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不同调控元件及组合对烟草外源蛋白瞬时表达的效果分析 被引量：5
1
作者 刘文浩 王瑞丰 +1 位作者 刘琬琳 许杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期62-71,共10页
植物瞬时表达是一种高效快速获得外源基因表达的方法,该系统主要应用于蛋白互作研究、调控元件功能分析、蛋白亚细胞定位和蛋白制剂合成等方面。为了进一步提高外源基因在瞬时表达体系中稳定表达效果,本研究对瞬时表达载体的多种作用元... 植物瞬时表达是一种高效快速获得外源基因表达的方法,该系统主要应用于蛋白互作研究、调控元件功能分析、蛋白亚细胞定位和蛋白制剂合成等方面。为了进一步提高外源基因在瞬时表达体系中稳定表达效果,本研究对瞬时表达载体的多种作用元件及转化条件进行优化。首先,我们在目前最常用的双元表达载体pCambia1300骨架上,分别添加可增强特异性转录和稳定蛋白表达的新的调控元件,构建pREU-EF、pREUR-EF和pREUR-p24-EF重组表达载体,并且通过定性和定量方法分析不同元件组合、不同菌液浓度对报告基因eGFP表达的影响。激光共聚焦显微镜观察结果证明3个重组载体可在烟草叶片的细胞膜、细胞质和细胞核中快速表达报告基因;定量PCR分析表明3个重组载体中报告基因在转录表达水平上分别比原pCambia1301-eGFP载体提高了4倍、20倍和28倍;蛋白水平分析表明烟草叶片转化48 h后,pREUR-EF外源蛋白表达量明显高于pREU-EF;并且当菌液注射液浓度OD600=0.4左右时,外源蛋白的表达效率最高。此外,我们还进一步把改造后的瞬时表达重组载体运用到双荧光素酶(Dual-Luciferase)报告系统中,实验证明改造后的瞬时表达重组载体可以更加快捷和有效地用于转录调控分析。因此,烟草瞬时表达载体中作用元件增加和优化组合,可以有效地提高外源蛋白的表达。 展开更多
关键词 植物瞬时表达 调控元件 烟草 转录调控 双荧光素酶
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国内甲状腺癌专病数据库单中心及多中心建设的探索及初步应用 被引量：1
2
作者 刘琬琳 王宇 +4 位作者 胡佳倩 魏文俊 郑莹 莫淼 王奕 《中华转移性肿瘤杂志》 2023年第3期207-212,共6页
甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤。国内在甲状腺癌诊疗过程中缺乏系统性收集和整理标准化临床数据, 缺乏高级别的诊断准确性、治疗有效性、并发症发生率等相关的临床研究, 因此建立甲状腺癌专病数据库是一条必经之路。甲状腺癌单... 甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤。国内在甲状腺癌诊疗过程中缺乏系统性收集和整理标准化临床数据, 缺乏高级别的诊断准确性、治疗有效性、并发症发生率等相关的临床研究, 因此建立甲状腺癌专病数据库是一条必经之路。甲状腺癌单病种数据库需要保证数据的结构化、完整性、准确性及时效性。单中心甲状腺癌专病数据库的建设是多中心数据库建设的基础。通过基于区块链技术联盟协作开展多中心临床研究, 建立全国首个多中心、一体化、规范化的甲状腺癌专病数据库。多中心甲状腺癌专病数据库的建立难度主要在于数据标准及数据上传格式的统一, 需要有统一的监督管理组织及数据共享合作模式。 展开更多
关键词 甲状腺癌 数据库 单病种 区域链
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英语的分层教学与全面提高 被引量：2
3
作者 刘琬琳 《宁德师专学报（哲学社会科学版）》 2002年第2期98-100,共3页
关键词 学习英语 全面提高 兴趣 练习 英语学习 回答 个性心理特征 分层教学 差生 农村中学
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拟南芥花药绒毡层细胞中具有基因簇特征的基因进化和功能分析 被引量：2
4
作者 左泽远 刘琬琳 许杰 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期147-162,共16页
在植物基因组中,除了同源基因成簇现象外,近年来还发现一些具有共表达特性的异源基因也能够以基因簇形式存在,但这些异源基因簇的进化和生物学功能尚不清楚。花药发育和花粉形成是植物进化出的特有的生殖生物学过程,同时产生了一些在花... 在植物基因组中,除了同源基因成簇现象外,近年来还发现一些具有共表达特性的异源基因也能够以基因簇形式存在,但这些异源基因簇的进化和生物学功能尚不清楚。花药发育和花粉形成是植物进化出的特有的生殖生物学过程,同时产生了一些在花药绒毡层中特异表达和特定功能的基因簇基因。该研究通过筛选和分析花药绒毡层中基因簇基因的分子特性、表达调控、基因年龄和基因重复进化等信息,探讨花药基因簇基因与植物开花功能进化之间的关系。结果表明,在拟南芥(Arabidopsisthaliana)中共筛选到84个(13个基因簇)花药绒毡层特异高表达的基因簇基因,它们主要产生于串联重复事件,76%的基因出现在开花植物分化后的阶段,主要参与生殖发育、花粉鞘组成和脂代谢等生物学过程。研究初步解析了拟南芥花药绒毡层中基因簇基因的基本特征、生物学功能和基因进化机制,为深入揭示植物基因簇基因的遗传学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 基因簇 花药绒毡层 基因重复 进化
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两相喷射器增压的二级压缩制冷系统性能分析 被引量：1
5
作者 刘琬琳 黄潇治 李风雷 《华侨大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2020年第1期60-66,共7页
建立一维等面积两相喷射器热力学模型,改进传统的二级压缩系统,提出一种喷射器增压的二级压缩制冷系统.以R1234yf为制冷剂,采用能量分析模型,研究不同设计工况下喷射器的性能.结果表明:当蒸发温度升高时,系统的性能系数(COP)和喷射系数... 建立一维等面积两相喷射器热力学模型,改进传统的二级压缩系统,提出一种喷射器增压的二级压缩制冷系统.以R1234yf为制冷剂,采用能量分析模型,研究不同设计工况下喷射器的性能.结果表明:当蒸发温度升高时,系统的性能系数(COP)和喷射系数增大,喷射器升压比减小;当冷凝温度升高时,COP和喷射系数减小,喷射器升压比增大;当蒸发温度为0℃,冷凝温度为50℃时,COP随着中间温度的升高先增大后减小,且存在一个最优中间温度,系统性能提高率可达10%以上. 展开更多
关键词 两相喷射器 二级压缩 制冷系统 热力学模型
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甲状腺乳头状癌中cortactin、N-WASP的表达及其与临床病理学特征的关系
6
作者 文铎 刘琬琳 +2 位作者 曹一鸣 渠宁 朱永学 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期688-692,共5页
背景与目的:甲状腺乳头状癌是最常见的甲状腺癌病理类型。分析侵袭性伪足关键蛋白cortactin、N-WASP在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平及其与临床病理学特征的关系。方法:选取2015年1月—2017年12月复旦大学附属肿瘤医院病理科保存的甲... 背景与目的:甲状腺乳头状癌是最常见的甲状腺癌病理类型。分析侵袭性伪足关键蛋白cortactin、N-WASP在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平及其与临床病理学特征的关系。方法:选取2015年1月—2017年12月复旦大学附属肿瘤医院病理科保存的甲状腺乳头状癌组织标本及对应癌旁组织89对,采用免疫组织化学方法,检测癌组织与癌旁组织中cortactin、N-WASP蛋白的表达情况并分析其与临床病理学特征之间的关系。结果:癌组织中cortactin和N-WASP的阳性表达率分别为57.30%和59.55%,高于癌旁组织的5.62%和7.87%,差异有统计学意义(P<0.05)。Cortactin的表达与甲状腺乳头状癌患者的年龄、性别、肿瘤大小无显著相关性(P>0.05),但与有无淋巴结转移有关,N-WASP与肿瘤大小、有无淋巴结转移有关(P<0.05)。在有淋巴结转移的病例中,cortactin、N-WASP的阳性表达率均较高(P<0.05)。结论:甲状腺乳头状癌组织中与侵袭性伪足形成相关的cortactin、N-WASP呈高表达,且与甲状腺乳头状癌的发病和淋巴结转移相关。Cortactin与N-WASP的表达水平呈正相关。 展开更多
关键词 CORTACTIN N-WASP 侵袭性伪足 甲状腺乳头状癌 临床病理学特征
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拟南芥EXLs(EXTRACELLULAR LIPASE)基因簇的分子演化特征及其在花药发育中的转录调控分析
7
作者 刘琬琳 余姚一夫 +1 位作者 孙雅倩 许杰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期3154-3167,共14页
基因簇是指两个或两个以上基因成簇排列且功能相关的特殊区域。前期研究表明,植物进化产生一些基因簇特征的功能基因参与有性生殖过程(如花药的发育和雄配子的形成),但目前对于植物有性生殖中特有基因簇的分子演化及转录调控的认知还较... 基因簇是指两个或两个以上基因成簇排列且功能相关的特殊区域。前期研究表明,植物进化产生一些基因簇特征的功能基因参与有性生殖过程(如花药的发育和雄配子的形成),但目前对于植物有性生殖中特有基因簇的分子演化及转录调控的认知还较少。拟南芥(Arabidopsis thaliana)EXLs(EXTRACELLULAR LIPASE)(1~6)是一类在花药发育和雄配子形成中起到重要功能的GDSL(Gly-Asp-Ser-Leu)脂肪酶,本研究利用生物信息方法分析了EXLs(1~6)的组成结构和同源演化特征,结果表明EXLs(1~6)具有典型基因簇特征,蛋白的氨基酸序列具有较高的一致性,其同源基因的成簇现象在其他双子叶植物中也普遍存在。并进一步整合启动子元件、基因表达聚类分析和烟草(Nicotiana tabacum)双荧光素酶系统开展EXLs(1~6)转录调控分析,结果显示,尽管EXLs(1~6)基因簇中的6个基因在花药中都有较高的表达,但这6个基因具有不同的启动子元件,受到不同转录因子的转录调控,其表达特征也有明显的差异。因此,我们推测拟南芥EXLs(1~6)基因簇中的同源基因在植物生殖中的功能并不是完全冗余的,它们的产生可能是功能特化的结果。研究结果为探索EXLs(1~6)基因簇的演化及在生殖发育中的功能提供了科学依据。 展开更多
关键词 拟南芥 EXLs基因簇 花药发育 转录调控 基因演化
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CD90,Tenascin-C在甲状腺癌中的表达水平及临床病理学特征的关系 被引量：2
8
作者 刘琬琳 文铎 +2 位作者 曹一鸣 魏文俊 朱永学 《临床与病理杂志》 2019年第9期1878-1885,共8页
目的:研究CD90,Tenascin-C在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法:选取2016年1月至2018年12月复旦大学附属肿瘤医院病理科保存的甲状腺乳头状癌组织标本及对应癌旁组织70对,采用免疫组织化学和免疫荧光方法,... 目的:研究CD90,Tenascin-C在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法:选取2016年1月至2018年12月复旦大学附属肿瘤医院病理科保存的甲状腺乳头状癌组织标本及对应癌旁组织70对,采用免疫组织化学和免疫荧光方法,检测癌与癌旁组织中CD90,Tenascin-C蛋白的表达情况并分析其与临床特征之间的关系。结果:癌组织CD90,Tenascin-C阳性表达率分别为60.30%和62.55%,高于癌旁组织的6.62%和6.87%(P<0.05)。CD90及Tenascin-C的表达与甲状腺乳头状癌患者的年龄、性别、肿瘤大小差异无统计学意义(P>0.05),但与有无淋巴结转移有关(P<0.05)。CD90+Tenascin-C双阳性与肿瘤多灶性,腺外侵犯及有无淋巴结转移有关(P<0.05),免疫荧光实验证实Tenascin-C蛋白与肿瘤相关成纤维细胞标志分子CD90的共存关系。结论:甲状腺乳头状癌组织中CD90,Tenascin-C呈高表达,与患者临床病理特征有一定关系。 展开更多
关键词 CD90 TENASCIN-C 肿瘤相关成纤维细胞 甲状腺乳头状癌 临床病理特征
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《节大欢喜-大》
9
作者 刘琬琳 刘昕 +1 位作者 刘亚璇 白新蕾 《美苑》 CSSCI 北大核心 2015年第S2期27-,共1页
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