荧光免疫分析法检测食品中黄曲霉毒素的研究进展 被引量：16

1

作者 左晓维 雷琳 +1 位作者 刘河冰 陶晓奇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期236-245,共10页

黄曲霉毒素是迄今发现的真菌毒素中毒性最强的一类,是公认的I类致癌物,在粮食、坚果、油脂、乳及其制品等多种食品中均有发现。因此,研究出准确、快速、便捷的检测方法对保障食品安全和人类健康具有重要意义。荧光免疫分析法具有灵敏度... 黄曲霉毒素是迄今发现的真菌毒素中毒性最强的一类,是公认的I类致癌物,在粮食、坚果、油脂、乳及其制品等多种食品中均有发现。因此,研究出准确、快速、便捷的检测方法对保障食品安全和人类健康具有重要意义。荧光免疫分析法具有灵敏度高、准确性好、检测速度快、操作简单等优势,适合现场高通量快速筛查,近年来被广泛地用于检测食品中的黄曲霉毒素。该文介绍了4类常用的荧光标记物(荧光素、量子点、上转换纳米粒子和稀土离子螯合物),并详细阐述了5种荧光免疫分析法(荧光免疫吸附法、荧光免疫层析法、荧光偏振免疫分析、荧光共振能量转移免疫分析和时间分辨免疫分析)的检测原理,以及上述方法应用于检测食品中黄曲霉毒素的国内外最新研究进展,为今后的研究提供借鉴。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素 食品 荧光标记物 荧光免疫分析法

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鸡大肠杆菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的16S rRNA甲基化酶检测 被引量：10

2

作者 肖方 李新生 +1 位作者 刘河冰 杜向党 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期870-873,共4页

为了解河南地区鸡源大肠杆菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的16S rRNA甲基化酶的流行情况,对2005-2008年在河南地区病鸡的病料中分离保存的429株大肠杆菌进行药敏试验,并分别设计特异性引物对其进行16S rRNA甲基化酶基因的聚合酶链式反应... 为了解河南地区鸡源大肠杆菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的16S rRNA甲基化酶的流行情况,对2005-2008年在河南地区病鸡的病料中分离保存的429株大肠杆菌进行药敏试验,并分别设计特异性引物对其进行16S rRNA甲基化酶基因的聚合酶链式反应扩增。检测结果显示,在6种氨基糖苷类药物高水平耐药的16SrRNA甲基化酶基因中,仅检测出ArmA和RmtB,检出率分别为20.7%（89/429）和23.3%（100/429）。且随时间的推移,ArmA和RmtB的出现几乎是逐年增高。提示河南地区鸡大肠杆菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的16S rRNA甲基化酶产生率较高,且以ArmA和RmtB为主。 展开更多

关键词 大肠杆菌 氨基糖苷类 耐药 16S rRNA甲基化酶

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质粒介导的喹诺酮类耐药基因在鸡源大肠杆菌中的流行 被引量：11

3

作者 肖方 李新生 +4 位作者 张素梅 刘河冰 潘玉善 刘建华 杜向党 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期222-225,共4页

为了解河南省质粒介导的喹诺酮类耐药基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr)在产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌中的流行与分布,分别设计特异性引物对2005-2008年在河南省病鸡病料中分离保存的158株16SrRNA甲基化酶阳性鸡大肠杆... 为了解河南省质粒介导的喹诺酮类耐药基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr)在产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌中的流行与分布,分别设计特异性引物对2005-2008年在河南省病鸡病料中分离保存的158株16SrRNA甲基化酶阳性鸡大肠杆菌进行PCR扩增。结果显示,在158株产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌中,qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr的检出率分别为0.6%,2.5%,13.9%,2.5%和58.2%。提示质粒介导的喹诺酮类耐药基因在河南省产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌中普遍存在,且以qnrS和aac(6′)-Ib-cr为主。 展开更多

关键词 大肠杆菌 喹诺酮类 耐药 质粒介导

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基于核酸适配体检测动物性食品中氯霉素残留的研究进展 被引量：11

4

作者 王鑫 刘河冰 陶晓奇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期254-262,共9页

氯霉素是一种禁用于食品动物的广谱抗生素,建立对其残留的快速检测尤为重要;核酸适配体作为新型生物识别元件,稳定性好且易合成,结合核酸适配体对氯霉素进行残留检测是继传统抗体检测之后又一新的突破方向,因此具有良好发展前景。在此... 氯霉素是一种禁用于食品动物的广谱抗生素,建立对其残留的快速检测尤为重要;核酸适配体作为新型生物识别元件,稳定性好且易合成,结合核酸适配体对氯霉素进行残留检测是继传统抗体检测之后又一新的突破方向,因此具有良好发展前景。在此综述了近5年基于核酸适配体检测动物性食品中氯霉素残留的研究进展,主要包括比色分析法、荧光分析法、化学发光分析法、表面增强拉曼散射检测法以及电化学生物传感器法等,发现当前适配体在氯霉素残留检测领域缺乏系统深入研究,相关检测应用难以同时兼顾简单快速和灵敏准确的检测需求,特此比较和讨论不同分析方法,并分析其优缺点及发展趋势,以期为动物性食品中氯霉素残留的高效监管提供有益参考。 展开更多

关键词 核酸适配体 氯霉素 分析方法 动物性食品

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氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶的研究进展 被引量：5

5

作者 焦显芹 肖方 +2 位作者 刘河冰 李新生 杜向党 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期128-130,共3页

16S rRNA甲基化酶的出现可直接导致革兰氏阴性菌对氨基糖苷类药物高度耐药,已成为临床治疗中面临的重大难题。作者简要概述了细菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的16S rRNA甲基化酶的发现过程、作用机制、医学和兽医临床分布、遗传背景及... 16S rRNA甲基化酶的出现可直接导致革兰氏阴性菌对氨基糖苷类药物高度耐药,已成为临床治疗中面临的重大难题。作者简要概述了细菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的16S rRNA甲基化酶的发现过程、作用机制、医学和兽医临床分布、遗传背景及扩散机制,以期引起对该类药物耐药机制的关注。 展开更多

关键词 甲基化酶 氨基糖苷类 耐药

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ESBLs在产16S rRNA甲基化酶鸡大肠杆菌中的流行 被引量：5

6

作者 刘河冰 李新生 +4 位作者 莫娟 肖方 陈玉霞 苑丽 杜向党 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期621-624,共4页

为了解河南地区超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药基因（TEM，SHV，OXA和CTX—M）在产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌的流行，分别设计特异性引物对2005—2008年在河南地区病鸡的病料中分离保存的158株16S rRNA甲基化酶阳性鸡源大肠杆菌进... 为了解河南地区超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药基因（TEM，SHV，OXA和CTX—M）在产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌的流行，分别设计特异性引物对2005—2008年在河南地区病鸡的病料中分离保存的158株16S rRNA甲基化酶阳性鸡源大肠杆菌进行聚合酶链式反应扩增。检测结果显示，在158株产16S rRNA甲基化酶鸡大肠杆菌中，TEM，SHV，OXA和CTX—M检出率分别为94．3％，2.5％，62％和47．5％。在5组CTX-M组型中，CTX—M-2组型53株，CTX—M-9组型42株，CTX—M-2＆CTX—M-9组型20株。提示ESBLs在河南地区产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌中普遍存在，且以TEM，OXA和CTX—M为主。ESBLs和氨基糖苷类高水平耐药16S rRNA甲基化酶基因同时出现在临床分离株中，加重了兽医临床治疗中抗菌药物选择的困难。 展开更多

关键词 大肠杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 耐药

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三种ELISA试剂盒与虎红平板凝集试验检测牛布鲁氏菌病的比较试验研究 被引量：5

7

作者 肖妍 霍蕾 +3 位作者 赵丹 李蓉蓉 王建华 刘河冰 《今日畜牧兽医》 2019年第11期6-7,5,共3页

为比较牛布鲁氏菌抗体ELISA检测试剂盒的性能,以及ELISA与虎红平板凝集试验(RBPT)的符合率,采用国内外三种商品化ELISA试剂盒和虎红平板凝集试验,对315份奶牛血清进行了牛布鲁氏菌检测。试验结果显示,美国某公司生产的牛布鲁氏菌ELISA... 为比较牛布鲁氏菌抗体ELISA检测试剂盒的性能,以及ELISA与虎红平板凝集试验(RBPT)的符合率,采用国内外三种商品化ELISA试剂盒和虎红平板凝集试验,对315份奶牛血清进行了牛布鲁氏菌检测。试验结果显示,美国某公司生产的牛布鲁氏菌ELISA试剂盒与RBPT的阳性符合率为94.1%,阴性符合率为90.6%,Kappa值为0.85,为完全符合;瑞典某公司生产的牛牛布鲁氏菌ELISA试剂盒与RBPT的阳性符合率为96.2%,阴性符合率为79.7%,Kappa值为0.78,为高度符合;国内某公司生产的牛布鲁氏菌ELISA试剂盒与RBPT的阳性符合率为90.9%,阴性符合率为82.8%,Kappa值为0.74,为高度符合。比较结果表明,三种ELISA试剂盒与RBPT的符合性均较好,国产试剂盒与国外同类产品的一致性较好,可推荐用于大规模的流行病学调查、临床样布的初步诊断及规模化养殖的日常监控。 展开更多

关键词 牛布鲁氏菌病 酶联免疫吸附实验 虎红平板凝集试验 符合性比较

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蘑菇中鹅膏毒肽间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：3

8

作者 刘河冰 秦誉 +1 位作者 邢维维 马立才 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第5期294-301,共8页

目的:旨在建立一种检测蘑菇中鹅膏毒肽(Amanitin,AMA)的间接竞争酶联免疫吸附方法(Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。方法:通过EDC/NHS在α-鹅膏毒肽的羧基位置引入6-氨基己酸得到半抗原,并进一步与... 目的:旨在建立一种检测蘑菇中鹅膏毒肽(Amanitin,AMA)的间接竞争酶联免疫吸附方法(Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。方法:通过EDC/NHS在α-鹅膏毒肽的羧基位置引入6-氨基己酸得到半抗原,并进一步与不同的载体蛋白偶联制备免疫原和包被原。之后,利用免疫原免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体。基于所获得的抗体,并通过对包被原和抗体工作浓度、包被条件、封闭条件、酶标二抗工作浓度和孵育时间等条件的优化,建立了蘑菇中鹅膏毒肽间接竞争ELISA检测方法,最后对所建立方法的灵敏度、添加回收率、批内及批间变异等参数进行了评价。结果:合成的半抗原分子量为1033.12,经MALDI-TOF鉴定免疫原的偶联比约为10.03。基于杂交瘤技术制备、筛选出鼠单克隆抗体13H4的IC50为1.91μg/L。基于所获得单克隆抗体,所建立蘑菇中鹅膏毒肽间接竞争ELISA方法的检出限为0.88μg/kg,添加回收率为85.66%~113.05%,批内变异系数为5.35%~9.54%,批间变异系数小于15%。结论:本研究所建立的ic-ELISA方法准确度、精密度、灵敏度较高、性能稳定,为突发毒蘑菇中毒事件的毒原分析提供了一种简便、可靠的快速检测方法。 展开更多

关键词 蘑菇 鹅膏毒肽 间接竞争酶联免疫吸附测定法

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鸡源大肠杆菌AmpC型β-内酰胺酶的分子检测 被引量：2

9

作者 刘河冰 李新生 +4 位作者 张素梅 莫娟 肖方 潘玉善 杜向党 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第9期34-36,共3页

为了解河南地区AmpC型β-内酰胺酶耐药基因在产16S rRNA甲基化酶鸡大肠杆菌的流行与分布,分别设计特异性引物对2005—2008年在河南地区病鸡的病料中分离保存的158株16S rRNA甲基化酶阳性鸡大肠杆菌进行聚合酶链式反应扩增。检测结果显示... 为了解河南地区AmpC型β-内酰胺酶耐药基因在产16S rRNA甲基化酶鸡大肠杆菌的流行与分布,分别设计特异性引物对2005—2008年在河南地区病鸡的病料中分离保存的158株16S rRNA甲基化酶阳性鸡大肠杆菌进行聚合酶链式反应扩增。检测结果显示,在158株产16S rRNA甲基化酶鸡大肠杆菌中,CMY-2和DHA-1检出率分别为34.8%和36.1%。提示AmpC型β-内酰胺酶耐药基因在河南地区产16S rRNA甲基化酶鸡大肠杆菌中普遍存在。 展开更多

关键词 大肠杆菌 AMPC Β-内酰胺酶 耐药

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猪痢疾发病机理及诊断技术研究进展 被引量：3

10

作者 Burrough ER 刘河冰 《中国猪业》 2018年第5期41-43,46,共4页

猪痢疾是以出血性黏液样腹泻为特征的一种严重的肠道疾病。该疾病是由短螺旋体感染引起的,最常见于生长育肥猪。易感猪主要以黏膜出血性盲肠结肠炎为主要临床特征,严重的可以引起死亡,即使恢复健康后也会降低生长性能,给养殖业造成严重... 猪痢疾是以出血性黏液样腹泻为特征的一种严重的肠道疾病。该疾病是由短螺旋体感染引起的,最常见于生长育肥猪。易感猪主要以黏膜出血性盲肠结肠炎为主要临床特征,严重的可以引起死亡,即使恢复健康后也会降低生长性能,给养殖业造成严重的经济损失。本文综述了猪痢疾的病因、发病机制和诊断知识,以期为该病的风险防控提供科学依据。 展开更多

关键词 猪痢疾 短螺旋体 消化系统疾病

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新城疫病毒洛阳分离株HN基因真核表达载体的构建 被引量：1

11

作者 余祖华 程相朝 +4 位作者 丁轲 张春杰 李银聚 吴庭才 刘河冰 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第8期133-135,共3页

采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从新城疫病毒洛阳分离株中扩增出HN基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA3真核表达载体上,构建pcDNA3-HN重组质粒。通过用PCR扩增、酶切电泳分析的方法对重组DNA进行鉴定,成功构建了... 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从新城疫病毒洛阳分离株中扩增出HN基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA3真核表达载体上,构建pcDNA3-HN重组质粒。通过用PCR扩增、酶切电泳分析的方法对重组DNA进行鉴定,成功构建了新城疫病毒洛阳分离株HN基因真核表达载体。 展开更多

关键词 新城疫病毒(NDV) HN基因 真核表达载体

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牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用 被引量：2

12

作者 肖妍 李蓉蓉 +3 位作者 柴铭骏 霍蕾 董志珍 刘河冰 《今日畜牧兽医》 2019年第12期6-9,共4页

为了研制一种检测牛布鲁氏菌抗体的间接ELISA试剂盒,试验以提纯的羊布鲁氏菌WS-01株脂多糖(LPS)作为包被抗原,建立牛布鲁氏菌间接ELISA方法。筛选最佳试剂盒组分并优化反应条件,制备牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒,并用该试剂盒对18... 为了研制一种检测牛布鲁氏菌抗体的间接ELISA试剂盒,试验以提纯的羊布鲁氏菌WS-01株脂多糖(LPS)作为包被抗原,建立牛布鲁氏菌间接ELISA方法。筛选最佳试剂盒组分并优化反应条件,制备牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒,并用该试剂盒对182份布鲁氏菌病阳性血清和143份布鲁氏菌病阴性血清进行检测,检测结果经SPSS17.0软件分析,构建受试者工作曲线(ROC)及曲线下面积,以最高敏感性和特异性确定临界点。使用布病标准阳性血清按2的倍比稀释,采用建立的间接ELISA方法进行检测,得出阳性临界值时的最大稀释倍数。使用本研究建立的间接ELISA试剂盒及国外商品化试剂盒对临床采集的411份样品进行比对检测,比较其符合率。结果表明:当阳性血清稀释到1∶128时,通过建立的间接ELISA检测结果仍为阳性,该方法与其他常见病无交叉反应,重复性检测批间变异系数均小于10%,保存期试验确定试剂盒可在2℃~8℃下保存12个月;选取411份样品进行牛布鲁氏菌检测,本研究建立的试剂盒与国外试剂盒相比符合率为91.24%,说明两种试剂盒符合率较高,为牛布鲁氏菌的临床诊断提供了技术手段。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 间接ELISA 敏感性 特异性 应用

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鸡源奇异变形杆菌16Sr RNA甲基化酶基因的扩散机制

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作者 李德喜 刘河冰 +5 位作者 李新生 张素梅 陈玉霞 胡功政 商艳红 杜向党 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期263-267,共5页

从某鸡场9日龄鸡群的粪便样本中分离、鉴定出奇异变形杆菌22株,并进行药敏试验和耐药基因(16SrRNA甲基化酶基因和超广谱β-内酰胺酶基因)的PCR检测。然后通过接合试验、电转化试验以及脉冲场凝胶电泳来分析16SrRNA甲基化酶基因的扩散机... 从某鸡场9日龄鸡群的粪便样本中分离、鉴定出奇异变形杆菌22株,并进行药敏试验和耐药基因(16SrRNA甲基化酶基因和超广谱β-内酰胺酶基因)的PCR检测。然后通过接合试验、电转化试验以及脉冲场凝胶电泳来分析16SrRNA甲基化酶基因的扩散机制。结果显示,22株鸡奇异变形杆菌对庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素均呈现高水平耐药,对头孢噻呋、头孢噻肟、环丙沙星、氟苯尼考、多西环素呈现不同程度的耐药。PCR检测表明,在7种16SrRNA甲基化酶基因中仅扩增出rmtB基因;同时,这些菌株也携带有blaCTX-M基因。接合试验和电转化试验重复多次均未成功。脉冲场凝胶电泳结果显示,这些菌株具有相近的亲缘关系,提示该场鸡源奇异变形杆菌16SrRNA甲基化酶基因rmtB的扩散以克隆传播为主。 展开更多

关键词 奇异变形杆菌 rmtB 超广谱Β-内酰胺酶 脉冲场凝胶电泳

原文传递

基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法同时检测猪肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸 被引量：1

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作者 周松 刘河冰 +4 位作者 马立才 丁亚芳 张佳林 白春阳 陶晓奇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期292-300,共9页

该研究建立一种基于免疫磁珠分离、净化和富集的快速、灵敏的胶体金免疫层析同时检测猪肉中的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(3-methylquinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)和喹噁啉-2-羧酸(quinoxaline-2-carboxylic acid,QCA)残留的方法。利用... 该研究建立一种基于免疫磁珠分离、净化和富集的快速、灵敏的胶体金免疫层析同时检测猪肉中的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(3-methylquinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)和喹噁啉-2-羧酸(quinoxaline-2-carboxylic acid,QCA)残留的方法。利用免疫磁珠快速提取猪肉中的MQCA和QCA,磁场快速分离,加热洗脱并富集,然后用胶体金免疫层析法检测,可在5 min内完成,MQCA定性和定量检测限均为0. 1μg/kg(QCA定性和定量检测限均为0. 25μg/kg)。结果表明,经过优化后试纸条最佳工艺为抗体标记浓度2. 5 mg/mL,抗原(T线)划膜浓度1. 2mg/mL,羊抗鼠二抗(C线)划膜浓度1. 0 mg/mL,制备免疫磁珠时亲和素磁珠与抗体最佳偶联量为40μg/mg,MQCA和QCA样本添加浓度分别为0. 1、0. 5、2和0. 25、1. 25、5μg/kg,回收率为89. 9%～115. 2%,变异系数为6. 8%～11. 5%。用基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法和液相色谱-质谱/质谱技术(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时对20个市售猪肉样本检测,一致性较好,证明胶体金免疫检测方法可以用于实际猪肉样本中MQCA和QCA的快速定性和定量检测。 展开更多

关键词 免疫磁珠 胶体金免疫层析法 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 喹噁啉-2-羧酸

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母源抗体在仔猪疾病防治中的应用研究

15

作者 王学强 刘河冰 《畜牧兽医科学（电子版）》 2018年第12期68-69,共2页

该文对母源抗体在仔猪疾病防治中的应用进行讨论，对母源抗体的传递方式、母源抗体的作用、消长规律进行阐述，为合理利用母源抗体提供参考。

关键词 仔猪 疾病防治 母源抗体 应用

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猪传染性胸膜肺炎和大肠杆菌混合感染的治疗 被引量：1

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作者 王学强 刘河冰 《当代畜禽养殖业》 2018年第10期38-38,共1页

本文主要就猪传染性胸膜肺炎与大肠杆菌混合感染的诊治问题进行了论述,以期为养殖人员提供参考。

关键词 猪 传染性胸膜肺炎 大肠杆菌 混合感染

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动物疫病监测的作用及完善措施 被引量：1

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作者 刘河冰 《畜牧兽医科学（电子版）》 2019年第3期52-52,共1页

我国畜牧业的健康平稳发展最重要的工作之一就是动物疫病的监测,该项工作能有效预防和控制动物疫情,又能保证动物类产品的质量,为维护公共卫生安全起到重要作用。

关键词 动物疫病 防控 措施

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