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新疆犊牛源大肠杆菌系统进化及其耐药特性 被引量:14
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作者 张星星 乔军 +6 位作者 孟庆玲 陈诚 孟丹 于伟伟 才学鹏 陈创夫 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第6期60-64,共5页
本研究利用三重PCR的方法对新疆犊牛源大肠杆菌临床分离株进行系统进化分群,对不同进化群的菌株进行致病性和16种药物的敏感性试验。结果:粪便样品中分离出的127株大肠杆菌中非致病群A(37.8%)和高致病群D(30.7%)菌株分布相对较多,... 本研究利用三重PCR的方法对新疆犊牛源大肠杆菌临床分离株进行系统进化分群,对不同进化群的菌株进行致病性和16种药物的敏感性试验。结果:粪便样品中分离出的127株大肠杆菌中非致病群A(37.8%)和高致病群D(30.7%)菌株分布相对较多,其次是低致病群B1(18.1%)和高致病群B2(13.4%);其中腹泻犊牛源(B2+D)群大肠杆菌明显多于健康犊牛。药敏结果显示,犊牛源大肠杆菌多重耐药表型的菌株占85.0%,主要分布在3耐~7耐,其中腹泻犊牛携带的大肠杆菌耐药率高于健康犊牛,D群大肠杆菌耐药率最高,B2群耐药率最低,A群和B1群居中。结论:新疆犊牛源大肠杆菌耐药性比较严重,应受到重视。 展开更多
关键词 大肠杆菌 系统进化分群 耐药性 致病性 犊牛
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调督熄风针法对肝阳上亢非杓型高血压病患者血压昼夜节律、血压变异性、平滑指数的影响 被引量:7
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作者 梁燕 +4 位作者 李晨梅 高慧 王艳君 多慧玲 李佳 《现代中西医结合杂志》 CAS 2019年第34期3763-3767,共5页
目的探讨调督熄风针法对肝阳上亢非杓型高血压病患者血压昼夜节律、血压变异性、平滑指数的影响。方法将符合入组标准的69例肝阳上亢非杓型高血压病患者随机分为2组,对照组34例口服马来酸左旋氨氯地平,治疗组35例口服马来酸左旋氨氯地... 目的探讨调督熄风针法对肝阳上亢非杓型高血压病患者血压昼夜节律、血压变异性、平滑指数的影响。方法将符合入组标准的69例肝阳上亢非杓型高血压病患者随机分为2组,对照组34例口服马来酸左旋氨氯地平,治疗组35例口服马来酸左旋氨氯地平基础上于申时行调督熄风针法,2组均治疗4周,比较2组患者治疗前后动态血压[24 h平均收缩压(24hMSBP)、24 h平均舒张压(24hMDBP)、白天平均收缩压(dMSBP)、白天平均舒张压(dMDBP)、夜间平均收缩压(nMSBP)、夜间平均舒张压(nMDBP)]、血压昼夜节律、血压变异性[24 h平均收缩压变异性(24hSBPV)、24 h平均舒张压变异性(24hDBPV)、白天收缩压变异性(dSBPV)、白天舒张压变异性(dDBPV)、夜间收缩压变异性(nSBPV)、夜间舒张压变异性(nDBPV)]、平滑指数[24 h平均收缩压平滑指数(24hSBPSI)、24 h平均舒张压平滑指数(24hDBPSI)、白天收缩压平滑指数(dSBPSI)、白天舒张压平滑指数(dDBPSI)、夜间收缩压平滑指数(nSBPSI)、夜间舒张压平滑指数(nDBPSI)]。结果2组治疗后的动态血压、血压变异性各指标均明显低于治疗前(P均<0.05),且治疗组的nMSBP、nMDBP、nSBPV、nDBPV均明显低于对照组(P均<0.05);2组治疗后的平滑指数以及血压昼夜节律、转变杓型人数均明显高于治疗前(P均<0.05),且治疗组的nSBPSI、nDBPSI及血压昼夜节律、转变杓型血压人数均明显高于对照组(P均<0.05)。结论申时行调督熄风针法能对肝阳上亢非杓型高血压病患者起到减小血压波动、降低全天血压水平、改善昼夜节律、平稳降压的作用,尤其是在改善夜间血压方面更有优势。 展开更多
关键词 调督熄风针法 择时针刺 肝阳上亢 非杓型高血压 血压昼夜节律 血压变异性 平滑指数
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分子伴侣hfq基因缺失对单核细胞增生李斯特菌毒力及生物被膜生成的影响 被引量:7
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作者 卢海亭 乔军 +5 位作者 孟庆玲 彭叶龙 陈诚 才学鹏 陈创夫 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期94-98,共5页
为了解非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)分子伴侣蛋白Hfq在LM毒力中发挥的调控作用,在构建LM-Δhfq缺失株的基础上,通过动物攻毒试验检测野毒株LM-SB5与缺失株LM-Δhfq对昆明系小鼠的LD50,肝、脾载菌量及对肝、脾、肾的病理损伤;通过溶... 为了解非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)分子伴侣蛋白Hfq在LM毒力中发挥的调控作用,在构建LM-Δhfq缺失株的基础上,通过动物攻毒试验检测野毒株LM-SB5与缺失株LM-Δhfq对昆明系小鼠的LD50,肝、脾载菌量及对肝、脾、肾的病理损伤;通过溶血试验检测二者的溶血活性;通过结晶紫染色的方法检测二者的生物被膜生成能力。以分析hfq基因缺失对LM毒力及生物被膜生成的影响。结果显示,与LM-SB5相比,LM-Δhfq对小鼠的LD50升高了6.067倍,毒力显著降低;肝、脾载菌量在第2,4,5天显著下降(P<0.05),在第3天下降极显著(P<0.01);对肝、脾、肾的病理损伤也有所减弱,LM-Δhfq较LM-SB5溶血能力下降了2倍,生物被膜生成能力在24 h时显著降低(P<0.05)。研究结果证实,Hfq蛋白对LM的毒力及生物被膜生成能力具有重要调控作用。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 非编码RNA hfq基因 毒力
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绵羊肺炎支原体膜蛋白p56基因的克隆、表达及反应原性研究 被引量:6
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作者 陈诚 乔军 +5 位作者 孟庆玲 胡政香 马玉 才学鹏 陈创夫 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期455-458,共4页
为了分析绵羊肺炎支原体(MO)膜蛋白p56的反应原性,本研究以MO新疆流行株为模板,设计特异性引物对p56抗原集中区段进行PCR扩增,将扩增产物克隆测序,进一步亚克隆至表达载体pET-28a(+)中,构建pET-28a(+)-p56原核表达载体。将重组载体转化... 为了分析绵羊肺炎支原体(MO)膜蛋白p56的反应原性,本研究以MO新疆流行株为模板,设计特异性引物对p56抗原集中区段进行PCR扩增,将扩增产物克隆测序,进一步亚克隆至表达载体pET-28a(+)中,构建pET-28a(+)-p56原核表达载体。将重组载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG对重组菌进行诱导,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。结果表明,SDS-PAGE分析证实表达的重组融合蛋白相对分子量为44 kDa;Western blot分析表明该重组蛋白可与MO阳性血清发生特异性免疫学反应,证实表达的重组p56融合蛋白具有良好的反应原性,为进一步研发MO检测用抗原奠定了前期基础。 展开更多
关键词 MO 膜蛋白 p56基因 克隆 原核表达 反应原性
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调督息风针法对非杓型高血压病30例昼夜节律及临床疗效的影响 被引量:6
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作者 梁燕 鲍晓华 +4 位作者 李晨梅 高慧 王艳君 李佳 《江苏中医药》 CAS 2019年第8期68-70,共3页
目的:探讨在常规西药治疗基础上加用调督息风针法对非杓型高血压病患者昼夜节律及临床疗效的影响。方法:将60例非杓型高血压病患者随机分为治疗组与对照组,每组30例。对照组予马来酸左旋氨氯地平片口服,治疗组在对照组基础上采用调督息... 目的:探讨在常规西药治疗基础上加用调督息风针法对非杓型高血压病患者昼夜节律及临床疗效的影响。方法:将60例非杓型高血压病患者随机分为治疗组与对照组,每组30例。对照组予马来酸左旋氨氯地平片口服,治疗组在对照组基础上采用调督息风针法治疗,2组均治疗4周。比较2组患者治疗前后血压及血压昼夜节律、临床症状的变化情况,并评估临床疗效。结果:治疗组治疗后夜间收缩压下降率与治疗前及对照组治疗后比较均明显升高(P<0.05);治疗组非杓型转变为杓型高血压率为56.67%,优于对照组的26.67%(P<0.05);2组治疗后收缩压和舒张压均较治疗前明显下降(P<0.05),且治疗组收缩压和舒张压下降程度均较对照组显著(P<0.05);2组治疗后中医症状积分均较治疗前明显下降(P<0.05),且治疗组积分明显低于对照组(P<0.05);治疗组总有效率86.67%,明显优于对照组的66.67%(P=0.035)。结论:加用调督息风针法可降低非杓型高血压患者血压,改善临床症状,同时能调整血压昼夜节律。 展开更多
关键词 调督息风 肝阳上亢 昼夜节律 高血压病 马来酸左旋氨氯地平片 针刺疗法
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申时行调督熄风针法联合西药治疗肝阳上亢非杓型高血压临床观察 被引量:6
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作者 梁燕 鲍晓华 +3 位作者 李晨梅 高慧 王艳君 《山东医药》 CAS 2019年第25期18-21,共4页
目的观察申时(下午3~5时)行调督熄风针法联合西药对肝阳上亢非杓型高血压的治疗效果。方法将60例肝阳上亢型非杓型高血压患者随机分为对照组、治疗组各30例。对照组给予马来酸左旋氨氯地平片2.5mg口服,1次/d,晨起顿服。治疗组给予马来... 目的观察申时(下午3~5时)行调督熄风针法联合西药对肝阳上亢非杓型高血压的治疗效果。方法将60例肝阳上亢型非杓型高血压患者随机分为对照组、治疗组各30例。对照组给予马来酸左旋氨氯地平片2.5mg口服,1次/d,晨起顿服。治疗组给予马来酸左旋氨氯地平片口服(方法同对照组)联合调督熄风针法治疗,调督熄风针法治疗时间为下午3~5点,1次/d,5次/周,2周为1个疗程。两组均治疗4周。治疗前后监测两组动态血压,计算夜间血压下降率,统计治疗后杓型血压患者比例,治疗前后统计血压负荷、晨峰血压(MBPS),用放射免疫法检测血浆内皮素(ET),硝酸还原法检测血清一氧化氮(NO)。结果治疗后两组动态血压均低于治疗前(P均<0.05),治疗组夜间平均收缩压、夜间平均舒张压低于对照组(P均<0.05);治疗后两组夜间血压下降率高于治疗前(P<0.05),且治疗组高于对照组(P<0.05);治疗后治疗组杓型血压比例高于对照组(P<0.05);治疗后两组血压负荷、MBPS均低于治疗前(P均<0.05),治疗组夜间收缩压负荷、夜间舒张压负荷、MBPS均低于对照组(P均<0.05);治疗后治疗组血浆ET水平低于对照组(P均<0.05),血清NO水平高于对照组(P均<0.05)。结论申时行调督熄风针法联合西药治疗可逆转肝阳上亢非杓型高血压患者的非杓型结构,降低血压负荷、MBPS,改善血压昼夜节律及血管内皮功能。 展开更多
关键词 非杓型高血压 调督熄风针法 申时 肝阳上亢 血压昼夜节律 血压负荷 晨峰血压 内皮素 一氧化氮
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少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶基因的克隆及生物信息学分析 被引量:6
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作者 赵海龙 孟庆玲 +5 位作者 乔军 贡莎莎 胡政香 才学鹏 陈创夫 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期26-32,共7页
为研究捕食线虫性真菌几丁质酶的功能,在国内首次对少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-801和AO-483基因进行扩增、克隆及测序,并对其编码蛋白信号肽、疏水性与亲水性、高级结构、功能域进行预测和分析。结果显示,2个不同蛋白均具有典型的几... 为研究捕食线虫性真菌几丁质酶的功能,在国内首次对少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-801和AO-483基因进行扩增、克隆及测序,并对其编码蛋白信号肽、疏水性与亲水性、高级结构、功能域进行预测和分析。结果显示,2个不同蛋白均具有典型的几丁质酶催化区保守序列SXGGW和DGXDXDWE,属于糖苷水解酶18家族几丁质酶,无信号肽序列,表明这2个蛋白为非分泌型蛋白,二级结构以无规则卷曲、α-螺旋和β-折叠为蛋白的主要结构元件,三级结构中有(α/β)8的圆桶形结构。系统发育分析表明,几丁质酶AO-801和AO-483与昆虫病原真菌几丁质酶的亲缘关系更为接近,说明它们所产生的几丁质酶在侵染宿主的过程中发挥着类似的功能,并且不同来源真菌几丁质酶根据分子质量的差异形成3个不同的进化分枝。 展开更多
关键词 少孢节丛孢菌 几丁质酶 基因克隆 生物信息学
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绵羊肺炎支原体多表位融合基因MO-meAg1的构建、表达及重组蛋白免疫原性分析 被引量:5
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作者 路路 孟庆玲 +7 位作者 乔军 陈诚 卢海亭 张星星 贡莎莎 才学鹏 陈创夫 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期678-684,共7页
为获得具有良好免疫原性的绵羊肺炎支原体(MO)重组蛋白,利用ABCpred等软件预测分析MO EF-P、PDHA、P97相似蛋白和EF-Ts蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合基因MO-meAg1,合成后将其亚克隆至表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-3... 为获得具有良好免疫原性的绵羊肺炎支原体(MO)重组蛋白,利用ABCpred等软件预测分析MO EF-P、PDHA、P97相似蛋白和EF-Ts蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合基因MO-meAg1,合成后将其亚克隆至表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-32a(+)-MO-meAg1。将pET-32a(+)-MOmeAg1转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后检测重组蛋白反应原性和免疫原性。SDSPAGE结果显示,MO-meAg1重组蛋白分子质量约34.5ku;Western blot分析结果显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性。小鼠免疫试验结果表明,重组蛋白MO-meAg1具有较强的免疫原性,诱导机体产生的抗血清其间接血凝效价可达1∶128以上。获得的多表位融合蛋白MO-meAg1为绵羊支原体肺炎的免疫学诊断及新型疫苗研究奠定基础。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 抗原表位 多表位融合基因 表达
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细粒棘球蚴RTN4基因的克隆及序列分析 被引量:5
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作者 孟庆玲 +5 位作者 乔军 陈诚 马玉 胡政香 才学鹏 陈创夫 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第3期17-22,共6页
【目的】克隆细粒棘球蚴(Eg)内质网膜蛋白4(Reticulon-4,RTN4)抗原基因,对其序列进行生物信息学分析。【方法】采集感染Eg的绵羊肝脏和肺脏,提取Eg头节总RNA为模板,对RTN4基因进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体后测序,对其核... 【目的】克隆细粒棘球蚴(Eg)内质网膜蛋白4(Reticulon-4,RTN4)抗原基因,对其序列进行生物信息学分析。【方法】采集感染Eg的绵羊肝脏和肺脏,提取Eg头节总RNA为模板,对RTN4基因进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体后测序,对其核苷酸序列及氨基酸序列进行生物信息学分析。【结果】Eg RTN4cDNA全长654bp,编码217个氨基酸,蛋白质分子质量为25.3ku,等电点为8.83。编码氨基酸序列中含有1个N端酰基化位点、2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和4个蛋白激酶C磷酸化位点。经生物信息学软件预测,RTN4蛋白的抗原表位区主要集中在第1-47位、第71-147位和第171-217位区域;含有2个高度疏水区,2个跨膜区,膜外区分别位于第1-47位和第171-217位。【结论】成功克隆了Eg RTN4基因,预测了其编码蛋白抗原的结构和表位。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 抗原基因 基因克隆 生物信息学分析
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绵羊肺炎支原体新疆流行株的分离鉴定及其膜蛋白P80基因序列分析 被引量:5
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作者 马玉 乔军 +6 位作者 孟庆玲 胡政香 陈诚 才学鹏 张金生 陈创夫 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期1375-1380,共6页
本研究对新疆沙湾县疑似绵羊肺炎支原体(MO)感染的病料进行病原的分离鉴定,并对分离株进行形态学、生化和分子生物学鉴定。分离鉴定出MO13株,提取MO分离株的基因组,经PCR技术扩增MO分离株膜蛋白P80基因,将扩增序列与Gen Bank中已知的MO... 本研究对新疆沙湾县疑似绵羊肺炎支原体(MO)感染的病料进行病原的分离鉴定,并对分离株进行形态学、生化和分子生物学鉴定。分离鉴定出MO13株,提取MO分离株的基因组,经PCR技术扩增MO分离株膜蛋白P80基因,将扩增序列与Gen Bank中已知的MO法国14811株膜蛋白P80基因序列进行比较。结果表明,该序列核苷酸的同源性为97.11%,推导氨基酸序列的同源性达到98.28%。该基因存在60处碱基突变,其中24处是同义突变,36处为错义突变,表明MO不同地域分离株膜蛋白P80存在一定的遗传变异。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 分离 鉴定 P80基因
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新疆北疆地区犊牛球虫感染调查及虫种鉴定 被引量:4
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作者 马玉 乔军 +4 位作者 孟庆玲 李清平 张金生 陈创夫 《中国奶牛》 2015年第6期21-24,共4页
为了解新疆北疆地区奶牛养殖场犊牛球虫的感染情况,对昌吉、石河子、奎屯地区6个大型奶牛养殖场1岁龄以内荷斯坦犊牛的球虫感染情况进行了调查。结果发现,犊牛球虫总感染率达到35.55%,其中0~6月龄犊牛平均感染率达42.25%,7~1... 为了解新疆北疆地区奶牛养殖场犊牛球虫的感染情况,对昌吉、石河子、奎屯地区6个大型奶牛养殖场1岁龄以内荷斯坦犊牛的球虫感染情况进行了调查。结果发现,犊牛球虫总感染率达到35.55%,其中0~6月龄犊牛平均感染率达42.25%,7~12月龄犊牛平均感染率达21.74%。经虫种鉴定,共鉴定出5种艾美耳属球虫,分别是邱氏艾美耳球虫(E.zurnii)、牛艾美耳球虫(E.bovi)、椭圆艾美耳球虫(E.ellipsoidall)、柱状艾美耳球虫(E.cylindrica)、亚球形艾美耳球虫(E.subspherica),其中邱氏艾美耳球虫、椭圆艾美尔球虫和牛艾美耳球虫为优势种。本次调查为新疆北疆地区犊牛球虫病的科学防控提供了流行病学资料。 展开更多
关键词 奶牛 球虫 种类鉴别 感染率
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绵羊肺炎支原体新疆分离株黏附素与溶血素A基因的克隆及序列分析 被引量:4
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作者 胡政香 乔军 +7 位作者 孟庆玲 陈诚 赵海龙 马玉 赞哈尔.波拉提 张金生 陈创夫 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2015年第2期201-205,共5页
根据Gen Bank报道的绵羊肺炎支原体(MO)基因组序列,设计特异性引物,对MO新疆分离株黏附素基因和溶血素A基因进行PCR扩增、克隆及测序;应用分子生物学软件对该基因及其编码蛋白进行分子特征分析,并与其他支原体相应序列进行同源性分析,... 根据Gen Bank报道的绵羊肺炎支原体(MO)基因组序列,设计特异性引物,对MO新疆分离株黏附素基因和溶血素A基因进行PCR扩增、克隆及测序;应用分子生物学软件对该基因及其编码蛋白进行分子特征分析,并与其他支原体相应序列进行同源性分析,构建该基因系统进化树。结果显示:黏附素基因长为3426 bp,溶血素A基因长为777 bp;黏附素在第1-23位氨基酸残基为信号肽、1个跨膜区,可能为分泌型蛋白;溶血素A无信号肽和跨膜区、有RNA结合位点和甲基转移酶结合位点。系统发生分析表明,黏附素基因与猪肺炎支原体P146株进化关系较近,与其他的支原体进化关系远;溶血素A基因与猪肺炎支原体232株、结膜支原体HRC581株位于同一分枝上,进化关系近。本研究克隆了MO黏附素基因和溶血素A基因,为了解MO毒力相关基因生物学功能及其致病中的作用奠定了前期基础。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 黏附素 溶血素A 基因克隆 序列分析
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新疆石河子地区鸡皮刺螨形态学鉴定及其cox1基因比对分析 被引量:3
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作者 张星星 孟庆玲 +4 位作者 乔军 贡莎莎 才学鹏 陈创夫 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第1期30-35,共6页
为了确定新疆石河子地区流行的鸡螨虫的种类,采集本地区蛋鸡和斗鸡流行的螨样进行形态学观察鉴定,同时克隆并分析其线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基1(cox1)基因,并与Gen Bank登录的鸡皮刺螨参考序列对比分析同源性并构建系统进化树。初步... 为了确定新疆石河子地区流行的鸡螨虫的种类,采集本地区蛋鸡和斗鸡流行的螨样进行形态学观察鉴定,同时克隆并分析其线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基1(cox1)基因,并与Gen Bank登录的鸡皮刺螨参考序列对比分析同源性并构建系统进化树。初步形态学鉴定结果显示:该虫体呈长椭圆形,后部略宽,螯枝细而长;背面有1块背板,前部较宽,后缘平直;胸板拱桥形,宽大于长,板上刚毛2对;肛板圆三角形,肛孔位于肛板后部;雄螨的胸殖板和腹肛板相接形成全腹板,具有鸡皮刺螨的形态特征。分子生物学鉴定发现,本研究螨虫株cox1基因与法国和意大利鸡源鸡皮刺螨cox1基因序列同源性达99%,证实石河子地区流行的鸡螨虫为鸡皮刺螨,该螨虫与法国和意大利鸡源鸡皮刺螨具有较近的亲缘关系。 展开更多
关键词 鸡皮刺螨 形态学鉴定 分子生物学鉴定 cox1基因 石河子地区
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新疆北疆地区犊牛球虫感染调查及虫种鉴定 被引量:3
14
作者 马玉 乔军 +4 位作者 孟庆玲 李清平 张金生 陈创夫 《家畜生态学报》 北大核心 2014年第10期64-67,共4页
为了解新疆北疆地区奶牛养殖场犊牛球虫的感染情况,对昌吉、石河子、奎屯地区6个大型奶牛养殖场一岁以内荷斯坦奶牛犊牛球虫感染情况进行了调查。结果发现,犊牛球虫总感染率达到35.55%,其中0~6月龄犊牛平均感染率达42.25%,7~1... 为了解新疆北疆地区奶牛养殖场犊牛球虫的感染情况,对昌吉、石河子、奎屯地区6个大型奶牛养殖场一岁以内荷斯坦奶牛犊牛球虫感染情况进行了调查。结果发现,犊牛球虫总感染率达到35.55%,其中0~6月龄犊牛平均感染率达42.25%,7~12月龄犊牛平均感染率达21.74%。经虫种鉴定,共鉴定出5种艾美耳属球虫,分别是邱氏艾美耳球虫(Eimeria zurnii)、牛艾美耳球虫〔Eimeria bovi〕、椭圆艾美耳球虫( Eimeria ellipsoidall)、柱状艾美耳球虫( Eimeria cylindrica )、亚球形艾美耳球虫( Eimeria subspherica),其中邱氏艾美耳球虫、椭圆艾美尔球虫和牛艾美耳球虫为优势种。调查为新疆北疆地区犊牛球虫的科学防控提供了流行病学资料。 展开更多
关键词 奶牛 球虫 种类鉴别 感染率
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绵羊肺炎支原体HSP70基因的克隆、表达及免疫原性分析 被引量:3
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作者 胡政香 乔军 +7 位作者 孟庆玲 赵海龙 陈诚 赞哈尔.波拉提 马玉 才学鹏 陈创夫 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期8-12,共5页
根据GenBank登录的MO HSP70基因序列,设计特异性引物对MO新疆分离株HSP70基因进行扩增,克隆入T载体中测序。将HSP70基因亚克隆入表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达载体pGEX4T-1-HSP70,并转化入大肠埃希氏菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导重组菌... 根据GenBank登录的MO HSP70基因序列,设计特异性引物对MO新疆分离株HSP70基因进行扩增,克隆入T载体中测序。将HSP70基因亚克隆入表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达载体pGEX4T-1-HSP70,并转化入大肠埃希氏菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。SDS-PAGE分析证实表达的重组融合蛋白分子质量为53ku;Western blot分析表明该重组蛋白可与MO阳性血清发生特异性免疫学反应,证实表达的重组HSP70具有良好的反应原性。重组HSP70蛋白免疫小鼠后可诱导机体产生特异性抗体,证实该重组蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 MO HSP70基因 载体构建 原核表达
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ncRNA伴侣分子hfq基因缺失对单核细胞增生李斯特菌环境适应能力的影响 被引量:3
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作者 卢海亭 乔军 +6 位作者 孟庆玲 彭叶龙 陈诚 谢堃 才学鹏 陈创夫 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1174-1178,共5页
Hfq作为一种保守的RNA分子伴侣蛋白,主要通过与nc RNA结合来参与调控单核细胞增生李斯特菌(LM)的生命活动.利用基因重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法构建具有氯霉素抗性的p KSV7-Δhfq重组穿梭质粒,电转化至新疆野毒株LM-SB5感受态细胞后在42... Hfq作为一种保守的RNA分子伴侣蛋白,主要通过与nc RNA结合来参与调控单核细胞增生李斯特菌(LM)的生命活动.利用基因重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法构建具有氯霉素抗性的p KSV7-Δhfq重组穿梭质粒,电转化至新疆野毒株LM-SB5感受态细胞后在42℃和氯霉素压力下进行同源重组,筛选LM-SB5 hfq基因缺失株,并分析hfq基因缺失株在不同温度、pH、高盐、乙醇、H_2O_2、Triton X-100胁迫环境下的适应能力.结果成功构建得到一株遗传性稳定的LM hfq基因缺失株LM-Δhfq;LM-Δhfq对5%NaCl、3.5%乙醇、0.1%H_2O_2的适应能力显著降低,对30℃、37℃、42℃、pH 4、pH 9及Triton X-100的适应能力没有显著变化,表明Hfq参与了LM对高盐、乙醇、H_2O_2胁迫环境的适应过程.本研究为进一步揭示Hfq蛋白在参与ncRNA调控细菌生命活动的机制奠定了基础. 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 非编码RNA hfq基因 同源重组 分子伴侣
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单增李斯特菌hfq基因的克隆及分子特征分析 被引量:3
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作者 彭叶龙 乔军 +6 位作者 孟庆玲 谢堃 陈诚 马玉 才学鹏 陈创夫 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期1-4,共4页
目的:了解单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes,LM)SB5野毒株ncRNA伴侣分子怕基因及其编码蛋白质的分子生物学特征。方法:利用PCR方法对hfq基因进行扩增、克隆及测序,对魄向基因分子特征进行分析,预测其编码蛋白质的二三级结构... 目的:了解单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes,LM)SB5野毒株ncRNA伴侣分子怕基因及其编码蛋白质的分子生物学特征。方法:利用PCR方法对hfq基因进行扩增、克隆及测序,对魄向基因分子特征进行分析,预测其编码蛋白质的二三级结构及功能活性位点,对其进行同源性及遗传变异分析。结果:LMhfq基因全长234bp,编码77个氨基酸,对推导的Hfq氨基酸序列分析发现从N端到C端包含1个饯一螺旋及5个β-折叠,具有RNA结合位点及六聚体结合位点。LM-SB5hfq基因核苷酸序列与李斯特菌属各菌株同源率为94.5~100%,与其他种属细菌同源率为36.19—62.39%。结论:Hfq蛋白具有RNA的结合位点,可能在细菌ncRNA调节基因表达过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 危向基因 克隆 序列分析
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加味升降散穴位贴敷治疗痰热型原发性高血压临床研究 被引量:2
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作者 梁燕 +4 位作者 多慧玲 陈蕾 来于 王淑婉 黄松旭 《国际中医中药杂志》 2021年第6期541-545,共5页
目的评价加味升降散穴位贴敷治疗痰热型原发性高血压的疗效。方法将符合入选标准的2018年9月-2019年9月石家庄市中医院61例患者采用分层随机分配法分为2组,其中治疗组30例,对照组31例。对照组口服苯磺酸氨氯地平片,治疗组在对照组基础... 目的评价加味升降散穴位贴敷治疗痰热型原发性高血压的疗效。方法将符合入选标准的2018年9月-2019年9月石家庄市中医院61例患者采用分层随机分配法分为2组,其中治疗组30例,对照组31例。对照组口服苯磺酸氨氯地平片,治疗组在对照组基础上加用加味升降散穴位贴敷,2组均治疗4周。分别于治疗前后进行中医证候评分,采用动态血压监测仪进行24 h动态血压测定,包括白天平均收缩压(dMSBP)、白天平均舒张压(dMDBP)、夜间平均收缩压(nMSBP)、夜间平均舒张压(nMDBP)、24小时平均收缩压(24 hMSBP)、24小时平均舒张压(24 hMDBP)并进行血压昼夜节律检测。结果治疗后,治疗组nMSBP、24 hMSBP低于对照组(t值分别为-2.331、-1.511,P值分别为0.045、0.033);治疗组血压昼夜节律[(8.87±8.33)%比(6.94±6.12)%,t=1.034]高于对照组(P<0.05);治疗组治疗后眩晕、头痛、头如裹、呕吐痰涎、心烦不安、口苦、失眠评分均低于对照组(P<0.05)。结论加味升降散穴位贴敷可有效降低痰热型原发性高血压患者的血压水平,且对夜间血压的改善尤为明显,从而减少血压波动,改善患者症状。 展开更多
关键词 原发性高血压 升降散 穴位贴敷疗法 24小时动态血压 血压 昼夜节律
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从国庆庆典看仪式传播对国家认同的建构 被引量:2
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作者 崔有为 《新闻研究导刊》 2020年第15期91-92,共2页
国家认同主要表现为公民对于本国的国家主权、政治制度、道德标准、历史文化等方面产生的情感和归属感,增强公民的国家认同感对于维持社会秩序、维护国家统一、保障社会稳定都具有重要的作用。政府和大众传播媒介是建构国家认同的重要... 国家认同主要表现为公民对于本国的国家主权、政治制度、道德标准、历史文化等方面产生的情感和归属感,增强公民的国家认同感对于维持社会秩序、维护国家统一、保障社会稳定都具有重要的作用。政府和大众传播媒介是建构国家认同的重要力量。庆祝中华人民共和国成立70周年庆典活动,经由媒介的大量集中报道,形成了媒介狂欢。从仪式传播的角度来看,国庆庆典通过唤醒集体记忆,让参与者共同体验、共同营造意义空间,重新凝聚和团结了社会群体,使国家认同得到进一步强化。 展开更多
关键词 仪式传播 媒介事件 集体记忆 象征符号
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绵羊肺炎支原体基因组DNA表达文库的构建与鉴定 被引量:2
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作者 陈诚 乔军 +5 位作者 孟庆玲 胡政香 马玉 才学鹏 陈创夫 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期646-651,共6页
为了筛选绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)免疫原性相关基因,提取MO基因组DNA,利用限制性内切酶Sau3AⅠ对基因组DNA进行酶切,回收500-3 000bp的基因组DNA片段,用T4DNA连接酶将其与经BamHⅠ酶切并去磷酸化处理的pET28a/b/... 为了筛选绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)免疫原性相关基因,提取MO基因组DNA,利用限制性内切酶Sau3AⅠ对基因组DNA进行酶切,回收500-3 000bp的基因组DNA片段,用T4DNA连接酶将其与经BamHⅠ酶切并去磷酸化处理的pET28a/b/c载体连接,然后转化至DH5α感受态细胞,通过菌液PCR对插入到载体中的片段大小及插入率进行鉴定。从转化的平板上提取质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,构建MO基因组表达文库。随机挑选单菌落,用pET28a/b/c通用引物进行PCR鉴定,结果显示插入片段大小为300-2 000bp,插入率为90%,表明成功构建了MO基因组表达文库,该文库的构建为进一步筛选MO相关的免疫性基因及潜在候选疫苗靶点奠定前期基础。 展开更多
关键词 MO 基因组表达文库 构建 鉴定
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