参与靶基因调节.对基因修饰小鼠和细胞的研究表明,AP-1参与细胞的正常生长和癌性转化过程,其在细胞中的作用取决于细胞类型、AP-1的组成和各组分的相对比例,也与刺激的种类密切相关.AP-1的活性受多种核因子调节,同时单体间也存在相互促进或拮抗作用.AP-1对各种刺激如应激、辐射或生长信号等作出生理或病理应答,参与细胞的增殖、分化和转化等过程,在肿瘤的形成、转移和侵袭中发挥重要作用,已经有学者研究通过抑制AP-1活性来发展抗肿瘤药物. 展开更多
关键词 AP-1 转录因子 肿瘤
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钙磷脂结合蛋白Ⅱ在人食管鳞状细胞癌中的表达 被引量：15
7
作者 张洵 支会英 +5 位作者 张健 王秀琴 周传农 吴旻 孙耘田 刘芝华 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期353-355,共3页
目的　探讨钙磷脂结合蛋白Ⅱ (annexinⅡ )在人食管鳞状细胞癌中的表达变化及其与食管鳞状细胞癌临床病理的相互关系。方法　应用半定量RT PCR、免疫组织化学和光密度扫描等方法 ,从mRNA和蛋白两个水平检测食管鳞状细胞癌中annexinⅡ的... 目的　探讨钙磷脂结合蛋白Ⅱ (annexinⅡ )在人食管鳞状细胞癌中的表达变化及其与食管鳞状细胞癌临床病理的相互关系。方法　应用半定量RT PCR、免疫组织化学和光密度扫描等方法 ,从mRNA和蛋白两个水平检测食管鳞状细胞癌中annexinⅡ的表达 ,并分析其与肿瘤分化程度的关系。结果　annexinⅡ在mRNA和蛋白水平上均在食管鳞癌组织中低表达 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,在中分化和低分化肿瘤中 ,蛋白表达明显低于高分化肿瘤 (P <0 .0 5 )。结论　annexinⅡ在食管鳞状细胞癌中低表达 ,可能与鳞状细胞的分化程度有关。 展开更多
关键词 食管癌 鳞状细胞癌 钙磷脂结合蛋白Ⅱ 肿瘤分化程度
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食管癌及癌旁组织中基因表达的初步研究 被引量：9
8
作者 周津 刘芝华 +4 位作者 王秀琴 周传农 赵峻 张汝刚 吴晣 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期303-306,共4页
目的　了解食管癌的基因表达概况，寻找在食管癌及癌旁组织中差异表达基因。方法　以癌及癌旁组织ｐｏｌｙ Ａ＋ Ｒ Ｎ Ａ 反转录合成的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 为探针，与 Ａｔｌａｓ 微点阵表达分析膜进行差异杂交。结果放射自显影结果显示在所... 目的　了解食管癌的基因表达概况，寻找在食管癌及癌旁组织中差异表达基因。方法　以癌及癌旁组织ｐｏｌｙ Ａ＋ Ｒ Ｎ Ａ 反转录合成的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 为探针，与 Ａｔｌａｓ 微点阵表达分析膜进行差异杂交。结果放射自显影结果显示在所分析的５８８ 种已知基因中，ｃｄｃ２５ Ｂ、 Ｍ Ｍ Ｐ、 Ｍ Ｅ Ｔ 等６１ 个在食管癌组织中表达上调，ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ ４ 、 Ｂ Ａ Ｄ、 Ｉ Ｌ１ Ｒ Ｅ Ｃ Ｅ Ｐ Ｔ Ｏ Ｒ Ａ Ｎ Ｔ Ａ Ｇ Ｏ Ｎ Ｉ Ｓ Ｔ、 Ｉ Ｌ６ 等２２ 个表达下调，参与细胞增殖、凋亡、分化和转移调控的多种基因的表达水平发生了明显改变。结论　这些基因的表达改变组成了一个食管癌特异的基因表达谱，首次为食管癌细胞的恶性表型提供了分子遗传学参考数据，一些与肿瘤发生相关的差异表达基因为发展生物标记物或肿瘤早期诊断和治疗提供了线索。 Ａｔｌａｓ 微点阵表达分析滤膜的差异杂交为初步了解某一组织或细胞的表达状况提供了一个较好的方法。 展开更多
关键词 食管癌 基因表达 差异杂交 癌旁组织
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食管鳞癌组织中SPARC蛋白表达的临床意义 被引量：12
9
作者 车轶群 王海 +2 位作者 齐军 郭健 刘芝华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期61-63,共3页
目的:探讨基质蛋白SPARC在食管鳞癌的增殖、侵润和转移中的作用。方法:应用免疫组化技术研究SPARC在食管鳞癌组织和其相邻的正常粘膜组织的表达差异,同时对蛋白表达进行定位。结果:36例食管鳞癌手术标本中30例SPARC蛋白表达阳性,正常食... 目的:探讨基质蛋白SPARC在食管鳞癌的增殖、侵润和转移中的作用。方法:应用免疫组化技术研究SPARC在食管鳞癌组织和其相邻的正常粘膜组织的表达差异,同时对蛋白表达进行定位。结果:36例食管鳞癌手术标本中30例SPARC蛋白表达阳性,正常食管上皮组织表达阴性(P<0.01)。SPARC蛋白在不同分化程度的食管鳞癌组织中的表达阳性率基本相同(P>0.05)。有淋巴结转移的食管鳞癌组织与无淋巴结转移癌组织的表达间有显著差异(P<0.05)。4例癌组织细胞核有表达,其余均为细胞浆表达。结论:SPARC和食管癌的发生与发展密切相关。食管癌出现转移时SPARC蛋白表达升高。 展开更多
关键词 SPARC 食管鳞癌 免疫组化
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Arsenic trioxide (As2O3) induced apoptosis and its mechanisms in a human esophageal squamous carcinoma cell line 被引量：11
10
作者 颉东旭 殷锁 +6 位作者 欧应贤 白海 丁芳 王秀琴 刘芝华 周传农 吴旻 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期280-285,共6页
目的　探讨As 2O 3对人食管鳞癌细胞的效应及其作用机制。方法　用细胞学、生物化学和DNA微阵列技术分析人食管鳞癌细胞经As 2O 3处理前后细胞形态、生长状况及基因表达的改变。结果　As 2O 3可显著抑制人食管鳞癌细胞的生长，引起G2/M... 目的　探讨As 2O 3对人食管鳞癌细胞的效应及其作用机制。方法　用细胞学、生物化学和DNA微阵列技术分析人食管鳞癌细胞经As 2O 3处理前后细胞形态、生长状况及基因表达的改变。结果　As 2O 3可显著抑制人食管鳞癌细胞的生长，引起G2/M期阻滞；激活半胱天冬氨酸蛋白水解酶；细胞发生凋亡。多数凋亡相关基因经As 2O 3诱导后表现为升调节，细胞周期调控蛋白和细胞内信号通路中促进细胞分裂的受体和因子的表达发生改变。结论　砷能激活蛋白水解酶（caspases），或者同时引起DNA损伤，产生G2/M期阻滞，也能诱导表达凋亡所需的蛋白，启动凋亡过程；这也表明As 2O 3对人食管鳞癌细胞的效应是广泛的，可能通过多个通路激活细胞凋亡，并引起多种类型基因表达改变。 展开更多
关键词 三氧化二砷 食管癌 细胞凋亡 细胞生长
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食癌中的等位基因缺失 被引量：11
11
作者 李洁 刘芝华 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第11期1777-1781,共5页
食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,近年来对食管癌分子遗传基础研究取得了相当大的进展,但其发生发展的分子机制仍不十分清楚.在肿瘤研究中,杂合性缺失是一种常用的等位基因缺失检测方法,广泛用于候选抑癌基因的筛选及已知抑癌基因... 食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,近年来对食管癌分子遗传基础研究取得了相当大的进展,但其发生发展的分子机制仍不十分清楚.在肿瘤研究中,杂合性缺失是一种常用的等位基因缺失检测方法,广泛用于候选抑癌基因的筛选及已知抑癌基因失活机制的阐明等方面.并且等位基因异常在多种肿瘤中被证明是肿瘤发生早期事件,因此杂和性缺失可能成为肿瘤筛查和早期诊断的重要工具.等位基因缺失研究常用技术包括限制性片段长度多态性和微卫星分析等.食管癌中常见的染色体缺失区及其相关基因有17号染色体短臂(p53基因)、13号染色体长臂(Rb 基因)等.本文对以上几方面以及等位基因缺失在食管癌发展不同时期的变化等作了较为详细的阐述. 展开更多
关键词 食管癌 等位基因缺失 分子遗传学 抑癌基因 基因突变 癌基因
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Slp2基因的差异表达与肺癌的分化和转移 被引量：11
12
作者 苏雷 张建 +3 位作者 魏秀琴 支修益 许庆生 刘芝华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期678-680,共3页
目的:探讨Slp2基因在肺癌组织中的差异表达与肺癌组织分化和转移的相关性。方法:通过提取52例肺癌患者的肺癌组织和正常配对组织以及4个肺癌细胞系的总RNA,用逆转录-聚合酶链反应检测Slp2基因的表达,结合肺癌患者的临床资料进行分析。结... 目的:探讨Slp2基因在肺癌组织中的差异表达与肺癌组织分化和转移的相关性。方法:通过提取52例肺癌患者的肺癌组织和正常配对组织以及4个肺癌细胞系的总RNA,用逆转录-聚合酶链反应检测Slp2基因的表达,结合肺癌患者的临床资料进行分析。结果:52例肺癌组织中38例Slp2基因的表达明显增强。其中低年龄、低分化、纵隔淋巴结转移、Ⅲa期肺癌患者Slp2基因的差异表达更为明显(P<0.05);Slp2基因在4个肺癌细胞系中均呈阳性表达。结论:Slp2基因在肺癌组织的表达明显高于正常对照组织,而且与肺癌组织的分化程度、是否发生纵隔淋巴结转移以及临床分期密切相关。 展开更多
关键词 Slp2基因 肺癌 临床分期 肺癌组织分化 淋巴结转移
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绒毛膜癌耐药细胞系的建立及人白细胞介素2基因转染后对其多药耐药性的逆转作用 被引量：13
13
作者 崔竹梅 向阳 +1 位作者 杨秀玉 刘芝华 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期549-553,共5页
目的　建立绒毛膜癌 (绒癌 )的耐药细胞系 ,应用基因工程技术将人白细胞介素 2 (hIL 2 )基因导入绒癌耐药细胞系 ,观察hIL 2基因转染后对绒癌耐药细胞耐药性的逆转作用。方法　采用间歇诱导的方法 ,用鬼臼乙叉甙 (VP 16)诱导绒癌细胞系J... 目的　建立绒毛膜癌 (绒癌 )的耐药细胞系 ,应用基因工程技术将人白细胞介素 2 (hIL 2 )基因导入绒癌耐药细胞系 ,观察hIL 2基因转染后对绒癌耐药细胞耐药性的逆转作用。方法　采用间歇诱导的方法 ,用鬼臼乙叉甙 (VP 16)诱导绒癌细胞系JEG 3 ,建立耐药细胞系 ,四甲基偶氮唑蓝比色法检测该耐药细胞系对多种化学治疗药物的耐药指数 ,及多种耐药基因包括肺耐药蛋白、多药耐药相关蛋白、谷胱甘肽转移酶、二氢叶酸还原酶和多药耐药基因 (MDR1)的mRNA表达情况。用逆转录聚合酶链反应技术 ,克隆hIL 2基因 ,将hIL 2基因插入真核表达载体pcDNA3 1( + )中 ,提取质粒 ,通过阳离子脂质体将hIL 2基因转染绒癌耐药细胞系 ,用新霉素筛选含hIL 2DNA片段的单个细胞克隆 ,检测转染hIL 2基因后该细胞耐药指数的变化 ,测定转染后细胞hIL 2和多种耐药基因mRNA的表达。结果　用VP 16采用间歇诱导法 ,成功建立绒癌的VP 16耐药细胞系JEG 3 /VP 16,并检测出MDR1mRNA表达。转染hIL 2基因后 ,绒癌细胞中检测出hIL 2mRNA表达 ,转染hIL 2基因的细胞的耐药指数降低 ,JEG 3 /VP 16细胞转染pcDNA3 1( + ) hIL 2后 ,对VP 16的耐药指数由 3 8 7降至 6 0～6 1,对甲氨蝶呤的耐药指数由 14 5降至 2 6～ 2 5 ,对更生霉素的耐药指数由 展开更多
关键词 绒毛膜癌 转染 白细胞介素2 多药抗药性
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SLP-2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系 被引量：14
14
作者 曹文枫 张立勇 +3 位作者 张斌 王跃琦 刘芝华 孙保存 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期830-833,共4页
目的 探讨SLP-2蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系.方法 收集18例新鲜配对的食管鳞状细胞癌及正常食管上皮组织,应用Western blot法检测SLP-2蛋白的表达水平.将220例配对的食管鳞状细胞癌组织和... 目的 探讨SLP-2蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系.方法 收集18例新鲜配对的食管鳞状细胞癌及正常食管上皮组织,应用Western blot法检测SLP-2蛋白的表达水平.将220例配对的食管鳞状细胞癌组织和正常食管上皮组织构建组织芯片,采用免疫组化SP法检测SLP-2蛋白的表达情况,并分析SLP-2蛋白的表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征之间的关系.结果 Western blot法检测结果显示,SLP-2蛋白在18例新鲜食管鳞状细胞癌组织中的高表达率为72.2%.免疫组化染色结果显示,SLP-2蛋白在220例食管鳞状细胞癌组织中的高表达率为54.1%,明显高于其在正常食管上皮组织中的高表达率（3.6%,P＜0.001）.SLP-2蛋白的高表达与食管鳞状细胞癌的浸润深度相关（P=0.033）,而与其他临床病理特征均无关（均P＞0.05）.结论 SLP-2可能作为一个新的肿瘤相关基因在食管鳞状细胞癌的发生发展过程中发挥着重要作用;SLP-2蛋白的高表达与食管鳞状细胞癌的侵袭转移密切相关. 展开更多
关键词 SLP-2蛋白 食管肿瘤 侵袭 组织芯片 免疫组织化学
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Cystatin家族的研究进展 被引量：13
15
作者 李国平 王秀琴 +2 位作者 刘芝华 王仑山 吴旻 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期217-218,共2页
关键词 CYSTATIN 肿瘤浸润 细胞凋亡 肿瘤转移
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DNA高甲基化与抑癌基因 被引量：9
16
作者 刘仲敏 刘芝华 吴旻 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第9期1420-1424,共5页
哺乳动物基因组中,DNA甲基化是指 CpG二核苷酸中的胞嘧啶第5位碳原子被甲基化.DNA甲基化是一种基因外修饰,不改变DNA的一级结构;他在细胞正常发育、基因表达模式以及基因组稳定性中起着至关重要的作用。全基因组低甲基化,维持甲基化模... 哺乳动物基因组中,DNA甲基化是指 CpG二核苷酸中的胞嘧啶第5位碳原子被甲基化.DNA甲基化是一种基因外修饰,不改变DNA的一级结构;他在细胞正常发育、基因表达模式以及基因组稳定性中起着至关重要的作用。全基因组低甲基化,维持甲基化模式酶的调节失控和正常非甲基化CpG岛的高甲基化是人类肿瘤中普遍存在的现象。DNA高甲基化是导致抑癌基因失活的又一个机制.本文综述了抑癌基因的高甲基化、DNA修复基因的高甲基化、甲基化与转录的关系以及导致转录失活可能存在的作用机制、寻找甲基化相关基因的依据原则、甲基化的检测方法、肿瘤甲基化图谱的特征、甲基化与突变的相互作用、导致甲基化产生的原因、及其广泛的应用前景. 展开更多
关键词 DNA甲基化 抑癌基因 肿瘤 基因转录 DNA修复基因
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Ets转录因子家族在发育和肿瘤发生中作用的研究进展 被引量：10
17
作者 张健 高福禄 刘芝华 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第10期1624-1627,共4页
Ets转录因子家族包括30多个成员,具有复杂的结构和功能,通过调节细胞的增生、分化、凋亡及细胞与细胞间的相互作用,在许多生理和病理过程中发挥重要的调控作用。Ets家族成员在发育过程中特异性时空表达与其对发育的调控作用密切相关,他... Ets转录因子家族包括30多个成员,具有复杂的结构和功能,通过调节细胞的增生、分化、凋亡及细胞与细胞间的相互作用,在许多生理和病理过程中发挥重要的调控作用。Ets家族成员在发育过程中特异性时空表达与其对发育的调控作用密切相关,他从细胞、组织、器官不同的水平调控发育过程,特别是在血管发生和免疫系统的发生中发挥重要作用。此外,Ets在肿瘤的侵袭、转移和血管生成过程中发挥重要作用,主要与调节细胞外基质(ECM)酶的转录活性有关。Ets转录因子受多种信号通路的调控,MAP激酶(Erk,p38和JNK)、Ca^(2+)依赖的信号通路以及TGF-β。 展开更多
关键词 Ets转录因子 肿瘤 研究进展 细胞外基质 信号通路 造血细胞系
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香蕉钙调蛋白基因的克隆及序列分析 被引量：9
18
作者 龚洁敏 金志强 +4 位作者 孔德骞 郑学勤 金建华 刘芝华 陈章良 《热带作物学报》 CSCD 1994年第1期65-71,共7页
从香蕉（ＭｕｓａｎａｎａＬｏｕｒ，）果实中提取总ＲＮＡ，以ＯｌｉｇｏｄＴ（１８ｂｐ）为引子合成ｃＤＮＡ第一链，以大麦钙调蛋白基因两端的寡聚核苷酸为引物，用ＰＣＲ方法扩增香蕉钙调蛋白基因，并克隆到ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＫ... 从香蕉（ＭｕｓａｎａｎａＬｏｕｒ，）果实中提取总ＲＮＡ，以ＯｌｉｇｏｄＴ（１８ｂｐ）为引子合成ｃＤＮＡ第一链，以大麦钙调蛋白基因两端的寡聚核苷酸为引物，用ＰＣＲ方法扩增香蕉钙调蛋白基因，并克隆到ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＫＳ－载体上。酶切分析和测定ＤＮＡ全序列，将该序列与几种植物的钙调蛋白基因作比较，同源性高达８１．９％－９５．３％。进一步将基因克隆到表达载体ｐＴｒｃＨｉｓＢ上，得到高效表达的融合蛋白。 展开更多
关键词 香蕉 钙调蛋白基因 蛋白表达 克隆 序列分析
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S100A8和S100A9在子宫颈鳞癌组织中的表达 被引量：7
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作者 冯旺琴 崔竹梅 +1 位作者 刘芝华 李玉军 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第11期1969-1972,共4页
目的:探讨S100A8、S100A9在子宫颈鳞癌及正常宫颈组织中的表达及其意义。方法:采用半定量的RT-PCR技术和免疫组织化学的方法,从mRNA及蛋白水平检测32例子宫颈鳞癌和15例正常宫颈组织中S100A8、S100A9的表达,及与不同临床病理参数的关系... 目的:探讨S100A8、S100A9在子宫颈鳞癌及正常宫颈组织中的表达及其意义。方法:采用半定量的RT-PCR技术和免疫组织化学的方法,从mRNA及蛋白水平检测32例子宫颈鳞癌和15例正常宫颈组织中S100A8、S100A9的表达,及与不同临床病理参数的关系。结果:子宫颈鳞癌组织中,S100A8、S100A9在mRNA及蛋白水平上均低表达(P<0.05),其中,低分化肿瘤的表达明显低于高、中分化肿瘤(P<0.05)。结论:S100A8、S100A9在子宫颈鳞癌组织中低表达,且可能与鳞状细胞的分化程度相关。提示S100A8、S100A9低表达可能与子宫颈鳞癌的发生发展有关系。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 鳞癌 S100A8 S100A9 RT-PCR 免疫组织化学
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EMP-1基因对人食管癌细胞系生长的影响 被引量：9
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作者 王海涛 刘芝华 +1 位作者 王秀琴 吴旻 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期229-232,共4页
背景与目的:本室曾用正常食管粘膜上皮细胞和食管癌细胞进行微阵列分析,得到一批在正常食管粘膜上皮细胞和食管癌细胞中差异表达的基因,其中包括上皮膜蛋白-1(EMP-1)基因,EMP-1基因的mRNA水平表达差异有6倍。本文进一步研究EMP-1基因在... 背景与目的:本室曾用正常食管粘膜上皮细胞和食管癌细胞进行微阵列分析,得到一批在正常食管粘膜上皮细胞和食管癌细胞中差异表达的基因,其中包括上皮膜蛋白-1(EMP-1)基因,EMP-1基因的mRNA水平表达差异有6倍。本文进一步研究EMP-1基因在食管癌发生发展中的作用;方法:构建人EMP-1基因的真核表达载体,并转染人食管癌细胞系,Westernblot检测转染效果,RT-PCR检测转染后EMP-1的表达情况,绘制生长曲线,流式细胞检测细胞周期的变化;结果:EMP-1基因成功转入人食管癌细胞系EC9706,EMP-1基因表达量变高,细胞生长变慢,S期减少;结论:EMP-1基因与食管癌发生有一定关系。 展开更多
关键词 食管肿瘤 EMP-1基因 基因功能 细胞转染 影响
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