CTC法结合体外受精比较不同方法对绵羊精子体外获能的影响 被引量：5

1

作者 刘烈琴 刘丑生 +4 位作者 郭勇 倪和民 张宏 杨飞鸽 刘云海 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第8期31-34,共4页

为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果,新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA,A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精,并利用金霉素荧... 为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果,新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA,A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精,并利用金霉素荧光染色(chlortetracycline,CTC)法结合各自相应的体外受精结果对其获能效果进行检验。结果显示上游法处理后精子的获能比例和受精后的卵裂率均高于其它组,说明肝素上游法可以较好的诱导绵羊精子获能。 展开更多

关键词 绵羊精子 获能 CTC 体外受精

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雌激素和孕激素对不同发情方式小鼠子宫内膜中孕激素受体分布的影响 被引量：5

2

作者 张鸿波 秦国嵩 +4 位作者 刘云海 郭勇 李晓燕 刘烈琴 倪和民 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2009年第3期206-209,I0007,共5页

目的探讨雌(Estrogen,E2)、孕激素(Progesterone,P4)对同期发情与自然发情小鼠子宫内膜中孕激素受体(Progesterone receptor,PR)分布的影响。方法45只同日龄雌鼠,根据处理方式的不同随机分为5组:自然发情组(对照组)、同期发情组、卵巢... 目的探讨雌(Estrogen,E2)、孕激素(Progesterone,P4)对同期发情与自然发情小鼠子宫内膜中孕激素受体(Progesterone receptor,PR)分布的影响。方法45只同日龄雌鼠,根据处理方式的不同随机分为5组:自然发情组(对照组)、同期发情组、卵巢摘除组、P4处理组和E2处理组,5组小鼠在见栓后第4、6、8天分别取样后,采用免疫组织化学法观察小鼠子宫内膜中PR的分布变化情况。结果免疫组织化学染色结果显示,5个处理组小鼠子宫内膜的三种细胞中都有PR存在;同期发情组小鼠子宫内膜中三种类型细胞PR的表达与自然发情组差异有显著性(P<0.05);P4处理组小鼠子宫内膜中三种类型细胞PR的表达在见栓第4、6天显著低于卵巢摘除组(P<0.05);E2处理组小鼠子宫内膜腺上皮和间质中PR在第4、6、8天时都显著高于卵巢摘除组(P<0.05),而在腔上皮中则显著低于卵巢摘除组(P<0.05)。结论同期发情处理与自然发情小鼠的子宫内膜上PR的分布,都受E2和P4的特异诱导而变化。 展开更多

关键词 小鼠 子宫内膜 雌激素 孕激素 孕激素受体分布

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不同培养液及血清浓度对绵羊孤雌生殖胚胎发育的影响 被引量：4

3

作者 张宏 刘云海 +4 位作者 倪和民 杨飞鸽 刘烈琴 薛君忠 郭勇 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第7期32-34,共3页

体外成熟的绵羊卵母细胞,经5μmol/L A23187 5 min和2 mmol/L 6-DMAP 4 h激活后,分别在SOFaa、M-199两种培养液中进行培养,试验比较了SOFaa、M-199液分别添加BSA和不同浓度(10%、20%)胎牛血清对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。M-199+FC... 体外成熟的绵羊卵母细胞,经5μmol/L A23187 5 min和2 mmol/L 6-DMAP 4 h激活后,分别在SOFaa、M-199两种培养液中进行培养,试验比较了SOFaa、M-199液分别添加BSA和不同浓度(10%、20%)胎牛血清对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。M-199+FCS组的卵裂率显著低于SOFaa+BSA和SOFaa+FCS组(P<0.05),SOFaa+BSA组的囊胚率显著低于M-199+BSA、SOFaa+FCS、M-199+FCS三组(P<0.05);SOFaa+10%FCS与SOFaa+20%FCS组的卵裂率及囊胚率均无显著差异,M-199+10%FCS和M-199+20%FCS组的卵裂率及囊胚率间均无显著差异。结果表明:SOFaa比M-199更适合绵羊孤雌生殖胚体外发育,此外添加10%的FCS即可达到较好的培养效果。 展开更多

关键词 绵羊 孤雌胚 体外培养

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双重荧光染色法评定小鼠体内外囊胚质量的研究 被引量：3

4

作者 孟令君 高建明 +2 位作者 刘云海 刘烈琴 张建芳 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2008年第3期49-51,59,共4页

研究并建立适合小鼠囊胚的双重荧光染色方法。用建立的双重荧光染色法对小鼠体内外囊胚细胞计数,分别计数囊胚不同时期的内细胞团和滋养层的细胞数,比较不同发育时期囊胚的内细胞团和滋养层细胞的比例,评定体内外囊胚质量。

关键词 双重荧光染色 内细胞团 滋养层 细胞计数 小鼠囊胚

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不同共培养细胞类型对绵羊孤雌生殖胚发育的影响 被引量：3

5

作者 张宏 刘云海 +3 位作者 倪和民 杨飞鸽 刘烈琴 郭勇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第5期8-12,共5页

体外成熟的绵羊卵母细胞经孤雌激活4h后,分别在5种体细胞单层(成熟前颗粒细胞、成熟后颗粒细胞、输卵管壶腹部上皮细胞、输卵管峡部上皮细胞、子宫内膜细胞)中进行共培养,比较其对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。结果表明:成熟前后颗粒... 体外成熟的绵羊卵母细胞经孤雌激活4h后,分别在5种体细胞单层(成熟前颗粒细胞、成熟后颗粒细胞、输卵管壶腹部上皮细胞、输卵管峡部上皮细胞、子宫内膜细胞)中进行共培养,比较其对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。结果表明:成熟前后颗粒细胞对绵羊孤雌胚体外发育的卵裂率和囊胚率差异不显著(P>0·05);但输卵管壶腹部上皮细胞(27·5%)、子宫内膜细胞组囊胚率(27·7%)高于输卵管峡部上皮细胞和颗粒细胞(17·7%、20·3%),且差异显著(P<0·05);壶腹部上皮细胞与子宫内膜细胞在囊胚率上差异不显著(P>0·05)。说明在绵羊孤雌生殖胚体外发育中,选择成熟前及成熟后的颗粒细胞都可达到相同的共培养效果;使用输卵管壶腹部上皮细胞、子宫内膜细胞进行共培养效果优于输卵管峡部上皮细胞和颗粒细胞,可以得到较高的囊胚率。 展开更多

关键词 共培养 绵羊 孤雌生殖胚 体外培养

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钙离子载体及咖啡因对绵羊精子获能的影响 被引量：2

6

作者 刘烈琴 郭勇 +4 位作者 刘云海 薛君忠 张宏 李晓燕 倪和民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期112-116,共5页

通过添加不同浓度（0.05、0.1、0.2、0.5、1、5、10μmol/L）的钙离子载体（A23187,IA）及2 mmol/L咖啡因,探讨不同作用时间其对绵羊精子体外获能的影响。结果发现,IA浓度越高,精子的体外获能率越高,顶体反应率越低,活力越低,死精子就越... 通过添加不同浓度（0.05、0.1、0.2、0.5、1、5、10μmol/L）的钙离子载体（A23187,IA）及2 mmol/L咖啡因,探讨不同作用时间其对绵羊精子体外获能的影响。结果发现,IA浓度越高,精子的体外获能率越高,顶体反应率越低,活力越低,死精子就越多;而延长作用时间对获能、顶体反应的影响不明显。IA和咖啡因共同作用后,咖啡因能够促进IA诱导顶体反应的发生。建议用IA诱导绵羊精子获能时,其浓度以0.050.2μmol/L为宜,作用时间1 min。 展开更多

关键词 绵羊精子 体外获能 钙离子载体 咖啡因

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钙离子浓度对绵羊精子获能的影响 被引量：2

7

作者 李贺娟 倪和民 +3 位作者 薛君忠 张宏 杨飞鸽 刘烈琴 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第10期99-101,共3页

为探讨钙离子浓度对绵羊精子获能的影响,将绵羊精子在不同钙离子浓度的绵羊输卵管合成液(SOF液)中培养,并用钙离子载体A23187进行诱导。结果发现,不同钙离子浓度对绵羊精子的影响差别不明显,经A23187诱导后,1.7mmol/L组和2 mmol/L组的... 为探讨钙离子浓度对绵羊精子获能的影响,将绵羊精子在不同钙离子浓度的绵羊输卵管合成液(SOF液)中培养,并用钙离子载体A23187进行诱导。结果发现,不同钙离子浓度对绵羊精子的影响差别不明显,经A23187诱导后,1.7mmol/L组和2 mmol/L组的顶体反应率(AR)与其他组有显著差异(P<0.05),1.7 mmol/L浓度中,绵羊精子存活时间为16 h,2 mmol/L浓度中的存活时间为10 h,因此认为绵羊精子获能的适宜钙离子浓度为1.7 mmol/L,且获能过程中钙离子的存在是必要的。 展开更多

关键词 绵羊 精子 钙离子浓度 获能

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孕酮对绵羊精子体外获能的影响

8

作者 薛君忠 刘云海 +4 位作者 郭勇 刘烈琴 张宏 杨飞鸽 倪和民 《广西农业生物科学》 CSCD 2006年第B09期63-67,共5页

为了探讨孕酮对绵羊精子体外获能的影响,将绵羊精子分别加到含不同浓度(1、5、10μm o l/L)孕酮的输卵管合成液(SOF)中,作用不同时间后分别取出部分精子样本进行金霉素荧光染色(Ch lortetracycline,CTC),通过精子与CTC结合染色的不同类... 为了探讨孕酮对绵羊精子体外获能的影响,将绵羊精子分别加到含不同浓度(1、5、10μm o l/L)孕酮的输卵管合成液(SOF)中,作用不同时间后分别取出部分精子样本进行金霉素荧光染色(Ch lortetracycline,CTC),通过精子与CTC结合染色的不同类型来评定孕酮对绵羊精子的影响。结果显示,在240 m in和360 m in时,各实验组中获能精子的百分数均明显高于对照组的(P<0.05),说明一定浓度的孕酮有利于绵羊精子的体外获能。 展开更多

关键词 绵羊 精子获能 CTC染色 孕酮

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不同发情阶段的绵羊血清对绵羊精子获能和体外受精的影响 被引量：1

9

作者 刘烈琴 刘云海 +2 位作者 郭勇 杨飞鸽 倪和民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1150-1156,共7页

为比较不同发情阶段和不同浓度的绵羊血清在绵羊体外受精过程中对绵羊精子体外获能及存活时间、受精效果的影响,试验以绵羊输卵管合成液(SOF)为基础获能液,在其中分别添加发情当天、发情结束和发情间期的绵羊血清,血清浓度分别为0%、2%... 为比较不同发情阶段和不同浓度的绵羊血清在绵羊体外受精过程中对绵羊精子体外获能及存活时间、受精效果的影响,试验以绵羊输卵管合成液(SOF)为基础获能液,在其中分别添加发情当天、发情结束和发情间期的绵羊血清,血清浓度分别为0%、2%、5%、10%和20%。利用金霉素荧光染色(CTC,chlortetracycline)法及体外受精2种方法检测不同血清及其浓度对绵羊精子获能的影响。结果表明:1)当在获能液中添加发情当天绵羊血清时,在10%和20%血清浓度下作用45 min的获能效果最好,其获能而且未完成顶体反应的精子率(45.28%和44.52%)显著高于0%、2%和5%血清浓度组(30.14%、28.71%和35.49%,P<0.05);2)当在获能液中添加发情结束时或发情间期的绵羊血清时,在含不同浓度的这2种血清的获能液中作用45 min后,各浓度组引起的获能精子百分率变化均不显著(P>0.05);3)在含20%发情当天绵羊血清的获能液中,精子的存活时间(18 h)显著高于含20%发情结束和发情间期的绵羊血清的获能液(11 h;11 h);4)在不同血清诱导获能后进行的体外受精的试验中,添加发情当天绵羊血清组的卵裂率和囊胚率(62.5%和26.25%)均显著高于发情结束时血清组(42.22%和11.11%,P<0.05)和发情间期血清组(37.36%和15.38%,P<005)。以上结果表明:在进行绵羊体外受精试验中,采用20%发情当天绵羊血清作用45 min比采用发情结束和发情间期的绵羊血清能更好地诱导精子获能。 展开更多

关键词 绵羊 精子 血清 获能 体外受精

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绵羊精子在不同动物生殖道内获能效果的比较

10

作者 刘烈琴 刘云海 +4 位作者 倪和民 薛君忠 张进涛 白景隆 郭勇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第1期27-29,共3页

体外获能是哺乳动物体外受精体系中很重要的一步，获能处理的好坏直接关系着受精的成功与否。目前，绵羊体外受精效果与牛相比尚有较大差距，虽然原因是多方面的，但绵羊精子体外获能效果不十分理想是一个重要方面。因此，试验拟从精子... 体外获能是哺乳动物体外受精体系中很重要的一步，获能处理的好坏直接关系着受精的成功与否。目前，绵羊体外受精效果与牛相比尚有较大差距，虽然原因是多方面的，但绵羊精子体外获能效果不十分理想是一个重要方面。因此，试验拟从精子获能的角度来探寻绵羊受精效果不理想的原因。 展开更多

关键词 精子获能 哺乳动物 绵羊 能效 生殖道 体外受精 体外获能 受精效果

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成熟液和时间对绵羊体外孤雌胚发育的影响

11

作者 杨飞鸽 郭勇 +4 位作者 倪和民 张宏 刘烈琴 薛君忠 刘云海 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第1期33-34,共2页

颗粒细胞在卵母细胞体外成熟和体外受精进程中具有重要的作用，能显著提高卵母细胞体外成熟和体外受精率；但也有研究发现，颗粒细胞存在与否并不影响卵母细胞体外成熟和体外受精率，甚至还可显著降低其体外成熟率和体外受精率。

关键词 卵母细胞体外成熟 体外受精 胚发育 绵羊 时间 颗粒细胞 受精率 成熟率

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透明带诱导绵羊精子顶体反应的研究

12

作者 刘烈琴 顾申 +5 位作者 周卫宾 杨飞鸽 张宏 郭勇 刘云海 倪和民 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第23期29-31,共3页

为探讨绵羊透明带对其精子顶体反应的诱导作用,试验分为3组:①不经获能处理的精子与透明带共孵育,②精子经获能处理后与透明带共孵育,③不经获能处理的精子与透明带共孵育,然后添加IA23187,来观察透明带对精子顶体反应的诱导效果。结果... 为探讨绵羊透明带对其精子顶体反应的诱导作用,试验分为3组:①不经获能处理的精子与透明带共孵育,②精子经获能处理后与透明带共孵育,③不经获能处理的精子与透明带共孵育,然后添加IA23187,来观察透明带对精子顶体反应的诱导效果。结果显示获能与否并不影响透明带对精子顶体反应的诱导效果,添加IA23187后,顶体反应升高,但差异不显著(P>0.05)。说明透明带可诱导绵羊精子(无论获能与否)发生顶体反应,IA23187不能提高透明带对顶体反应的诱导作用。 展开更多

关键词 绵羊精子 获能 顶体反应 透明带 钙离子载体

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孕酮和雌二醇对绵羊精子体外获能的影响

13

作者 薛君忠 孟丹娜 +4 位作者 韩国亮 刘烈琴 张宏 杨飞鸽 倪和民 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2007年第21期10-13,共4页

试验探讨孕酮和雌二醇对绵羊精子体外获能和顶体反应的影响。将绵羊精子分别加到含不同浓度孕酮(1、10和100μmol/L)和雌二醇(1、10、和100μmol/L)的输卵管合成液(SOF)中,作用不同时间后分别取出部分精子样本进行金霉素荧光染色(chlort... 试验探讨孕酮和雌二醇对绵羊精子体外获能和顶体反应的影响。将绵羊精子分别加到含不同浓度孕酮(1、10和100μmol/L)和雌二醇(1、10、和100μmol/L)的输卵管合成液(SOF)中,作用不同时间后分别取出部分精子样本进行金霉素荧光染色(chlortetracycline,CTC),通过精子与CTC结合染色的不同类型来评定孕酮和雌二醇对绵羊精子的作用。结果表明:雌二醇对绵羊精子体外获能和顶体反应都没有显著的促进作用(P>0.05);一定浓度的孕酮和雌激素组合抑制绵羊精子体外获能和顶体反应的发生(P<0.05)。 展开更多

关键词 精子获能 CTC染色 孕酮 雌二醇 绵羊

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猪链球菌和化脓性棒状杆菌混合感染的诊治

14

作者 魏拣选 党如意 +4 位作者 刘芳宁 张淑霞 刘烈琴 李五福 杨增岐 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2005年第10期53-54,共2页

关键词 猪 链球菌病 化脓性棒状杆菌 混合感染 发病情况 临床症状 实验室检验 病理变化

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不同生殖周期的绵羊生殖道不影响绵羊精子获能

15

作者 刘烈琴 周卫宾 +2 位作者 顾申 杨飞鸽 郭勇 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2008年第3期13-15,共3页

了解发情期、妊娠前期、发情间期的生殖道对获能的影响,从而选取一个适当时期的生殖道作为实验的基础,希望能为体外获能的研究提供一些参考。将离心后的绵羊精液输入发情期、妊娠前期、发情间期的绵羊生殖道作用一定时间后,发现获能的... 了解发情期、妊娠前期、发情间期的生殖道对获能的影响,从而选取一个适当时期的生殖道作为实验的基础,希望能为体外获能的研究提供一些参考。将离心后的绵羊精液输入发情期、妊娠前期、发情间期的绵羊生殖道作用一定时间后,发现获能的比例均会增加,但不同时期的生殖道间差异不显著,且顶体反应的比例变化也不大;说明处于不同生殖周期的绵羊生殖道对绵羊精子获能的影响是相同的。 展开更多

关键词 精子获能 生殖道 绵羊

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肝素浓度和作用时间对绵羊精子体外获能和体外受精的影响

16

作者 刘烈琴 罗桂河 +3 位作者 孟丹娜 薛君忠 郭勇 倪和民 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第21期21-24,共4页

通过研究添加不同的浓度肝素(0、5、10、20、50μg/mL)及不同作用时间(0、30、45、60、90、120min)对绵羊精子体外获能、活力、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添... 通过研究添加不同的浓度肝素(0、5、10、20、50μg/mL)及不同作用时间(0、30、45、60、90、120min)对绵羊精子体外获能、活力、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添加10μg/mL肝素作用45min时,其获能率最高,顶体反应率最低(40.92%和16.59%)(P<0.05),存活时间18h,能够提高受精卵的囊胚发育;单独使用咖啡因或与10μg/mL肝素联合使用,其获能效果均不如单独使用10μg/mL肝素。说明绵羊精子获能时肝素的适宜浓度是10μg/mL,作用时间是45min,咖啡因无协同肝素促进获能的作用。 展开更多

关键词 绵羊精子 体外获能 肝素 咖啡因 体外受精

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